UNIVERSIDAD DE EL SALVADOR FACULTAD DE QUIMICA Y FARMACIA

PROPUESTA DE GUIA TECNICA PARA LA VALIDACION DE METODOS DE LIMPIEZA DE EQUIPOS UTILIZADOS EN LA FABRICACION DE FORMAS FARMACEUTICAS LIQUIDAS ORALES NO ESTRILES ANTEPROYECTO DE TRABAJO DE GRADUCACION PARA OPTAR AL GRADO DE LICENCIATURA EN QUIMICA Y FARMACIA

PRESENTADO POR: MAYRA JEANNETTE ASCENCIO CRUZ

CIUDAD UNIVERSITARIA, 6 DE NOVIEMBRE DE 2012

Estudiantes

Br. Mayra Jeannette Ascencio Cruz

Carn AA03042

__________________ Firma

Docente(s) Director(a) (es)

Licda. Rosa Mirian Rivas de Lara

___________________ Firma

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I.

INTRODUCCION

En la actualidad, muchos organismos reguladores de las Buenas Prcticas de Manufactura, estn incrementando sus exigencias para asegurar la calidad de los productos farmacuticos y como punto de partida se estn enfocando en gran medida, en los programas de limpieza, especialmente con la validacin de los procedimientos de limpieza de los equipos de produccin (Precisamente por los riesgos de contaminacin cruzada que puede darse entre diferentes productos farmacuticos) No existe un mtodo general para realizar la limpieza de un equipo ni reglas claras para establecer los lmites mnimos permisibles de residuos, por lo que es de trascendental importancia no solo un buen procedimiento de limpieza sino tambin una adecuada estrategia de validacin de limpieza. Dentro de las Buenas Prcticas de Manufactura la validacin es la evidencia documentada que da la seguridad de que un proceso especfico, mtodo o sistema producir consistentemente un producto o resultado que cumple con las especificaciones de calidad o criterios de aceptacin previamente establecidos. La validacin es uno de los principales requisitos de calidad y de la cual el objetivo primordial es demostrar la capacidad de proporcionar de forma continua y reproducible productos homogneos de acuerdo a las especificaciones de calidad establecidas. Validacin de mtodos de limpieza es el proceso por el que se establece una evidencia documental de que un proceso de limpieza reduce de manera constante los residuos (activo, excipientes, solventes) en la superficie del equipo a un nivel aceptable preestablecido. Dado el concepto anterior, se asume que deben establecerse lmites de residuos aceptables en que ste no sea ningn riesgo potencial para el

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consumidor

final,

ya

que

los

mtodos

de

limpieza

no

eliminan

completamente los residuos, solo los reducen a niveles aceptables dentro de los rangos oficiales permitidos. Hay muchas razones para requerir que el equipo est limpio, entre tantas reducir la cantidad de contaminantes presentes de forma que no se altere la seguridad, identidad, concentracin, calidad o pureza del medicamento. Segn Normas de Buenas Prcticas de Manufactura, cada equipo debera estar destinado para un producto en especfico, sin embargo si varios productos son procesados en el mismo y ste es tratado con el mismo proceso de limpieza, puede seleccionarse un producto representativo. Los criterios de seleccin pueden basarse en la solubilidad y la dificultad de limpieza. Con esta investigacin se pretende generar una gua tcnica para la validacin de mtodos de limpieza de equipos utilizados en la fabricacin de lquidos orales no estriles; que facilite la seleccin de los parmetros y criterios que se deben tomar en cuenta durante la validacin El trabajo se realizar en el primero y segundo trimestre del ao 2013

II. DELIMITACION Y DEFINICION DEL PROBLEMA Durante la fabricacin de medicamentos, muchos productos y sus ingredientes activos pueden ser contaminados por otros productos farmacuticos e ingredientes activos, por los agentes de limpieza, por microorganismos u otros materiales como lubricantes, partculas de aire, materias primas, sustancias intermediarias y auxiliares. En muchos casos el mismo equipo puede ser usado para la elaboracin de diferentes productos subsecuentes. Es por ello que es necesario garantizar que la limpieza de los mismos ha sido realizada en forma eficiente (eliminando adecuadamente cualquier contaminante: principio activo, excipientes, jabn, etc.). La mejor forma de garantizar la realizacin de este proceso, es por medio de una validacin, es decir poseer una evidencia documental de que lo que se hace, funciona para lo que se ha previsto. La FDA ha provedo una gua general para la validacin de la limpieza de los equipos, donde se presentan diferentes criterios a aplicar con respecto en el establecimiento de lmites permisibles de residuos de un producto en el siguiente a procesar. En el pas algunos no existe una gua tcnica para la validacin de mtodos de limpieza de equipos para la fabricacin de lquidos orales no estriles a seguir; los laboratorios de la Industria Farmacutica no poseen la capacidad de destinar un equipo para cada producto, el mismo equipo se utiliza para diferentes productos, por ello es esencial no solo un buen procedimiento de limpieza si no una gua clara y especifica de validacin de mtodos de limpieza de equipos para la fabricacin de lquidos orales no estriles. El problema con la presencia de residuos de producto, depender en gran medida de su toxicidad, ya que, esta contaminacin puede provocar reacciones adversas por mezclas de medicamentos, como ejemplo:

penicilina y medicamentos reguladores de la glucosa, o glicsidos cardiacos y reguladores de la presin arterial contaminados con trazas de hormonas podran producir efectos fatales de salud a las personas, como en el caso especfico de las personas que son alrgicas a los antibiticos betalactmicos, pueden incluso provocar limpieza ha sido efectiva la muerte debido a un Shock

anafilctico. Debido a lo anterior se debe de tener la certeza de que la y que se removieron los residuos a un nivel aceptable, y esto se logra validando los procedimientos de limpieza. En esta investigacin se elaborar una gua tcnica para la validacin de mtodos de limpieza de equipos que se utilizan en la fabricacin de formas farmacuticas lquidas orales no estriles. Las reas de lquidos no estriles son un poco menos complicadas que las estriles, pero no menos importantes, generalmente si el laboratorio fabricante, tiene un rea de estriles, es la mayor prioridad, pero no hay que dejar de lado las reas de lquidos no estriles. Los equipos que se tomaran en cuenta, son aquellos que son indispensables en estas reas tales como: tanques de acero inoxidable, tanques de acero inoxidable de doble chaqueta, molino coloidal, agitadores, filtros, llenadoras. En ella se pretende recopilar los criterios, parmetros y metodologas que deben considerarse para que el mtodo o procedimiento de limpieza de un equipo en especfico produzca los resultados de acuerdo a las especificaciones preestablecidas

III. ANTECEDENTES INVESTIGACIONES NACIONALES No se encontraron. INVESTIGACIONES INTERNACIONALES 1. Food and Drugs Administration. Guide to inspections validation of cleaning processes, 1995. Disponible en: http://www.fda.gov/ICECI/Inspections/InspectionGuides/ucm074922.htm Esta es una gua de referencia para validar los procesos de limpieza en los equipos utilizados en la Industria Farmacutica. Proporciona lineamientos a seguir para poder revisar el procedimiento de limpieza,

2. Gerencia General de Inspecciones y control de medicamentos y productos GGIMP. Guas relacionadas a la garanta de calidad. Validacin de limpieza. Brasilia, 2006. Como su nombre lo indica es una gua que nos muestra que pasos seguir, que consideraciones deben tenerse en cuenta al momento de tomar la decisin de validar la limpieza, que aspectos evaluar en el proceso, en el procedimiento de limpieza, como levantar un protocolo de validacin de limpieza.

3. Gonzlez Gonzlez, CD, Validacin retrospectiva y control estadstico de procesos en la Industria Farmacutica, Universidad de Chile, Tesis de grado, Licenciatura en Qumica y farmacia. Santiago de Chile, Chile, 2005. Disponible en: www.scribd.com

Trata de darnos las directrices para la validacin retrospectiva de procesos. En el proceso de fabricacin que parmetros tomar en cuenta para poder validarlo. Como analizar los resultados de los parmetros tomados en cuenta.

