INTRODUCCION

Bacillus cereus es un grande, 1 m X 3.4, Gram-positivas, en forma de vara, que forma endosporas, bacteria aerbica facultativa. Primero fue aislado con xito en 1969 de un caso de neumona mortal en un paciente de sexo masculino y se cultiv a partir de la sangre y el lquido pleural . 16s rRNA comparacin revela Bacillus cereus a ser ms relacionada con el Bacillus anthracis , la causa de ntrax, y Bacillus thuringiensis , un patgeno de insectos utilizados como plaguicidas A pesar de que tienen caractersticas similares, se distinguen como B. cereus es ms mviles, B. thuringiensis produce toxinas de cristal, y B. anthracis es no hemoltica. B. cereus es mesfila, creciendo de forma ptima a temperaturas entre 20 C y 40 C, y es capaz de adaptarse a una amplia gama de condiciones ambientales. Se distribuye ampliamente en la naturaleza y se encuentra comnmente en el suelo como un organismo saprofito. B. cereus es tambin un colaborador de la microflora de los insectos, que derivan los nutrientes de su husped, y se encuentra en la rizosfera de algunas plantas. Como una bacteria del suelo, B. cereus puede propagarse fcilmente a muchos tipos de alimentos como los vegetales, huevos, carne y productos lcteos, y es conocido por causar el 25% de las intoxicaciones de origen alimentario debido a su secrecin de toxinas emticas y enterotoxinas. La intoxicacin alimentaria se produce cuando los alimentos se dejan sin refrigeracin por varias horas antes de que se sirve. El resto de las esporas de los alimentos contaminados de tratamiento trmico despus del enfriamiento crecen bien y son la fuente de la intoxicacin alimentaria. Adems, Bacillus cereus es un patgeno humano oportunista y se asocia ocasionalmente con infecciones, que causan las enfermedades periodontales y otras infecciones ms graves.Los pacientes inmunocomprometidos son susceptibles a la bacteriemia, endocarditis, meningitis, neumona, y endoftalmitis . Su potencial para causar infecciones sistmicas son de la salud pblica actual y las preocupaciones biomdicas. As, la secuencia del genoma de Bacillus cereus es importante a fin de establecer la informacin de fondo gentico para investigaciones futuras. La secuenciacin de su genoma es vital para ampliar la comprensin de su patogenicidad para el tratamiento y para el desarrollo de frmacos antimicrobianos.Adems, dado que Bacillus cereus cepas genticamente son tan estrechamente relacionada con B. anthracis , comparaciones genmicas entre las dos especies son importantes para el estudio de B. anthracis virulencia.

GENOMA ESTRUCTURA
3.1 Genoma B. cereus tiene un cromosoma circular de 5.411.809 nt de longitud y se secuenci completamente utilizando el mtodo de secuenciacin escopeta. La estructura del genoma de B.cereus se compone de 5481 genes, la codificacin de protenas 5234, 147 ARNs estructurales, y 5, 366 operones de ARN. Un grupo de genes interesante que se encuentra dentro de su genoma codifica para la arginina va metablica deiminasa. Este grupo se predice que tienen un papel en su supervivencia, permitiendo que sea resistente a las condiciones cidas en una manera similar a Streptococcus pyogenes. Adems, B. cereus tiene una nueve ureasa gen grupo de genes que codifica para las protenas, desaminasa blasticidina S, y una capa de protenas S. La enzima ureasa aumenta su vigor en condiciones cidas y es similar a la ureasa se encuentran en otras bacterias que se requiere para la colonizacin del estmago humano. Los genes presentes en el cromosoma asociado a B. cereus virulencia incluyen genes que codifican para los no-hemolticas enterotoxinas, el canal de formacin de tipo III hemolisinas, la fosfolipasa C, O perfringolisina (listeriolisina O), y las proteasas extracelulares. El hbl opern, una transcripcin de ARN de 5,5 kb, transcribe las tres protenas de las enterotoxinas hemolisina BL asociados con la intoxicacin por alimentos. Estos genes, junto con otros genes que codifican para enzimas metablicas, las protenas que participan en la motilidad y la quimiotaxis, protenas implicadas en la esporulacin y los transportistas de celulares estn regulados por la plcR genes. El plcR gen tambin es necesario para la virulencia completa de B. cereus , y es a menudo el blanco de los frmacos antimicrobianos. Otro gen que se encuentra en su cromosoma es el gera gen que es esencial para la esporulacin cuando los nutrientes se agotan, y es responsable de la germinacin de esporas estimulada por la L-alanina y ribosides . Tambin cuenta con 18-23 genes que codifican para pptidos y aminocidos ABC transportador ATPprotenas de unin a lo que sugiere que los aminocidos, las protenas y peptids se prefieren las fuentes de nutrientes. 3.2 Los plsmidos B. cereus tiene una amplia gama de plsmidos que varan en tamao desde 5 a 500 kb y se sabe que tiene ms de un plsmido con slo unos pocos que estn asociados con la patognesis. B. cereus ATCC tiene un plsmido pXO1 que se encuentra en B. anthracis. Es avirulento porque no tiene la porcin que codifica para las protenas de toxinas y normativo.B. cereus G9241 tiene un plsmido que es 99,6% idntico al pXO1 plsmido de B. anthracis , pero no tiene el plsmido pXO2 que se requiere para la virulencia completa. Tambin tiene un segundo plsmido que codifica para un opern biosntesis

