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http://www.ensembl.org/Homo_sapiens/Gene/Sequence?g=ENSG00000165092;r=9:7551557 8-75695358 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/CCDS/CcdsBrowse.cgi?

REQUEST=CCDS&DATA=CCDS66 44
Nucleotide Sequence (1506 nt):
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Translation (501 aa): CTG


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http://www.ensembl.org/Homo_sapiens/Gene/Sequence?g=ENSG00000165092;r=9:755 15578-75695358

>chromosome:GRCh37:9:75514978:75695958:-1 CTTATCTTCCCATGAGAGTCAAGAAATGATTTTATTTCTTTAATGTGCTAAAGAATACAG CTAGTGCAAAGGGCTTGGAAAGATTGCAAGAGAATAAGAAGCATCTGCATATACAGAAGG AGATAATTTTTAAGTAAATGAGTGATGACATTTGTAATTTAAGTTTTCTCCTTCAGCTTT AGTTTTCAGGAATAAAACACTGTGCGTGTAAGATTATAAAGGCCAGACCGCCGATGGAGG TTTGGGGCACTCCTTCAACCACTCACAAATTGGACAGTATGTTTTGATGGAGCGTGCCGT CCTTTATCAGGTATTTCAGGTTATGAGGAGAGGCTACAAGCTGTGAATCAACATAGCTAA TCGAGACAGAATTTGTGTTTTGTGCTTCATGGATCTTTTTTACATTCATGTCCACTTAAA GAAGGCAGCCAGCTCCTTCATTCTTTTAACCTCACAGGAGGTTTGTGCTGTAGGACAGAA AGGCTAATTATCCAGCAGATGATCTGCCTTCCTGGCACTCCTTGAGGGAATTATGCCAGA TAGGGGAAAGGGAGACATGTGCCTTGTGGAAAAGAGAAGGTGGGAGGGGAGGCATGCCCC AGAAGTCCAGGATGGGAAGAGAGATCTGCAGACTCCCAGGGAACCTACAGCTTTCTCCTT CACAGCATTGCAGGAGGTGAGCGGAGTTTTGGGTTAGGTGGGAGGGGTGTGGCTGCCTAG TATGCCTGAGGGGCTGGAGTTTAGGCTGAGTTTCACAGCCTTTGCAAAGTTTACTGGGCT

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http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/216 -> FASTA

Homo sapiens chromosome 9, GRCh37.p5 Primary Assembly


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>gi|224589821:c75568233-75515578 Homo sapiens chromosome 9, GRCh37.p5 Primary Assembly 70 per line Negative strand GCTGCATACACTTATCACAGGTTTCGGCTTTGTAAATTAATTCATCTGCAAATAGTGCACTGTCTCCAGG TACAAATTCGATGCTGGAGCACTGGTTTCTTAAGGATTTAAGTTTAAAGTCAAAGGCTTCCTGCCCTAGG TGTTACAAATAAGTAGTGTCGTTTTCTTTTTTTGCTCTGAGTTTGTTCATCCAATCGTATCCGAGTATGC AAATAAACTTTAGCCCGTGCAGATAAAAAAGGAACAAATAAAGCCAAGTGCTCTATCAGAACCAAATTGC TGAGCCAGTCACCTGTGTTCCAGGAGCCGAATCAGAA [-75567920]ATGTCATCCTCAGGCACGCCAGACTTACCTGTC CTACTCACCGATTTGAAGATTCAATATACTAAGGTGAGTAAAACTTCTATTTTCTGCTTTGACTCGGGTT TGCAAAAACTGCATTTATGTAAAGCATTAAAGGTCAATTTAAGTAAACTTGTGTAAAGAGCCCTTTGCAA ATATAAAAATAAAAGGCATGCAAAATGCAGGTCTCAGTTTAGTGTCCTGATCAAATATGATCTAAATCAT ATCAGACAATCTTTCATAAATTTATTTCTTAAAATATTTCCAAGCGAAAGGAATTCTCTTCTGTGTGAAA GGATTCTTATACCAGGATTCAGAGGACTTTACTAAGCACTTCTATTAACTTCACTATAGCCGGCATGTAT GATAAGAGAGCAAAATACTCACTAGAGAAGCTTACTGGAAAGAACCAAACGAGTAGGAACAATAGAAAGC AAACAAGGAGAAAGAGAGCATACTGAAATAACATAACTTTCCAATATGTTTAATAAAATGAGTGTTAAAA TAGGGGGACTTAAGTCTGATAATTGGATTCGAAAATCTTCAGATGGACTTGCATTATTTTGCATATTTTG GTGGGAGGAAGAAAAGCATTATTTCTTCAGCCAAGTTTGTTGCCATTGGAGCAGATGTGTAATTGTTAAC TGATAAATATTTAGAGAAACAAGAGCAGGAGCTAGATCCAGACTTTAAAATCCGCAGCTGGGGGGAACTA GGAAATGGATCCTGCTTGAGTCGTTCTGAGAGTAACTCTGAACTTTGCCTGTTTCACACTGCTTTCCTGT CAGATCCTAGAACTCCAAAACAAACAAATGAATAAAACACAATCTAACCAAAATTACTTGAAGTTATCTT TATGGTGTGATGCAGAAAGTATGGTAAGAAATTAACTCTTGCAAATCAAGAGAGAGCCATTTTGCTGTCT GAATTAGCCAACAGAAAAACAAAGGGCATTATAATTTAATGATAAAGTAAAAGTCCCCACTGTTATATAT TTATTTCCTCACTTGTAACCATGGATGGCTTTGAAATCCCAAGGTCTGTTGCATTTTCATTTTCATAAAG CACAACAAATGAGGAAGTTGCTCAGCTGATTGGCTCTTTTCCTCAGGAAAGTAGCAGCAGAGATCAGATT GTGCCTTTAACATGGTTGACCAGCAGCTATGAAGTGTATTTTAAGGTATTGTTATCACGAGGTTTTGTTA