IV. JUSTIFICACION Muchos son los factores por los cuales, es importante validar la limpieza en los equipos, pero el principal de ellos es la prevencin, el de evitar la contaminacin cruzada entre un producto y otro. La contaminacin cruzada es un riesgo, pues se est en juego con efectos adversos en los consumidores o en el peor de los casos vidas humanas. Por eso la importancia de contar con una gua tcnica para la validacin de mtodos de limpieza de equipos utilizados en la fabricacin de formas farmacuticas lquidas orales no estriles. Aunque es requerimiento regulatorio designado formalmente, la validacin de limpieza contina siendo un problema para fabricantes e inspectores. Puede ser una exigencia compleja, ya que requiere de una comprensin profunda del proceso, materiales y los productos qumicos involucrados en la limpieza. Adicionalmente es necesario comprender la base cientfica para fijar niveles residuales aceptables y el desarrollo de procedimientos analticos capaces de detectar muy bajos niveles del o los compuestos buscados. En las reas de lquidos no hay mucho riesgo de partculas en suspensin en el aire, pero si un equipo no fue bien lavado y desinfectado representa un foco de contaminacin. Por otra parte El Salvador no cuenta con una gua clara a seguir para la validacin de procesos de limpieza, esta es de vital importancia, puesto que la limpieza es un proceso tan importante, pero no se le da el valor debido. Es necesario un documento donde se recopilen diferentes criterios para poder validar los procesos de limpieza de equipos utilizados para fabricar, jarabes, emulsiones, suspensiones y soluciones, con que metodologa analtica puede validarse tal o cual proceso de limpieza, que mtodo de toma de muestra usar para tal producto especifico y que parmetros de desempeo evaluar. Todo lo anterior formar parte de la propuesta de la Gua tcnica para la validacin de

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mtodos de limpieza de equipos en la fabricacin de formas farmacuticas lquidas orales no estriles. Una vez establecido el proceso de limpieza debe seguirse, cumplirse, documentarse, registrarse y mantenerse. Es necesario evaluar todos los posibles contaminantes como parte de la validacin de la limpieza, sin embargo esta investigacin estar focalizada en la evaluacin de residuos de principios activos.

V. OBJETIVOS

5.1 Objetivo general Proponer una gua tcnica para la validacin de mtodos de limpieza no normalizados, de equipos utilizados en las reas de fabricacin de formas farmacuticas lquidas orales no estriles. 5.2 Objetivos especficos 5.2.1 Definir los mtodos fsico-qumicos para la toma de muestra que ser utilizada en la validacin de mtodos de limpieza de equipos utilizados en la fabricacin de formas farmacuticas lquidas orales no estriles. 5.2.2 Establecer criterios para definir los parmetros de desempeo a evaluar en el desarrollo de la validacin de un mtodo de limpieza para equipos utilizados en la fabricacin de formas farmacuticas lquidas no estriles.

5.2.3 Plantear la metodologa analtica con la cual se verificaran los lmites de residuos de principio activo.

5.2.4 Proporcionar algunos criterios para establecer los lmites de residuos aceptables en la limpieza de equipos. 5.2.5 Proponer un formato para los protocolos de validacin de mtodos de limpieza de equipos utilizados en la fabricacin de lquidos orales no estriles.

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VI. MARCO TEORICO La vocacin de la Industria farmacutica siempre ha sido producir

medicamentos de calidad y con total garanta de seguridad. Al elaborar productos destinados a curar la enfermedad, salvar o mejorar la calidad de vida, no puede haber el mnimo margen de error. Sin embargo, a pesar de los esfuerzos por controlar la fabricacin, se exige una mejora continua y mximas garantas de calidad. Es en esta lucha de conseguir un total dominio de la calidad que surge la validacin. La calidad del medicamento se consigue en cada uno de los pasos de su proceso, desde su investigacin hasta el ltimo anlisis que se realiza al producto terminado. Se debe garantizar cada etapa de la produccin, que se realicen de forma adecuada y cumpliendo los parmetros de calidad previamente establecidos. Este mximo grado de calidad slo es proporcionado a travs de la validacin. Para obtener medicamentos seguros y eficaces de forma continua, es necesario que su calidad sea constante. Este objetivo se alcanza solo cuando las especificaciones que se aplican estn basadas en procedimientos validados. 6.1 LIMPIEZA Se define la Limpieza como el proceso de separacin por medios fsicos, mecnicos, o qumicos de la suciedad depositada en los equipos utilizados en la fabricacin de medicamentos. La limpieza se efecta usando uno o varios mtodos de limpieza ya sean fsicos (restregar, o utilizando flujos turbulentos) o qumicos (uso de detergentes, lcalis y cidos). El calor es un factor adicional, para ayudar a los medios fsicos y qumicos y teniendo en cuenta de que debe seleccionarse una temperatura de acuerdo a los detergentes que se usen, las superficies a lavar y la suciedad a eliminar.

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Suciedad: todo residuo indeseable sea orgnico o inorgnico incrustado en las superficies y en el equipo que se utiliza en la fabricacin de medicamentos. La suciedad se elimina por 4 mecanismos: Solubilizacin: la suciedad es absorbida por el lquido formando una solucin. Emulsificacin: la suciedad forma gotitas que luego se transfieren a la solucin. Micelizacin: la suciedad forma micelas que son transferidas a la solucin. Accin mecnica: la suciedad es arrancada de la superficie por la energa cintica de la solucin. 6.1.1 Mtodos de limpieza Se pueden agrupar en 3 Mtodos Manuales: son generalmente simples, dependen del buen que hacer del operario, se elimina la suciedad restregando con una solucin detergente; Las partes desmontables del equipo se lavan independientemente en cubos o recipientes adecuados con agua o solucin detergente a temperatura controlada. Se requiere un buen entrenamiento del operario, para obtener los mismos resultados que con una limpieza automtica o semiautomtica Mtodos semiautomticos: El equipo de limpieza es Limpieza in situ o CIP por sus siglas en ingls: se efecta sin desarmar el equipo, pero para ello es necesario que el equipo tenga un diseo especfico. Este concepto de limpieza se utiliza para reflejar la limpieza de conductos, tuberas, tanques y sistemas de filtracin que no se pueden desarmar o desplazar. Para una limpieza efectiva el agente limpiador debe circular a travs de las piezas. Para la limpieza eficaz de tuberas y el interior de los equipos se requiere una velocidad mnima de flujo de 1.5 metros por

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segundo con flujo turbulento. El empleo de esta tcnica implica seguir estrictamente la metodologa indicada por el fabricante y verificar cuidadosamente el estado final de la limpieza del equipo. El paso de los lquidos de lavado a alta velocidad por las superficies de los equipos provoca un rascado mecnico que elimina los depsitos de suciedad (esto solo es aplicable al flujo en tuberas, intercambiadores de calor, bombas, vlvulas, centrfugas, etc.). La tcnica utilizada normalmente para la limpieza de grandes depsitos (tanques) consiste en atomizar la solucin de detergentes sobre las superficies superiores de los mismos y dejar entonces que desciendan por las paredes. En estos casos el efecto mecnico es insuficiente, pero puede ser mejorado hasta cierto punto por la utilizacin de boquillas de atomizacin especiales. La limpieza de los depsitos requiere grandes volmenes de detergentes que deben circular de forma rpida Mtodos automticos: Pulverizacin a baja presin y alto volumen ( BPAV): es la aplicacin de agua o una solucin de detergente en grandes volmenes a presiones de hasta 6.8 Kg/ cm2. 100 lbs/ pulg2 . Pulverizacin a alta presin y bajo volumen: es la aplicacin de agua o solucin de detergente en volumen reducido y alta presin es decir de hasta 68 Kg/ cm2 , 1000 lbs/ pulg2. Limpieza a base de espuma o gelatina: es la aplicacin de detergente en forma de espuma o gelatina durante 15 a 20 minutos para enjuagar posteriormente con agua pulverizada.