cpsula. B. ZK cereus , una cepa patgena, tiene cinco plsmidos. Los genes transposasa se encuentran en los dos plsmidos grandes que funcionan en el intercambio de genes entre plsmidos y cromosomas. Los tres plsmidos ms pequeos de la funcin de cinco en la identificacin de protenas de replicacin y movilizacin.

LA CLULA ESTRUCTURA Y EL METABOLISMO

4.1 Estructura de la clula Bacillus cereus es una m 1 x 4.3, en forma de varilla, Gram-positivas bacteria. Su estructura celular se compone de una membrana interna y un peptidoglicano gruesa que funciona para mantener la forma celular. La porcin de polisacrido constituye el 50% por ciento de la pared celular y se compone de un polisacrido neutro compuesto de N-acetilglucosamina, N-acetylmannosamine (ManNac), N-acetilgalactosamina y glucosa en una relacin molar de 4: 1: 1: 1 . La porcin de cido de la pared celular es caracterstica de tener una unidad de tetrasacrido repitiendo 5% de la pared celular se compone de cidos techoic constituido por N-acetilglucosamina, galactosa, glicerol, y fsforo en una relacin molar de 1: 1,4: 1: 1. La relacin entre el polisacrido y peptidoglicano es un cido murmico 6-fosfato. El peptidoglicano de algunos B. cereus cepas son nicos con slo unos pocos presentes oligmeros, los muropeptides reticulados son atenuadores, y muchos de la falta muropeptide el grupo N-acetly . Estas caractersticas distintivas afectar cargo de la superficie celular que contribuye a la unin de una cpsula exterior o una capa S en las cepas patgenas. Los aislamientos clnicos de B. cereus tiene una glicoprotena S-capa sobre su peptidoglicano que consta de matrices paracristalinas protenicos y cubre la superficie celular. El S-capa est implicado en la virulencia de B. cereus y funciones para promover la interaccin con los leucocitos polimorfonucleares humanos. Tambin permite B. cereus se adhieran a la laminina, el colgeno tipo I, fibronectina y fibringeno del epitelio, y por lo tanto tiene un papel en la creciente interaccin entre el B. cereus y su acogida . Adems, esta capa protenica mejora su resistencia a la radiacin. B. cereus es mvil por medio de flagelos y exhibe dos tipos de motilidad incluyendo la natacin y un enjambre, dependiendo de la enivronment. Las clulas individuales muestran la motilidad nadar a travs de cortas barras flagelado . Por otro lado, un enjambre es un movimiento colectivo de celdas de enjambre con flagelo que se observa a ser de tres a cuatro veces ms, y tambin cuarenta veces ms que las clulas flageladas natacin individuales. 4,2 Estructura Spore

