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CHRISTIAN GALLEGOS PALERMO

COPROPARASITOLOGICO Es un estudio prescrito bajo sospecha de presencia parasitaria, larvas, o huevos de diferentes familias de helmintos, amebas, tenias y protozoos. El mdico ordena este estudio cuando el paciente presenta:

Dolores o clicos, etc. Cuando los parsitos se alojan en el aparato digestivo, una proporcin de ellos, o las larvas, o los huevos... son eliminados con las heces. REACCIN INFLAMATORIA Constituyen procesos inflamatorios crnicos con perodos de actividad, que alternan con otros de latencia y con manifestaciones:

Diarrea. Gases.

DIGESTIVAS: (dolor abdominal, pirosis (acidez del estomago), diarrea, vmito) EXTRADIGESTIVAS: (articulares, hepticas, cutneas, fatiga, sequedad bucal y ocular, fiebre)

Se engloba una amplia gama de trastornos inflamatorios del intestino: etiologa conocida:

INFECCIOSA: (Vibrio Cholerae, Shiguella, virus, parsitos) QUMICA: antibiticos de amplio espectro (penicilina, lincomicina) FSICA: Estrs. SENSIBILIDAD INMUNOLGICA ESPECFICA:

Otros en los que no se ha logrado evidenciar un factor casual. Se han implicado en su patogenia diversos factores exgenos (fuera de si mismo en otro lugar) que interactuaran sobre un organismo con una cierta predisposicin gentica. (Enfermedad de Crohn, Colitis Ulcerosa). Signos y/o sntomas con carcter recurrente: rectorragia, dolor abdominal, distensin, retortijn, episodios de diarrea, tenesmo o urgencia defecatoria, presencia de lesiones anogenitales y presencia de determinadas manifestaciones extraintestinales. Entre las manifestaciones sistmicas o extraintestinales cabe destacar: prdida de peso, retraso del crecimiento en nios, aftas y ulceraciones en boca, lesiones drmicas (eritema nodoso, pioderma gangrenoso), oculares (epiescleritis o iritis), articulares (artritis seronegativa, sacroileitis o espondilitis anquilopoytica) y hepticas (colangitis esclerosante primaria). IMPORTANCIA Mediante esta prueba, el mdico puede tener una informacin rpida e importante para establecer, junto con la historia clnica, un cierto grado de exactitud acerca del tipo de diarrea que afecta al paciente. Cabe mencionar que algunas bacterias ocasionan cuadros diarreicos a travs de toxinas, razn por la cual no se observan leucocitos en la muestra. Esta prueba tambin nos informa de la presencia de otros elementos que proporcionan valiosa informacin al mdico.

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HECES Conjunto de los desperdicios generalmente slidos (o, casi siempre por algn padecimiento, a veces tambin lquidos) que genera todo ser viviente como producto final del proceso de la digestin. Las heces son los restos de los alimentos no absorbidos por el tubo digestivo (como fibras y otros componentes que no son tiles para el ser en cuestin), y tambin clulas del epitelio intestinal que se descaman en el proceso de absorcin de nutrientes, microorganismos, y otras sustancias que no logran atravesar el epitelio intestinal. DIARREA La diarrea no es una enfermedad sino el sntoma de otro trastorno. Su principal caracterstica es la evacuacin frecuente de heces acuosas, lo cual provoca una baja absorcin de lquidos y nutrientes, pudiendo estar acompaada de dolor, fiebre, nuseas, vmito, debilidad o prdida del apetito. De acuerdo con cifras de la Organizacin Mundial de la Salud, la diarrea es una de las principales causas de muerte en los pases del Tercer mundo. La definicin mdica de la diarrea es el aumento de la cantidad de heces a ms de 200 g/24 h. El paciente lo percibe como una disminucin en la consistencia de las heces que causa urgencia o molestia abdominal. Ccaractersticas de "flojas, aguadas, blandas o lquidas". Aumento del volumen, de la frecuencia, o de la fluidez de las heces, ms de 200 gr/da, con ms del 90% agua. El nmero de deposiciones vara segn la dieta y la edad, pero en general se define la diarrea como tres o ms deposicin lquida o blanda por da, acompaada por dolor abdominal, nauseas, vmitos, con o sin fiebre, incontinencia fecal. La diarrea con sangre, moco, tenesmo rectal, escaso volumen, pero muy frecuente (20 a 30 veces en un da) se conoce como disentera. CLASIFICACIN FISIOPATOLOGICA

OSMTICA: Se debe al aumento del componente no absorbible en el tubo digestivo, aumentando la concentracin osmolar y jalando, liquido del componente vascular. Ocurre cuando aumenta la ingesta de hidratos de carbono o se administra lactulosa en grandes cantidades. SECRETORA: Patogenia: Presencia de sustancias (secretagogos) que estimulan la secrecin intestinal hacia el lumen, aumentando el volumen fecal. Se produce porque los enterocitos aumentan la secrecin de electrolitos a lumen intestinal jalando consigo agua, se observa en los procesos txicos como el clera. MALABSORTIVA: Habilidad intestinal (INTESTINO DELGADO) para digerir o absorber un nutriente est alterado. Alimento al llegar al colon acta como un soluto osmtico en el lumen. Esta alteracin suele ser crnica. Caracterstica clnica: Paciente con prdida de peso, en nios desnutricin, lientera (fragmentos de alimentos en heces) o esteatorrea (gotas de grasa en heces). Por lo general cesa con el ayuno. Causas: Dficit enzimtico pancretico. Defectos en la digestin de los lpidos por alteracin de la circulacin enteroheptica o alteraciones en la formacin de bilis. Sobrecrecimiento bacteriano (Enteritis infecciosas, infestacin parasitaria, esprue tropical) Prdida de enterocitos (radiacin, infeccin) Obstruccin linftica (linfoma, tuberculosis).

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TRASTORNO DE LA MOTILIDAD: Se debe a una hipermotilidad de uno o ms segmentos del intestino, es tpica del sndrome de intestino irritable. Ocurre por aumento del trnsito intestinal. Causas: Hipertiroidismo Neuropata diabtica Colon irritable Posquirrgico INFLAMATORIA O EXUDATIVA. Existen lesiones en la mucosa intestinal a travs de las que se produce exudacin de componente mucoso y sanguinolento. Se presenta en enfermedades inflamatorias del intestino e infecciones por Salmonella y shiguella. Ocurre por lesin del epitelio colnico. Caracterstica clnica: DISENTERA, Heces que persisten durante el ayuno. Causas: Enfermedad inflamatoria Intestinal Infecciones: Shiguella, Salmonella, Campylobacter, Entamoeba Histoltica. CLASIFICACION CLINICA

DIARREA AGUDA: Diarrea de inicio reciente, que por lo general dura menos de una semana Causas: Enterotoxinas: E Coli, V Cholerae, C. difficile, Stafilococo. Infecciosa: Viral (Rotavirus, Adenovirus), Bacterias (E Coli, Salmonella, Shigella), Parsitos (giardia, amebas) Medicamentos: laxantes, anticidos, antimicrobianos.

DIARREA CRONICA: Diarrea que suele durar ms de 4 semanas Causas: Infecciosa: Parsitos (amebas, giardia, taenias, VIH, tuberculosis, etc) Uso crnico de medicamentos Enfermedades sistmicas (hipertiroidismo, colitis ulcerativa, amiloidosis) Cncer (intestinal, linfoma) Colon Irritable.