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TATTGATGTTTGATTAATACAATATAAGAATTGCCAAGTAATTTCTGAGCACGTGGTACTATGCTGTATA CAGGGAGGTAAAAGAGTAAGAACAATATTTACTTGGTACCCTTGTGTATGCAGATATTCTTATATCGGCC TTCTTACTCTAGGATTATTAGAGATAATTGAAGTTATTTTTGAAAGATTGAATTTTGAAGATACCCTCCC TCTCCCATTTTTGACCTAGTTTATATCTCTTATTTTTATACTTTAATCAAGAGGATATAAACATGAAGTC TGTGCCTCTCAAACTGTTGCATTCTGTACTCAGCTGTCAGTCTCTAGACTATGTCTTTGGTCACTTTGGT CCCATTAGCCTAATTTTGGCCCCTCAGTCCTGGAAAAAGCACAAGATTATTTTCCTTCCCAACACTAAGT CACACCTAGATCAGACCTATGCAATATTCTCTTTCTTTCTTTCTTTCTTTCTTTCTTTCTTTCTTTCTTT CTTTCTTTCTTTCTTTCTTTCTTTCTTTCTTTCTTCTTTCTTTTCTTTCTTTCTTTCTTTCTTTCTTTCT TTCTTTCTTTCGTCTCTCTCTCTCTCTTTCTCTTTCTCTCTTTTCTTTTCTTTCTTCTTTTTTTTTTTTT TTTTTTTTTTTTTGAGCTGGAGTCTCACTCTGTCACCCAGGCTGGAGTGCAATGGTGCGATCTTGGATCA CTGCAACCTCTGCCTCCTGGGTTCAAGTGATTCTCCTGCCTCAGCCTCCCAACTAGCTGGGACTACAGGC ATGTACCACCAAGCCCAGCTAATCTTTGTATTTTGTTTTTTTCTTTTTTTAGTAGAGACAGGGTTTCACC ATGTTGGCCGGACTGGTCTCGAACTCCTGACCTCAAGTGATCCATCCGCCTTGGCCTCCCAAGGTGCTGG GATTACAGGCCTGAGCCACCATGCTGGCCTGGACCTATACAATATTCTAAGGCTGTGGTTCTCAGCCCTG GCTGTTCATTAGAATCATCTCGGGGGCTTTAAAAATGTATAAACTGATTTGGGGCAGGGGAGGGTATACA TTAACACAAATTATATCAGTGTATAGTTTAAATTTCTCCTCCAAAGCCCATGTGGCAATTTAAATGCCAT TGTAACAGCAATAGGAAGTGGGCCTAATGGGAGACTCTTAAATAAAATTCAGCAAGTTCTTCTTGAATAG TCGGTATAGCTAGTGATGAATATAGAATTTGCCTATGATAAAAGCATTAATAAAATTCAGCATAGTTACT GTGTGTATGTATATTATCGCCACTTACTGAAGATATTTATACCAAGTACTACAACAAGAATACTATTCAC GCAATCTTACGCATACCTTGAAACAATCCTATTAAATATTATCATCCCCACTTTACACATGAGGAAACGC TTGCAGAAGACAGATAACATTTTGAACTCAAAGTTTTTGCCAAGTGAACATTTCTCAGTTCCCTGTTAAT TCACAGTAAAATAGTTTCATTTCTAGTTGACAGTAAAATGAGCAAATTTACTCTCTGCACTTTTTAACAA AGACAAATTTCAGTTTTGTATTTTCGACTAGCAGAATGTTCCATGCTTGTTTGATGAAGCTTGTTATGAC ATCACCCCACTGAGGGTCTTGGGAATCCCTGATCAGGAATTTCCTCTATTATGAAAAACAGAGGGGACCA TCTTGTTACTACATATCCTAGAAGATAATAATTTTCTGGCATTGTCCCAGACCTAATAGCTGCTTGGTGT TTTCAGGAAAATTATTGAACTCCAGAGTTGCAGGAAGTTTACTCATAATTTCAAAGTAGTATTTGATTTT GCAATTTAAAGGGCAATTAAACAAAGCTGAGACAATACTGCCTTTTGTAAGTGTAAATTTATTAAAGGAA TTATCCCTCCAGGATGAGAGACATAGTTAAGAACTTTATGGTCCAGTGAGAATGTGGAACTTCGGGAACT GGGATAGTGTTTTAACAAAGAAAACATCTGAATATTATCTCAGGATAAAAGTAATGACCAAACCTTCAAA GTATAATACAATTTATCTGGAAGCCACCCTGGTTTTTTGTTTGTTTGTTTGGTTGGTTTTCTAAATTTGT TTTGTAGAGGCAAGGGTTTGCTATGTTGCCCAGGCTGGTCTCAAACTCTTGGGCTCAAGTGATCCTCCTG CCTCAGTCTCCAGCTACTAACCCAGGCTCTGGAAGCCACATTTTTGTCCACTTATTAAAATAGCATGAAG GGAGAGAAAAGTATAAACATAAATCTCCTTTAAAAAGTGTTTTTCTCTTGCGTATAATGAGAATCAGGTA AATAATTAGATTTTGCTAACTTTTGGCCACCAGCAAATTTAAAGCTAAACAAATTGTTTATGGTCTGCAA AACTGCATTCTAATTTTCCCCATCTAGATCTTCTATTGTAATTTTTTGTTGGATTCTAATTACTACTATT CATGTAATTATGTTTGTTTATATAAGCATCTTTAAACACTTTATGAAATATGACAGGGAATAAATTATAA TTAAACCCAACTCCTGCCAAGGCCTCTGTTTAAGCAATTTATTTAACCAATTAATGGGAAAAAAAATTAA CTGAGTAATATGATACATATTACAATTGCAAAAGAAAATTGATTCTAGCCTGTTAAGTACAGAAACATCA AGAGAATTACAAGCTGATCCATATATAAGCAGTAATGAATACTGATCCAACAAATTCTAGCTTCTAGCAA ACCATATCTTTCCCCCTACAGCATAGTGACTATTCTATCTTTTATAAATTCAGACTACCACTTCTCAGGG ACACAATGTACGACCAAAATGGCTATCCATATATATAGTTGCACTATTCTATTTGTTTCTAGGTAGTGTG TATCCATATATGTCTGCATTCTAATTTATAGTGCTACTTTTTTTTATCAAGATGAGTATGTTATAATGAA ATTAATGGAGTTTGTAAGGAGCTTTCCAAATTTCTAAAACTGCCAAAAAGGATTTTTTTTTCACACCTTA AGTATTGTCTATAATGCACTTTTCTTTTCCTTCAGGGTGAATTGCTATGGCGTGGTAAGTGCCCAGTGCC CCTTTGGTGGATTCAAGATGTCTGGAAATGGAAGAGAACTGTAAGATTAACGTTCTATTAAGATAAATAT TTATTTTTATGAAAATGATTTTCATTCCCAGGGAATTAACTCATAGTTTTCACCTTACATAAAACCTGCC TCTGTTCTTTCCTGGAGATTCATAGCACCAAATAGCTTATTAAATGTGGGATGTACTCCATAAGTGCAAA AGGTGATTGCAGAACAGCAACATAATTTACTAAATTCCTACTATATTTTAGGGACTATATTAAGCAACTT ACATTGGTGATTGTAATACTGCTTGCTTTTAGAATTGCTTGCTATATATATGAATGTAATCCATTTGGGA AACATTTCCAGAAAAGAGGTGGAAACTATGCATTGGTGATTGCAAGAAAGGTGCAAATGTAAACACTCTA GTTATTTGAATAAACCATTTAAATAAGTAAATTAGGTGACTTATGTAAAGGAAATTTCAGTGTAAGAGGA ATGATTCCCATTTGTTGAGATATTATTGATGTAGACTTTAACATTTTTTATTACCATAAGAAGTTATTTT TAGTATTAAAACTTAAACCTAAAAGGAAATTTGAGGAAAACATGTTTTATAGTAGTGACTAGATTAAGAA TATTTATATATAAATGCATTTATGAAATTTCAATTGCTTTTGAAACTAGGGTATATAGACTTTTTAAGTA TGCACATATATATGTAAATACAGAAAGTAGTGGCAATATGCTTAGTTGATTTTGTTTAGGCAAGTTTAGT CATTTTATTTCTTAAAACTTTTTTACATGTATTAATGTAAACATTTATGAAGAAAAAAGAAATAGAAACC TTATAGTATCAAACACAGATCGTAAACTTGCTCATTTTGTAATTAGGAAGTGAAAATGTGCCTTTCTCAA TCTCTAAATGTATTAAATGGTTGAGTACCGTACTCTAACAAATCAGCAAAATTACAAGGAAACAAATATC TCTGAAGAGTCAGTGAAATGGGAGAATTATAAAATGACCAGTCTACTTTCTCAATATGCTTTCATTTATT AAGCACTTGCTATGTGTAAGGTCCTAGGAACCCCAGAGACATGACACCATGTTCCATGCTCTACATAGCT GTGGTGGCAGGACATGCAAAATAACCTACATACACTATGAAATAAGTAGTAATACACTGGGATTCCATAT