B. cereus la formacin de esporas se produce cuando los nutrientes son escasos en el medio ambiente y germinan en clulas vegetativas una vez que estn disponibles. Por lo tanto, la estructura de esporas es importante para la supervivencia de esta bacteria. B. cereus esporas constan de un ncleo interno rodeado por la membrana interna, y la corteza exterior rodeada por la membrana exterior con una capa exterior adicional. La capa de la espora est hecho de protenas y pequeas cantidades de lpidos y carbohidratos que contribuyen a su resistencia a los agentes oxidantes y productos qumicos mediante el bloqueo de molculas txicas [. Adems, la estructura externa de la espora que les permite ser calor y -resistente a la radiacin Germinacin de las esporas es comnmente en respuesta a la L-alanina, que estimula los eventos de germinacin de esporas incluyendo hidrataciones, la prdida de Ca2 + y cido dipicolnico y el metabolismo . 4.3 Metabolismo B. cereus es un aerobio facultativo para que pueda utilizar el oxgeno como un aceptante terminal de electrones, pero tambin tiene mtodos de respiracin anaerbica como un mecanismo de liberacin de energa. Secuenciacin del genoma completo revel genes que codifican para las enzimas metablicas como la NADH deshidrogenasas, succinato dehidrogenasa, III complejo, no de bombeo de protones del citocromo oxidasas bd quinol y de bombeo de protones-oxidasas, como la citocromo c oxidasa y el citocromo aa3 quinol oxidasa . En la respiracin aerbica, equivalentes reductores producidos a partir de la gluclisis y el ciclo de Krebs se reoxidado por la cadena transportadora de electrones, creando una fuerza motriz de protones y la ATP por la ATP sintasa. En la respiracin anaerbica, B. cereus utiliza la fermentacin para generar energa. Fermentacin recicla NAD + por reduccin del piruvato y produce lactato y etanol. ATP se genera por la fosforilacin sustrato nivel. B. cereus puede metabolizar una variedad de compuestos que incluyen los carbohidratos, protenas, pptidos y aminocidos para el crecimiento y la energa. Algunos de los principales productos producidos a partir de fuentes de carbono tales como sacarosa o glucosa durante la respiracin anaerbica incluyen L-lactato, acetato, formiato, succinato, etanol y dixido de carbono. Durante la respiracin nitrato, nitrato reductasa convierte nitrato en nitrito que se convierte en amonio por nitrito reductasa.

PATOLOGA
Bacillus cereus causa dos tipos de intoxicacin alimentaria en humanos, incluyendo el sndrome de diarrea y el sndrome emtico. Los resultados de la intoxicacin alimentaria de su produccin de enterotoxinas en el tracto gastrointestinal. La dosificacin de ingerido B. cereus esporas que

conducen a sndrome diarreico es 105-107 1 g de alimento ingerido, y 105-108 1 g de alimento ingerido para el sndrome emtico. Enterotoxins asociados con el sndrome diarreicas son unresistant a las condiciones cidas del estmago. Sin embargo, la toxina pptido cereulida asociada con el sndrome emtico es ms resistente a condiciones cidas y permanece activa a 121 C . Los factores de virulencia asociados con sndrome diarreico desarrollar en tres enterotoxinas incluyendo hemolisina BL (HBL), enterotoxina no hemoltica (NHE), y K citotoxina . El principal factor de virulencia de B. cereus es HBL que est hecha de las tres protenas B, L1, L2 . Los sntomas de sndrome diarreico incluyen diarrea acuosa, clicos abdominales y dolor que se produce 6-15 horas despus de la ingestin que puede durar veinticuatro horas. El sndrome emtico es causado por la toxina pptido cereulida que se secreta durante la fase estacionaria. Esta toxina tiene una estructura de anillo, dodecadepsipeptide, que consta de cuatro aminocidos, repitiendo tres veces, y los cidos oxi . Los sntomas asociados con el sndrome emtico incluyen nuseas y vmitos en menos de media hora a seis horas despus de la ingestin de alimentos y tambin tiene una duracin de cerca de veinte y cuatro horas. Aunque B. cereus es comnmente conocido por causar intoxicaciones de origen alimentario, se ha reportado como causante de infecciones locales y sistmicas, como un patgeno oportunista, especialmente entre los pacientes inmunocomprometidos, recin nacidos y pacientes con heridas quirrgicas. B. cereus puede causar infecciones oculares como queratitis, endoftalmitis y panoftalmitis. El principal factor de virulencia en B. cereus endoftalmitis es HBL lo cual puede resultar en el desprendimiento de la retina y ceguera. Adems,B. cereus puede causar mastitis gangrena, bovino, infecciones pigenas, celulitis, la mortalidad infantil, meningitis bacteriana, enfermedad periodontal, abscesos pulmonares y endocarditis. Sin embargo, estas infecciones son menos comunes. Los factores de virulencia asociados con las infecciones gastrointestinales no son hemolisinas y la fosfolipasa C III hemolisina causa lisis de los eritrocitos. Fosfolipasa C produce dao en los tejidos por la degranulacin de los neutrfilos humanos estimulante, y se rompe la matriz subepitelial afecta a la cicatrizacin de los tejidos en las infecciones

