Disciplina: MICROBIOLOGIA I Aula: Crescimento Bacteriano

Profa Dra Cristina L S Petrarolha Silva FEA Fundao Educacional de Andradina FISMA-FCCA

1-Consideraes Gerais
Crescimento em bactrias:
Individual populacional

Crescimento um somatrio dos processos metablicos progressivos, que normalmente conduz diviso com concomitante produo de duas clulas-filhas a partir de uma.

http://vsites.unb.br/ib/cel/microbiologia/divisao/divisao.html#fissao

http://vsites.unb.br/ib/cel/microbiologia/divisao/Mitose.jpg

www.youtube.com

Tamanho bacteriano adulto

O que ? Quem o influencia?

Idade bacteriana
O que ?

Termos para crescimento microbiano

Taxa de crescimento (velocidade especfica de crescimento): a variao no nmero ou massa de microrganismos por unidade de tempo. Tempo de gerao: o intervalo de tempo necessrio para que uma clula se duplique. O tempo de gerao varivel para os diferentes
organismos, podendo ser de 10 a 20 minutos at dias, sendo que em muitos dos organismos conhecidos, este varia de 1 a 3 horas. O tempo de gerao no corresponde a um parmetro absoluto, uma vez que dependente de fatores genticos e nutricionais.

IMPORTANTE
Toda bactria tem seu ambiente ideal onde encontra condies timas de crescimento. Uma pop bacteriana um SISTEMA DINMICO, com clulas se dividindo e cluas morrendo o tempo todo.

Tubo direita, meio BHI sem semeadura; tubo esquerda, meio BHI aps crescimento bacteriano. Observar turvao indicativa de multiplicao microbiana
http://www.microbiologia.vet.br/ImagensBacteriologia.htm

Meio com crescimento bacteriano apresentando sedimento (deposio de bactrias).

2- Mtodos de medida
Desenvolvimento da cultura bacteriana:
Aumento da quantidade de protoplasma Aumento do nmero de microorganismos

2.1- Mtodos para estimar 2.1massa ou aumento de protoplasma DIRETOS

Centrifugao Peso Seco

INDIRETOS
Nitrognio Colorimetria ou espectrofotometria Consumo de Metablito ou Acmulo de produto do metabolismo Turbidimetria

Turbidmetro
Leitura em 660nm Curva padro No destrutiva No diferencia cls viveis das cls mortas

Colormetro

2.2- Mtodos para estimar o 2.2nmero de microorganismos

DIRETOS
Contadores de partculas Cmaras de contagem Esfregaos corados

INDIRETOS (clulas viveis)

Diluio Seriada ou do nmero mais provvel (NMP) Plaqueamento em Meio Slido (UFC)

Contagem direta
Cmara de Neubauer

Contagem indireta

http://mednt.jp/dilution%2Btechnique

Contagem Indireta
Tcnica da Diluio Seriada

http://bervieira.sites.uol.com.br/dilui.htm

Contagem em placas:

Contagem em placas: Tcnica Pour Plate

http://www.practicalbiology.org/areas/advanced/health-and-disease/hygiene/making-a-pourplate,98,EXP.html

http://biology.clc.uc.edu/fan khauser/Labs/Microbiology /Meat_Milk/Pour_Plate.htm

Tcnica da membrana filtrante

Tcnica nmero mais provvel

http://laboratoriodemicrobiologiadeali mentos.blogspot.com/

3- Curva de Crescimento
Utilizar apenas CULTURA PURA

Representao grfica do aumento do nmero de indivduos em um determinado perodo de tempo

3- Curva de Crescimento
fases de desenvolvimento de uma cultura bacteriana adaptao, desenvolvimento (crescimento), extino de nutrientes e morte Fases: lag, exponencial, estacionria e morte

Curva de Crescimento Sistema Fechado

Fase Lag ou Latente

Perodo de adaptao, intensa atividade metablica Ausncia de diviso Longa: inculo pequeno, cultura velho, meio e T desfavorveis Pode inexistir

Fase logartimica ou exponencial

Diviso mxima Progresso geomtrica de razo 2 Fatores determinantes do crescimento

Fase estacionria
Escassez de nutrientes ou acmulo de metablitos Bactrias crescem muito lentamente ou nmero de mortes igual ao de novas

Fase de declnio ou morte

Morte das bactrias Lento ou exponencial

Curva de Crescimento Sistema Fechado

Curva Diuxia
duas fontes de carbono aps trmino da primeira, inicia-se uma nova curva

Crescimento em culturas contnuas

Estes so respectivamente controlados pela concentrao do nutriente limitante (fonte de C ou N) e pela taxa de fluxo (taxa de diluio). Em baixas concentraes do nutriente limitante, a taxa de crescimento proporcional concentrao do nutriente

Se houvesse:
Suprimento ilimitado de nutrientes + Ambiente inaltervel + Espao ilimitado

Quimiostato

http://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/12crecimiento. htm

Equaes para determinao dos parmetros de crescimento

O tempo de gerao pode ser calculado quando uma cultura encontra-se em fase exponencial, pela frmula abaixo: N=No.2n onde N= nmero final de clulas No= nmero inicial de clulas n= nmero de geraes

n= log(N) - log(No)/0,301 G = t/n

onde
G= tempo de gerao t= tempo de crescimento n= determinado acima.

4- Efeito dos fatores ambientais no Crescimento Bacteriano

4.1-Temperatura

Tipos de Bactrias em Relao a Temperatura

4.2- pH

4.3- Tenso de Oxignio 4.4- gua 4.5- Presso Osmtica