METODOS COPROPARASITOSCOPICOS

Para establecer en el laboratorio clnico el diagnostico etiolgico de las parasitosis de cavidades se puede recurrir a mtodos parasitoscopicos a partir del estudio de materia fecal o exudado vaginal. Los primeros se conocen como mtodos coproparasitoscopicos y se utilizan ampliamente. Algunas consideraciones generales sobre la obtencin y manejo de la muestra de materia fecal son de utilidad, ya que lo ms obvio frecuentemente resulta que se desconoce o se maneja en forma incorrecta. La mayora de las ocasiones, la obtencin de materia fecal se realiza con una evacuacin emitida espontneamente, debe recogerse en un envase limpio, teniendo cuidad de que las heces no estn mezcladas con orina, tierra y hojas vegetales. Una vez obtenida la muestra, lo recomendable es que se entregue al laboratorio en el transcurso del mismo da, y que en el tiempo antes de su traslado se mantenga a temperatura ambiente. Si por algn motivo la muestra no se puede trasladar al laboratorio el mismo da de ser emitida, se deber conservar en refrigeracin a 4C. Pero si se guardara por varios das, entonces lo ms recomendable es el uso de conservadores como el formol, para lo cual se mezclan 10 ml de formol al 10% por cada 3 a 5 gramos de materia fecal. Por ltimo, en relacin con el manejo y obtencin de materia fecal para estudio parasitoscopico, se debe recordar que no est indicado usar laxantes, solamente en casos de constipacin, y si se utilizan, preferentemente que sean productos de origen natural como el plantago. Los enemas en trminos generales, estn contraindicados, ya que los acuosos diluyen las heces, y si son de tipo hipertnico, destruyen formas parasitarias frgiles, como los trofozoitos; y los enemas aceitosos dificultan la observacin microscpica. Los mtodos coproparasitoscopicos se dividen en cualitativos, que son aquellos que solo nos informan si hay o no formas parasitarias en el producto estudiado, y cuantitativos que nos dan a conocer numricamente cuantas formas parasitarias estn presentes, las cuales se reportan por gramo o mililitro de heces, segn la tcnica que se utilice. Entre los mtodos cualitativos tenemos el examen directo en fresco, el frotis fecal estandarizado de Kato, el de concentracin por flotacin de Faust, el Willis y el Sheater. Los de concentracin por sedimentacin son: el de Ritchie, de sedimentacin en copa o de sedimentacin gravitacin simple. Los mtodos cuantitativos son de concentracin por centrifugacin, flotacin de Ferreira, por dilucin de Stoll, tcnica de Beaver, mtodo modificado de Kato-Miura y la tcnica de Kato-Katz.

La prueba de Beal o prueba enteral se utiliza en la obtencin de contenido duodenal, para la bsqueda de protozoarios y helmintos de localizacin en duodeno. Para ello por va bucal se hace llegar la capsula de beal, la cual posee un hilo trenzado de nylon y algodn con un extremo libre que se fija a la mejilla del paciente. La capsula permanece en el duodeno durante un tiempo, para posteriormente extraer y exprimir el hilo, a fin de colectar el material impregnado, mismo que se observa microscpicamente. El mtodo de la cinta adhesiva de celulosa engomada, o tcnica de Graham, consiste en utilizar cinta adhesiva transparente para tomar muestras de la regin anal y perianal, misma que se coloca posteriormente sobre un portaobjetos para buscar formas parasitarias microscpicas. El tamizado de heces es un procedimiento de utilidad para recuperar formas parasitarias macroscpicas; se recomienda especialmente para bsqueda de proglotides de Taenia. Para su realizacin se colocan os tamices uno sobre otro, de tal manera que el de malla ms abierta quede hasta arriba y el de malla ms cerrada hasta abajo. A continuacin, las heces de 24 horas de un paciente se tamizan al chorro de agua, para ayudar al paso por las mallas, y las formas parasitarias son retenidas, se colectan y se observan detalladamente para establecer el diagnstico correcto. El de Faust es un excelente mtodo, pero no detecta formas parasitarias pesadas, por ser un mtodo de concentracin por flotacin. Coproparasitoscopico directo en fresco: se realiza con heces recin emitidas, est indicado para identificar trofozoito y larvas. Se utilizan promedio 50 mg de materia fecal que se diluyen un una gota de solucin salina isotnica, se coloca un porta objetos y se procede con la observacin al microscopio, se agrega lugol. Coproparasitoscopico de concentracin por flotacin con salmuera: tcnica cualitativa, denominada mtodo de Willis, se realiza con una solucin saturada de cloruro de socio. La materia fecal se homogeniza en una pequea cantidad de salmuera, y a continuacin se aplica suficiente solucin de salmuera, hasta el borde del frasco. Se deja reposar 30 min, se coloca el porta objetos y se colecta el material flotante, luego se procede a la lectura microscpica. Coproparasitoscopico de concentracin por flotacin simple en solucin saturada de sacarosa: esta tcnica tambin es cualitativa y se realiza de la misma forma que la de Willis, pero se utiliza solucin de sacarosa de 1200 Be. Coproparasitoscopico de concentracin por centrifugacin flotacin, tcnica de Faust: tcnica cualitativa, muy utilizada en base al uso de sulfato de zinc con una densidad de

1180 Be. Se combina la concentracin por flotacin con la solucin hipertnica ms el uso de centrifugacin. Se homogeniza la muestra con agua, se procede a centrifugar y lavar dos veces, y finalmente se homogeniza con la solucin de sulfato, y se colecta el material a observar del sobrenadante con un asa de alambre. Mtodo de Ritchie: tcnica cualitativa que se realiza con formol ter. Se utiliza una solucin de formalina al 10% para fijar a los parsitos y el ter, para facilitar la liberacin de las formas parasitarias de la materia fecal. Se homogeniza la muestra con solucin salina isotnica y se centrifuga, se lava y se obtiene el sedimento. Mtodo de Stoll: tcnica cuantitativa, con la aplicacin de solucin de hidrxido de sodio 0.1N. Se realiza utilizando probetas y pipetas calibradas y haciendo una suspensin de materia fecal con solucin de hidrxido de sodio 1:15. Se toma el material para observacin de la parte media de la probeta, se coloca en el portaobjetos, se cubre, se lee toda la preparacin, se cuentan todas las formas parasitarias y se obtiene el factor de la tcnica, para luego multiplicar el nmero de formas parasitarias de la preparacin por el Factory se reporta nmero de huevos por mililitro de heces. Coproparasitoscopico por frotis grueso de Kato-Miura: tcnica cuantitativa, se realiza con cubreobjetos de celofn impregnado con solucin de verde de malaquita y glicerina. Con la glicerina se aclaran las formas parasitarias y el verde de malaquita se usa como contraste. El frotis de heces se lleva a cabo con 50 mg de materia fecal, previo filtrado a raves de una malla de alambre. Para el reporte se hace un regla de tres para llevar a un gramo y se reporta el nmero de formas parasitarias por gramo de heces. Kato-Katz: tcnica cuantitativa que se realiza exactamente igual que la anterior, la variante es que se utiliza un cartn de 3 mm de grosor, con un orificio de 6 mm de dimetro, para colectar una muestra de heces ya tamizada, llenando el orificio del cartn.

Juan Romario Martnez Cervantes