DIARREA DEL VIAJERO. Diarrea que ocurre dentro de los 10 primeros das de visitar algn pas nuevo (generalmente donde hbitos de limpieza son pobres) Causas: Infecciosa o mediada por toxinas: E Coli enterotoxignica o invasiva, parsitos (Giardia lamblia, entamoeba Histoltica, rotavirus), Shigella, Salmonella. RECOLECCION DE LA MUESTRA Un espcimen fecal bebe colectarse en un recipiente con tapn de rosca, limpio (no necesariamente estril), que no debe estar contaminado con orina. En la etiqueta se debe marcar la hora en que se deposit la muestra y la fecha, as como los datos de identificacin del paciente. Son suficientes cantidades pequeas de heces, en general 2.5cc de heces formadas o 15-30 cc de heces liquidas. ASPECTO MACROSCOPICO

CONSISTENCIA: Normalmente es pastosa-dura. Puede modificarse en distintas circunstancias. En las diarreas la consistencia es lquida, en cantidad abundante cuando se deben a patologa intestino delgado y escaso y mucosas si proceden del intestino grueso. Las deposiciones semiblandas indican un trnsito rpido por el intestino delgado o son propias de las afecciones pancreticas o biliares. En el estreimiento son duras, en forma de grandes bolos en la atona, y acintadas en las obstrucciones mecnicas. Las deposiciones caprinas son propias de los estados espsticos acentuados. Pastosa, liquida, blanda, dura, mucoide, caprino, diarreico, granuloso.

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COLOR: En los seres humanos la primera vez que los bebs vacan su intestino echan unas deposiciones "color meconio" amarillo-anaranjadas, espesas y pegajosas que se denominan as precisamente: meconio. ste se expulsa durante las primeras 24 horas de vida, gracias a la accin laxante del calostro. Grasas de color claro pueden indicar una alteracin pancretica. Blanco: Debido a la ingesta (leche, bario, caoln...) o a la ausencia de bilis fundamentalmente. Negro pueden sugerir un exceso de bilis. Por la presencia de sangre coagulada presente en el aparato digestivo. Por medicamentos (carbn, hierro, bismuto). Amarillento indican que el paciente sufre una infeccin conocida como giardiasis. Sndrome de Gilbert. Esta enfermedad est condicionada por brotes de ictericia y de hiperbilirubinemia y ocurre cuando hay un exceso de bilirrubina en la sangre. Azules o verdes: ciertas enfermedades o consumir ciertos alimentos. Puede ser debido a la ingesta (verduras, medicamentos...) o a la presencia de biliverdina (rapidez del trnsito intestinal, diarreas infantiles). Rojo: A la ingesta de remolacha o a la existencia de hemorragias prximas al ano. MUCUS: Su presencia en las heces es propia de los estados inflamatorios (enteritis y colitis), pero tambin se presenta en los estados espsticos, an sin Inflamacin. La presencia de mucus es indicio de irritacin compatible con la existencia de un parasitismo. El procedimiento es utilizar un aplicador de madera para buscar la presencia de mucus en la muestra. Resultados: (+), (++), (+++). ASPECTO QUIMICO

pH: Se emplea una tira de papel indicador universal, sobre el cual se aplica una pequea cantidad de materia fecal, se espera unos minutos y se compara con la escala de colores. rojo de metilo y azul de bromotimol. Vara entre 6,8 y 7,2 dependiendo del rgimen alimenticio. Los valores normales. Se van a modificar segn el proceso digestivo.

pH cidos indican EDA de tipo viral. pH alcalinos indican EDA invasivas.

El pH fecal depende en parte de la fermentacin de los azcares. La fermentacin en el colon de una cantidad normal de carbohidratos y de produccin de cidos grasos explica un pH normal ligeramente acidificado. Si se sospecha intolerancia a los disacridos, se realiza un simple test de screening (Prevencin, a pacientes asintomticos (Hiptesis sospecha)).

pH ligeramente alcalinos, se dan en casos de diarreas secretorias sin ingesta de alimentos, colitis, adenoma velloso, y posiblemente con el uso de antibiticos.

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Un pH fecal menor de 6.0 es evidencia sugestiva de malabsorcin de azcares. En nios y en algunos adultos se nota que sus heces tienen un olor dulce como resultado de cidos grasos voltiles y la presencia de intolerancia a la lactosa. pH fecales bajos tambin contribuyen a escoriaciones de la piel de la regin perianal, frecuentemente acompaadas de diarrea. La determinacin de sustancias reductoras en la materia fecal es un test ms confiable la deficiencia de disacaridasa. Un pH fecal alto puede ser un factor de riesgo de cncer colo-rectal. La ingesta de cereales con fibra (75-100g/das x 14 das) demuestra la capacidad de reducir el pH fecal en 0,4 unidades. Sin embargo, esto significa que un pH alto se relaciona en segunda instancia con el riesgo de cncer. THEVENON: (SANGRE OCULTA EN HECES) Disolucin etanlica de piramidn se macera en cido actico concentrado, se aade el reactivo y unas gotas de agua oxigenada. BENEDICT: (DETECCIN DE GLUCOSA) 5 gotas de Heces (liquido); 1 gramo de heces (pastoso). 2.5 ml. de Benedict. Hervir aproximadamente 5 min. Moviendo el tubo lentamente. Dejar en reposo y evaluar en cruces. Azul verdoso: vestigio o trazas. Amarillo verdoso: (+). Amarillo intenso: (++). Naranja ladrillo: (+++).

Reaccin cualitativa en la cual interviene el reactivo de Benedict, el cual es una disolucin alcalina de ion cprico de color azul intenso. El reactivo de Benedict consta de Sulfato cprico, citrato de sodio, y carbonato anhidro de sodio y agua destilada. Reactivo de Benedict: solucin de 17.3 g de sulfato de cobre cristalizado, 173 g de citrato de sodio o potasio, 200 g de carbonato de sodio en 1.000 ml de agua destilada. EL FUNDAMENTO: El ion cprico, otorgado por el sulfato cprico, es capaz de reducirse, por efecto del grupo aldnico del azcar (CHO), en un medio alcalino caliente, a su forma de Cu+, que se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al xido cuproso (Cu2O). El medio alcalino, facilita que el azcar este de forma lineal, puesto que el azcar en solucin forma un anillo de piransico o furansico. Una vez que el azcar est lineal, su grupo aldehdo puede reaccionar con el ion cprico en solucin. En estos ensayos es posible observar que la fructosauna cetohexosa es capaz de dar positivo, esto ocurre por las condiciones en que se realiza la prueba, puesto que en un medio alcalino caliente esta cetohexosa se tautomeriza (Dos ismeros que se diferencian slo en la posicin de un grupo funcional: hay equilibrio quimico), pasando por un intermediario enlico (compuesto con grupo hidroxilo unido al carbono), a glucosa, quedando con el grupo aldehdo capaz de reducir al ion cprico.

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CUERPOS REDUCTORES O AZCARES REDUCTORES EN HECES: Las heces deben de ser recientes, no debe dejarse pasar ms de una hora desde que son emitidas hasta que se realiza el examen. Hay que diluir una parte de heces en dos partes de agua destilada, mezclar bien y centrifugar a un nmero bajo de revoluciones (1.500 rpm.). Se toman 15 gotas del sobrenadante, se colocan en un tubo de vidrio y se le aaden dos gotas de ClH 1 N. Luego calentamos para desdoblar la sacarosa. Una vez que ha enfriado el lquido anterior, se aade una tableta de CLINITEST (Ames) para azcares reductores y se deja disolver. Resultado de los azcares reductores - escala de colores: Negativo: 0 gr/dl Azul 1+: 0.5 gr/dl Verde transparente 2++: 0.75 gr/dl Verde turbio 3+++: 1 gr/dl Verde-amarillo 4++++: 2 gr/dl Amarillo ladrillo. SANGRE

a)

REACCIN DE LA BENCIDINA: Sobre un papel de filtro manchado de heces, se ponen unas gotas de bencidina y agua oxigenada de 10 volmenes. Si el resultado es (+), como resultado de la presencia de peroxidasa, se formar un halo de color verde-azulado en torno a la mancha. REACCIN DE WEBER O DEL GUAYACO: La prueba es igual que la anterior pero en lugar de poner bencidina se pone guayaco. La reaccin es la siguiente: HEMOGLOBINA + H2O2 H2O + O2 BENCIDINA O2 + o Color Azul-verdoso PRUEBA DEL CROMO RADIOACTIVO: No se basa en la peroxidasa: Tiene ms sensibilidad y especificidad que las anteriores. Se basa en la capacidad del Cr radioactivo (Cr51) para ser fijado por los hemates y por el hecho de no ser reabsorbido en el tracto gastrointestinal. As pues, es excretado por las heces en las que puede ser medido por espectrofotometra de rayos.

