UNIVERSIDAD VERACRUZANA Facultad de Medicina

Efectos osmticos en glbulos rojos y clulas vegetales, en soluciones con diferente osmolaridad
Catedrtico:
Jorge Parrazal Cobos Jueves 13 de octubre de 2011

Alumnos:
Astudillo Lpez Itzel Cesta Mendoza Gustavo Galindo Lpez Patricia Martnez Rosete Luis Antonio Reyes bravo Susana Rivera morales Norberto

INTRODUCCIN

El conocimiento adecuado del metabolismo y los electrolitos es de gran inters mdico, como los casos de perdida de lquidos y sales por vmitos y diarreas, traumatismos y quemaduras, o los de retencin de aguay sales en la insuficiencia cardiaca congestiva, la insuficiencia renal del sndrome nefrtico. Los lquidos corporales muestran gran constancia en la concentracin de sus componentes inicos, pH, temperatura; adems tiene mecanismos muy efectivo para su regulacin y sistemas de proteccin contra a perdida de agua, como la piel el rin, cuyo fin es conservarla constante, al grado mximo posible, la concentracin de distintos componentes del medio interno; es en rigor, la expresin del clsico aforismo de Bernard: la constancia del medio interno es la condicin de a vida libre

Efectos osmticos en glbulos rojos humanos y en clulas vegetales, con soluciones de diferente osmolaridad

Antecedentes
El descubrimiento de la smosis es anterior al de la difusin, antecedida sta a su vez, por un mundo reinante de confusiones. Se considera que la primera luz sobre este tema es dada en 1748 por J. A. Nollet (1700-1770) el cual despus de obtener una membrana de vejiga animal, colocando alcohol de un lado y agua del otro, observ que el agua flua a travs de la vejiga para mezclarse con el alcohol, pero de ninguna manera el alcohol se mezclaba con el agua; descubriendo as la existencia de membranas semipermeables. 1 El hallazgo de la smosis en membranas semipermeables fue realizado por Henri Dutrochet, el cual observ que la difusin del solvente a travs de una membrana semipermeable ocurra siempre de la solucin de menor concentracin de un soluto, que no puede pasar, hacia la solucin de mayor concentracin; adems, el solvente que fluye es capaz de desarrollar una presin sobre la membrana a la que denomin presin osmtica. 1 Posteriormente, gracias a los experimentos y aportaciones de grandes entes, como lo fueron Robert Brown (describi el movimiento que lleva a cabo una partcula inmersa en un fluido), Thomas Graham (el padre de la qumica de los coloides y creador de la ley de difusin de los gases), el fisilogo alemn Adolf Eugen Fick (autor de la ley del flujo de difusin, habl del efecto que tiene en este una diferencia de concentraciones), y otras grandes personalidades, se pudieron vislumbrar las caractersticas e importancia de la smosis en los seres vivos. 1 Efectos osmticos de los fluidos Los fluidos, de acuerdo a sus efectos osmticos, son definidos en trminos de osmolaridad, osmolalidad, presin osmtica, tonicidad, y presin coloidosmtica. 2 La osmosis se define como la difusin neta de agua a travs de una membrana semipermeable. La cual va a estar determinada por dos aspectos fundamentales: 1. Diferencia de concentracin de soluto. 2. La presencia de una membrana, que debe de ser relativamente impermeable al soluto.3 Las partculas osmticamente activas (POA) son aquellos solutos que atraen agua a travs de una membrana semipermeable hasta alcanzar un equilibrio, siendo as, de importancia trascendental conocer el efecto directo de las mismas en las clulas de cuerpo. 2