APLICACIN DE LA BIOTECNOLOGA
Agente de Control Biolgico Agentes de control biolgico son alternativas a los pesticidas qumicos que son capaces de suprimir las plagas de plantas y tambin puede mejorar el crecimiento vegetal. La mayora de las cepas de Bacillus cereus produce toxinas que causan enfermedades transmitidas por alimentos. Sin embargo, hay cepas que no producen la enterotoxina HBL. As, los compuestos

antifngicos de Bacillus cereus cepas se han desarrollado como un agente de control biolgico tiles en la represin de hongos y enfermedades de los cultivos. Bacillus cereus Cepas Bacillus cereus B4 se utiliza como pesticida para disuadir a los hongos de podredumbre plntulas. Esta cepa produce tres tipos de metabolitos que le permiten suprimir ciertas enfermedades de plantas y promover el crecimiento de las plantas. Los metabolitos incluyen Kanosamine, 3, 4-dihidroxi benzoato, y 2 ceto-4 metiltiobutirato. El metabolito 3,4-DOHB mejora la resistencia de los cultivos y los resultados en un sistema de races saludable y ms grande. Bacillus cereus DGA34 se aisl del medio ambiente y es til en la lucha contra las enfermedades fngicas en cultivos de amortiguacin. Se produce naturalmente el A. zwittermicina antibitico por fermentacin que se encuentra en el lquido sobrenadante de su medio de cultivo. Este antibitico es eficaz en la lucha contra una amplia gama de hongos y bacterias, y reduce los sntomas de la podredumbre de la enfermedad y la podredumbre de la raz. Bacllus cereus UW85 produce dos toxinas, incluyendo antibiticos y antibiticos zwittermicina A. B. Bacillus cereus UW85 se utiliza para proteger las semillas de alfalfa de amortiguacin fuera causada por Phytophthora medicaginis , frutos del pepino de Pythium aphanidermatum , los cacahuetes de Sclerotinia minor y plntulas de tabaco de Phytophthora nicotianae Estos son slo algunos B. cereus con las cepas actuales de patentes de Estados Unidos como agentes de biocontrol para enfermedades de los cultivos. En este momento hay muchosBacillus cereus cepas que an estn bajo revisin.

LA INVESTIGACIN ACTUAL
Las biopelculas de B. cereus La capacidad de B. cereus para formar biopelculas sobre superficies puede causar problemas potenciales de contaminacin en la industria alimentaria. Por lo tanto, la formacin de biopelculas de varios B. cereus cepas estn siendo estudiados para evitar la contaminacin potencial de alimentos y garantizar la seguridad durante la produccin. En un estudio reciente, ensayo de microtitulacin y ensayos sobre acero inoxidable fueron completamente o parcialmente sumergido en un lquido a fin de observar B. cereus la formacin de biopelculas. Dado que el acero inoxidable se utiliza comnmente para tuberas y tanques en la industria alimentaria, las pruebas adicionales se llevaron a cabo para investigar B. cereus la formacin de biopelculas de las esporas en acero

inoxidable cupones. Los resultados de ambas pruebas fueron similares. Parece que B. cereus biopelculas se forman preferentemente en la interfase aire-lquido. Esta tendencia es debido a la disponibilidad de oxgeno en esta regin, causando el movimiento hacia bacteriana oxgeno. Adems, la formacin de esporas era ms rpida en la fase de suspensin de la formacin de biopelculas que sugiere que las biopelculas son una cavidad para la esporulacin. Los resultados muestran que B. cereus biopelculas pueden desarrollar dentro de los sistemas de almacenamiento y tuberas, cuando sea parcialmente lleno o cuando quedan restos de lquido durante la produccin. Adems, el aumento de la formacin de esporas por B. cereus en los biofilms pueden potencialmente causar una falla nueva contaminacin y el equipo durante la produccin de alimentos .