b)

c)

PIGMENTOS BILIARES La presencia de bilirrubina y estercobilingeno en heces mediante 2 mtodos:

a)
Se

PRUEBA DEL SUBLIMADO: Sensible para Estercobilina. Se hace poniendo en un tubo de ensayo: Dilucin de heces.................................... 5 ml. Sublimado (ClHg).................................... 5 ml. agita y se incuba a 37oC durante 1 - 2 horas y se observan los resultados: ROJO.............................. ESTERCOBILINA o ESTERCOBILINGENO VERDE............................ BILIRRUBINA. BLANCO......................... Ausencia de Pigmentos. PRUEBA DE GRIGAUT: Sensible para bilirrubina. Se hace poniendo en un tubo de ensayo: ClH concentrado...................................... 5 ml.

b)

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Cl3Fe (10%)............................................. 2 gotas. (Tricloruro de monohierro) Dilucin de heces.................................... 5 ml.

Se agita y se calienta ligeramente observando los resultados: VERDE..................................... BILIRRUBINA. ROJO........................................ ESTERCOBILINGENO. Las 2 pruebas se hacen simultneamente, debido a su diferente sensibilidad, y los resultados se interpretan as: SUBLIMADO GRIGAUT

ESTERCOBILINOGENO BILIRRUBINA acelerado

+ +

+ + +-

Heces normales Trnsito intestinal Trnsito intestinal Obstruccin biliar

ESTERCOBILINGENO + medianamente acelerado BILIRRUBINA -

ENZIMAS PROTEOLTICAS: Se intenta comprobar la presencia de Tripsina, Quimiotripsina, etc. Las heces normales (hasta una dilucin 1/100) licuan la gelatina. La prueba se realiza aplicando una gota de diferentes diluciones (1/5, 1/10, 1/50, 1/100) de la heces a estudiar de heces sobre una pelcula de gelatina. Se considera un resultado positivo si la gelatina queda disuelta en hora. Positivo hasta una dilucin 1/100........................... Digestin normal. Positivo hasta una dilucin 1/50............................. Digestin media. Positivo hasta una dilucin 1/10..............................Digestin deficiente. 1. DETERMINACIN CUANTITATIVA DE GRASA EN HECES REACCIN DE AZUL DE NILO PARA GRASA FECAL: Diluir en un tubo de ensayo una porcin de muestra con 9 volmenes de agua. Aadir: 1 ml. de esta suspensin fecal. 1 ml. de agua.

1.
2.

3. 4.

3 gotas de ClH al 10%. 3 gotas de Oxalato amnico saturado. Calentar a ebullicin durante unos segundos. Enfriar. Echar el lquido en un vaso de precipitado. Lavar el tubo de ensayo con 2,5 ml. de solucin de CO3Na2 al 20% y aadirlos al contenido del vasito. Agregar 15 ml. de agua y 1 ml. de solucin de Azul de Nilo (0,05% en agua) dejando resbalar por las paredes. Leer los resultados inmediatamente: NEGATIVO: Rosado que vira a gris (aproximadamente < 7 g./da) DUDOSO: Gris azulado.

5. 6.
7.

POSITIVO: Azul (aproximadamente > 7 g./da) Cuando la reaccin de azul de Nilo es negativa, la grasa fecal no excede nunca de 5% en peso. Una reaccin claramente positiva corresponde a ms del 5% de grasa.

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2.

MTODO DE VAN DE KAMER: Se separan los lpidos de las heces mediante tratamiento de estas con una solucin de hidrxido potsico alcohlico y que contenga pequeas cantidades de alcohol amlico. De sta manera se produce la formacin de jabones. Posteriormente se hidrolizan los jabones con ClH y se convierten en cidos grasos, extrayndose estos a continuacin con ter de petrleo. Por ltimo se titulan los cidos grasos con NaOH 0,1 N Peso total de heces x Vol. cc. NaOH g. de grasa = Peso de la muestra ASPECTO MICROSCOPICO

LEUCOCITOS: Eosinfilos: Estas clulas, generalmente redondeadas, tienen un dimetro similar al de los PMNS, y se caracterizan en las tinciones, por la presencia de grandes grnulos rojo prpura, adems que suelen presentar su ncleo segmentado. Neutrfilos polimorfonucleares (PMNS): Generalmente son encontrados en casos de disentera bacteriana o amebiosis. Se hallan comnmente presentes en las infecciones bacterianas y en la enfermedad inflamatoria crnica del colon. No se observan en diarrea secundaria a virus, toxinas y parsitos. Frots de heces con tincin azul de metileno para ver leucocitos fecales: dejar secar la muestra y teir por 30 a 60, dejar secar a temperatura ambiente y enjuagar a chorro de agua ver a 100X HEMATIES: Los glbulos rojos tienen un dimetro de 7,5 m. Su presencia en las heces puede indicar ulceracin a nivel del tacto intestinal u otro problema hemorrgico. En parsitos, bacterias, virus, etc. PIOCITOS: Se presenta en pequeas cantidades en la enteritis y colitis de cualquier etiologa. Pero la presencia brusca de pus abundante es indicio de la evacuacin a la luz intestinal de un absceso prximo (perirrectales, prostticos, pioslpinx, etc.). LBULOS DE GRASA: En una dieta que contenga al menos 50 g de grasa diarios la cantidad de lpidos es de menos de 6 g/24 h, correspondiendo a menos del 30% del peso seco de las heces. La cantidad total de lpidos desdoblados debe ser al menos del 50% de las grasas totales. Cantidades menores indicaran una absorcin intestinal deficitaria. Hay aumento de la grasa fecal total en insuficiencias pancreticas, espre (Enfermedad comn en la que la cubierta del intestino delgado est daada como respuesta a una ingestin de gluten y de protenas similares que se encuentran en el trigo, centeno, avena, cebada y otros granos, mucoviscidosis, obstrucciones biliares, etc. En la observacin lo mas importante son las grasa neutras. Se informa positivamente a partir de 15 - 20 gotas/campo (objetivo x40). El aumento patolgico de grasas en heces se llama ESTEATORREA. Si en el microscopio se observa mas de 60 gotas /campo es seguro esteatorrea. Algunas veces, para observar las grasas se calienta el portaobjetos suavemente a la llama.

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CRISTALES: Indican una excesiva irritabilidad. Presentan el mismo aspecto que en el sedimento urinario. Origen alimentario (oxalato de calcio). Endgeno (Oxalato calcio, fosfato amnico-magnsico). Hay unos, caractersticos del parasitismo intestinal, llamados cristales de CharcotLeyden, presentando una forma tpica de agujas de brjula. Medicamentos. BACTERIAS: Carecen de significado clnico. Las bacterias pueden infectar cualquier parte del cuerpo, pero frecuentemente ocasionan diarrea al invadir el tracto digestivo. CLULAS EPITELIALES: Mucosa intestinal. Indican una excesiva irritabilidad. Las clulas epiteliales o clulas escamosas pueden estar presentes en las heces, ms an si la muestra se obtiene por sigmoidoscopa. El tamao de estas clulas son semejantes al de las amebas, la coloracin es verde plido con apariencia uniforme no granular cuando se les colorea con TrichomeGomori. HONGOS LEVADURAS: Clulas ovoides de 4 a 6 m y que pueden encontrarse en forma de levaduras o hifas. Son altamente hepatotxicos y lesionan la mucosa gastrointestinal (agravando el problema de hiperpermeabilidad). Junto con los hongos, erradican al resto de la flora. PRASITOS: Es un anlisis de la materia fecal para verificar la presencia de un parsito o de una infeccin del intestino causada por organismos similares a gusanos. Los huevos se refieren a la primera etapa del ciclo de vida del parsito. Algunos parsitos son organismos unicelulares como la Amebiasis, la Giardia y las Tricomonas, etc., mientras que otros tienen apariencia de gusanos. TEST DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA Es una prueba mdica cuyo objetivo es diagnosticar o excluir la diabetes. Despus de un ayuno de varias horas y en condiciones de reposo la concentracin de glucosa en sangre es de 65 a 100 mg por 100 ml. Despus de la ingestin de alimentos, sobrevienen alzas hasta de 120 a 140 mg por 100 ml y, unas horas despus, regresan a los valores en ayunas.