Eritrocitos La sangre es tejido vivo formado por lquidos y slidos. La parte lquida, llamada plasma, contiene agua, sales y protenas. Ms de la mitad del cuerpo es plasma. La parte slida de la sangre contiene glbulos rojos (eritrocitos), glbulos blancos (leucocitos) y plaquetas. Un eritrocito es una clula sangunea a nucleada, tambin denominada glbulo rojo o hemate, de color rosado y de forma redondeada u oval, con un dimetro aproximado de 7 m, cuya misin fundamental es la captacin de oxgeno y su transporte a los tejidos. Este se origina en la mdula sea y atraviesa distintos estadios de maduracin, que van desde la clula madre, el proeritroblasto, el eritroblasto basfilo, el policromatfilo y el ortocromtico, hasta el reticulocito y el eritrocito. La vida media de esta clula es de 110-120 das, al cabo de los cuales es eliminada de la corriente sangunea y destruida por el sistema reticuloendotelial. Su nmero oscila entre 4,5 y 5 millones por mm 3 en el hombre y entre 4 y 4,5 millones en la mujer. 4 La membrana de los eritrocitos corresponde a la teora del modelo del mosaico fluido propuesto en 1972 por S. J. Singer y Garth Nicolson. 5 Segn este modelo, la membrana celular se compone de capa bimolecular de lpidos, en la cual a determinados intervalos se incluyen unidades proteicas que forman un mosaico en la doble capa lipdica. La doble capa lipdica es relativamente impermeable a la mayora de las molculas hidrosolubles y representa la estructura bsica de la membrana. Las molculas de protena se encuentran incluidas o disueltas en la doble capa lipdica de la membrana celular, y protruyen en diverso grado sobre las superficies interna o externa de la membrana clulas, o ambas. Se han demostrado cientos de distintas protenas, que desempean determinadas funciones de membrana especficas, por ejemplo, protenas de transporte, receptores y sitios de anclaje para componentes extracelulares o intracelulares. 6 Hay considerables gradientes de concentracin de iones y molculas entre un lado y otro de la membrana plasmtica de todas las clulas porque el citoplasma celular es un fluido muy distinto al fluido extracelular. En su papel, la membrana plasmtica proporciona dos tipos de movimiento: el transporte pasivo y el transporte activo. 7 Siendo la principal diferencia entre ambos la utilizacin o no de energa; ya que por un lado el transporte pasivo (ya sea por difusin simple o facilitada) se da sobre la base de un gradiente de concentracin (en una direccin termodinmicamente favorable), mientras que en el transporte activo se necesita energa (pues va en contra del gradiente de concentracin). Las soluciones que tienen una concentracin total de solutos inferior a la del plasma y, por lo tanto, una presin osmticamente ms baja, son hipoosmticos respecto al plasma. Si el soluto es osmticamente activo, estas soluciones tambin son hipotnicas respecto al plasma. Los eritrocitos colocados en soluciones hipotnicas ganan agua y pueden estallar- un proceso que se denomina hemlisis-; mientras que al colocar eritrocitos en una solucin hipertnica (como el agua de mar) que contiene solutos osmticamente activos

a una osmolalidad y presin osmtica ms elevadas que las del plasma, se contraen debido a que el agua sale de las clulas por smosis, este proceso se denomina crenacin (crena=muesca) debido a que la superficie celular adopta un aspecto festoneado. 3 Siendo por esta razn, junto con otras, tan importante el conocimiento respecto a las necesidades de lquidos y electrolitos y el impacto de sus desequilibrios sobre la salud. Importancia en la clnica de la reposicin de lquidos La reposicin de volumen en pacientes crticos ha experimentado cambios significativos en los ltimos veinte aos que se han traducido en disminucin de la morbimortalidad de estos pacientes. Gran parte de estos avances tienen ms relacin con cambios en la actitud por parte de los mdicos y a guas ms estrictas en la poltica transfusional, que a la generacin de nuevos tipos de fluidos. Estos avances son fcilmente apreciables en la reanimacin inicial de pacientes hipovolmicos o traumatizados que ingresan a Unidades de Urgencia, donde se observa mayor agresividad en el aporte de fluidos no sanguneos en el intento de recuperar rpidamente a los pacientes del estado de shock; mientras que por otra parte es posible apreciar la dificultad al evaluar la reposicin de volumen en pacientes crticos hospitalizados, en quienes el efecto a largo plazo de las distintas soluciones es enmascarado por las complejas alteraciones fisiopatolgicas propias de estos pacientes. 2 Regulacin del volumen circulante efectivo El agua corporal total corresponde aproximadamente al 60% del peso del individuo. De ste, las dos terceras partes comprenden el compartimento o lquido intracelular (LIC), y una tercera parte el lquido extracelular (LEC), el cual es el que ms importa en trminos de reposicin de volumen, por cuanto es el encargado de la perfusin tisular, si bien, en ocasiones, el mdico puede modificar la tonicidad de los fludos para utilizar el LIC en la restauracin de la perfusin tisular. El LEC consta de dos compartimentos, el fludo intersticial y el volumen intravascular (VIV). El volumen de sangre, a su vez, est dado por la suma del VIV y la masa de glbulos rojos, siendo de aproximadamente 70 a 80 ml/Kg en un adulto sano. 2 La mantencin de una perfusin tisular adecuada es fundamental para el metabolismo celular normal. El volumen circulante efectivo (VCE) se refiere a aquella fraccin del LEC que est en el sistema arterial (700 ml en un hombre de 70 Kg) y que est efectivamente perfundiendo los tejidos. Este volumen es vigilado por los cambios de presin en los baroreceptores arteriales (seno carotdeo y arteriola aferente glomerular), ms que por alteraciones del flujo o del volumen; y por otros mecanismos reguladores. Por ejemplo, en un caso de deshidratacin la sangre se concentra ms al reducirse el volumen sanguneo y se produce un aumento de la osmolalidad, lo que propicia la estimulacin de los Osmorreceptores en el hipotlamo. Como resultado de este aumento de estimulacin de los Osmorreceptores la persona experimentara sed y a consecuencia beber agua; lo cual ir acompaado de la excrecin de un

