Replicacin del ADN

En este apartado describimos con ms detalle los procesos de replicacin, transcripcin y traduccin, introducidos en el apartado anterior. La transmisin de informacin implica que el ADN es capaz de duplicarse de manera de obtener dos molculas iguales a partir de la molcula inicial. Este proceso se llama replicacin. Luego del descubrimiento de la estructura del ADN, en 1957, dos bilogos moleculares americanos, Matthew Stanley Meselson y Frank Stahl demostraron que este se replica de una manera semiconservativa, es decir que la nueva cadena se sintetiza utilizando una de las hebras preexistentes como molde. Las molculas de ADN hijas estn formadas por una cadena nueva y una original que sirve como molde. Con nitrgeno 15 (un istopo radiactivo), ya que el nitrgeno es necesario para la sntesis de las bases que componen el ADN, y usando sucesivas generaciones de bacterias Escherichia coli, estos cientficos mostraron que cuando el ADN se duplica, cada una de sus cadenas pasa a las clulas hijas sin cambiar y actan de molde o patrn para formar una segunda hebra y completar as las dos doble cadenas. Para que esto ocurra, la clula debe abrir la doble cadena de ADN en una secuencia especfica denominada origen de replicacin(en bacterias) osecuencia de replicacin autnoma (en eucariotas) y copiar cada cadena. En la replicacin participan varias enzimas. Las ADN polimerasas sintetizan una nueva cadena de ADN. Para esto utilizan como molde una de las hebras y un segmento corto de ADN, al que se le agregan los nuevos nucletidos. Este segmento funciona como cebador (primer, en ingls). La ADN polimerasa agrega nucletidos al extremo 3 de la cadena en crecimiento.

Figura 1. Replicacin del ADN. La enzima ADN polimerasa sintetiza una nueva hebra de ADN agregando un nucletido al extremo 3 (en el cual hay un OH). La ADN polimerasa copia la cadena molde con alta fidelidad. Sin embargo, introduce en promedio un error cada 107 nucletidos incorporados. Tiene, adems, la capacidad de corregir sus propios errores, ya que puede degradar ADN que acaba de sintetizar. Otras enzimas que participan en este proceso son: la ADN primasa (que sintetiza el primer de ARN), la ADN ligasa (que une extremos 5 con 3 que hayan quedado luego de la sntesis), la ADN helicasa y las ADN topoisomerasas ADN (que evitan que el ADN se enrede en el proceso), las rotenas de unin al ADN(facilitan la apertura de la doble hebra).

TranscripcinUna vez que se conforman las dos cadenas nuevas de ADN, lo que sigue es pasar la
informacin contenida en estas cadenas a una cadena de ARN, proceso que se conoce como transcripcin. Aqu la enzima responsable es la ARN polimerasa, la cual se une a una secuencia especfica en el ADN denominada promotor y sintetiza ARN a partir de ADN. En la transcripcin, la informacin codificada en un polmero formado por la combinacin de 4 nucletidos (ADN) se convierte en otro polmero cuyas unidades tambin son 4 nucletidos (ARN). El cido ribonucleico es similar al ADN (por eso el proceso se denomina transcripcin), pero poseen algunas diferencias, como mostramos en la figura 2.

Figura 2. Diferencias entre el ADN y el ARN. Ambos polmeros de nuclotidos estn formados por un cdigo de 4 bases nitrogenadas. Sin embargo, en la clula el ADN se encuentra como una doble cadena y el ARN generalmente como simple cadena. La similitud en el alfabeto permite la sntesis de un polmero utilizando el otro como molde, en presencia de las enzimas adecuadas. La transcripcin de genes puede dar lugar a ARN mensajero (ARNm, molcula que sirve como molde de la traduccin), ARN ribosomal (ARNr, que forma parte de losribosomas, un complejo compuesto por protenas y ARNr donde se realiza el proceso de traduccin) o ARN de transferencia (ARNt, molculas que funcionan como adaptadores en el proceso de traduccin).

Fenmenos postranscripcin
Si bien estos pasos bsicos son los mismos para la mayora de los organismos, hay diferencias entre los distintos dominios de seres vivos (Bacteria, Arquea y Eucaria) tanto en la replicacin como en la transcripcin y en la traduccin.En organismos procariontes, el ARNm se une a los ribosomas y puede ser traducido tal y como es liberado de la ARN polimerasa, ya que se encuentra en el citoplasma celular y no sufre ninguna modificacin. Incluso, puede ser traducido a medida que es transcripto.En los eucariontes, sin embargo, la traduccin y transcripcin ocurren en forma separada. La transcripcin ocurre en el ncleo y la traduccin, en el citoplasma, puede ocurrir minutos, horas o incluso das ms tarde. Antes de salir del ncleo para ser traducido, el ARNm sufre dos modificaciones, por lo que es llamado pre-ARNm. La primera de ellas es el procesamiento por corte y empalme (splicing, en ingls), en el cual se eliminan algunos secuencias no codificantes (o intrones) y se unen las secuencias codificantes (exones). Una molcula de ARNm puede llegar a tener hasta 70 intrones, que pueden llegar a variar de tamao entre 80 y 10.000 nucletidos. La segunda modificacin ocurre en los extremos: al extremo 5 se le une una caperuza (compuesta por guanina metilada) y al extremo 3 se agrega una cola de poliadenina o poliA(Figura 3). Luego de todas estas modificaciones, tenemos un ARN maduro.