62

CCTATGGAGGTAGAGAAGCAATTAAAGTACCGAGCAAAGTATTGAAGAAAACCTAGACACTACCAGAGTA TAAGAGTCAGGATGGCATCTCTCTAACCATCACTATTTTCATCTGTCAGACAAGGCCAAGGATTGTGAGT GTGGATAAGAGTGGAAGAAGAAAATAGATCTTTTAACCTCTATTCCATGCTTAAGATTCTATAGTTCTGA CCCCACTGGAAATCCAGTGGTTGAAAACTTAATGGCAGTTTATAGAGAAGAAAACTTCTCCTAACAGAAG AGATGAAACTTCCTCTAGGGCAGAAAGCAAGTGTAGGATATCAGTTAGTAGAGAAGAGGGCTTTCTTGCA TGGAACATTACATGTGGTATGTTGAGGGGCTAGTGAATTTTGTTGATTGGTGTGGATTTATGGGGATGAA AAATATGATTTCAGAGTAACATATGATACAGATTAAGAAGTCCTGCATTTAAGAAATTTGACTTAGATTT TATTAGTGGAGTAGTGAAAAGCCATGGATATATTTAGGATGTTGCTGAAGTAGAACAAAAAGTTAGCCCA TCAAAAATGCATGGCGTAGCTGAGAAAACATTACTGGAGTCTGACCAGCTGAATTTGATTCCTAATTCTG CCACTTGCTAGCCATGCACCCCAGTTCAAGCTACCTAACTTCTGAGCCTCTACTTTCTCATATTTGGTGG AGATGTTCACATTCCTCTTAAGATGGAATGAGAGTTCTTGTGGGAGTTAAATGACATACTGAATATTAAA TCCCTAGCCACATAACTGTCACAAAGTGTAAATTCAACAAATGGGTTTCTTCCTTCCCTAGTTTCTTCTC TTTCTATTACTGGAGAATCTCTTGGCAAAACTAATTACTTTGTACAAAAAGTAAGAACAAAGGTTAGATT ACTCTGAAGGGCAGTTGGTTCGTTTCTGGCCTGGTTATCTAACAACACATTTCACTGAGAACATTAAAGA TAAAATAATCAAAAGGAATGCAAGACTAAAGTAGACCAAACATGTCAATTTCGTTGAACATAATTTGGTC AGACTTTAAGGTGAAGGCATAAAGAAATCAAATAAGAGAAGGACTGAAAACAGGAATCAACCATCAGTAA TTTCCTAAAAATCTAGAACATGAGTATAGATAATTTCTTTCAAATACAAAGGAAAAAGTTGTGGGTTTTT TTTTTTTTACTTCAAAAATTCAACTAGAGAATGCTACAGTTAAAGTGTACCTGAAACCAAATTTGGTGAA TTTAATAACCAAGTCATTTGCTGCAAGATGTTCCAAGAGTTACAAGTTATTACTCAGGCGATAACCTCAA ATGACTCCCAAGAGTTAAATTATAAATTTTCCTCAACAATAGAGAGAATTGATCAGTTGAGAACAGAGTC CTCAAAGAGCGAAAAATGGTGTTATGCAGACCCCAGTGTGTTTGAAGGTGATACAGAGTATGCAAATCTT GATTTTGCATCTCTGATCATAGTGTTGGCTCTGGGATTAGTTAAAAGACAGAAATTCCTCCCTTTGTGTA ACTGTACTGTTTCACTTAGGTTAACGTAGGTCCTTTAAGACTTTGCTAGTATGCCATTTTAAACTTGATT GGCTCTTAGCCCCTCCCACCATATTTTTTTCCTCCTGTCCCATAGAAAAGGGAGCAAGGAAGTGTAAACT AATGGTCGTATAGTGAGAACACAAATGAATTTTTTTTCTTGATATTTACCAAGTGTGTTCAGCAAACAGT TCTTCTGTGCCTACTTAATTAGTGCCAGTCTTAATCCTGGGTACAGAGAGGAAATCAGATGTAATGTGGT ACTAGTGCCTTTTTTTTTTTTACAGTGTGGACCCTGGACAAGAAGCATAGGTTGATATCACTTGCAAGTT TATTACCAATGCCAACTCAGGCTTCACTCGAGACCTGCTAATTCAGAATCAGTATTTGAATAAGGTCCCA GGTGATTTGTACATTGAAGATTTTAGAAGTATACAAACAGTAACTCACAGACATAGTAAGATGAAGAGAA ATCCAAACAGATGTTTGGGGCTATGTCGTAGATATAGTATAGGCATAGGAATCCTAAGGAGCAGGACATA TTTCAGCCTGAATATGACAAAAATCCCACTTATTACTCTCCTGAGAGCTTCAAGTGCCTATATGACCCAA AATACAATGGAAAGCCTATTGGCGAAAGTCATGGGTTGATTGATCTAACCCTGAGATAAAATACTTATTA AAATATTATCTTTTAATGGGTTTCAGACAACTGAGGCTAAGCCCTTTAATTACTTTAAGGACCATGCTCA CTGAAGCTTTTAAAAGGTATTTTCAAAAGCTTAATTGCCCAAGAAAATAATCAGTGTAAGAGTATTAGGT TACCCAGCAGAAAATGATGTCTTCTACATACCTGTCTACATCACAAGAAGGGAGGGGTAAAAAAGGATCA AGATCTTATTCTTCTGTAAGCCTACATGTGCATGAGTGTTATGATTTTGAGACTACTCTTATATACATGT AATTTGATCCTCTTATCAAAACAATATAGAGAATAACTGAGCCCAATCTTTTTAGTCATCTCTTCAACAA GGGGTAAATCAGTCAGTTTCTAAAACTGGTGGGAGGTCTCCATAAACCTGATAACAAGATCCCAAAATCC AAACTGATTGACTGAGTTAATTCCTGATCATTTGGGTTGAACTTAAGAGTTATACAAGAAAATGGTAGGG GACGAGGAGGTTGTATAAAGGGGAAAAAACAACAACTGCAAAAAGCCCAAGAGCCTGAATTTAGACCAAT CTATCATCTTCCTCCTCTTAAAAAGAAAACAATTTAAAAGTTTTAAATAAAAAATAAAGGTCATGTTTTT GTTTTGCCAAGAATCAAAAGATTTTGCTGAAACTACTGCTGCAAAATATTTTGTTTCAAGCCATCTTAGG GCACCTCAGACTAAAAATGAAACCATGATCAATTTCTATCCCCTTACCACTTCTATGACAATCACACATG GTAAATACAAGCTCTGCTCTAGTACTACAATAAAACTGTAGAACTAGAGTAGACCTTGTAGTGATCATAT ATTACTACTTCTCCTCTTGTCCTATGTCCATCTTATTTCAATCTAAACTAGAAATGACAAAATTCTTGTT GGGTCGAATTGTCTTTTGAGTAGTTTTAGAGCTTTTTGTTTTCATTTCTCCAAGATGATCTTGTTGCATC TGCAGTTCGAGTTTTTAAAATCAAGTAGAATAATGTCAAAAGGGGACAATTTATGTGAGAAATCAACTGA CAGTACATGATTATTTAAAATGAAAGTTTTAAAGAAAATTTTCCCCACAAGGGAATCTGTGTAAGACCAG AAATCTTATGATTGGCTAGCTACTATATAAAATGCTCTGTACACAAGAAATATTTTCTATTGTCCCTAGC CAGTAAAACAAGAACAAACTCGTACCAAACATGAACTACAGTATATTTATACTGCTGTGCTAAATGGTGT TTGTGGGTATGTTTTTCTTCTCTCTAGGGGAGAGTACGGTTTCCATGAATATACAGAGGTCAAAACAGTC ACAGTGAAAATCTCTCAGAAGAACTCATAAAGAAAATACAAGAGTGGAGAGAAGCTCTTCAATAGCTAAG CATCTCCTTACAGTCACTAATATAGTAGATTTTAAAGACAAAATTTTTCTTTTCTTGATTTTTTTAAACA TAAGCTAAATCATATTAGTATTAATACTACCCATAGAAAACTTGACATGTAGCTTCTTCTGAAAGAATTA TTTGCCTTCTGAAATGTGACCCCCAAGTCCTATCCTAAATAAAAAAAGACAAATTCGGATGTATGATCTC TCTAGCTTTGTCATAGTTATGTGATTTTCCTTTGTAGCTACTTTTGCAGGATAATAATTTTATAGAAAAG GAACAGTTGCATTTAGCTTCTTTCCCTTAGTGACTCTTGAAGTACTTAACATACACGTTAACTGCAGAGT AAATTGCTCTGTTCCCAGTAGTTATAAAGTCCTTGGACTGTTTTGAAAAGTTTCCTAGGATGTCATGTCT GCTTGTCAAAAGAAATAATCCCTGTAATATTTAGCTGTAAACTGAATATAAAGCTTAATAAAAACAACCT TGCATGATTCTTGTTA