volumen menor de orina, debido al efecto de la hormona antidiurtica (ADH) directamente en los riones, que promueve la retencin de agua. 2 Por otro lado una persona con un valor sanguneo normal que ingiere comidas saladas tambin se vuelve sedienta, lo que hace que se libere ms ADH por la neurohipfisis; as bebiendo ms y eliminando menos agua por la orina la sal de los alimentos se diluir para restablecer la concentracin sangunea normal, pero con un volumen sanguneo mayor. En caso de privacin de sal sucede lo contrario, y as al haber una osmolalidad plasmtica ms baja, los Osmorreceptores se estimulan menos y la neurohipfisis libera menos ADH. En consecuencia se elimina ms agua por la orina para restaurar de nuevo la concentracin plasmtica adecuada, pero con un volumen sanguneo menor 3 Aunado a lo anterior es importante resaltar la importancia del sodio en la regulacin de la osmoticidad del suero, ya que este es el principal soluto que participa en esta, es muy probable que la osmoticidad anormal del suero se asocie con trastornos que producen una concentracin anormal del sodio, un volumen anormal de agua o ambos. As es probable que el plasma hiperosmtico sea causado por un aumento del sodio srico o prdida de agua; lo cual puede asociarse con diabetes inspida, hipercalemia, diuresis durante la hiperglucemia severa o con recuperacin inicial de anuria; y/o a causas externas al organismo como lo es la ingestin de alcohol. De forma anloga, es probable que el suero hipoosmtico se deba a una disminucin del sodio y/o a un exceso de agua, lo cual puede asociarse con el estado posoperatorio, el tratamiento con drogas diurticas y dieta hiposdica (como en pacientes con insuficiencia cardaca, cirrosis, etc.) enfermedad suprarrenal (p. ej., enfermedad de Addison, sndrome adrenogenital) sndrome de secrecin inapropiado de hormona antidiurtica (SIADH) o enfermedades que hacen que se libere de forma inadecuada la ADH (carcinoma de pulmn de clulas en avena, carcinoma broncgeno, insuficiencia cardaca congestiva, lesiones pulmonares inflamatorias, porfiria, hipotiroidismo severo o la enfermedad cerebral). 8

OBJETIVO GENERAL
Observar los efectos osmticos en eritrocitos cuando estos son expuestos a soluciones con diferentes concentraciones de soluto.

OBJETIVOS ESPECFICOS Observar los efectos causados por las soluciones isotnicas en los eritrocitos

Observar los efectos causados por las soluciones hipotnicas en los eritrocitos Observar los efectos causados por las soluciones hipertnicas en los eritrocitos

Estudiar la conducta osmtica de las clulas y la penetracin de solutos de las mismas, observando y midiendo. La plasmlisis y el tiempo en que ocurre. La plasmlisis y el intervalo de tiempo entre la plasmlisis y la desplsmolisis Observar las modificaciones morfolgicas, celulares, como resultado en respuesta a la presencia de medios con distintas concentraciones.