La glucosa es la principal fuente de energa para la mayora de las clulas del cuerpo y algunas de estas clulas (por ejemplo, las del cerebro y los glbulos rojos) son casi totalmente dependientes de la glucosa en la sangre, como fuente de energa. El principal origen de la glucosa est en la ingesta de los carbohidratos consumidos como alimentos y la mayora de ellos terminan convirtindose en glucosa en la sangre. Despus de las comidas, una parte de la glucosa se convierte en glucgeno para ser almacenado por el hgado y por los msculos esquelticos. El glucgeno se descompone gradualmente en glucosa y el hgado lo libera al torrente sanguneo cuando los niveles de glucosa disminuyen. El exceso de glucosa se transforma en triglicridos para el almacenamiento de energa. La principal hormona reguladora de la concentracin de glucosa en el cuerpo es la insulina (a pesar de que otras hormonas como el glucagon, la epinefrina y el

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cortisol

tambin

la

pueden

afectar).

En la diabetes si se suministran 100 g de glucosa o bien 1 g/kg de peso, se produce una curva de hiperglucemia venosa con valores mayores a los normales, un descenso de los valores inciales en tiempo superior a las 2 horas y no se observa hipoglucemia secundaria. Muchas formas de estrs severo (por ejemplo, trauma, accidente cerebrovascular, ataque cardaco y ciruga) pueden aumentar temporalmente los niveles de glucosa. Algunas drogas tambin pueden aumentar los niveles de glucosa, entre las que destacan: Corticosteroides, Antidepresivos tricclicos, Isoniazida, Litio, Fenotiazinas, Fenitona. Otras, por el contrario, pueden disminuir los niveles de glucosa sanguneos, entre las que destacan: Alcohol, Esteroides anablicos, Clofibrato, Gemfibrozil, Inhibidores de la monoaminoxidasa (IMAO), Sulfonilreas. DATOS CLNICOS Las caractersticas de la curva de la glucosa sangunea despus de la administracin de una cantidad conocida de glucosa indica la tolerancia a esta. La diabetes mellitus tipo I se caracteriza por la disminucin de la tolerancia a la glucosa debido a la disminucin de secrecin de insulina en respuesta a la carga de glucosa. Esto se manifiesta por la hiperglucemia, glucosuria y metabolismo de grasas. La tolerancia a la glucosa disminuye en la diabetes tipo I, en trastornos relacionados con lesin heptica; en algunas infecciones; en la diabetes tipo II, que se acompaa de obesidad y aumentos de concentraciones plasmticas de cidos grasos, disminuye la tolerancia bajo la influencia de algunos frmacos; y algunas veces en la arterioesclerosis. La insulina incrementa la tolerancia a la glucosa; su administracin disminuye el contenido sanguneo de glucosa e incrementa la utilizacin y almacenamiento heptico de esta. Un exceso de insulina puede producir hipoglucemia intensa y esta resultar en convulsiones y muerte, a menos que se administre glucosa de inmediato. En las insuficiencias hipofisiaria y corticosuprarrenal se incrementa la tolerancia a la glucosa debido a la disminucin del antagonismo de la accin de la insulina a cargo de las hormonas secretadas por estas glndulas. MTODOS

1.

PRUEBA DE GLUCOSA EN AYUNAS: Despus de ayunar por 8 horas exactas. Se saca una muestra de sangre para analizarla y medir el nivel de glucosa en la sangre. Dos das. El nivel de glucosa normal despus de ayunar debera ser menor que 110mg %. Tiene diabetes si esta prueba se hace en dos das diferentes y los dos resultados son 126mg% o mayor que esta cifra.

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2.

Tiene "problemas de tolerancia a la glucosa" si la lectura de la glucosa es sobre 110mg% pero menor que 126mg%. PRUEBA DE GLUCOSA AL AZAR: A diferencia de la prueba de glucosa que requiere de 8 horas de ayuno, esta prueba de glucosa al azar se puede hacer a cualquier hora durante el da sin importar si ingiri algn alimento. Una persona tiene diabetes si la lectura de glucosa en dos das diferentes es de 200mg% o ms, y con la presencia de dos o ms sntomas de diabetes. PRUEBA DE TOLERANCIA CON UNA DOSIS INTRAVENOSA DE GLUCOSA. Son poco comunes. Para realizar este tipo de prueba, al paciente se le inyecta por va venosa una cantidad conocida de glucosa durante tres minutos, previa la medicin de los niveles de insulina (las clulas Beta liberan insulina para ayudar al cuerpo a usar o a acumular el azcar o la glucosa obtenida de los alimentos. La insulina es la hormona "anablica" por excelencia; es decir, permite disponer a las clulas del aporte necesario de glucosa para los procesos de sntesis con gasto de energa, que luego por gluclisis y respiracin celular se obtendr la energa necesaria en forma de ATP (mononucletido de adenosina trifosforilado) que usa el metabolismo como unidad de energa transportable para dichos procesos. Mantiene la concentracin de glucosa en nuestra sangre. Lo consigue porque cuando el nivel de glucosa es elevada el pncreas lo libera a la sangre. Su funcin es favorecer la absorcin celular de la glucosa), en la sangre en el minuto uno y en el tres. La prueba consiste en inyectar 50 C.C. de una solucin de glucosa al 50%. Se dosifica la glucemia antes de la inyeccin y a los 15, 30, 60, 90 y 120 minutos.

3.

4.

PRUEBA DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA CON CORTISONA: Para reconocer un trastorno latente del metabolismo de los glcidos en personas obesas o no, con antecedentes hereditarios o familiares de diabetes. Un individuo que pese menos de 80 kilos se le da oralmente 50 mg. de cortisona ocho horas antes, y otro tanto dos horas antes de la ingestin de glucosa. Si el peso excede de 80 kilos la dosis de cortisona es de 65 mg. (Estas dosis pueden ser reemplazadas por cantidades equivalentes de prednisona: 10 12,50 mg.) Corticoides Un valor de 140 mg% de la glucemia a las dos horas de la ingestin de glucosa es considerado como lmite normal. Por debajo de esa cifra la respuesta es negativa y por arriba es positiva. Los corticosteroides estn implicados en una variedad de mecanismos fisiolgicos, incluyendo aquellos que regulan la inflamacin, el sistema inmunitario, el metabolismo de hidratos de carbono, el catabolismo de protenas, los niveles electrolticos en plasma y, por ltimo, los que caracterizan la respuesta frente al estrs.

5.

PRUEBA DE GLUCOSURIA PROVOCADA CON CORTICOIDES: Al paciente se da 20 mg. de prednisona, a las 12, a las 16 y a las 20 horas. La ltima ingestin de alimentos se hace a la hora 18. Se recoge la orina desde la hora 22 hasta la hora 6 del da siguiente. Se considera como anormal la eliminacin de ms de 60 mg. por hora de glucosa. Es til en los casos en que se sospecha una diabetes latente, siempre que no exista un descenso del umbral renal para la glucosa. (Umbral renal hace referencia al punto en el cual el rin deja escapar glucosa

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hacia la orina. En el humano el umbral renal para glucosa est en alrededor de 180 mg/dL. Esto significa que por encima de este valor empieza a aparecer glucosa en la orina. En cuanto a la reabsorcin de la glucosa decir que toda la glucosa filtrada se reabsorbe en el tbulo proximal y se devuelve a la circulacin sangunea. Cuando la concentracin en sangre supera los 180 mg/dl, la reabsorcin se impide y la glucosa aparece en la orina.