63

-> FIND (reading highlight/ highlight all):


ATGTCATCCTCAGGCACGCCAGACTTACCTGTCCTACTCACCGATTTGAAGATTCAATATACTAAGATCT TACAGTAGGAGTCCGTGCGGTC

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/216 -> Graphics -> Tools -> sequence text view

Promoter sequence and start of gene from -75569370 to -75568234 approx neg strand:
[-75569370] AACCATCCAGCCCAGAGGCTGAAAATATTTACAGAAAAAGTTTTGCAAATTCTTGTCTTA GATGAATAAAAAGTTATGTTTAAATGCCTGTAAGGGTGACTATTCACTGA GAAAACCAAAGCAGTTGATGCTTGAACCCATGTAGGAGTTCTCTTGTGGAGAATAGGGT AGAAATAGTAAACAGAAATAAGAGTCCAGGTTTGGGAGTCAGACTGGCCTG AAATGAAATTCTGGTCCTGCACTAATAGATCTGTGACCATAAGTAAGCTACTCACCCTCT GTATGTCTCTAAAATGGGGATATGAAATGAGGGTAGAAAGGGAAACAAGT GCTGCACCTGATTTGGGCAAACAATTCAGAAATTTTTAGTTTCCCTATGTAAGTCCCATAT TCAGGGGAATTGGCAAGTTTCACTAGAAAAAAAAAAATTGGTTGATTCT CCACAATCAGAGCATCCAGAGTATTTTATCTTGTTCCTATTGTAACGTTTGCTAGAGCTAC AATACAATAAAGTATTGTACTTAAAATGGGAGTAACACTGTTTAAAAAA TTGTCCTTCAGCTAAATATTAATTTAAGAACTTGAATTGTTTGGAAGCCCTGCTTAAATTT AGTCTTTGTACACTGCCTATGTTGATAAATACAGACAACTTCCAAAACC AGGATTACTTTCATTTTAAATGAGTATTAATAGATGATATTGCCATATTTCTAATTGTGGT GATTGTGTGTGACAGTGTGTTCCGAATTCCCTAAAAGTCCTGCTGGCTT TTCTGTTCACATATAGAAAATAAAGATAATTTAGGGCTTCTGAGATCACAGTAGGTCTAC TTACCCAGCACTGAAAATACACAAGACTGATACGATATTTTAAAACTAAC TTAGGGTAGGGTGTAGATAAAGGGCCTTTCTTCCCCAAACAGCACCTTGATTTTCTGGGA GATGGACTGATTTCCTGAAAGCCTTGTCCTGAAGACACCTGGCCAGCTTC TACTGAGAACAAGTGCCCTTTTAGACTCTTTTCAATCCTCAAATTCTCTGATTCCAAGTCT GTCAGAGAACAGAAAGTTACATAGTAGCATTAAAAAGCATGAGAAGTCA AAAAAATAATAACTGGCCTTAGTGGCCAGAGCAGCT [-75568234] G^AATT_C is Eco R1 restriction site [start of mRNA -75567940 (untranslated region)] GCTGCATACACTTATCACAGGTTTCGGCTTTGTAAATTAATTCATCTGCAAATAGTGCACT GTCTCCAGGTACAAATTCGATGCTGGAGCACTGGTTTCTTAAGGATTTAAGTTTAAAGTC AAAGGCTTCCTGCCCTAGGTGTTACAAATAAGTAGTGTCGTTTTCTTTTTTTGCTCTGAGT TTGTTCATCCAATCGTATCCGAGTATGCAAATAAACTTTAGCCCGTGCAGATAAAAAAGG AACAAATAAAGCCAAGTGCTCTATCAGAACCAAATTGCTGAGCCAGTCACCTGTGTTCCA GGAGCCGAATCAGAA [start of gene -75567940] ATGTCATCCTCAGGCACGCCAGACTTACCTGTCCTACTCACCGATTTGAAGATTCAATATACTAAG Location of restriction sites in promoter region from -75569370 to -75568234 using NEB webcutter2:

http://tools.neb.com/NEBcutter2/cutshow.php?name=9fdf9fe6-

64

Cut pos. MS Enzyme Recognition sequence -------- -- -------------------- -------------------3 BtsCI GGATG_NN^ 8 MnlI CCTC(N)6_N^ 10 CviKI-1 RG|CY 11 BccI CCATCNNNN^N_ 16 FspEI CC(N)12^NNNN_ 18 AlwNI CAG_NNN^CTG 18 CviKI-1 RG|CY 19 MspJI CNNR(N)9^NNNN_ 20 FspEI CC(N)12^NNNN_ 20 LpnPI CCDG(N)10^NNNN_ 23 MspJI CNNR(N)9^NNNN_ 24 MspJI CNNR(N)9^NNNN_ 24 FspEI CC(N)12^NNNN_ 25 LpnPI CCDG(N)10^NNNN_ 25 MspJI CNNR(N)9^NNNN_ 25 FspEI CC(N)12^NNNN_ 26 SspI AAT|ATT 28 MspJI CNNR(N)9^NNNN_ 31 MspJI CNNR(N)9^NNNN_ 44 MspJI CNNR(N)9^NNNN_ 44 MspJI CNNR(N)9^NNNN_ 45 HpyCH4V TG|CA