Efectos de la bilis Procine en B. cereus Resistencia a la bilis es importante para la supervivencia de B. cereus en el intestino delgado, donde pueden proliferar y liberar enterotoxinas. En marcha proyectos de investigacin se llevan a cabo para poner a prueba B. cereus y los factores que pueden afectar su crecimiento y la liberacin de enterotoxinas, una vez ingeridos. Un estudio reciente analiz los efectos de la bilis de porcino (PB) en el B. cereus y en su enterotoxina HBL en el intestino delgado mediante el uso de los medios de comunicacin del intestino con diferentes tipos de alimentos.Diferentes concentraciones de bilis porcino se han aadido a los medios gstricos para simular el estrs cido. Los resultados muestran que el crecimiento de B. cereus se vio afectada por el tipo de alimentos en los medios de comunicacin del intestino delgado que pueden explicarse por el efecto protector de diferentes tipos de alimentos en contra de la bilis del cerdo.Por ejemplo, los componentes de los alimentos, tales como fibra puede unirse a las sales biliares reduciendo sus efectos txicos sobre B. cereus . Adems, las sales biliares puede ser secuestrado por los componentes de los alimentos que reducen los niveles de colesterol. Se concluy que la tolerancia de B. cereus a la bilis porcino y su capacidad para crecer y producir toxinas es dependiente del tipo de alimentacin y en las concentraciones biliares en el intestino delgado. Estudios adicionales se llevan a cabo para probar los efectos de la bilis en el B. cereus enterotoxina as como los efectos de diferentes fuentes de carbono sobre la liberacin de enterotoxina. Factores de virulencia de B. cereus B. cereus ha sido una creciente y consolidada patgeno humano oportunista. Por lo tanto, la investigacin actual se est llevando a cabo para entender su patogenicidad y factores de virulencia con el fin de encontrar blancos potenciales para los medicamentos antimicrobianos. En un estudio reciente llevado a cabo, B. cereus pieles gen, un regulador transcripcional que es

responsable de la absorcin de hierro y el metabolismo bacteriano, ha demostrado reducir la virulencia en el patgeno de piel mutante. Los resultados en esta investigacin revel una disminucin en la regulacin de la absorcin de hierro con tres veces ms hierro intercelular en la piel mutante que en la de tipo salvaje, lo que resulta en una mayor cantidad de oxidante radicales libres. La virulencia de B. cereus piel mutante se midi en una infeccin de insectos que revel la importancia de la regulacin del metabolismo del hierro en bacterias patgenas por su virulencia reducida. Este estudio reciente da una idea de la importancia de la piel de los genes en la regulacin de las concentraciones de hierro para el crecimiento celular, la supervivencia, y la patogenia. La virulencia reducida de B. cereus pieles mutantes en este experimento demuestra el potencial de la piel de genes para ser un buen objetivo para los medicamentos antimicrobianos como una protena conservada entre bacterias patgenas . B. cereus Endoftalmitis B. cereus causa endoftalmitis que puede conducir a la ceguera. Actualmente no hay tratamiento universal para esta enfermedad. Diversos proyectos de investigacin se llevan a cabo por el Laboratorio de Callegan para entender su patogenicidad y virulencia con el fin de desarrollar mejores tratamientos y antibiticos. Un proyecto de investigacin actual est estudiando el papel de la B. cereus proteasas en la endoftalmitis. Parece que las cepas sin metaloproteasas InhA y InhA2, inhibidores inmunes, eran ms virulenta que la cepa de tipo salvaje. Otro de los proyectos de investigacin en curso incluye el estudio de la plcR gen que regula la produccin de toxinas y tiene un papel importante en la B. cereus patognesis endoftalmitis.El plcR cepa mutante exhibi una reduccin en la virulencia que result en 20% retenido funcin de la retina. Los efectos del bloqueo del pptido PAPR como una forma potencial de tratamiento est siendo investigado. Las estructuras de la pared celular de B. cereus , incluyendo peptidoglicano, S-capa, las cpsulas, y los cidos techoic estn siendo estudiados por su capacidad para producir inflamacin intraocular. El reconocimiento de estas estructuras de la pared celular de clulas de la retina estn siendo investigados.