6.

PRUEBA CON TOLBUTAMIDA INTRAVENOSA: (Tratar la diabetes II, disminuye el azcar en la sangre al estimular la secrecin de insulina por el pncreas y ayudar a que el cuerpo la use en forma eficiente). La inyeccin intravenosa de 1 g. de tolbutamida sdica diluida al 10%. En los sujetos normales dicha inyeccin hace descender la glucemia a los 20 minutos a cifras inferiores al 75%; de la glucemia inicial. En individuos con diabetes clnica o latente el descenso de la glucemia es poco marcado y no sobrepasa el porcentaje indicado. Esta prueba traducira la respuesta pancretica frente a un estmulo insulingeno. PRUEBA UTILIZANDO DOS DOSIS DE GLUCOSA: Se dosifica la glucemia: primero en ayunas, dando luego 50 g. de glucosa; a los 30 minutos se hace la segunda glucemia y se da la otra dosis de 50 g.; se realiza la tercera glucemia a los 60 minutos de la primera. Normal: a) Glucemia en ayunas: normal. b) Elevacin mxima que no exceda de 75 mg. La cifra inicial, a los 30 minutos. c) A los 60 minutos, la glucemia debe ser menor, igual, o no exceder de 5 mg. a la obtenida a los 30 minutos. d) No hay glucosuria durante la prueba. Diabtica: a) Glucemia en ayunas: normal 0, ms comnmente, mayor que lo normal. b) Elevacin mxima que excede en 75 mg. la cifra inicial a los 30 minutos. c) A los 60 minutos, la glucemia es mayor de 10 mg. a la obtenida a los 30 minutos. d) Si existe glucosuria ella est en relacin con la intensidad de la diabetes.

7.

8.

PRUEBA DE TOLERANCIA UTILIZANDO UNA DOSIS NICA ORAL DE GLUCOSA: Se suministra glucosa por la boca, la absorcin desde el tracto gastrointestinal hacia la sangre contina durante un lapso variable, que depende de la cantidad de glucosa suministrada. La mxima absorcin de glucosa se estima en 0,8 g/kg de peso por hora. La tolerancia a la glucosa suministrada por va oral, mide el balance entre la velocidad de pasaje de la glucosa al fluido extracelular y su separacin por la asimilacin celular y la excrecin urinaria, si la hubiere. Por tanto, la prueba puede influirse no slo por aquellos factores vinculados con la utilizacin de la glucosa, sino tambin por los que influyen en su absorcin. La insulina segregada por el azcar glucosa, necesaria qumicas. En una persona aumento de la glucosa en DIABETES: pncreas controla la concentracin en sangre del como combustible en numerosas reacciones sana, la digestin del alimento (1) induce el sangre (2). El pncreas libera insulina (3), que

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estimula la absorcin de glucosa por parte de las clulas. Tambin contribuye a transformar la glucosa en glucgeno, que se almacena en el hgado (4) y los msculos como reserva energtica. Las hormonas regulan la liberacin de insulina estimulando la disminucin de la concentracin de azcar en sangre (5), lo que a su vez frena la secrecin pancretica (6). En una persona con diabetes mellitus, el pncreas no produce insulina suficiente o el organismo no es capaz de utilizarla. Despus de la digestin (A), si el pncreas no segrega suficiente insulina (B), el organismo se ve obligado a descomponer las grasas, pues no puede utilizar la glucosa para obtener energa. Como consecuencia, se eliminan con la orina unos compuestos txicos llamados cetonas (D), que tambin se acumulan en la sangre (E) y provocan acidosis cetnica, un cuadro grave que puede degenerar en coma o muerte. Si el organismo no es capaz de utilizar la insulina, la glucosa se acumula fuera de las clulas y circula sin ser absorbida. Las concentraciones elevadas de este azcar en sangre (C) y orina (D) deterioran la capacidad del organismo para combatir las infecciones y pueden provocar tambin acidosis cetnica. PODER REDUCTOR DE LA GLUCOSA.- HAY DOS MTODOS:

Reactivos de Benedict y Fehling: Reduccin del cobre, En ambos casos, los reactivos actan utilizando el poder reductor de la glucosa, que se oxida a cido glucnico. En el caso del reactivo de Benedict, el ion cprico se reduce a cuproso formndose Cu20 de color rojo ladrillo. Por otro lado, el Fehling se basa en la reduccin de Ag+ a plata metlica formndose un espejo de plata en el tubo de ensayo. Ortoluidina. Este se basa en una condensacin de azcares reductores con ortoluidina y realizar una medida espectrofotomtrica. Estos mtodos estn en desuso por las interferencias y la toxicidad de los reactivos.

Mtodos enzimticos.- Tambin hay dos:

Hexoquinasa. La glucosa reacciona con el reactivo enzimtico que contiene una mezcla de las enzimas Hexoquinasa (HK) y Glucosa-6Fosfato_Deshidrogenasa. En la primera etapa la Glucosa reacciona con el ATP para formar Glucosa-6-Fosfato y ADP. En presencia de NAD, la enzima Glucosa-6-Fosfato_Deshidrogensa oxida la glucosa-6-Fosfato a 6Fosfogluconato, aumentando la concentracin de NADH en cantidad proporcional a la cantidad de Glucosa presente en la muestra. Glucosa oxidasa. La glucosa reaaciona con el mtodo enzimtico que contiene una mezcla de las enzimas Glucosa Oxidasa (GOD) y Peroxidasa (POD). En la primera etapa la glucosa es oxidada a cido Glucnico con la accin de la enzima Glucosa oxidasa, liberndose como producto H 2O2, el cual en una reaccin mediada por la enzima peroxidasa (POD) reacciona con el cido P-Hidroxibenzoico y 4-aminoantipirina producindose un compuesto coloreado con un mximo de absorcin a 505 nm, en cantidad proporcional a la cantidad de Glucosa presente en la muestra. NAD: (Nicotinamida Adenn Dinucletido) Coenzima que contiene la vitamina B3 y cuya funcin principal es el intercambio de electrones e

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hidrogeniones en la produccin de energa de todas las clulas. (Agente Oxidante).

NADH: (Nicotinamida Adenn Dinucletido reducido) Forma reducida del NAD+, ya que posee dos electrones (y un protn) ms. Acta como transportador de 2e- y 1H+, para acabar cedindolos. (Cofactor) (agente importante. NADP+: (Nicotinamida Adenn Dinucletido Fosfato) siendo la NADPH su forma reducida; su mecanismo de accin es similar al descrito para el NAD+ ADP: (Adenosn Difosfato) HEMOGLOBINA

Es una heteroprotena de la sangre, de peso molecular 68.000 (68 kD), de color rojo caracterstico, que transporta el oxgeno desde los rganos respiratorios hasta los tejidos, en mamferos, ovparos y otros animales. Lo forman cuatro cadenas polipeptdicas (globinas) a cada una de las cuales se une un grupo hemo, cuyo tomo de hierro es capaz de unirse de forma reversible al oxgeno. El grupo hemo se forma por:

1. 2. 3.

Unin de la Succinil CoA (formado en ciclo de krebs o ciclo del acido ctrico) a un aminocido glicina formando un grupo pirrol. Cuatro grupos pirrol se unen formando la Protoporfirina IX. La protoporfirina IX se une a una molcula de hierro ferroso (Fe2+) formando el grupo hemo.