65

47 47 57 58 61 64 69 77 77 78 80 81 94 95 99 99 100 100 104 107 107 111 117 119 127 127 128 128 129 129 129 138 139 141 141 142 143 149 149 150 150 150 151 151 165 174 179 181 181 186 186 187 187 188 191 194 194 194 194 194 196

# #

# # #

MluCI ApoI DdeI MspJI MspJI MspJI MspJI MspJI FspEI FspEI MseI DraI MspJI Tsp45I MspJI BspCNI LpnPI FspEI BtsIMutI DdeI HphI TspRI SfaNI MspJI MwoI BstAPI FspEI MspJI FspEI MspJI MspJI FatI CviAII FspEI MspJI NlaIII MspJI MspJI FspEI FspEI MspJI FspEI MspJI FspEI MspJI MspJI Hpy166II FspEI LpnPI FspEI MspJI MspJI FspEI MspJI HinfI StyD4I PspGI MspJI BssKI MspJI BstNI

^AATT_ R^AATT_Y C^TNA_G CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ T^TA_A TTT|AAA CNNR(N)9^NNNN_ ^GTSAC_ CNNR(N)9^NNNN_ CTCAG(N)7_NN^ CCDG(N)10^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CAGTG_NN^ C^TNA_G GGTGA(N)7_N^ _NNCASTGNN^ GCATC(N)5^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ GCNN_NNN^NNGC GCAN_NNN^NTGC CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ ^CATG_ C^AT_G CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ _CATG^ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ GTN|NAC CC(N)12^NNNN_ CCDG(N)10^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ G^ANT_C ^CCNGG_ ^CCWGG_ CNNR(N)9^NNNN_ ^CCNGG_ CNNR(N)9^NNNN_ CC^W_GG

66

196 198 198 199 200 201 205 207 208 208 208 210 213 214 216 216 216 216 216 216 217 221 222 225 226 226 229 230 230 230 233 233 236 238 239 243 246 247 247 247 247 247 247 248 249 249 249 250 252 254 264 264 267 267 268 270 270 279 280 281 281

# ScrFI FspEI LpnPI PleI MlyI # BslI HinfI # MspJI # MspJI # LpnPI # FspEI Hpy188I PleI MlyI MspJI CviKI-1 PhoI HaeIII LpnPI FspEI BsrI MspJI BsgI MspJI ApoI MluCI MspJI FspEI LpnPI MspJI Sau96I AvaII # MspJI MspJI HpyCH4V MspJI MspJI BfuCI BglII # MboI # DpnII BstYI Sau3AI MspJI LpnPI FspEI DpnI MspJI Tsp45I MspJI MspJI HphI CviKI-1 AluI MspJI FspEI MspJI FspEI FspEI MspJI FspEI

CC^N_GG CC(N)12^NNNN_ CCDG(N)10^NNNN_ GAGTCNNNN^N_ GAGTC(N)5| CCNN_NNN^NNGG G^ANT_C CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CCDG(N)10^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ TC_N^GA GAGTCNNNN^N_ GAGTC(N)5| CNNR(N)9^NNNN_ RG|CY GG|CC GG|CC CCDG(N)10^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ ACTG_GN^ CNNR(N)9^NNNN_ GTGCAG(N)14_NN^ CNNR(N)9^NNNN_ R^AATT_Y ^AATT_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CCDG(N)10^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ G^GNC_C G^GWC_C CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ TG|CA CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ ^GATC_ A^GATC_T ^GATC_ ^GATC_ R^GATC_Y ^GATC_ CNNR(N)9^NNNN_ CCDG(N)10^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ GA|TC CNNR(N)9^NNNN_ ^GTSAC_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ GGTGA(N)7_N^ RG|CY AG|CT CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_

67

283 286 287 288 289 290 290 294 294 295 301 302 303 304 317 318 328 328 329 329 330 331 331 332 334 338 342 343 349 350 350 350 352 352 358 360 360 360 362 366 368 369 378 378 378 379 380 386 386 386 387 387 392 397 398 398 399 399 405 414 414

MspJI MnlI MspJI FspEI FspEI BcoDI BsmAI MspJI FspEI FspEI MspJI MnlI FspEI FspEI BsgI BbvI FspEI MspJI FspEI MspJI MspJI ApeKI TseI Fnu4HI HpyCH4V MspJI MspJI BslI MspJI FspEI LpnPI MspJI MluCI MspJI Hpy188I MspJI ApoI MluCI MspJI MspJI BsmFI MspJI LpnPI FspEI MspJI FspEI FspEI FspEI MspJI FspEI MspJI FspEI BslI MspJI MluCI FspEI MspJI FspEI MspJI BfaI FspEI

CNNR(N)9^NNNN_ CCTC(N)6_N^ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ GTCTCN^NNNN_ GTCTCN^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CCTC(N)6_N^ CC(N)12^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ GTGCAG(N)14_NN^ GCAGC(N)8^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ G^CWG_C G^CWG_C GC^N_GC TG|CA CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CCNN_NNN^NNGG CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CCDG(N)10^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ ^AATT_ CNNR(N)9^NNNN_ TC_N^GA CNNR(N)9^NNNN_ R^AATT_Y ^AATT_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ GGGAC(N)10^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CCDG(N)10^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CCNN_NNN^NNGG CNNR(N)9^NNNN_ ^AATT_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ C^TA_G CC(N)12^NNNN_

68

415 417 426 426 433 435 435 439 449 452 454 454 456 460 461 468 469 469 469 474 482 485 * 485 * 488 489 492 497 497 504 512 513 514 518 519 522 533 536 540 541 543 543 544 544 548 561 561 561 565 567 568 569 569 570 574 574 576 576 577 584 593 596

MspJI MspJI MspJI MluCI MspJI HinfI TfiI FokI Hpy188I BtsCI FspEI MspJI Hpy188III MspJI SfaNI MspJI LpnPI FspEI MspJI MspJI MspJI AclI HpyCH4IV MspJI FspEI BfaI AluI CviKI-1 MspJI FspEI FspEI MspJI CviQI RsaI MseI MspJI BtsIMutI HpyCH4III AcuI TspRI MseI DraI MspJI MluCI AluI CviKI-1 MspJI HpyAV SspI FspEI AseI MseI MluCI MspJI MseI FspEI MspJI MspJI MluCI MspJI MspJI

CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ ^AATT_ CNNR(N)9^NNNN_ G^ANT_C G^AWT_C GGATG(N)9^NNNN_ TC_N^GA GGATG_NN^ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ TC^NN_GA CNNR(N)9^NNNN_ GCATC(N)5^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CCDG(N)10^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ AA^CG_TT A^CG_T CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ C^TA_G AG|CT RG|CY CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ G^TA_C GT|AC T^TA_A CNNR(N)9^NNNN_ CAGTG_NN^ AC_N^GT CTGAAG(N)14_NN^ _NNCASTGNN^ T^TA_A TTT|AAA CNNR(N)9^NNNN_ ^AATT_ AG|CT RG|CY CNNR(N)9^NNNN_ CCTTC(N)5_N^ AAT|ATT CC(N)12^NNNN_ AT^TA_AT T^TA_A ^AATT_ CNNR(N)9^NNNN_ T^TA_A CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ ^AATT_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_