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6.2 VALIDACION 6.2.1 DEFINICION El trmino validacin ha sido definido en distintas literaturas de diversas maneras y por diversos autores, aunque los trminos utilizados son diferentes, todas concuerdan con lo mismo: especificar e implementar, aprobar y documentar. De manera general segn las Buenas Prcticas de Manufactura vigentes: Es el establecimiento de una evidencia documentada que suministra un alto grado de seguridad, de que un proceso especfico elaborar en forma permanente un producto que cumple unas caractersticas y especificaciones de calidad predeterminadas. En general se consideran 3 tipos de validacin: Validacin prospectiva: para procesos nuevos. Validacin retrospectiva: para procesos repetidamente utilizados no validados anteriormente, pero de los cuales se tiene suficiente documentacin para probar la bondad del proceso. Validacin concurrente: validacin llevada a cabo durante la produccin rutinaria de productos destinados a la venta. 6.2.2 VALIDACION DE METODOS DE LIMPIEZA La validacin de limpieza de equipos es el proceso de establecimiento de pruebas documentales de que un procedimiento de limpieza especfico reducir los residuos de la superficie de los equipos a un nivel predeterminado aceptable. La validacin de la limpieza es necesaria para todo el equipo que est en contacto directo con el producto. Tambin se debe realizar en los equipos de envasado primario.

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La FDA reafirma la necesidad de documentar los procedimientos de limpieza en su gua sugiere que se deben tener los procedimientos escritos y bien definidos, detallando todo el proceso, usada para las diferentes piezas del equipo o la mquina. Debe haber un procedimiento de limpieza para limpiar entre diferentes lotes, y un proceso diferente para limpiar en el cambio de producto. De igual manera debe existir un procedimiento para remover los residuos solubles en agua y para remover los residuos no solubles en agua. O si la empresa dedica equipos solo para ciertos productos que se fabrican, que generan ciertas gomas, o residuos difciles de retirar. Cuando el procedimiento de limpieza es usado nicamente entre cambios de lote del mismo producto, el criterio a aplicar es visiblemente limpio y no requiere de validarse el proceso. 6.2.3 IMPORTANCIA DE VALIDAR LA LIMPIEZA. La limpieza como mtodo de control se realiza despus de terminado el proceso de fabricacin de un medicamento o una forma farmacutica, para asegurar que cuando se empiece con un nuevo proceso de produccin con un activo diferente no existan residuos de la molcula anterior que sean significativos, causando contaminacin cruzada y que finalmente sea perjudicial para la persona que consumir el medicamento y para la empresa. Se le da gran nfasis, a los residuos de activos pues estos adems de que algunos son altamente peligrosos debido a su toxicidad, generan compuestos de degradacin que en la presente investigacin no se tomaran en cuenta debido a la magnitud de lo mismo. Ciertos activos como las hormonas, los antibiticos -lactmicos, los esteroides, entre otras sustancias, son muy peligrosas debido en algunos casos a su toxicidad, en algunos otros por los efectos adversos que provocan. En el caso de los antibiticos -lactmicos en algunas personas provocan reacciones alrgicas, lo cual puede conducir a un shock anafilctico y al final la muerte.

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6.3 ESTABLECIENDO LIMITES ACEPTABLES DE RESIDUOS Actualmente las autoridades sanitarias de cada pas basndose en la Gua de inspeccin y procesos de validacin de limpieza de la FDA, han establecido reglamentos y normativas orientadas a la implementacin del aseguramiento de la calidad en la Industria Farmacutica para lograr que sus productos obtengan la calidad requerida internacionalmente. La validacin de limpieza constituye un elemento de suma importancia en la produccin de medicamentos, siendo parte esencial de la garanta y calidad de manufactura del producto farmacutico. Ella asegura que el residuo que permanece en la superficie de los equipos, luego de aplicar la limpieza establecida en los procedimientos normalizados de operacin, se encuentre dentro de los niveles permisibles predeterminados. La validacin de la limpieza comprende la identificacin y caracterizacin de los residuos (principio activo, excipientes, productos de degradacin, preservantes, agentes de limpieza, microorganismos, etc.), seleccin de los criterios para el clculo del lmite aceptable de residuo, seleccin y validacin del mtodo de muestreo, seleccin y validacin del mtodo analtico para la determinacin de los residuos, seleccin y validacin del procedimiento de limpieza, elaboracin del informe final y de las instrucciones operacionales. La clave para una validacin de limpieza efectiva es determinar cun limpio es suficientemente limpio. Esto est usualmente determinado por el establecimiento del lmite de residuo para un ingrediente activo especfico. Por eso, antes de comenzar un estudio factible de validacin de limpieza hay que seleccionar un analito y un lmite aceptable de residuo para ese analito. Este aspecto constituye uno de los ms importantes y difciles de resolver dentro del programa de validacin de limpieza. Desdichadamente no existe una gua clara para el lmite aceptable de residuo en la manufactura de un producto, de ah la

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importancia que tiene la recopilacin y el anlisis de los criterios utilizados por la literatura para determinar este. Este trabajo tiene por objetivo escoger los criterios ms utilizados en el clculo del lmite aceptable de residuo. As como el de contribuir en la divulgacin de la necesidad del establecimiento de un lmite correcto teniendo en cuenta los elementos aqu reunidos. El documento gua de la FDA para la validacin de limpieza solo establece que el lmite de residuo debe ser lgico, prctico, alcanzable, verificable y cientficamente justificado: lgico basado en una comprensin del proceso; prctico en el sentido que debe ser el apropiado para la situacin actual de limpieza a ser validada; verificable por alguna tcnica analtica de deteccin; alcanzable por el procedimiento de limpieza y lo ms importante que las industrias desarrollen un argumento cientficamente racional para el lmite elegido. Algunos de los criterios que la FDA toma en cuenta en su Gua para la inspeccin de validacin del proceso de limpieza son: Ninguna cantidad de residuo debe estar visible en el equipo despus de que se ejecuten los procedimientos de limpieza. Cualquier activo puede estar presente en el siguiente producto hasta un nivel mximo de 10 ppm Cualquier ingrediente activo puede estar presente en el siguiente producto en un nivel mximo de 1/ 1000 de la dosis mnima diaria del agente activo en una dosis mxima diaria del producto siguiente. Estos criterios han sido ampliamente utilizados por la Industria farmacutica para la determinacin de lmites aceptables de residuos. Los niveles de residuos sern determinados segn el potencial farmacolgico, seguridad, toxicidad, estabilidad y efectos de contaminacin sobre el prximo producto. Tambin para estimar los lmites aceptables de residuo se debe tener en cuenta la va de administracin del producto, si se trata de un principio activo

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o un producto terminado, el lmite de deteccin de la tcnica analtica, el proceso de fabricacin y la capacidad del procedimiento de limpieza. 6.3.1 LMITE BASADO EN LA DOSIS DEL RESIDUO Se basa en la consideracin de una cantidad permisible de residuo que luego del proceso de limpieza puede estar presente en el producto terminado que va a ser elaborado en el mismo equipo sin experimentar efectos adversos en la salud. El lmite aceptable de residuo (LAR) desde este punto de vista se calcula como la relacin entre la dosis mnima diaria del ingrediente activo A elaborado (DDMinA) y la dosis mxima diaria del prximo producto B a elaborarse subsecuentemente (DDMaxprodB) multiplicado por un factor de seguridad (FS) y por el tamao del lote del prximo producto B (TLprodB) (ecuacin 1).

