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ESTRUCTURA DNA
Base nitrogenada
Purinas
A_G
Pirimidinas
C_T
Confirmacin de la molcula portadora de la informacin gentica Se realiz un estudio en grupo de virus que atacan clulas bacterianas Bacterifagos o Fagos
25 min despus de infectar una bacteria- la cel estallaba y liberaba virus nuevos, copias exactas del original Fcil observacin al microscopio Anlisis qumico de bacterifagos revelo que consisten en DNA y protena ?
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1953. Ao culminante: J. Watson y F. Crick resuelven la estructura tridimensional del DNA (Nature 171: 737738)
Watson y yo hemos encontrado el secreto de la vida
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REPLICACIN DNA
Watson y Crick
Mecanismo de replicacin semiconservativa
La iniciacin
Origen de replicacin (enzimas y protenas iniciadoras) Cadena molde Secuencia de inicio para la nueva cadena (cebadorprimer), formada por nucletidos RNA
En la cadena simple del DNA abierto, la sntesis del cebador de RNA es catalizada por la enzima RNA primasa. Sin cebador la DNA polimerasa no acta.
Helicasa separa las cadenas y forma una estructura conocida horquilla de replicacin DNA polimerasa III sintetiza las nuevas cadenas complementarias Replicacin ocurre en direcciones opuestas desde un nico origen Replicacin Semiconservativa Comienza en uno o varios sitios Es bidireccional
Okazaki Cadena adelantada nico cebador en nico sitio Cadena rezagada Requiere mltiples cebadores, dispuestos a intervalos DNA polimerasa III alarga cebadores Fragmentos de RNA hebra rezagada son degradados y reemplazados por DNA (DNA polimerasa I) DNA ligasa une todos los fragmentos.
TELOMEROS Y TELOMERASAS
Cromosomas lineales de clulas eucariontes contienen en sus extremos una secuencia fija denominada telmero. En replicacin los extremos de los cromosomas se acortan. El cebador no sustituido por DNA. En seres humanos telomerasa se encuentra activa durante las primeras etapas de desarrollo embrionario y se inactiva cuando se han sintetizado telmeros de suficiente longitud.
CORRECCIN DE ERRORES
Existen mecanismos preciso de copiado del DNA antes de la divisin celular Mecanismos de reparacin de daos accidentales en replicacin
Errores al aadir nucletido incorrecto a la nueva cadena en formacin, un nucletido no complementario a la cadena molde.
DNA polimerasa III comete errores; pero retrocede y elimina nucletidos (3-5 exonucleasa) y luego reanuda el movimiento 5-3 reparacin coduplicativa.
CORRECCIN DE ERRORES
DNA polimerasas II, IV y V participan en reparacin posterior a la duplicacin en respuesta a daos en el DNA. Mecanismo de reparacin por escisin, corrige la formacin de dmeros de timina .
CORRECCIN DE ERRORES
Salvataje o SOS, repara daos estructurales. Luego reparacin la DNA polimerasa III sigue duplicando DNA.
Los enlaces entre los fosfatos aportan la energa que impulsa las reacciones catalizadas por la DNA polimerasa. Cada nucletido ocupa un lugar en la cadena de DNA activa se libera un grupo P, esta energa permite que se den las reacciones controladas por la DNA polimerasa.
PCR Requiere cebadores al inicio y final Thermus acuaticus (Taq) Aplicacin para diferentes anlisis. Cuales son los componentes PCR?
GENERALIDADES
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