Osmosis en glbulos rojos humanos expuestos y en clulas vegetales expuestos

Materiales Agua destilada (sol. Hipotnica) Solucin fisiolgica 9% (sol. isotnica) Sol de cloruro de sodio al 10% (sol. Hipertnica) Jeringas portaobjetos cubreobjetos tulipanes Procedimiento para clulas humanas: 1. se procedio a extraer una cantidad considerable de sangre de nuestro compaero Tubos de ensaye Cinta Torunda Ligadura Navaja centrifuga microscopio gotero

2. la muestra de sangre posteriormente fue vertida en un tubo de ensaye con heparina, previamente colocada

3. inmediatamente la sangre en el tubo de ensaye fue colocada en la centrifuga y se procedi a realizar centrifugacin durante 10 min

4. pasado el tiempo se procedi a colocar gotas del suero en los portaobjetos y se realiz el extendido.

5. Se hizo el mismo procedimiento de extendido en dos portaobjetos ms y despus de esto se procedi a colocar gotas de soluciones hipertnicas, hipotonas e isotnicas a cada uno de los extendidos y se coloc cubreobjetos

Procedimiento para clulas vegetales: 6. De los ptalos del tulipn se realizaron cortes tangenciales, dejando una delgada capa de ptalos.

7. Despus de esto se procedi a colocar los cortes de ptalo en los portaobjetos

8. Finalmente a cada muestra de ptalo se le agrego solucin hipertnica, hipotnica e isotnica.

Procedimiento final para ambas practicas: 9. Las muestras se observan al microscopio a 40x y 100x y se ven por separado las muestras con sol. Hipertnica, sol. Hipotnica y sol. Isotnica, agregando a estos aceite de inmersin.

Resultados:
Al observar al microscopio, las soluciones de diferente osmolaridad, causaron diversos efectos en las clulas:

La solucin hipertnica hizo que las clulas vegetales y animales liberaran agua lo que les dio un aspecto de crenadas.

La solucin hipotnica creo el efecto de edematizar a las clulas.

La solucin isotnica no creo ningn cambio en las clulas.

Con esto comprobamos la hiptesis planteada al principio de esta prctica la cual nos dictaba que Las clulas vegetales vivas y los eritrocitos se edematizan en un medio hipotnico y se deshidratan en un medio hipertnico.

IMPORTANCIA
Mediante la practica pudimos corroborar que la teora de las reacciones de la clulas, en este caso eritrocitos, fueron acorde a los esperado. La aplicacin Biomdica de estos resultados son los siguientes: Como podemos ver las clulas en presencia de un liquido hipoosmtico es la de hincharse hasta el grado de estallar, esto nos muestra que si en un paciente que necesita una entrada intravenosa de glucosa, en este caso se usara dextrosa; o que necesita entrada intravenosa de electrolitos y no se guarda bien la relacin osmtica con respecto a la sangre, en lugar de hacer un bien al paciente lo estaramos matando al generar lisis celular en masa debido a la presencia de un liquido hipoosmtico en la sangre. Como los eritrocitos son los que tendran el primer contacto con susodicha sustancia se ocasionara anemia hemoltica? En el paciente agravando mas su condicin ya delicada. En el caso de la presencia en un liquido hiperosmtico las clulas se crinan, aplicando el ejemplo anterior, el paciente recibe una intravenosa hiperosmtica, los eritrocitos reaccin de primera mano y se genere anemia, no es hemoltica por que las clulas no son destruidas (lisis) pero estn crinadas y no pueden realizar sus funciones como tal. En resumen es importante conocer y saber diferenciar los efectos que tienen las diversas cualidades osmticas en la sangre para beneficio tanto propio como del paciente.