Cuando se desconoce el producto siguiente a elaborar, se escoge para el clculo la mayor de las dosis diarias y el menor tamao del lote entre todos los posibles productos a elaborarse despus de A. El factor de seguridad se usa como un extra que provee proteccin, ya que el valor obtenido de los clculos teniendo en cuenta este criterio es considerado como un valor seguro. Existen diferentes factores de seguridad en dependencia de la ruta de administracin (tabla 1). Tabla 1. Factores de seguridad segn la va de administracin
Va de Administracin Parenteral, oftalmolgica Oral Tpica Factor de seguridad 0.0001 0.001 0.01

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Desde el punto de vista cientfico no existe objecin si se escoge un factor de seguridad menor que 0,001 por ejemplo (en el caso de productos por va oral) o si se usan otros parmetros que la dosis mnima diaria. Sin embargo, una seleccin arbitraria de un criterio ms restringido reducira el valor del lmite de residuo, lo que puede resultar una limpieza no razonable y reducir la disponibilidad de un mtodo de anlisis con un lmite de deteccin suficientemente bajo. 6.3.2 LIMITE DE RESIDUO BASADO EN LA MUESTRA DE ANALISIS

Este lmite de anlisis lo realiz Destin A. LeBlanc quien ha desarrollado muchos trabajos referentes al tema de la validacin de limpieza. En sus anlisis retoma el criterio anterior pero incluye nuevos elementos en la frmula para obtener el lmite ms verdadero y ms adecuado al proceso de la contaminacin, limpieza y control del residuo. Adems hace un anlisis separado de cada uno de los lmites a travs de los cuales se obtiene el lmite de residuo en la muestra analtica, esto contribuye a una mejor comprensin y entendimiento del lmite de residuo en cada una de las etapas del proceso. Al LAR LeBlanc lo denomina lmite de la muestra analtica ensayada pues el procedimiento analtico mide el principio activo en disolucin, como un resultado del hisopado y desorcin del hisopo dentro de un disolvente adecuado, o por enjuague y la medicin del principio activo dentro del disolvente de enjuague. Este lmite como veremos est formado por la contribucin de otros lmites de residuos como: lmite de aceptacin en el prximo producto, lmite de aceptacin sobre la superficie de contaminacin del equipo y lmite de aceptacin en la muestra analizada (ecuaciones 2, 3 y 4)

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donde: L1: lmite de aceptacin en el producto subsecuente , o sea, es el lmite del agente activo, A, en el producto subsecuente, B. Se expresa por el producto del factor de seguridad (FS) con la relacin de la dosis mnima diaria del ingrediente activo A elaborado (DDMinA) y la dosis mxima diaria del prximo producto B a elaborarse (DDMaxprodB). En esta ecuacin las dosis estn expresadas en la misma unidad, por ejemplo, en miligramo, y para expresar L1 en p.p.m. se utiliza 10 6 como un factor de conversin. L2: lmite por rea de superficie, depende del lmite en el producto siguiente expresado en ppm (L 1), del tamao del lote en kilogramo del producto subsecuente B (TLprodB) y del rea total de superficie compartida del equipo en centmetro cuadrado (ACE). Se expresa en microgramo por centmetro cuadrado y 1000 es un factor de conversin de kilogramo a gramo. Para el valor del rea de superficie se considera toda el rea de la superficie de contacto. En este clculo se asume que toda la contaminacin est distribuida uniformemente por toda la superficie del equipo. L3: es el lmite de residuo (en microgramo por gramo o microgramo por milimetro) para la muestra analtica. Debemos conocer el lmite de residuo por rea de superficie (L 2), la superficie de rea muestreada con el hisopo en centmetro cuadrado y la cantidad en milimetro del disolvente de desorcin del

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residuo del hisopo. Para el muestreo por hisopado se asume que un rea fija de la superficie del equipo es muestreada (ASM) y el hisopo se desorbe sobre una cantidad constante de disolvente (CDD). Para el muestreo por enjuague se trabaja con el rea total de la superficie del equipo y el volumen de agua de enjuague. Por lo general L1 < L2 < L3, ya que L3 refleja el residuo en un pequeo volumen de muestra analizada. La expresin completa est descrita por la ecuacin 5.

Esta concepcin para el clculo del lmite aceptable de residuo es vlida para cuando todos los componentes de un frmaco se procesan en un mismo equipo que posteriormente se utilizar para otro producto farmacutico. Muchas veces la produccin se concibe de forma tal que en un mismo equipo solo se procesan los ingredientes activos para luego realizar la mezcla con los excipientes en otro equipo. En estas situaciones el nivel permisible de contaminacin hay que evaluarlo considerando solamente el residuo del ingrediente activo A, que permanecer luego de la limpieza en el ingrediente activo B a procesarse en un equipo comn. De esta forma el nivel de cualquier residuo presente en el posterior ingrediente activo farmacutico puede ser evaluado indirectamente a partir del efecto del residuo en el producto terminado en que se incorporar dicho ingrediente activo. Para estos casos las frmulas se modifican de la manera que muestran las ecuaciones 6, 7, 8, 9, 10 y 11.

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donde: L1: lmite de residuo de principio activo A (p.a.A) en cualquier producto terminado B por producir. L2: lmite de residuo de principio activo A en cualquier principio activo B (p.A.B) elaborado con posterioridad y que formar parte del producto terminado B. L3: lmite de residuo por rea de superficie compartida en el equipo. L4: es el lmite de residuo en la muestra analizada. Obsrvese como en este caso para lograr valorar el efecto de la contaminacin del principio activo que fue limpiado en el producto terminado subsecuente se ha hecho considerando el efecto del ingrediente activo A en el ingrediente activo B y la posterior incorporacin de este ltimo al producto terminado B. Por eso se habla en la ecuacin de dosis diaria mxima del principio activo B y tamao del lote del principio activo B.

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En el caso de

industrias

que poseen productos

farmacuticos con

formulaciones de diferentes dosis, se escoger como lmite de residuo del principio activo A en el principio activo B el mayor valor de dosis de las formulaciones de B, que se corresponder con el menor lmite de residuo del ingrediente activo A. 6.3.3 LIMITE BASADO EN LA TOXICIDAD DEL RESIDUO El uso de la dosis teraputica o dosis farmacolgica como base para el clculo del lmite de residuo es til para situaciones donde el material es un ingrediente activo con niveles de dosis teraputicas conocidas. Existen casos donde no se cuenta con la dosis del residuo como, por ejemplo, en la produccin de medicamentos en fase de investigacin, donde todava la dosis del principio activo o el producto terminado no ha sido completamente establecida. Tambin existen los residuos que no tienen dosis como los productos de degradacin, los excipientes y los agentes de limpieza. En estas situaciones el establecimiento del lmite aceptable de residuo puede estar basado en el consumo aceptable diario (CAD) el cual tiene en cuenta el efecto txico de la sustancia en el cuerpo. El efecto txico de una sustancia en el cuerpo humano se estima a travs de la toxicidad en animales. As, LD50 (Letal Dosis, LD50 por sus siglas en ingls) es la dosis letal media o toxicidad aguda en animales. Usualmente se expresa en miligramo por kilogramo de peso del animal y es la dosis de toxicidad a la cual mueren la mitad de los animales de experimentacin con la sustancia probada. Para efectuar una conversin correcta de los datos de toxicidad aguda en animales a el CAD en humanos para una sustancia dada, hay que tener en cuenta que la va de administracin de la sustancia debe ser la misma en ambos. Existen varias referencias que proporcionan el factor para convertir la toxicidad aguda en animales en un estimado de ADI. Por ejemplo, algunas

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referencias establecen que para convertir la dosis letal media para animales en ADI puede emplearse un factor de seguridad de 1000 con un factor adicional de 1 a 10. El ADI puede calcularse directamente a travs de la expresin: ADI (mg/da) = LD50 (mg/kg) x w (kg) x F donde: w: peso del cuerpo humano. F: producto del factor de seguridad (FS) por un factor adicional (FC). FC: factor de conversin determinado empricamente a partir de modelos con animales desarrollado por Layton y otros.21 Una forma ms indirecta de calcular el ADI es calculando primero el nivel no observado del efecto (no observable effect level , NOEL por sus siglas en ingls): NOEL = LD50 x FC y ADI = NOEL x w x FS Una vez estimado el ADI, ste es sustituido por el producto del factor de seguridad y por la dosis mnima diaria del residuo en la ecuacin para calcular el lmite aceptable de residuo en la muestra de anlisis (ecuacin 12).

