UNIVERSITE DE YAOUNDE 1 FACULTE DE MEDECINE ET DES SCIENCES BIOMEDICALES

THE UNIVERSITY OF YAOUNDE 1 FACULTY OF MEDECINE AND BIOMEDICAL SCIENCES

DEPARTEMENT DE BIOCHIMIE ET DES SCIENCES PHYSIOLOGIQUES

RAPPORT DU TP DE BIOCHIMIE N 1 SUR LES CONSTITUANTS ANORMAUX DE LURINE

NOMS ET MATRICULES DES PARTICIPANTS : KONLACK MEKONTSO JOEL 10M117 KIAR AWOU CARIN GLADY 10M113 KEBA FAITH BIH IRENE 10M110

SOUS LENCADREMENT DE : Pr JEANNE NGOGANG Dr CONSTANT ANATOLE PIEME Dr NKEGOUM AMA VICKY Dr JUDITH TORIMIRO

ANNEE ACADEMIQUE 2011/2012

Introduction gnrale

Liquide organique dlimination de dchets et des toxiques du mtabolisme, lurine est labore par les reins et stocke dans la vessie. L'urine est secrte par les reins par filtration du sang, puis par rcupration des molcules de l'urine primitive pour former l' urine dfinitive , qui sera rejete. Les nphrons, units fonctionnelles des reins effectuent donc une filtration slective du plasma. Au cours de certaines affections, le glomrule rnal laisse filtrer des molcules protiques, glucidiques, biliaires, et mme des corps ctoniques. La recherche de ces dernires dans lurine peut donc contribuer au diagnostic de certaines pathologies rnales ou mme systmiques, do limportance du prsent expos. Dans chacune des expriences, on utilisera dune part une urine tester, et dautre part une urine pathologique connue

I.

Recherche des protines

Normalement lurine ne contient que des traces de protines (20-100mg/l) du fait de leur rabsorption tubulaire plus ou moins complte .Il sagit ici principalement dalbumine et de globuline quon groupe sous le nom dalbumine vraie ( 3-60mg/l) mais aussi dautres protines comme lhmoglobine et les glycoprotines quon nommera ici pseudo-albumine ( traces ).on peut donc dire que lurine normale est pratiquement exempte de protines

1. Par lacide nitrique reaction de heller

Cette raction est base sur le fait que les protines prcipitent en prsence dacide nitrique. Au laboratoire on fait couler 1,5 ml durine examiner dans un tube contenant 1,5 ml dacide nitrique. Le temps de contact est denviron cinq minutes. Si lurine contient de lalbumine vraie on observe un disque blanc au contact de lacide(1), dans le cas dune pseudo-albumine il se forme un nuage blanc au-dessus de lacide(2). Lintensit de la coloration tant proportionnelle la quantit de protines que contient lurine, des techniques de dosage plus spcifiques permettent de dterminer la concentration de protine. Si lurine ne contient ni lune ni lautre de ces protines, on observe un disque brun au contact de lacide(3).

(1)

disque brun(3)

2. Par lacide sulfosalicylique

Cette raction nest pas trs spcifique, elle permet de dtecter des concentrations de protines urinaires aussi faibles que 100 mg/l. En pratique, on verse 3ml dacide sulfosalicylique 3% dans un tube contenant 1ml durine examiner. Un trouble ou une prcipitation suffit pour conclure sur la prsence de protines.

Tube de gauche : urine normale Tube de droite : urine riche en protines

II.

Recherche des sucres rducteurs par la liqueur de Fehling

Les -oses contiennent les groupements aldhydes et ctones oxydables qui rpondent donc aux ractions d'oxydation. Ils rduisent les oxydes mtalliques tel la liqueur de Fehling chaud en milieu alcalin. Ces proprits sont utilises en pratique. Mais du fait que dautres substances que les oses exercent une action rductrice (cratinine, morphine etc), il y a lieu de purifier notre urine pour les liminer. En pratique, on porte bullition 1,5ml de liqueur de de Fehling contenu dans un tube essai pendant cinq minutes environ, Puis on y ajoute 1,5ml durine examiner. En prsence de corps rducteurs (oses par exemple), il se forme un prcipit rouge brique doxyde cuivreux.
tube de gauche : urine contenant des corps reducteurs tube de droite : urine normale

III.

Recherche des corps ctonique et de ctognes Test dImbert ou raction de Lgal

Le terme de corps ctoniques urinaires dsigne chacun des trois composs actone, acide actyl actique et le bta-hydroxy butyrate. Comme ils sont de la mme origine, il suffit de caractriser dans lurine la prsence de lactone pour conclure sur la potentielle prsence des autres.la recherche dactone est base sur la raction colore de LEGAL qui peut dtecter des concentrations dactone de lordre de 0,05g/l. Au laboratoire, on traite

2ml durine examiner avec une solution de nitroprusside, en prsence dactate puis de soude ou dammoniac (ractif dMBERT). Dans un tube contenant 2ml durine, on ajoute 2 gouttes dacide actique, puis 2 gouttes de nitroprussiate de sodium 8%, ayant homognis lensemble, on y ajoute 4 gouttes dammoniac. Si lurine contient des corps ctoniques, on observera un nuage rouge-violac (1), dans le cas contraire (urine normale) on observe une un disque blanc sparant les deux liquides.

Urine normale

(1)

Conclusion gnrale
La maitrise parfaite de la physiologie rnale permet de comprendre les mcanismes physiopathologiques aboutissant la prsence anormale de certains composs dans lurine, lesquels composs peuvent tre mis en vidence par diverses ractions biochimiques de coloration et de prcipitation. Ceci prsente un grand avantage en clinique car une raction positive nest pas spcifique dune maladie, mais elle permet dorienter le diagnostic diffrentiel. La recherche des constituants anormaux de lurine aide aussi au monitoring de certaines pathologies systmiques.