Introduo

O mtodo tintorial predominante utilizado em bacteriologia o mtodo de Gram. A bacterioscopia, aps colorao pelo mtodo de Gram com diagnstico presuntivo de triagem, ou at mesmo confirmatrio em alguns casos, constitui pea importante e fundamental na erradicao e no controle das Doenas Sexualmente Transmissveis (DST). Essa tcnica simples, rpida e tem capacidade de resoluo, permitindo o correto diagnstico em cerca de 80% dos pacientes em carter de pronto atendimento em nvel local. Os custos com investimento e manuteno so consideravelmente baixos diante da eficcia alcanada com os resultados imediatos dos testes. Essa tcnica requer instalao simples, necessitando apenas de uma sala pequena com disponibilidade de gua e gs, onde dever ser instalado um balco com pia e um bico de Busen, eventualmente substitudo por uma lamparina ou espiriteira. So ainda necessrios: microscpio com objetiva de imerso e bateria para a colorao de Gram. Os corantes devem ser preparados pelo prprio laboratrio ou por um laboratrio habilitado que assegure a qualidade do produto. Finalmente, e mais importante, so necessrios tcnicos de laboratrio treinados, responsveis e conscientes do valor do seu trabalho. As interpretaes dos esfregaos corados pelo Gram envolvem consideraes relacionadas com as caractersticas da colorao, tamanho, forma e agrupamento das clulas. Estas caractersticas podem ser influenciadas por vrios fatores, incluindo idade da cultura (esfregao de cultura), meio de cultivo utilizado, atmosfera e incubao e presena de substncias inibidoras. A colorao de Gram recebeu este nome em homenagem a seu descobridor, o mdico dinamarqus Hans Cristian Joaquim Gram. Em 1884, Gram observou que as bactrias adquiriram cores diferentes, quando tratadas com diferentes corantes. Isso permitiu classific-las em dois grupos distintos: as que ficavam roxas, que foram chamadas de Gram-positivas, e as que ficavam vermelhas, chamadas de Gram-negativas. Aps descrio do mtodo, inmeras propostas de modificao foram feitas. Neste curso voc vai conhecer a tcnica, os corantes e os procedimentos para a correta realizao da colorao de Gram, recomendados pelo Departamento de DST, Aids e Hepatites Virais do Ministrio da Sade.

Tcnicas de colorao de Gram

Aula 01 - Introduo