69

597 602 604 606 606 611 611 612 612 615 615 618 619 620 621 621 621 628 639 640 645 # 645 # 655 658 # 658 # 658 # 659 # 660 660 # 665 666 666 667 671 # 672 # 672 # 672 # 676 677 687 687 702 702 711 712 713 715 716 716 723 723 728 * 729 731 733 735 740 740 744 745 745

CviKI-1 MspJI MseI MluCI ApoI FspEI MspJI LpnPI FspEI MspJI MspJI BsrGI CviQI RsaI BtsI BtsIMutI Hpy166II TspRI MspJI FspEI FspEI LpnPI MspJI StyD4I PspGI BssKI BslI BstNI ScrFI MspJI FspEI MspJI MspJI MspJI MspJI FspEI LpnPI MseI DraI MseI AseI FspEI MspJI MspJI MluCI MspJI MspJI FspEI MspJI MspJI MspJI MspJI Tsp45I HphI EcoP15I HpyCH4III BtsIMutI TspRI Hpy188I ApoI MluCI

RG|CY CNNR(N)9^NNNN_ T^TA_A ^AATT_ R^AATT_Y CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CCDG(N)10^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ T^GTAC_A G^TA_C GT|AC GCAGTG_NN^ CAGTG_NN^ GTN|NAC _NNCASTGNN^ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CCDG(N)10^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ ^CCNGG_ ^CCWGG_ ^CCNGG_ CCNN_NNN^NNGG CC^W_GG CC^N_GG CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CCDG(N)10^NNNN_ T^TA_A TTT|AAA T^TA_A AT^TA_AT CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ ^AATT_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ ^GTSAC_ GGTGA(N)7_N^ CAGCAG(N)25^NN_ AC_N^GT CAGTG_NN^ _NNCASTGNN^ TC_N^GA R^AATT_Y ^AATT_

70

745 749 749 755 756 756 758 763 763 764 764 765 767 772 773 773 776 777 787 787 788 788 790 792 795 797 797 802 806 807 808 810 811 813 813 813 813 815 820 822 826 827 829 834 838 842 845 846 847 847 847 848 848 853 862 864 867 867 868 868 869

EcoRI LpnPI FspEI MspJI * MspJI * FspEI MspJI FspEI MspJI MspJI FspEI Cac8I CviKI-1 MspJI LpnPI FspEI MspJI Hpy166II FspEI MspJI FspEI MspJI MspJI MspJI MspJI MluCI MspJI BspCNI CviKI-1 FspEI MspJI DdeI Hpy188I # DpnII Sau3AI BfuCI # MboI DpnI HpyCH4III MspJI AccI Hpy166II MspJI BseYI BtsIMutI MspJI TspRI MspJI * MspJI MspJI FspEI FspEI LpnPI MspJI MspJI MspJI MspJI FspEI FspEI MspJI MspJI

G^AATT_C CCDG(N)10^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ GCN|NGC RG|CY CNNR(N)9^NNNN_ CCDG(N)10^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ GTN|NAC CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ ^AATT_ CNNR(N)9^NNNN_ CTCAG(N)7_NN^ RG|CY CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ C^TNA_G TC_N^GA ^GATC_ ^GATC_ ^GATC_ ^GATC_ GA|TC AC_N^GT CNNR(N)9^NNNN_ GT^MK_AC GTN|NAC CNNR(N)9^NNNN_ C^CCAG_C CAGTG_NN^ CNNR(N)9^NNNN_ _NNCASTGNN^ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CCDG(N)10^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_

71

870 871 872 873 873 880 885 886 888 892 901 902 902 904 904 904 918 920 920 920 921 922 926 926 927 927 927 928 928 935 938 938 947 954 959 961 964 964 966 967 967 967 968 975 975 977 977 977 978 979 979 980 980 980 981 981 981 982 982 982 982

# #

# # # # #

MseI DraI FspEI FspEI MspJI DdeI FspEI FspEI MspJI MspJI MboII EcoO109I Sau96I CviKI-1 HaeIII PhoI FspEI LpnPI FspEI MspJI FspEI MspJI MspJI FspEI FspEI MspJI FspEI MspJI FspEI BccI MspJI FspEI MspJI Hpy188III MspJI CviKI-1 FspEI LpnPI MspJI FspEI MspJI LpnPI Hpy188III MspJI FspEI BssKI StyD4I PspGI BbsI ScrFI BstNI EaeI MspJI MspJI FspEI MspJI LpnPI PhoI HaeIII MscI CviKI-1

T^TA_A TTT|AAA CC(N)12^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ C^TNA_G CC(N)12^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ GAAGA(N)7_N^ RG^GNC_CY G^GNC_C RG|CY GG|CC GG|CC CC(N)12^NNNN_ CCDG(N)10^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CCATCNNNN^N_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ TC^NN_GA CNNR(N)9^NNNN_ RG|CY CC(N)12^NNNN_ CCDG(N)10^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CCDG(N)10^NNNN_ TC^NN_GA CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ ^CCNGG_ ^CCNGG_ ^CCWGG_ GAAGACNN^NNNN_ CC^N_GG CC^W_GG Y^GGCC_R CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CCDG(N)10^NNNN_ GG|CC GG|CC TGG|CCA RG|CY

72

983 984 985 986 986 990 990 991 991 991 993 995 996 996 997 1005 1007 1007 1008 1008 1012 1014 1019 1020 1023 1031 1031 1035 1037 1039 1039 1040 1040 1040 1040 1042 1050 1055 1056 1057 1057 1066 1073 1077 1081 1083 1088 1089 1092 1098 1098 1101 1105 1107 1111 1112 1116 1116 1116 1117 1118

# # # #

MboII Cac8I BspCNI AluI CviKI-1 AcuI MspJI MspJI LpnPI FspEI DdeI MspJI LpnPI FspEI MspJI MspJI BaeGI Bsp1286I MlyI PleI MspJI HinfI FspEI FspEI MspJI ApoI MluCI MspJI MnlI Hpy188I MspJI TfiI HinfI MspJI FspEI MspJI MspJI Hpy188I MspJI MspJI FspEI MspJI MspJI MspJI MseI MspJI FatI CviAII NlaIII LpnPI FspEI MspJI MspJI FspEI MspJI MspJI CviKI-1 HaeIII PhoI BsrI DdeI

GAAGA(N)7_N^ GCN|NGC CTCAG(N)7_NN^ AG|CT RG|CY CTGAAG(N)14_NN^ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CCDG(N)10^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ C^TNA_G CNNR(N)9^NNNN_ CCDG(N)10^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ G_KGCM^C G_DGCH^C GAGTC(N)5| GAGTCNNNN^N_ CNNR(N)9^NNNN_ G^ANT_C CC(N)12^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ R^AATT_Y ^AATT_ CNNR(N)9^NNNN_ CCTC(N)6_N^ TC_N^GA CNNR(N)9^NNNN_ G^AWT_C G^ANT_C CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ TC_N^GA CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ T^TA_A CNNR(N)9^NNNN_ ^CATG_ C^AT_G _CATG^ CCDG(N)10^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ CNNR(N)9^NNNN_ RG|CY GG|CC GG|CC ACTG_GN^ C^TNA_G

73

1122 1122 1122 1123 1125 1125 1125 1125 1125 1130 1130 1131 1131 1131 1132 1134 1134

MwoI BglI SfiI EaeI MspJI MscI HaeIII CviKI-1 PhoI MspJI FspEI TseI ApeKI MwoI Fnu4HI CviKI-1 AluI

