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MTODO FISH

(FLUORESCENT IN SITU HYBRIDIZATION)

ACADMICOS: Ana Carolina Azevedo Jaqueline de Jesus Yanez Filho

CONCEITO

Pareamento de determinado segmento de DNA ou RNA com uma sequncia de nucleotdeos complementar situada dentro da clula.

(GUERRA, 2004)

PRINCPIO GERAL DA TCNICA

O DNA e suas fitas

PRINCPIO GERAL DA TCNICA

Preparao das sondas Sondas centromricas Sonda de sequncia nica especficas para cromossomo Sondas para cromossomo inteiro Cariotipagem por espectro multicolorido

TIPOS DE SONDAS

Adequada para diagnsticos de Aneuplidias

TIPOS DE SONDAS

Permitem identificar sndromes de microdeleco, oncogenes e translocaes atpicas, envolvendo regies subtelomricas.

TIPOS DE SONDAS

Permitem detectar translocaes. Identificam todos os cromossomas marcadores, isto , aqueles dos quais no conhecemos o padro de bandas tpico.

TIPOS DE SONDAS

Deteco de pequenos rearranjos cromossmicos constitucionais ou adiquiridos, como no Cncer.

PRINCPIO GERAL DA TCNICA


Desnaturao de cromossomos Hibridizao Lavagem ps-hibridizao Deteco de sondas Amplificao de sinal Contagem colorida Microscpio

PRINCPIO GERAL DA TCNICA

MTODO FISH...VIDEO

RESULTADO

Sexo Masculino

Sexo Feminino

APLICABILIDADE NA REA MDICA


Essa propriedade de grande valor em estudos sobre cncer, j que um grande nmero de clulas pode ser verificado quanto a anormalidades clonais especficas que podem estar presentes somente em poucas clulas. A citogentica em interfase tambm possui enorme potencial para diagnstico pr-natal, sendo tambm um instrumento valioso para o mapeamento gnico .

LEUCEMIA MIELIDE CRNICA:

Pesquisa a sequncia BCR-

ABL

A sequncia anormal formada pela translocao de uma parte do cromossomo 22 (BCR, em

verde) com uma parte do


cromossomo 9 (ABL1, em vermelho).

REFERNCIAS

BORGES-OSRIO MR, ROBINSON WM. Gentica Humana. Porto Alegre. Editora Artmed, 2 edio, 2002. GUERRA,M. FISH: conceitos e aplicaes na citogentica. Ribeiro Preto: Sociedade Brasileira de Gentica,2004. MAGLIO,A. Mapeamento cromossmico em espcies de caf atravs da tcnica de hibridizao in situ fluorescense (FISH). Campinas: rev. O Agronmico, 59 (1), 2007.

OBRIGADO!!!