De la ecuacin anterior se nota que el ADI reemplaza a la DDMin del residuo blanco reducida por el factor de seguridad, ya que al definir el ADI se incluye un factor de seguridad, por eso no son necesarios factores adicionales. El lmite basado en la toxicidad del residuo aunque no es el nico mtodo para calcular el lmite de residuo cuando no existe una dosis para este, es el ms generalizado.

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6.3.4 LIMITE POR DEFECTO Se conoce como lmite por defecto al valor de 10 p.p.m. que se recoge en el segundo criterio de referencia que aparece propuesto por la FDA en el documento gua sobre validacin de procesos de limpieza. Se trata de un lmite socorrido que puede utilizarse cuando an no se han establecido otros criterios ms adecuados para controlar el residuo. El valor de 10 p.p.m. considerado como lmite por defecto es tambin en cierto sentido un mximo aceptable de lmite residual en el caso que el lmite calculado basado en la dosis estndar L1 (0,001 de la dosis mnima del principio activo en la dosis mxima del prximo producto) sea superior a este valor de 10 p.p.m. 6.3.5 LIMITE BASADO EN LA LIMPIEZA VISUAL La inspeccin visual es un mtodo de deteccin legtimo si se utiliza bajo las circunstancias correctas. Se trata de un mtodo de deteccin inmediato y de bajo costo, tanto para las aplicaciones de rutina como el monitoreo, y las extraordinarias como puede ser la validacin de la limpieza. El examen visual de la superficie es un mtodo con una larga trayectoria de resultados satisfactorios. Este mtodo permite simplificar muchos pasos del proceso de validacin si es sustentado sobre criterios estrictos, ya que no es necesaria una cuantificacin adicional de los lmites residuales. El objetivo de la limpieza visual es significativo, si una superficie est visualmente sucia, entonces los procedimientos de limpieza no son aceptables o estn fuera de control. Cuando se consideran una serie de circunstancias la deteccin visual se convierte en una herramienta poderosa de control. Estas circunstancias a tener en cuenta son: la potencia del residuo, el establecimiento de la cantidad de residuo que puede detectarse, la seleccin de las superficies apropiadas, el entrenamiento del personal de inspeccin, la definicin de las condiciones de la

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inspeccin visual y la identificacin de las etapas de los procesos ms convenientes para este tipo de control. Las condiciones de la inspeccin necesitan ser bien determinadas (iluminacin, ngulo, distancia de observacin, etc.) y se requieren inspectores entrenados que puedan distinguir entre 1 y 4 g/cm 2 de residuo sobre una superficie de acero inoxidable. Es importante tambin que la superficie a inspeccionar est visible, no sea porosa y preferiblemente sea de un color contrastante al del residuo que est siendo inspeccionado. Aunque este enfoque del lmite aceptable de residuo puede usarse en cualquiera de las etapas del proceso productivo la mejor candidata es el envase, ya que el riesgo de transferir residuo se incrementa cuando el producto est en su forma terminada. La deteccin visual sobre la superficie de contacto del equipo como control de limpieza es ms segura en productos orales y no estriles, por ejemplo, en tabletas. Los casos de inyectables o productos txicos como citostticos requieren un nivel adicional de prueba. El lmite de deteccin visual debe determinarse empricamente con el residuo de inters. Conociendo el peso del principio activo, excipientes o ambos, se pueden depositar hmedo y seco sobre superficies de inters para determinar el lmite de deteccin visual. Se podra preparar un experimento depositando cantidades crecientes de residuo sobre superficies modelos y determinar el nivel de limpieza visual. El ms alto nivel al cual la comisin de expertos considere que est visiblemente limpio se aceptar como el nivel permisible para la limpieza de ese residuo particular. Generalmente la lnea divisoria entre limpieza visual y suciedad visual es considerada en el rango de 4 g/cm 2 Si se calcula el lmite de residuo por rea de superficie L2 y se encuentra un valor significativamente mayor que 4 g/cm2 o que el valor de lmite visual determinado empricamente, se podra asumir la limpieza visual como el nico criterio de aceptacin.

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Para el caso de drogas potentes donde el lmite aceptable de residuo por rea de superficie es por lo general inferior a 1 g/cm2, si la superficie est visualmente sucia indicara falta de limpieza, pero una superficie visualmente limpia no podra garantizar que el residuo se encuentra en un nivel aceptable.

6.3.6 LMITE BASADO EN LA SENSIBILIDAD DEL MTODO ANALTICO DE DETERMINACIN DEL RESIDUO En este enfoque el lmite de residuo de limpieza es el lmite de deteccin del mtodo analtico. Considerando que el lmite analtico es muy inferior al del lmite de residuo, este puede ser un enfoque viable en los casos donde el peligro de contaminacin y sus consecuencias son de naturaleza crtica. Sin embargo, para la mayora de las situaciones de limpieza una limpieza extrema no est justificada. El costo de una limpieza extrema puede superar el costo de un producto por lo que sera ilgica y poco prctica. La decisin de considerar el lmite de deteccin del mtodo analtico como el lmite de residuo de limpieza es puramente del fabricante, el cual debe evaluar factores como la naturaleza del producto y la naturaleza y uso del otro producto a elaborar posteriormente. En ocasiones el valor del lmite aceptable de residuo calculado para la muestra de limpieza (L3) es menor que el lmite de deteccin del mtodo analtico. En esta situacin debe buscarse otra tcnica de anlisis o mejorar el instrumental de anlisis. Por ejemplo, si es una tcnica por cromatografa lquida de alta resolucin se puede aumentar la ganancia del detector o inyectar ms volumen de muestra, etc. Afortunadamente el valor de L3 no es esttico sino que se puede influir sobre l para incrementarlo, modificando el procedimiento de muestreo y anlisis del residuo. Esto se puede lograr al muestrear grandes reas de superficies del equipo o desorbiendo el hisopo en pequeos volmenes de disolvente. Tanto al muestrear grandes reas como al desorber la muestra en pequeos volmenes se puede disminuir el factor de recobrado,

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lo cual adiciona incertidumbre a la determinacin del residuo. Cuando no existe una tcnica de anlisis lo suficientemente sensible se debe establecer un compromiso entre la posibilidad de aumentar el LAR (L3) y la disminucin del factor de recobrado. Una buena idea para aumentar L3 hasta superar el lmite de deteccin de la tcnica es desorber el residuo del hisopo en una cantidad adecuada de disolvente, por ejemplo 5 mL. Luego concentrar la muestra por evaporacin total del disolvente y redisolver en una cantidad menor, por ejemplo 2 mL 6.3.7 LMITE BASADO EN LA CAPACIDAD DEL PROCESO DE LIMPIEZA El establecimiento del lmite de residuo como el lmite de capacidad del proceso de limpieza tiene lugar cuando se dispone de suficientes resultados del control del procedimiento de limpieza dentro de un intervalo inferior al valor calculado del lmite. El fabricante puede establecer el LAR por debajo de L3 en dependencia de la capacidad del proceso de limpieza sin temor a estarlo sobre estimando o exigiendo una limpieza excesiva, ya que debe limpiarse tanto como razonablemente pueda lograrse. Si el productor no tiene suficientes datos sobre la capacidad de un proceso de limpieza entonces debe establecer un proceso de limpieza que logre resultados inferiores al lmite de residuo calculado (L3). Nunca se debe establecer el LAR en la capacidad del proceso de limpieza si este produce resultados mayores que L3. Un proceso de limpieza validado con suficientes resultados analticos de muestras de limpieza puede ser una herramienta til para el monitoreo de rutina, pues en dependencia de los valores se puede escoger un rango de alerta y otro para tomar medidas dentro del proceso. Por ejemplo, si histricamente se cuenta con un residuo de principio activo en el agua de enjuague menor a 0,3 p.p.m y el valor calculado de L3 es 1,4 p.p.m., se puede establecer el valor de 0,6 p.p.m como un nivel de alerta y el de 0,8 p.p.m como