GCNN_NNN^NNGC GCCN_NNN^NGGC GGCCN_NNN^NGGCC Y^GGCC_R CNNR(N)9^NNNN_ TGG|CCA GG|CC RG|CY GG|CC CNNR(N)9^NNNN_ CC(N)12^NNNN_ G^CWG_C G^CWG_C GCNN_NNN^NNGC GC^N_GC RG|CY AG|CT

http://insilico.ehu.es/restriction/main/index2.php
Lengh of code: 1136 G+C=37% AACCATCCAG GATGAATAAA TATTCACTGA GAATAGGGTA TTGGGAGTCA AAGTAAGCTA TATGAAATGA AATTTTTAGT TTGGCAAGTT GTATTTTATC CAATACAATA GCTAAATATT TGCTTAAATT AGGATTACTT TGCCATATTT CTGCTGGCTT TTAGGGCTTC TACGATATTT AGGGCCTTTC GCCTTGTCCT AAGTGCCCTT CAGAAAGTTA AAAAAATAAT CCCAGAGGCT AAGTTATGTT GAAAACCAAA GAAATAGTAA GACTGGCCTG CTCACCCTCT GGGTAGAAAG TTCCCTATGT TCACTAGAAA TTGTTCCTAT AAGTATTGTA AATTTAAGAA TAGTCTTTGT TCATTTTAAA CTAATTGTGG TTCTGTTCAC TGAGATCACA TAAAACTAAC TTCCCCAAAC GAAGACACCT TTAGACTCTT CATAGTAGCA AACTGGCCTT GAAAATATTT TAAATGCCTG GCAGTTGATG ACAGAAATAA AAATGAAATT GTATGTCTCT GGAAACAAGT AAGTCCCATA AAAAAAAATT TGTAACGTTT CTTAAAATGG CTTGAATTGT ACACTGCCTA TGAGTATTAA TGATTGTGTG ATATAGAAAA GTAGGTCTAC TTAGGGTAGG AGCACCTTGA GGCCAGCTTC TTCAATCCTC TTAAAAAGCA AGTGGCCAGA ACAGAAAAAG TAAGGGTGAC CTTGAACCCA GAGTCCAGGT CTGGTCCTGC AAAATGGGGA GCTGCACCTG TTCAGGGGAA GGTTGATTCT GCTAGAGCTA GAGTAACACT TTGGAAGCCC TGTTGATAAA TAGATGATAT TGACAGTGTG TAAAGATAAT TTACCCAGCA GTGTAGATAA TTTTCTGGGA TACTGAGAAC AAATTCTCTG TGAGAAGTCA GCAGCT TTTTGCAAAT 100 TGTAGGAGTT 200 ACTAATAGAT 300 ATTTGGGCAA 400 CCACAATCAG 500 GTTTAAAAAA 600 TACAGACAAC 700 TTCCGAATTC 800 CTGAAAATAC 900 GATGGACTGA 1000 ATTCCAAGTC 1100 TCTTGTCTTA CTCTTGTGGA CTGTGACCAT ACAATTCAGA AGCATCCAGA TTGTCCTTCA TTCCAAAACC CCTAAAAGTC ACAAGACTGA TTTCCTGAAA TGTCAGAGAA

Restriction enzyme AccI,FblI,XmiI


GT^MK_AC

Cuts Positions 1 1 2 6
826

AclI,Psp1406I
AA^CG_TT

485

AcoI,CfrI,EaeI
Y^GGCC_R

980 1123 47 226

AcsI,ApoI,XapI
R^AATT_Y

74

360 606 745 1031

AfaI,RsaI
GT^AC

2 4

519 620 201 343 392 659 194 658 977 267 497 561 986 1134 18

AfiI,Bsc4I,BseLI,BsiYI,BslI
CCNN_NNN^NNGG

AjnI,EcoRII,Psp6I,PspGI
^CCWGG_

AluI
AG^CT

AlwNI,CaiI
CAG_NNN^CTG

1 2 2 2 1 2 2

ApeKI,TseI
G^CWG_C

331 1131 569 687 233 902 233

AseI,PshBI,VspI
AT^TA_AT

AspS9I,BmgT120I,Cfr13I,Sau96I
G^GNC_C

AvaII,Bme18I,Eco47I,SinI,VpaK11BI
G^GWC_C

BalI,MlsI,MluNI,MscI,Msp20I
TGG^CCA

982 1125 414 492 247 813 1122

BfaI,FspBI,MaeI,XspI
C^TA_G

BfuCI,Bsp143I,BssMI,BstMBI,DpnII,Kzo9I,MboI,NdeII,Sau3AI 2
^GATC_

BglI
GCCN_NNN^NGGC

1 1 2 3

BglII
A^GATC_T

247

BisI,BlsI,Fnu4HI,Fsp4HI,GluI,ItaI,SatI
GC^N_GC

332 1132 196 660

Bme1390I,MspR9I,ScrFI
CC^N_GG

75

979

Bme1580I,BseSI,BstSLI
G_KGCM^C

1 3

1007

BmrFI,BssKI,BstSCI,StyD4I
^CCNGG_

194 658 977 196 660 979 834

BseBI,BstNI,BstOI,Bst2UI,MvaI
CC^W_GG

BseYI
C^CCAG_C

1 5

BshFI,BsnI,BspANI,BsuRI,HaeIII,PhoI
GG^CC

216 904 982 1116 1125 1007

Bsp1286I,MhlI,SduI
G_DGCH^C

1 1 3

Bsp1407I,BsrGI,BstAUI
T^GTAC_A

618

Bst4CI,HpyCH4III,TaaI
AC_N^GT

540 735 820 127

BstAPI
GCAN_NNN^NTGC

1 2 6

BstC8I,Cac8I
GCN^NGC

765 984 57 107 810 880 993 1118 250 816 127 1122 1131 247

BstDEI,DdeI,HpyF3I
C^TNA_G

BstKTI
G_AT^C

2 3

BstMWI,MwoI
GCNN_NNN^NNGC

BstX2I,BstYI,MflI,PsuI,XhoII
R^GATC_Y

1 2 2
76

Csp6I,CviQI,RsaNI
G^TA_C

518 619 142

CviAII,FaeI,Hin1II,Hsp92II,NlaIII

_CATG^

1092

CviJI,CviKI-1
RG^CY

16

10 18 216 267 497 561 597 767 806 904 961 982 986 1116 1125 1134 249 815 81 544 677 871 902

DpnI,MalI
GA^TC

2 4

DraI
TTT^AAA

EcoO109I,DraII
RG^GNC_CY

1 1 2 5

EcoRI
G^AATT_C

745

FatI
^CATG_

138 1088 191 205 435 1014 1040 210 358 449 744 811 1039 1055 456 954 968 179 621 777 827

HinfI
G^ANT_C

Hpy188I
TC_N^GA

Hpy188III
TC^NN_GA

Hpy8I
GTN^NAC

77

HpyCH4IV,MaeII
A^CG_T

1 3

485

HpyCH4V
TG^CA

45 239 334 127 1122 1131 95 252 481 532 729 1066 80 522 543 569 574 604 676 687 870 1081 95 252 729 435 1040 200 269 339 488 499 563 826 927 980 988 1136 1122