Las hemoglobinas derivadas que normalmente circulan en sangre son: DEOXIHEMOGLOBINA (HHb): Cuando pierde el oxgeno, se denomina hemoglobina reducida, y presenta el color rojo oscuro o bord de la sangre venosa (se manifiesta clnicamente por cianosis). OXIHEMOGLOBINA (O2 Hb): Unida al oxigeno (hemoglobina oxigenada dando el aspecto rojo o escarlata intenso caracterstico de la sangre arterial). CARBOXIHEMOGLOBINA (COHb): Hemoglobina resultante de la unin con el CO. Es letal en grandes concentraciones (40%). El CO presenta una afinidad 200 veces mayor que el Oxgeno por la Hb desplazndolo a este fcilmente produciendo hipoxia tisular, pero con una coloracin cutnea normal (produce coloracin sangunea fuertemente roja) (Hb+CO). HEMIGLOBINA O METAHEMOGLOBINA (metHb). La meta Hb es la forma oxidada e inactiva de la hemoglobina, por lo cual no tiene capacidad para transportar O2. Concentraciones de meta Hb mayores de 10-15% de la hemoglobina total pueden provocar cianosis. Las elevaciones de meta Hb provocan disnea, cianosis y jaqueca y pueden ser letales.

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Durante el embarazo la Hb disminuye entre 2-3 g/dl debido a un aumento desproporcionado del volumen plasmtico en relacin con la masa celular de hemates. SIGNIFICACIN CLNICA

El cuadro ms comnmente relacionado con la disminucin de hemoglobina srica es la anemia, que en la mayora de los casos ocurre como signo o complicacin de otra enfermedad, a veces no relacionada directamente con trastornos en el sistema sanguneo. Existen situaciones en las que, por el contrario, la concentracin de hemoglobina se encuentra anormalmente elevada debido a una superproduccin de glbulos rojos. La nica condicin natural y fisiolgica que afecta los niveles de hemoglobina es la altitud, puesto que frente a bajas presiones de oxgeno atmosfrico se produce una compensacin mediante el incremento en el nmero de glbulos rojos y, por ende, en la concentracin de hemoglobina circulante. Generalmente un aumento de los valores de hemoglobina por encima de los normales es tan solo aparente. Suele ser debido a un aumento del nmero de hemates, por ejemplo en la adaptacin a un cambio de altitud, o bien en los casos en que la sangre sufre una concentracin por prdida de lquido plasmtico (por ejemplo, al sufrir el clera). Un descenso en los valores de hemoglobina por debajo de los normales es, sin embargo, muy comn y un sntoma caracterstico de las anemias, hemorragias repetidas y leucemia. VARIABLES PREANALTICAS:

Aumentado: Bilirrubina, fumadores. Altura.

lipemia,

andrgenos,

eritropoyetina,

estrs,

Disminuido: Alcoholismo, embarazo, tratamiento con factor de necrosis tumoral alfa. VARIABLES POR ENFERMEDAD:

Aumentado: Clera, mononucleosis infecciosa, policitemia vera, sinusitis, EPOC, asma, deficiencia de alfa 1-antitripsina. Fibroqustica. Disminuido: Fiebre tiroidea, malnutricin, amebiasis, tuberculosis pulmonar, lepra, difteria, septicemia, sepsis, actinomicosis, SIDA, Herpes zoster, citomegalovirus, tripanosomiasis, leptospirosis, aspergilosis, anquilostomiasis, tricuriasis, toxoplasmosis, mieloma mltiple, leucemia linfoctica crnica, leucemia mieloctica crnica, leucemia mieloctica aguda, leucemia mielgena crnica, eritroleucemia, hiper/hipotiroidismo. Cncer gstrico, de intestino delgado, colon, recto, hgado y pncreas; deficiencia de vitamina C, enfermedad de Gaucher, enfermedad de cadenas pesadas, macroglobulinemia de Waldenstrm, porfiria, histiocitosis X, agammaglobulinemia, anemias, talasemias, hemoglobinopatas, endocarditis, bronquiectasia, enfermedad pulmonar obstructiva crnica, lcera pptica, gastritis, enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, cirrosis, malabsorcin, glomerulonefritis, lupus eritematoso sistmico, enfermedad mixta del tejido conectivo, artritis reumatoidea activa, eritroblastosis fetal. VARIABLES POR DROGAS:

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Aumentado: Aminopirina, aspirina, cobre, glicerina, nitrofurantona (los anteriores ocurren con hemlisis), fumadores. Disminuido: Acetamilida, anfetaminas, anilina, aspirina, barbituratos, clorotiacida, corticosteroides, dinitrofenol, dipirona, glucosulfona, isoniazida, plomo, inhibidores de MAO, metotrexate, metildopa, novobiocina, prilocana, tio-ridozina, tiosemicarbazonas. FUNDAMENTO La hemoglobina (Hb) presente en la muestra, en presencia de ferricianuro, se oxida a hemiglobina (Hi, tambin llamada metahemoglobina) que, a su vez, se combina con iones cianuro a pH 7,2 convirtindose en cianuro de hemiglobina (HiCN o cianmetahemoglobina). Todos los hemocromgenos, a excepcin de la sulfohemoglobina, reaccionan completamente en 3 minutos y la lectura se efecta a 540 nm. BIBLIOGRAFA

ABSORBANCIA: Logaritmo de la relacin entre la intensidad de una radiacin antes y despus de atravesar un medio absorbente. Donde es la intensidad de la luz con una longitud de onda especfica y que es pasada por una muestra (intensidad de la luz transmitida) y es la intensidad de la luz antes que entre a la muestra (intensidad de la luz incidente) ANALITO: Es el componente (elemento, compuesto o ion) de inters analtico de una muestra. La informacin analtica: Cualitativa (Est presente o no en una determinada concentracin en la muestra), Cuantitativa (La proporcin en la que se encuentra) y estructural.

ANLISIS CUALITATIVO. Conjunto de procedimientos que buscan identificar el tipo de componentes presentes en una muestra de materia. ste no determina cantidades. ANLISIS CUANTITATIVO. Conjunto de procedimientos para determinar la cantidad relativa de un componente en una muestra de materia. Por ejemplo, estimar el porcentaje de Cu en un mineral. ANLISIS: Es un proceso que proporciona informacin fsica o qumica sobre los constituyentes de un espcimen. Los anlisis son Cualitativos: (se identifica la presencia de una sustancia en un espcimen) Cuantitativos: (se determina la cantidad de una sustancia dada en un espcimen).

ANTICOAGULANTES: Son aditivos que inhiben la coagulacin de la sangre y/o plasma, asegurando que los componentes que sern medidos no sufran un cambio significativo previamente al proceso analtico. La anticoagulacin se lleva a cabo ligando iones de Calcio (EDTA, citrato) o inhibiendo la actividad de la trombina (heparinas, hirudina). Los siguientes anticoagulantes slidos o lquidos se mezclan con la sangre inmediatamente despus de la recoleccin de la muestra. Cdigos de color de los anticoagulantes: Los cdigos de color de los anticoagulantes actualmente no se utilizan de forma uniforme. Los descritos originalmente en ISO/DIS 6710 (86) siguen siendo materia de debate. Los cdigos usados por la mayora de los fabricantes son: EDTA = Lavanda/Rojo; Morado. Citrato 9 + 1 = Azul claro/Verde; Citrato 4 + 1 = Negro/Malva;

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Heparina = Verde/Naranja; Sin aditivos (Para Suero) = Rojo/Blanco.

EDTA. Solucin de sales sdicas y potsicas del cido etilendiaminotetractico, en una concentracin 0.342 mol/l, pH=7.20. Este anticoagulante inhibe la participacin del in calcio en la coagulacin de la sangre, ya que a este pH tiene una accin complejante muy potente. Su frmula qumica es C10H16N2O8.

ALCUOTA: Porcin de la muestra de laboratorio sometida a anlisis.

APARATO: Equipo sin la capacidad de realizar mediciones, destinado a ejecutar funciones como calentar, agitar, evaporar. Conjunto de piezas organizadas de tal forma que cumplan con una funcin especfica.