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alarma para comenzar a tomar medidas. As, si despus de la limpieza se obtienen valores alrededor de 0,8 p.p.m el productor debe preocuparse porque los valores del agua de enjuague se obtuvieron fuera del intervalo acostumbrado. Si en el prximo lote todo est normal, entonces no hay ningn problema. Si por el contrario el agua de enjuague del prximo lote vuelve a dar fuera de lo normal, entonces se debe iniciar una investigacin porque algo diferente est ocurriendo en el proceso de limpieza, en el proceso de produccin, en la tcnica de muestreo o en el procedimiento de anlisis. En ningn caso se rechaza el lote mientras los resultados de las muestras de limpieza sean menores que L3. De esta forma la capacidad del proceso puede ser una herramienta inestimable para controlar y asegurar la consistencia del procedimiento de limpieza. A efectos de validacin y buscando siempre el peor caso, interesa: Que el tamao del lote A sea el mximo (Pmx) que se puede fabricar en el equipo puesto que as ceder la mxima contaminacin. Si no es as puede incluirse un factor de correccin f en los clculos (f=Pmx/PA) cuando el equipo se ensucia ms con el tamao de lote mximo (Pmx) que con el tamao de lote prototipo (PA). Que el tamao del lote del producto siguiente sea el mnimo que se puede fabricar en el equipo puesto que as podr contener la mxima concentracin de contaminante. Cuando se efecta la validacin de un equipo determinado se selecciona dos o tres procedimientos de muestreo diferentes y se calcula mediante las diferentes frmulas las ppm de contaminante para cada sistema de muestreo. 6.4 PROTOCOLO DE VALIDACIN El protocolo de validacin de limpieza es un documento previo que sirve como base de trabajo para llegar a establecer un mtodo de limpieza rutinario.

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Esquemticamente un protocolo de validacin es un programa experimental multidisciplinar preparado y aprobado por todos los profesionales de las diversas reas relacionadas con el tema: Produccin, Investigacin y Desarrollo, Aseguramiento de la calidad y Control de Calidad. El protocolo debe incluir la definicin del sistema o equipo a limpiar y la descripcin o referencia del mtodo a seguir que ser considerado como provisional. Un protocolo de validacin de limpieza debe constar de las siguientes partes: a) Objetivo b) Alcance c) Responsabilidades d) Procedimiento de limpieza a validar: descripcin del mtodo de limpieza o modus operandi a seguir de los operarios. Aqu debe mencionarse el lugar donde est ubicado el equipo, hay que describir el rea donde est ubicado el equipo, indicar los materiales de que est construida; una breve descripcin del equipo, (tamao, capacidad), el material del cual est construido. Si la limpieza es manual deben sealarse los materiales y el equipo que se utilizan para realizarla, de que material son y muy importante es incluir la ficha tcnica y de seguridad del producto de limpieza (jabn) o desinfectante e) Seleccin de las condiciones experimentales del protocolo Parmetros fsicos de la validacin Posibles contaminantes a monitorear. Procedimientos de muestreo Mtodos analticos Lmites de aceptacin de residuos Seleccin final de los productos y las condiciones con las que se realizar el protocolo.

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f) Recopilacin de datos, informes y conclusiones g) Frecuencia de validacin y revalidaciones 6.5 MTODOS DE TOMA DE MUESTRA Se explicarn por separado los muestreos para detectar contaminacin del tipo fsico-qumico, de los muestreos para descartar contaminacin del tipo microbiolgica. 6.5.1 Muestreos para detectar contaminacin fsico-qumica: 6.5.1.1 Mtodo del hisopado: es el procedimiento ms real pues es una muestra ms representativa, debido a que se arrastran todos los contaminantes que no han sido eliminados con la limpieza. Para este mtodo se utilizan hisopos de algodn, secos o hmedos con agua o con disolvente orgnico de acuerdo al residuo que se pretende detectar. La validacin del mtodo analtico que determine los residuos arrastrados con esta operacin debe incluir necesariamente un ensayo de recuperacin para evidenciar su exactitud. Si el % de recobro es bajo se debe emplear un factor de correccin en el clculo de los residuos. 6.5.1.2 Muestreo del agua de enjuague o disolvente del lavado final: Este debera de ser un control habitual en reactores, depsitos y equipos utilizados para la fabricacin de formas farmacuticas lquidas y semislidas. Para la validacin puede mencionarse que no es conveniente utilizar el agua de enjuague ya que sta es parte del proceso de lavado, por lo tanto no debe hacerse la toma de muestra de este lavado sino que una vez el equipo est limpio y enjuagado, se debe proceder a pasar agua por el equipo. En esta agua de enjuague se determinaran los residuos de analito. Si el agua no es un buen disolvente de los potenciales contaminantes del equipo se sustituir por un solvente orgnico.

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6.5.1.3

Muestreo de placebo: Es utilizado para equipos donde se fabrican formas farmacuticas slidas, simulando las condiciones de uso una vez limpio el equipo. Es una buena manera de conocer la cantidad de analito que puede pasar al siguiente producto a procesar.

6.5.1.4

Muestreos especiales de equipos dosificadores: En equipos como tableteadoras, encapsuladoras, dosificadoras de polvos, llenadoras de lquidos, llenadoras de tubos es sumamente importante comprobar la limpieza de los elementos dosificadores puesto que son puntos crticos. En casos como estos puede efectuarse el procedimiento de muestreo con hisopado, pero si son puntos muy inaccesibles, que es lo ms comn, deben hacerse muestreos especiales:

Por inmersin: este proceso se realiza, sumergiendo las piezas desmontables y de difcil acceso a la limpieza en un volumen conocido de soluciones hidroalcohlicas, tras un tiempo de contacto y agitacin se toma la muestra para el control analtico de residuos de contaminante. Generalmente se realiza este proceso cuando el procedimiento de limpieza seala que deben desmontarse tales piezas.

Enjuagado (Lquidos) o barrido con placebo (slidos) de los elementos dosificadores. Este mtodo consiste en pasar agua o excipientes inertes por los elementos de dosificacin, tomando las primeras fracciones para el control analtico de los residuos de contaminante. Se practica este mtodo cuando el procedimiento de limpieza no obliga a desmontar las piezas de dosificacin o no es posible hacerlo.

6.5.1.5

Muestreo del lote siguiente: Si tras fabricar un lote de producto A se fabrica un lote de producto B, es posible buscar residuos del principio activo de A en B como indicativo de la eficacia de la limpieza. Para ello, se toma una muestra

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del lote de producto B a granel o bien de las primeras unidades producidas (peor caso). Sin embargo, a efectos de validacin no es demasiado aconsejable ya que el mtodo analtico para la determinacin del analito A puede presentar interferencias debidas a los componentes del producto B, lo que supone una disminucin de sensibilidad y un esfuerzo considerable de validacin analtica.

6.5.1.6

Muestreos especiales del aire ambiental y de las superficies de paredes y suelos: En el caso de instalaciones destinadas a la fabricacin de productos txicos, hormonales, citostticos, sensibilizantes, etc., o si existe la posibilidad de contaminacin cruzada con el aire ambiental de otros locales de la planta, puede ser necesario muestrear al aire (tcnica de impactacin sobre filtros de membrana) y las superficies de paredes y suelos (hisopos).