HpyF10VI
GCNN_NNN^NNGC

MaeIII
^GTNAC_

MseI,Tru1I,Tru9I
T^TA_A

10

NmuCI,Tsp45I
^GTSAC_

TfiI,PfeI
G^AWT_C

2 11

SetI
_ASST^

SfiI
GGCCN_NNN^NGGCC

1 14

Sse9I,TasI,Tsp509I,TspEI
^AATT_

47 226 352 360 398 426 548 570 584

78

606 712 745 797 1031

SspI
AAT^ATT

2 1 2 5

26 567 488

TaiI
_ACGT^

TatI
W^GTAC_W

517 618 111 543 628 740 845

TspRI
_NNCASTGNN^

Primers

http://www.yeastgenome.org/cgi-bin/web-primer These primers are for PCR ForwardGCCCAGAGGCTGAAAATATT ReversePrimer Primer Length: 20 Length: Percent GC: 45 Percent GC: Tm: 52 Tm: SelfSelf-Anneal: 12 Anneal: EndEnd-Anneal: 12 Anneal: Offset: 10 Offset: Pair-Anneal: 20 Pair-End-Anneal: 12 Total valid primer pairs: 7 These primers will amplify a fragment of 1127 basepairs The sequence of DNA that will be amplified by these primers is 1

AGCTGCTCTGGCCACTAAG
19 57 52 20 12 1136

GCCCAGAGGC TGAAAATATT TACAGAAAAA GTTTTGCAAA TTCTTGTCTT


79

AGATGAATAA CTATTCACTG AGAAAACCAA 101 TCTCTTGTGG AGAATAGGGT 151 TTTGGGAGTC AGACTGGCCT 201 TCTGTGACCA TAAGTAAGCT 251 ATATGAAATG AGGGTAGAAA 301 AACAATTCAG AAATTTTTAG 351 ATTGGCAAGT TTCACTAGAA 401 GAGCATCCAG AGTATTTTAT 451 ACAATACAAT AAAGTATTGT 501 ATTGTCCTTC AGCTAAATAT 551 CTGCTTAAAT TTAGTCTTTG 601 CTTCCAAAAC CAGGATTACT 651 TTGCCATATT TCTAATTGTG 701 CCCTAAAAGT CCTGCTGGCT 751 TTTAGGGCTT CTGAGATCAC 801 CACAAGACTG ATACGATATT 851 AAGGGCCTTT CTTCCCCAAA 901 ATTTCCTGAA AGCCTTGTCC 951 CAAGTGCCCT TTTAGACTCT 1001 CTGTCAGAGA 1051 ACAGAAAGTT
51

AAAGTTATGT TTAAATGCCT GTAAGGGTGA AGCAGTTGAT GCTTGAACCC ATGTAGGAGT AGAAATAGTA AACAGAAATA AGAGTCCAGG GAAATGAAAT TCTGGTCCTG CACTAATAGA ACTCACCCTC TGTATGTCTC TAAAATGGGG GGGAAACAAG TGCTGCACCT GATTTGGGCA TTTCCCTATG TAAGTCCCAT ATTCAGGGGA AAAAAAAAAT TGGTTGATTC TCCACAATCA CTTGTTCCTA TTGTAACGTT TGCTAGAGCT ACTTAAAATG GGAGTAACAC TGTTTAAAAA TAATTTAAGA ACTTGAATTG TTTGGAAGCC TACACTGCCT ATGTTGATAA ATACAGACAA TTCATTTTAA ATGAGTATTA ATAGATGATA GTGATTGTGT GTGACAGTGT GTTCCGAATT TTTCTGTTCA CATATAGAAA ATAAAGATAA AGTAGGTCTA CTTACCCAGC ACTGAAAATA TTAAAACTAA CTTAGGGTAG GGTGTAGATA CAGCACCTTG ATTTTCTGGG AGATGGACTG TGAAGACACC TGGCCAGCTT CTACTGAGAA TTTCAATCCT CAAATTCTCT GATTCCAAGT ACATAGTAGC ATTAAAAAGC ATGAGAAGTC
80

AAAAAAATAA 1101 TAACTGGCCT TAGTGGCCAG AGCAGCT


Add prefix and suffix to ForwardPrimer

GCCCAGAGGCTGAAAATATT ReversePrimer

AGCTGCTCTGGCCACTAAG
TCGACGAGACCGGTGATTC

Promoter sequence and start of gene from -75569370 to -75568234 approx neg strand with primers highlighted
[-75569370] AACCATCCAGCCCAGAGGCTGAAAATATTTACAGAAAAAGTTTTGCAAATTCTTGTCTTA GATGAATAAAAAGTTATGTTTAAATGCCTGTAAGGGTGACTATTCACTGA GAAAACCAAAGCAGTTGATGCTTGAACCCATGTAGGAGTTCTCTTGTGGAGAATAGGGT AGAAATAGTAAACAGAAATAAGAGTCCAGGTTTGGGAGTCAGACTGGCCTG AAATGAAATTCTGGTCCTGCACTAATAGATCTGTGACCATAAGTAAGCTACTCACCCTCT GTATGTCTCTAAAATGGGGATATGAAATGAGGGTAGAAAGGGAAACAAGT GCTGCACCTGATTTGGGCAAACAATTCAGAAATTTTTAGTTTCCCTATGTAAGTCCCATAT TCAGGGGAATTGGCAAGTTTCACTAGAAAAAAAAAAATTGGTTGATTCT CCACAATCAGAGCATCCAGAGTATTTTATCTTGTTCCTATTGTAACGTTTGCTAGAGCTAC AATACAATAAAGTATTGTACTTAAAATGGGAGTAACACTGTTTAAAAAA TTGTCCTTCAGCTAAATATTAATTTAAGAACTTGAATTGTTTGGAAGCCCTGCTTAAATTT AGTCTTTGTACACTGCCTATGTTGATAAATACAGACAACTTCCAAAACC AGGATTACTTTCATTTTAAATGAGTATTAATAGATGATATTGCCATATTTCTAATTGTGGT GATTGTGTGTGACAGTGTGTTCCGAATTCCCTAAAAGTCCTGCTGGCTT TTCTGTTCACATATAGAAAATAAAGATAATTTAGGGCTTCTGAGATCACAGTAGGTCTAC TTACCCAGCACTGAAAATACACAAGACTGATACGATATTTTAAAACTAAC TTAGGGTAGGGTGTAGATAAAGGGCCTTTCTTCCCCAAACAGCACCTTGATTTTCTGGGA GATGGACTGATTTCCTGAAAGCCTTGTCCTGAAGACACCTGGCCAGCTTC TACTGAGAACAAGTGCCCTTTTAGACTCTTTTCAATCCTCAAATTCTCTGATTCCAAGTCT GTCAGAGAACAGAAAGTTACATAGTAGCATTAAAAAGCATGAGAAGTCA AAAAAATAATAACTGGCCTTAGTGGCCAGAGCAGCT [-75568234]

Prefix 5GAATTCGCGGCCGCTTCTAGAG3 Suffix 5TACTAGTAGCGGCCGCTGCAG3 Forward:


GAATTCGCGGCCGCTTCTAGAGGCCCAGAGGCTGAAAATATT TACTAGTAGCGGCCGCTGCAG

Reverse:
GAATTCGCGGCCGCTTCTAGAG AGCTGCTCTGGCCACTAAG TACTAGTAGCGGCCGCTGCAG I dont see how these primers can work with prefix and suffix attached.

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