IDENTIFICACION
Caldo glucosa sin fosfato, prueba de Voges Proskaguer (VP+), detectar acetil metil carbinol, aadir reactivos y aadir cristales de creatina para que la reaccin sea ms rpida. Agar nutritivo glucosa, incubar a 31 24-48 horas, se realiza la tincin con fuschina y el polihidroxibutirato (material de reserva) no se tie. Caldo nitrato, la prueba es positiva si hay transformacin del nitrato en nitrito. Movilidad, se siembra en agar en un medio semislido en picadura, si el microorganismo es movil crece por todo el medio. Se puede calcular el NMP cuando se sospecha que el alimento tenga menos de 10 UFC/ml. A partir de diluciones decimles se siembran en: caldo tripticasa a 31 durante 48 horas, de los tubos en crecimiento se siembran en Mossel y se confirma.

AMOR ESTA ES TU PROTEUS MIRABILIS

Aplicacin de la Biotecnologa
Los antgenos se encuentran en la membrana externa de P. mirabilis pueden servir como objetivos para las vacunas. Hasta ahora, de los 37 identificados inmuno-reactivos antgenos, 23 son enlazados a la superficie de las protenas. Los estudios han demostrado que 2 protenas de adquisicin de hierro (PMI0842 y PMI2596) aumentar la virulencia de P. mirabilis en el tracto urinario (Nielubowicz et al., 2008). Dado que ambas de estas protenas contribuyen a la patognesis, son buenos candidatos para vacunas. Una vez que una vacuna eficaz est hecho para estos antgenos, ms investigacin se determinar si o no estas vacunas pueden ser utilizadas contra otras bacterias que causan infecciones complicadas del tracto urinario, como la Providencia , y Morganella (Nielubowicz et al. 2008).

La investigacin actual
P. mirabilis hace varias fimbrias diferente que promover la adherencia a las superficies mucosas. Una de estas fimbrias, llamado manosa resistentes Proteus-como fimbrias, ha sido muy presente en los pacientes asociados con infecciones del tracto urinario (Xin et al., 1999). Un manosa resistentes Proteus-como gen (mrpH) presente en el opern mrp de MRP fimbrae ha sido recientemente demostrado ser esencial para la adhesin funcional de MR / P fimbrae (Xin, etc al, 1999). Mediante el uso de mutagnesis de insercin, los investigadores observaron que, sin la mrpH gen funcional, haba menos MR / P fimbriacin. Esta informacin llev a la conclusin de que la investigacin adicional en las capacidades del gen mrpH podra conducir a la produccin de una vacuna para hacer este gen ineficaz. Esto en ltima instancia, frenar la capacidad de la Proteus mirabilis bacteria se adhiera a las superficies de las mucosas, lo que dificulta la infeccin (Xin et al., 1999). P. mirabilis puede ser comnmente presentes en individuos sanos como parte de la mucosa normal. La bacteria se convierte en un problema importante sobre todo en personas que tienen sistemas inmunolgicos vulnerables y corren el riesgo de transmisin nosocomial, tales como los pacientes del hospital (Farkosh et al., 2008). Los estudios actuales demuestran que hay una serie de antibiticos que antes eran eficaces contra P. mirabilis que ahora son intiles debido a la prolongacin lactamasas de espectro beta (ESBL). Estas son las enzimas pasado a travs de plsmidos y se encuentran en la mayora de las Enterobacteriaceae. Estos plsmidos se encuentran dentro de los abscesos, la sangre, las puntas de catter, pulmn, lquido peritoneal, esputo y cultivo de la garganta (Farkosh et al., 2008). Detectado en la dcada de 1980 en la Klebsiella y E. E. , estas enzimas se encontraron para hidrolizar cefalosporina antibitico por lo que es ineficaz. El BLEE ha convertido en altamente peligroso cuando se produce en grandes cantidades, confiere resistencia a un gran nmero de antibiticos utilizados universalmente. La difusin de estos plsmidos es sobre todo frecuente en centros de salud donde los pacientes se han extendido las estancias hospitalarias, son el uso de catteres, se encuentran dentro de la UCI, ha tenido una ciruga reciente o se administran de conformidad con los antibiticos.