6.5.2 Muestreo para detectar contaminacin microbiolgica 6.5.2.1 Muestreo de la superficie del equipo: (solucin salina normal) se muestrea una superficie Mtodo con hisopos. Mediante hisopos estriles humedecidos con suero fisiolgico determinada, por lo general de 25 cm2. Posteriormente se siembra por estra en placa de Petri, en medio lquido o se filtra el lquido de extraccin en cuyo caso puede cuantificarse. Este mtodo presenta una baja recuperacin comparados con la de la placa Rodac (25 34% de recuperacin en superficies duras y secas, 47 63% en superficies duras y hmedas), por lo que se considera semi-

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cuantitativo. Tiene la ventaja de permitir el muestreo en puntos de difcil acceso. Los puntos de muestreo microbiolgico no deben coincidir exactamente con los de muestreo qumico para evitar contaminacin mutua. Mtodo de inmersin: en casos especiales se sumergen partes del equipo en volumen conocido de lquido estril el cual se puede sembrar directamente o se filtra a travs de membrana 0.45 que posteriormente se somete a incubacin. Mtodo con placas de contacto: (Rodac, Petrifilm, laminocultivo) La placa Rodac es una placa Petri modificada que contiene medio de cultivo slido y cuya superficie es ligeramente convexa. Una variante es el laminocultivo, con el medio depositado sobre una lmina rectangular. El petrifilm consiste en una doble pelcula que contiene medio deshidratado en su interior. La correlacin entre Rodac y Petrifilm es buena. La primera tiene la ventaja de que est listo para su uso y la segunda que, debido a su flexibilidad, permite el muestreo de superficies curvas e irregulares. Igualmente, tras muestrear con placas de contacto deben eliminarse los restos de medio de cultivo para evitar que sean un foco de contaminacin en el equipo. 6.5.2.2 Muestreo del agua o disolvente de lavado final Se efecta la filtracin por membrana de 0,45 m de un volumen conocido del agua de enjuagado final o del enjuagado a efectos de validacin. El recipiente utilizado para tomar la muestra, se esterilizar por calor seco durante una hora a 250C, especialmente para los ensayos de endotoxinas y ATP metra. 6.5.2.3 Muestreo del aire ambiental y de las superficies de las paredes y suelos.

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Para el muestreo de superficies se utilizarn placas de contacto o hisopos, ya descritos en el muestreo de las superficies de los equipos. Para el muestreo del aire ambiental se procedimientos siguientes: Mtodos cualitativos Mtodo de sedimentacin sobre placas estticas. Se emplean placas de Petri de 60 o 150 cm2 conteniendo medio de cultivo slido, que se exponen destapadas durante un perodo de tiempo adecuado (1 a 4 horas) en un punto determinado. Los microorganismos del aire transportados por las partculas se depositan aleatoriamente en funcin de su tamao y de las corrientes de aire sobre la superficie del agar. Los valores obtenidos despus del perodo de incubacin no son cuantitativos y no pueden compararse con los lmites recomendados por las normativas. Slo sirven para comparar la evolucin de contaminantes de un mismo punto de la zona. Mtodos cuantitativos Filtracin por membrana. Se aspira un volumen determinado de aire a travs de un filtro de membrana en el que son retenidos los microorganismos. Los filtros de gelatina dan a los grmenes mayores posibilidades de supervivencia que los de otro material y aseguran un estrecho contacto con el medio nutritivo. Posteriormente, se siembra en un medio de cultivo, se incuba y se cuantifica la contaminacin. Requiere elevada destreza tcnica por su mayor manipulacin y debe evitarse la desecacin del medio que originara prdida de viabilidad. Centrifugacin. Se hace pasar un determinado volumen de aire, que impulsa a los grmenes adheridos y las partculas de polvo hacia un medio de cultivo que se incuba directamente. Este mtodo proporciona buenos resultados en el caso de bajas concentraciones microbiolgicas. utilizar alguno de los

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Impactacin sobre medio slido: a) Hendidura en agar (slit to agar): consiste en una placa giratoria, conteniendo medio de cultivo, situada bajo un orificio fijo y en posicin radial. El instrumento est unido a una bomba de vaco que lleva un medidor del caudal de aire. Este aparato puede ser daado por polvos, por lo que debe tenerse cuidado en reas muy polucionadas. b) Cascada o tamiz: las partculas de aire se hacen impactar segn su tamao y mediante un sistema de vaco sobre placas conteniendo un medio de cultivo adecuado. La elevada velocidad de aire empleada en este aparato puede provocar deshidratacin del medio de cultivo.

Borboteo en medio lquido: se hace pasar un determinado volumen de aire a travs de un lquido de lavado (tampn o medio de cultivo) que posteriormente se filtra por membrana, incubndose en un medio de cultivo y en condiciones adecuadas. Es un mtodo caro y engorroso que no se utiliza rutinariamente. A causa del elevado flujo de aire, los agregados tienden a fragmentarse de manera que el contaje total obtenido es mayor que el nmero real de microorganismos. Debe tenerse en cuenta que algunos de estos mtodos a causa de la manipulacin requerida o por la propia tcnica de muestreo, pueden alterar los flujos laminares y las condiciones ambientales de la sala que se desea controlar. Es importante comprobar el ajuste de los apartados de muestreo y calibrarlos peridicamente, sea por parte del propio usuario o por el fabricante. De no ser as, pueden cometerse errores importantes al calcular los resultados.

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6.6 MTODOS ANALTICOS Se seleccionaran en base a los contaminantes que se desee monitorizar, se describirn a continuacin los mtodos que pueden utilizarse para detectar contaminacin fsico-qumica y para detectar contaminacin microbiolgica. 6.6.1 Mtodos para detectar contaminacin fsico-qumica 6.6.1.1 Mtodos fsicos y sensoriales se desmontan para realizar este control. Dependiendo del tipo de suciedad, la cantidad de contaminante presente en una superficie que no supera el control organolptico es del orden de 4 20 g/cm2 (equivalentes a 100 500 g/25 cm2). Una superficie limpia, tanto si est seca como si est hmeda, no debe contener ninguna materia extraa cuando se comprueba por alguno de los siguientes sistemas: No debe ser untuoso al tacto. Al frotar con un pauelo de celulosa o un trozo de algodn, no deben aparecer restos de suciedad. Debe ser prcticamente inodora. Mtodos visuales: control de partculas visibles y de turbidez o espuma Mtodos instrumentales: conteo de partculas inferiores a 50 m por microscopio o contador de partculas. 6.6.1.2 Mtodos qumicos y fsico-qumicos De no haber interferencias importantes debidas a la naturaleza de la muestra, se pueden emplear mtodos poco selectivos como 6.6.1.1.2 Control del agua del ultimo lavado o enjuague a efectos de validacin 6.6.1.1.1 Control organolptico y visual del equipo o de partes del equipo que

6.6.1.2.1 Mtodos cuantitativos especficos

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espectrofotometra UV-Vis, fluorimetra, polarografa, o mtodos electroanalticos. Si existen interferencias se deben utilizar mtodos cromatogrficos que son mucho ms selectivos como: cromatografa de capa fina, cromatografa de gases o cromatografa lquida. En caso de que el analito sea una sustancia inorgnica es posible espectroscopa de absorcin atmica. Los mtodos cuantitativos deben estar validados por tratarse de un anlisis de trazas los parmetros fundamentales a determinar sern la especificidad, limite de cuantificacin, tambin la linealidad y precisin. 6.6.1.2.2 Mtodos cuantitativos poco especficos Existen otros mtodos que no son especficos en el sentido en que no determinan a un analito determinado, que son fciles de realizar y en muchos casos son suficientes. Anlisis de Carbono orgnico total. (TOC) detecta partes por billn de analito (ppb), pero su uso se limita a muestras solubles en agua, se puede utilizar en muestras del agua de enjuague de los equipos. Slidos totales: Material no voltil orgnico e inorgnico presente en las agua de enjuague o muestras de hisopo, esta informacin es muy limitado debido a su inespecificidad. pH: detecta presencia de residuos cidos o alcalinos en las aguas de enjuague, esta determinacin es muy til para el control de residuos de detergente. Osmolalidad o Conductividad. Detectan la presencia de los residuos de sustancias inicas en medio acuoso.