BAO MARA. Consiste en calentar un objeto o sistema con el empleo de agua como medio de calentamiento. Se cree que lo ide una alquimista llamada Mara. CENTRIFUGA. Somete la muestra a fuerzas de aceleracin que obligan a las molculas a concentrarse en el fondo del envase utilizado, separndolas del medio en que se encuentran. Incluso, bajo ciertos mtodos se puede generar un gradiente de concentraciones dentro del mismo tubo, separando distintas molculas a distintos niveles o fases dentro del tubo. EL LABORATORIO CLNICO: Es el lugar donde se realizan anlisis clnicos que contribuyen al estudio, prevencin, diagnstico y tratamiento de los problemas de salud de los pacientes. Tambin se le conoce como laboratorio de patologa clnica. 1) Descubrir enfermedades en etapas subclnicas 2) Establecer un diagnstico basado en una sospecha bien definida. 3) Obtener informacin sobre el pronstico de una enfermedad. 4) Precisar factores de riesgo. 5) Ratificar un diagnostico sospechado clnicamente. 6) Vigilar un tratamiento o conocer una determinada respuesta teraputica.

EQUIPOS: Contempla aparatos e instrumentos. Material, dispositivo, aparato, instrumento, patrn y material de referencia utilizado en la realizacin de las medidas necesarias para llevar a cabo un ensayo o una calibracin. Material de vidrio, espectrofotmetro, software y hardware.

ESPECTRO. Rango de energa electromagntica organizado en orden creciente o decreciente de longitud de onda o frecuencia. ESPECTROFOTMETRO. Instrumento que tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromtica (de un largo de onda particular) a travs de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra.

ESTNDAR PRIMARIO. Solucin cuya concentracin se conoce con un alto grado de exactitud y se prepara al disolver un peso exacto del soluto puro hasta un volumen exacto. ESTANDAR: Es una preparacin que contiene una concentracin conocida de un elemento especfico o sustancia. Un estndar simple ser la dilucin del elemento o substancia en un disolvente neutro.

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La sustancia o material en el que uno o ms valores de sus propiedades son suficientemente homogneos y se encuentran suficientemente bien definidos para permitir emplearlo en la calibracin de un instrumento, en la evaluacin de un mtodo de medida o en la atribucin de valores a materiales. Material empleado como referencia para calibrar equipos de medida o contrastar la exactitud (trazabilidad) de las medidas.

ESTANDARIZACIN. Determinacin de la concentracin de una solucin mediante la utilizacin, directa o indirecta, de un patrn o estndar primario. FACTOR: Cada uno de los elementos que contribuyen a producir un resultado determinado, o cada una de las sustancias que tienen una accin fisiolgica especfica. Variable que maneja el investigador para medir cualquier efecto sobre otra variable. En el anlisis conjunto, las variables predictoras (factores) son no mtricas. Los factores deben representarse por dos o ms valores (tambin conocidos como niveles). INSTRUMENTOS: Son especficamente diseadas y fabricadas para cumplir uno o ms propsitos. Tienen una funcin tcnica. Herramientas (En conjunto son material de laboratorio) Equipo destinado a la realizacin de medidas, que opera solo o asociado a equipos anexos. Caracterstica: capacidad de hacer medidas y generar informacin. Termmetro, balanza, espectrofotmetro.

LA CALIBRACIN: Se define como una serie de operaciones que establece bajo condiciones definidas la relacin entre los valores obtenidos con un instrumento o proceso de medida o de materiales de referencia y sus correspondientes valores obtenidos con patrones.

LEY BEER-LAMBERT: A mayor cantidad de molculas presentes en la muestra, mayor ser la cantidad de energa absorbida por sus electrones. LONGITUD DE ONDA. Propiedad caracterstica de la luz, similar a su color, y equivalente a la longitud de la onda completa entre cresta y cresta consecutivas. Se expresa en nm o en . Es la distancia entre los picos de onda. La distancia existente entre dos crestas o valles consecutivos es lo que llamamos longitud de onda. Las ondas de agua en el ocano, las ondas de aire, y las ondas de radiacin electromagntica tienen longitudes de ondas.

MATERIALES: Son elementos agrupados en un conjunto el cual es, o puede ser, usado con algn fin especifico. MATERIAL INVENTARIABLE: Los aparatos y dispositivos de los que se lleva un registro. MATERIAL NO INVENTARIABLE: Es el de uso habitual. MATERIAL DE VIDRIO: Borosilicato.

MEDIDA: Es la determinacin experimental de las propiedades fsicas o qumicas de una sustancia. MTODO ENZIMATICO: Permite que la reaccin enzimtica se complete o llegue al equilibrio y se mide la variacin producida en la concentracin de un producto de reaccin o de un reactivo presente inicialmente en exceso. Se determina especficamente cada una de las sustancias de una mezcla sin necesidad de separar. o Las enzimas actan facilitando un mecanismo de reaccin ms sencillo.

o
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Actan sobre los mismos reactivos, originan alcanzan el mismo punto de equilibrio.
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los mismos productos y

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Incrementan la velocidad de reaccin rebajando la barrera correspondiente a la energa de activacin

MTODO CINTICO: Se utilizan medidas de la velocidad inicial de la reaccin enzimtica para deducir la concentracin inicial de sustrato. Los procedimientos de medida son idnticos a los utilizados para reacciones catalticas en general. Se mide la velocidad de desaparicin del sustrato o de generacin del producto, relacionada con la concentracin de enzima en disolucin. o No requieren blancos de referencia. o Consumen menos enzima. o Son ms sensibles. o Son ms rpidos. o Presentan menos interferencias matriciales (color, turbidez de muestra...) o Requieren ms rigor en las condiciones experimentales.

MTODO: Es la aplicacin de una tcnica para determinar una sustancia especifica en una determinada matriz. (Colesterol suero Mtodo espectroscpico de punto final; Catecolaminas en la orina cromatografa). MICROPIPETA. Son extremadamente tiles en los laboratorios de biotecnologa. Estas permiten medir con precisin volmenes tan pequeos como 0.1 l hasta 1 ml. MUESTRA BASAL: Se refiere a un estado estndar o de referencia de una funcin, como base de comparacin. Dcese del nivel de actividad de una funcin orgnica durante el reposo y el ayuno.

NANOMETROS: Unidad de longitud que equivale a una milmillonsima parte de un metro. (Nanotecnologia) Esto es: 1 nanometro = 0,000000001 metros. Es decir, un nanmetro es la mil millonsima parte de un metro, o millonsima parte de un milmetro. 1 nm = 1x10-9 m.

ONDA. Forma de propagacin de la energa a travs del espacio. La luz se propaga en forma de ondas electromagnticas de longitud de onda y frecuencia caracterstica. o Milmetro: 1 mm = 1 000 000 nm o Micrometro: 1 m = 1000 nm o Angstrom: 1 = 1/10 nm o Picmetro: 1 pm = 1/1000 nm

PIPETA VOLUMTRICA: Se utilizan para medir exactamente un volumen nico y fijo. Estas pipetas vienen para volmenes desde 0.5 ml hasta 200 ml. PIPETAS GRADUADAS. Estn calibradas en unidades adecuadas para permitir el vertido de cualquier volumen inferior al de su capacidad mxima. Los volmenes oscilan entre 0.1 y 25 ml. Se utiliza para medir pequeos volmenes de lquidos. PIPETA GRADUADA SEROLOGICA O TERMINALES: Se utiliza para verter un volumen cualquiera de lquido hasta su capacidad mxima. Las pipetas terminales o serolgicas comienza la graduacin desde la punta.