Figura 3. Transcripcin y procesamiento del ARN. En eucariontes, el ADN es transcripto cuando la ARN polimerasa se une al promotor, normalmente situado upstream (ro arriba) del lugar de inicio. Una vez sintetizado, el preARNm sufre ciertas modificaciones: se eliminan los intrones o secuencias no codificantes (splicing), y se agrega una caperuza al extremo 5 y una cola poliadenina al extremo 3.

Traduccin
1. 1. 1. Introduccin Cundo termina la traduccin? Procesos postraduccin

Introduccin
Una vez que el ARNm se encuentra en el citoplasma, es reconocido por el ribosoma mediante secuencias especficas (en bacterias) y por la caperuza (en eucariotas). En el ribosoma se lleva a cabo el proceso de traduccin. En este momento cobra importancia el ARNt, que funciona como adaptador entre aminocidos y ARNm. Cmo reconocen los ARNt qu aminocidos deben colocar para traducir una secuencia determinada? Los ARNt tienen una regin que se une a un aminocido especfico y otra que reconoce un triplete de nucletidos en el ARNm (anticodn). La traduccin comienza cuando el ribosoma reconoce ciertas secuencias en el extremo 5 del ARNm (en bacterias) o la caperuza (en eucariotas) y se mueve a lo largo del mensajero hasta que encuentra el primer codn AUG, que codifica para metionina (o formil-met en bacterias). Este codn funciona como sitio de inicio. A medida que avanza la traduccin, distintos ARNt se van uniendo al codn que le corresponda, se forma el enlace peptdico entre los aminocidos, y por ltimo se libera el ARNt descargado, quedando unido al ribosoma el ltimo ARNt incorporado cargando con la cadena peptdica en crecimiento. La transcripcin ocurre en el ncleo, donde se eliminan los intrones del pre-ARNm y se crea un ARN maduro, que migra al citoplasma. Una vez que este se une a los ribosomas (formados por subunidades de ARNr y protenas) y al ARN de transferencia, comienza el proceso de traduccin.

Cundo termina la traduccin?

Los tres codones que no son reconocidos por ningn ARNt (es decir, que no codifican ningn aminocido) funcionan como seales de terminacin. De esta manera, cuando aparece uno de estos tripletes (UAA, UAG, UGA) la protena recin formada se libera del ribosoma. Es importante destacar que en principio el ribosoma podra leer tres oraciones diferentes, tener tres marcos de lectura (figura 4) en el mismo ARNm, ya que puede comenzar a leer los tripletes en una base, en la base siguiente o en la tercera base. Es decir, un marco de lectura es una secuencia ininterrumpida de tripletes que puede ser diferente de acuerdo con el nuclotido de inicio.

Figura 4. Marcos de lectura. A partir de una misma secuencia de ARN es posible leer tres oraciones diferentes, lo que se traduce en tres protenas diferentes. La secuencia ser completamente diferente e incluso puede variar su longitud si, por ejemplo, aparece un codn de terminacin como en el marco de lectura 3 (codn UAA)

Procesos postraduccin
Una vez traducidas, las protenas deben adoptar una estructura tridimensional adecuada. Esto se logra con la ayuda de otras protenas denominadaschaperonas moleculares. Luego pueden ser modificadas mediante la unin de distintas molculas como azcares, nuclesidos, o fosfatos y dirigidas a lugares especficos de la clula (la membrana celular, el ncleo, etctera) de acuerdo con su funcin.Cuando una protena cumpli su funcin o cuando no se pleg correctamente, es degradada. Las protenas que van a ser degradadas son marcadas por la unin de una protena llamada ubiquitina. Una vez seleccionadas, un complejo multiproteico (el proteosoma), degrada las protenas en aminocidos rompiendo los enlaces peptdicos.

El ADN que constituye el genoma humado puede ser subdividido en pedazos de informacin llamados genes. Cada gen contiene informacin para la produccin de una protena nica la cual realizar una funcin especializada en la clula. El genoma humano contiene ms de 25,000 genes. Cmo usan las clulas la informacin codificada en sus genes? Las clulas realizan un proceso en dos pasos llamados trascripcin y traduccin para leer cada gen y producir la cadena de aminocidos que forman una protena. Este flujo de informacin constituye el Dogma Central de la Biologa, tal como est descrito a continuacin:

Trascripcin El primer paso, llamado trascripcin, implica copiar la secuencia de ADN en la forma de ARN mensajero (ARNm) la cual es una molcula muy similar al ADN. Al igual que el ADN, el ARNm contiene 4 bases nucleotdicas, pero en el ARNm la base uracilo (U) reemplaza a la tiamina (T). El ARNm sigue esencialmente las mismas reglas que el ADN para formar los pares de bases: G forma un par con C y A forma otro par con U. La molcula de ARNm transporta la informacin para hacer una protena desde el ncleo de la clula, donde se encuentra el ADN, hacia el citoplasma, donde se ubica la maquinaria para hacer protenas. Traduccin El segundo paso en la produccin de una protena es llamado traduccin. En el citoplasma, la informacin en el ARNm es traducida por la maquinaria celular productora de protenas, llamada ribosoma, la cual ensambla las protenas. Los ribosomas usan Cdigo Gentico Universal (el cual se muestra debajo) para determinar la secuencia de aminocidos codificada por el ARNm. Solamente la informacin contenida entre las seales de inicio (AUG) y terminacin (UAA, UAG o UGA) de una molcula de ARNm es usada para producir una secuencia de aminocidos. Despus de la seal de inicio (AUG), el ribosoma lee tres nucletidos a la vez. Cada grupo de tres nucletidos, o codn, especifica un aminocido en particular.