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6.6.1.2.3 Mtodos cualitativos Se utilizan para detectar la presencia de restos de detergentes o agentes sanitizantes junto con los ya comentados de pH y conductividad. Son reacciones de coloracin o precipitacin especficas que varan en funcin de los agentes a investigar. Deben validarse para los parmetros especificidad y lmite de deteccin. Las reacciones que no sean suficientemente sensibles no deben utilizarse. Por ejemplo: 1. Reacciones de precipitacin: los detergentes fosfatados dan positivo a la reaccin con sales de bario o nitrato de plata, etc. 2. Reacciones de coloracin: los detergentes fosfatados dan positivo a la reaccin con azul de molibdeno, los sanitizantes yodados dan positivo con almidn soluble, los sanitizantes clorados dan positivos con ortotoluidina, etc.

6.6.2 Mtodos analticos para determinar contaminacin microbiolgica 6.6.2.1 Aislamiento de colonias: Las muestras procedentes del muestreo de superficies (placas de contacto, hisopos), de inmersin, agua de lavado y ambiente se incuban directamente o bien tras filtracin por membrana segn los casos. 6.6.2.2 Identificacin cualitativa de los microorganismos patgenos Las colonias sospechosas se identificarn por procedimientos especficos. Como grmenes indicadores de patogenicidad interesan especialmente: 3. Staphylococcus aureus. 4. Escherichia coli. 5. Pseudomonas aeruginosa y P. cepacia

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6. Salmonella spp. 7. Candida albicans. En el caso de aislar repetidamente un mismo tipo de contamnate o, cuando interese investigar un tipo determinado de microorganismos, se utilizarn directamente medios de cultivo y temperaturas de incubacin selectivos para dicha especie.

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VII. DISEO METODOLOGICO 1) Tipo de estudio La investigacin es de tipo: Bibliogrfica: Se realizar una exhaustiva investigacin bibliogrfica para recopilar la suficiente informacin referente al tema de Validacin de limpieza de equipos. Transversal: el presente trabajo se enfocar en el estudio del problema en el presente, durante el perodo de Noviembre de 2012 hasta Marzo de 2013. 2) Investigacin Bibliogrfica Se visitaran las siguientes bibliotecas: Biblioteca de Facultad de Qumica y farmacia Dr. Benjamn Orozco Biblioteca Central de la Universidad de El Salvador Biblioteca de la Universidad Salvadorea Alberto Masferrer Biblioteca Virtual de la Asociacin de Universidades Privadas de El Salvador. Para la presente investigacin, se elaborar una gua tcnica para la validacin de mtodos de limpieza de equipos utilizados en la fabricacin de formas farmacuticas lquidas orales no estriles. En la que se recopilar la informacin bsica para validar procesos de limpieza de equipos. Esta constara de las siguientes partes: 1. 2. Introduccin Objetivo

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3. 4. 5.

Alcance Definiciones Requisitos generales 5.1 Pasos para la validacin 5.1.1 Establecimiento del protocolo para la validacin del mtodo de limpieza. 5.1.2 Realizacin de la validacin 5.1.3 Elaboracin del informe de validacin. 1. Introduccin: breve descripcin-resumen de lo que engloba la gua, para introducir al lector al tema en cuestin. 2. Objetivo: describir el propsito principal de la gua. 3. Alcance: aqu se definirn o detallarn para que laboratorios, reas, equipos, y que productos es aplicable la gua. 4. Definiciones: se incluir un listado de trminos con su significado que se son frecuentes en el mbito de validacin, pero que probablemente el lector no conozca para facilitar la comprensin del tema. 5. Requisitos generales: 5.1 Pasos para la validacin 5.1.1 Establecimiento del protocolo de validacin: como se menciona en el marco terico, este es un programa experimental multidisciplinar, documento previo que sirve como base de trabajo para llegar a establecer un mtodo de limpieza rutinario. En este se especificaran el proceso experimental de limpieza a evaluar, para que equipo o equipos es aplicable (lo cual se incluye en el alcance), el tipo de toma de muestra a emplear, parmetros de desempeo a evaluar, segn la metodologa analtica a disponer y los criterios de aceptacin. 5.1.2 Realizacin de la validacin

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5.1.3 Elaboracin del informe, conclusiones, revalidacin.

VIII. PRESUPUESTO Insumos -------------------------------------------------- $ 350.34 Papelera e impresiones------------------------------- $ 55.00 Transporte ------------------------------------------------ $ 35.00 Empastados ----------------------------------------------- $ 24.00 Otros ------------------------------------------------------- $ 185.00 Total $ 649.34

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XI. CRONOGRAMA

CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES

2012 EVA FECHA 1 2 I 3 4 5 6 7 ACTIVIDAD SELECCIN DEL TEMA INVESTIGACION DEL ANTEPROYECTO ASESORIA REDACCION DEL ANTEPROYECTO PRESENTACION DEL ANTEPROYECTO ANALISIS DE LA INFORMACION RECOPILADA INTERPRETACION DE RESULTADOS, DISCUSION, CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES 2013 9 10 11 12 PRESENTACION DE LA II ETAPA REDACCION DEL INFORME FINAL PRESENTACION DEL TRABAJO FINAL DEFENSA PUBLICA (III ETAPA) ENE FEB MAR ABR MAY JUN JUL AGO SEP OCT NOV DIC

X. BIBLIOGRAFIA 1. Gonzlez Gonzlez, CD, Validacin retrospectiva y control estadstico de procesos en la Industria Farmacutica, Universidad de Chile, Tesis de grado, Licenciatura en Qumica y farmacia. Santiago de Chile, Chile, 2005. Disponible en: www.scribd.com 2. Hidalgo Rodrguez, AI. Validacin del mtodo de limpieza de la envasadora de polvos DOS MICRO despus de la produccin de Bencilpenicilina Sdica en Betapharma S.A. Tesis de grado, Bioqumico farmacutico. Riobamba, Ecuador, 2010. Disponible en: www.scribd.com 3. Jimnez Arias, AC. Validacin del mtodo de limpieza de la encapsuladora automtica Bosh luego de la produccin de cpsulas de Dicloxacilina en Betapharma S.A. Tesis de grado para optar al ttulo de Bioqumico farmacutico. Riobamba, Ecuador, 2010. Disponible en: www.scrib.com 4. Lpez Marzo AM, Pierre Marzo RA. Establecimiento del lmite aceptable para el residuo de limpieza en los equipos de produccin de la Industria farmacutica. Revista Cubana Farmaceutica 2005; 39(3). Disponible en: http://www.bvs.sld.cu/revistas/far/vol39_3_05/far10305.htm 5. Merino Chvez, MA. Validacin del mtodo de limpieza de la envasadora de polvos Mateer Burt para fabricacin de amoxicilina en Betapharma S.A. Tesis de grado, Bioqumico farmaceutico. Riobamba Ecuador, 2010. Disponible en: www.scribd.com 6. Guide for to inspections validation of cleaning process. Disponible en : www.fda.gov {Consultada el 06/03/2012}. 7. Validacin de la limpieza de equipos en la Industria farmaceutica. Disponible en: http://blogsdm.files.wordpress.com/2009/11/4921455validacion-limpieza-con-toc.pdf 8. Sanz Snchez E. Validacin de limpieza en la Industria Farmacutica I y II Validacin GMP/ GLP. 69-72. www.farmaindustrial.com Disponible en:

9. Justificacin de lmites para validacin de limpieza en la fabricacin de ingredientes activos farmacuticos. GMP news, Mayo 2007. Disponible en : www.scribd.com 10. Agencia Nacional de vigilancia sanitaria. Gerencia de Inspeccin de Medicamentos y productos. general

Validacin de limpieza. Brasilia, Brasil, 2006.

XI. ANEXOS Anexo 1: Formato de protocolo de validacin de limpieza