GLOSARIO
Plasma: Parte lquida de la sangre en la cual estn suspendidos los elementos celulares. Del total del volumen sanguneo, el 55% est compuesto por plasma. Es un lquido claro, de color amarillo. No contiene clulas y est constituido por agua, electrlitos, protenas, sales inorgnicas, nutrientes, hormonas, enzimas, gases y materiales de desecho de las clulas. Es esencial para el transporte de los elementos celulares de la sangre, a travs de la circulacin, y de los nutrientes, para el mantenimiento del equilibrio cido-base del organismo y para el transporte de productos de desecho procedentes de los tejidos. El plasma y el lquido intersticial tienen un contenido y una concentracin de protenas muy similar, y, por lo tanto, el plasma es importante para mantener la presin osmtica y el intercambio hidroelectroltico entre los capilares y los tejidos. 4 Osmorreceptor: Receptor nervioso que se estimula por partculas disueltas. Son Osmorreceptores los corpsculos gustativos, las clulas neuroepiteliales de la mucosa olfatoria, algunas neuronas de los ncleos suprapticos y paraventricular del hipotlamo, etc. 4 Neurohipfisis: Porcin de la hipfisis derivada del hipotlamo, que constituye el lbulo posterior de la glndula. En ella se almacenan la vasopresina y la oxitocina (en forma de prohormonas) y, una vez activadas, pasan a la sangre. 4 Osmolalidad: Concentracin en osmoles por kilogramo de solvente. 4 Osmolaridad: Concentracin de una solucin expresada en osmoles de soluto por litro de solucin. 4 Presin osmtica: Fuerza necesaria para evitar la osmosis 2 Tonicidad: Trmino que se utiliza para describir el efecto de una solucin sobre el movimiento osmtico del agua. 2 Diabetes inspida: Poliuria hipotnica con polidipsia secundaria, que persiste incluso tras la restriccin hdrica. 4 Hipercalemia: Elevacin de la concentracin circulante de potasio. Se puede manifestar con nuseas, debilidad muscular y arritmias cardiacas.
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Anuria: Ausencia total de orina o en cuanta inferior a 50 ml en 24 horas. Con frecuencia es secundaria a una obstruccin del bajo aparato urinario, fibrosis retroperitoneal y, ms raramente, a un infarto renal o a una necrosis cortical bilateral. Su valoracin requiere la realizacin de una ecografa abdominal para descartar la obstruccin. 4 Enfermedad de Adisson: Pigmentacin bronceada de la piel, postracin grave y anemia, debidas a la hipofuncin de las glndulas suprarrenales. 4 Porfiria: Grupo de enfermedades hereditarias con carcter autosmico, de predominio dominante, que se caracteriza por una acumulacin de porfirinas o de sus precursores debido a defectos enzimticos. Estos acmulos van a producir fotosensibilidad cutnea (acumulacin de porfirinas) y/o alteraciones neurolgicas (acumulacin de precursores

porfirnicos). Desde el punto de vista clnico, se clasifican en porfirias eritropoyticas o porfirias hepticas. 4 Sndrome adrenogenital: Conjunto de las enfermedades producidas por un aumento en la secrecin de andrgenos en la corteza suprarrenal. Este sndrome puede ser congnito o adquirido. 4 Hipotiroidismo: Disminucin patolgica de la funcin tiroidea, que puede estar motivada por causas diversas: falta de iodo en la dieta (como sucede en las zonas de bocio endmico), disminucin de la hormona tirotropa de la hipfisis o su factor liberador hipotalmico, o bien por un desarrollo deficiente o una alteracin tiroidea. Se produce una disminucin del metabolismo, un enlentecimiento en la actividad corporal y psquica, etc. 4

CONCLUSIN

Podemos concluir con esta prctica que los eritrocitos estn rodeados por una membrana permeable al agua y a algunos electrolitos, la relacin de la entrada con la salida de los mismos se ver reflejada en la forma del eritrocito, y ser dada por las condiciones de tonicidad en las que se encuentre el lquido circundante a ellos, que en el caso del cuerpo ser el lquido intersticial. Definimos a la osmosis como la difusin neta de agua a travs de una membrana semipermeable. La importancia mdica de esta prctica en el campo medico, no lleva, por ejemplo a explicar cmo es que por medio de soluciones hipotnicas podemos regular un severo caso de deshidratacin; o como es que con una solucin hipotnica podemos tratar un edema de cualquier tipo.

Bibliografa
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