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PIPETA GRADUADA DE MORH O NO TERMINALES: Se utiliza para verter un volumen cualquiera de lquido hasta su capacidad mxima. Dejan espacios sin graduar. PROCEDIMIENTO: Es un conjunto escrito de instrucciones que detalla la aplicacin de un mtodo. PROPIPETA. Para expeler el aire presione la vlvula A sobre la parte superior del bulbo. Succione el lquido hacia arriba presionando la vlvula S ubicada en la parte inferior. Para descargar presione la vlvula E que se encuentra al costado de la vlvula S Las tres vlvulas posen bolillas de vidrio que controlan el vaco para un preciso trabajo de llenado y vaciado de las pipetas. El pequeo bulbo en la parte inferior se utiliza para expulsar la ltima gota. Dispositivo de jebe que se utiliza junto con la pipeta para trasvasar lquidos de un recipiente a otro. Evitar succionar con la boca lquidos. Pera de goma de 3 vas o Bulbo de succin. PROTOCOLO: Es un conjunto de instrucciones escritas estrictas que concretan el procedimiento que debe seguirse.

REACTIVO LMITE. Reactivo presente en la mnima cantidad estequiomtrica. Determina la mxima cantidad de productos formados durante la reaccin. REACTIVO. Sustancia que se transforma en otras nuevas descomponerse o combinarse qumicamente. Vase: reactivo lmite. al

REVOLUCIONES POR MINUTO: Unidad de medida para la frecuencia, determina el nmero de vueltas o rotaciones completas que hace un sistema cada minuto. SOLUCIN PATRN. Solucin de concentracin exactamente conocida que se usa en un proceso de valoracin para determinar la concentracin de otra. SOLUCIN REGULADORA. Solucin que tiene la propiedad de mantener su pH ms o menos constante cuando se le adicionan cantidades moderadas de cidos o bases fuertes, o cuando se diluye. SOLUCIN. Mezcla homognea de dos o ms componentes. Cuando slo est formada por dos componentes (un soluto y un solvente) se denomina solucin binaria. SOLUTO. Componentes de una solucin que de manera arbitraria se considera presentes en ella en menor cantidad. Vase: solvente, solucin. SOLVENTE. Componente de una solucin que de manera arbitraria se considera presente en ella en mayor cantidad. En soluciones acuosas el solvente es el agua. TECNICA: Es cualquier principio fsico o qumico que puede utilizarse para estudiar una sustancia. (espectroscpicas, electroqumicas, cromatogrficas, electroforticas, las microscpicas, y las de centrifugacin). TECNICA ESPECTROSCPICAS: Miden la absorcin y la emisin de radiaciones electromagnticas por las molculas y los tomos. TRAMITANCIA: Cantidad de luz que atraviesa la mezcla. Es la fraccin de luz incidente que es transmitida (dejada pasar) a travs de una muestra en solucin. As, T = I/Io, donde Io es igual a la intensidad de luz
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que llega a la muestra, I es la intensidad de luz que logra atravesar la muestra. La transmitancia es frecuentemente expresada como porcentaje: %T = (I/Io) x 100 ESPECTROFOTOMETRA.

PRINCIPIOS BSICOS: A diferencia de las pruebas realizadas anteriormente, la reaccin de Biuret es cuantificable, es decir, a mayor concentracin de protenas, mayor intensidad de color violeta. Esta reacciones, en las que el color formado es proporcional a la cantidad de sustancia se llaman reacciones colorimtricas. Midiendo la intensidad de color se podra conocer la concentracin de la sustancia que lo produce. Para ello se aplican tcnicas fotomtricas, empleando un aparato llamado colormetro (si mide slo un determinado color) o espectrofotmetro (si realiza una medida de todo el espectro de colores). La luz es parte de la radiacin electromagntica, que se propaga de forma ondulatoria. Las distintas radiaciones luminosas (los distintos colores) se diferencian unas de otras por sus longitudes de onda (l) (distancia entre la cresta de una onda y la siguiente), que se mide en nm. La luz visible engloba las radiaciones comprendidas entre 380-750 nm, que corresponden a los colores del arco-iris, de tal forma que cada color corresponde a una radiacin con una l especfica. El espectrofotmetro dispone de una lmpara que emite luz monocromtica, de una longitud de onda determinada, que incide y atraviesa la muestra coloreada a medir, y de un detector, que medir la cantidad de luz que no es absorbida por la muestra. Para cada sustancia determinada, se utilizar la radiacin de longitud de onda a la que absorba ms cantidad de luz. Su funcionamiento de basa en la ley de Beer-Lambert: la fraccin de luz incidente que es absorbida por una solucin es proporcional a la concentracin de soluto y al espesor de la sustancia atravesada por la luz. La relacin entre la luz incidente (I0) y la reflejada (I) dar una idea de la cantidad de radiacin que ha sido absorbida por la muestra. Es lo que se denomina Absorbancia (Abs) o Densidad ptica (DO)

EL CONTROL DE CALIDAD DEL LABORATORIO implica todo un conjunto de medidas encaminadas a lograr una adecuada confiabilidad de los resultados de laboratorio y tiene como propsito garantizar que los resultados obtenidos sean acordes al estado de salud del paciente. El control de calidad es, por tanto, el mtodo mediante el cual se mide la calidad real, compararla con los estndares y actuar sobre la diferencia. Tiene dos objetivos fundamentales: mantener bajo control el proceso y eliminar las causas de errores. La calidad se obtiene y se mejora a lo largo de todo el proceso por lo que el control de calidad debe ejercerse en las tres fases del proceso: la fase pre-analtica, analtica y post-analtica. La mayora de las tcnicas analticas cuantitativas implican diversas operaciones que estn sujetas a cierto grado de imprecisin y cierta posibilidad de error. El objetivo del control de calidad radica en asegurar que los productos finales, es decir los valores analticos que son producidos por un laboratorio clnico, sean suficientemente fiables y adecuados a la finalidad que persiguen. Este objetivo se cumple a medida que todo el personal del laboratorio sea consciente de las causas de las imprecisiones analticas y de las tcnicas disponibles para su deteccin, correccin y control.

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BILIRRUBINA La Bilirrubina es una combinacin de componentes que han sido clasificados de acuerdo a su reactividad. De tiempo atrs, la bilirrubina conjugada se ha denominado como fraccin directa de la bilirrubina y la bilirrubina no conjugada como fraccin indirecta. Sin embargo, estudios realizados mediante cromatografa lquida de alta presin (HPLC) han demostrado la existencia de otra fraccin unida covalentemente a la albmina srica, que no fue hallada en la bilis y ha sido denominada Bilirrubina DELTA. Esta nueva fraccin que reacciona directamente, representa un importante hallazgo en pacientes con colestasis y alteraciones hepatobiliares. Adems, por virtud de su fuerte enlace a la albmina, la aclaracin de esta bilirrubina desde el suero se aproxima a la vida media de la albmina: 12-14 das en lugar de la corta vida de la bilirrubina que es de 4 horas. Esto explica por qu en fase de recuperacin los pacientes no exhiben hiperbililirrubinuria o sus bilirrubinas elevadas en plasma bajan ms lentamente. Se ha desarrollado una nueva tcnica de qumica seca en la que se determinan todas las fracciones. En nuestro afn de poder prestar un mejor apoyo en las decisiones mdicas, tenemos disponible en estos momentos esta prueba, la cual permite diferenciar la bilirrubina no conjugada, la conjugada y la DELTA: Mientras que en las reacciones con la prueba Diazo estas dos ltimas eran reportadas como una sola dentro de la denominada bilirrubina DIRECTA. Esto trae ventajas en el manejo de los pacientes teniendo en cuenta que en los individuos normales casi el 100% de la bilirrubina del suero es NO conjugada y menos del 3% de la bilirrubina es conjugada (mono o diconjugada) y bilirrubina DELTA. Por lo tanto cualquier alteracin de una de las fracciones podr orientar mejor el diagnstico mdico. En adelante en el reporte de resultados se tendr en cuenta lo siguiente: Bilirrubina total Valor Normal 0.2 1.3 mg/dl

Bilirrubina indirecta Valor normal 0.0 - 1.1 mg/dl Bilirrubina conjugada Valor normal 0.0 - 0.3 mg/dl Bilirrubina delta Valor normal 0.0 - 0.2 mg/dl

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