1 AULA PRTICA DE MICROBIOLOGIA

COLORAO DE BACTRIAS PELO MTODO DE GRAM Material: - Esfregao bucal - Lminas bem limpas - Swab - Soluo fisiolgica - Bateria de Gram: cristal violeta, lugol, lcool-acetona, fucsina. Tcnica: 1. Com o auxlio do swab, fazer esfregaos bem finos sobre a lmina de microscopia. Esperar secar. 2. Fixar os esfregaos, passando a lmina trs vezes sobre a chama do bico de Bunsen. 3. Deixar a lmina esfriar e cobrir os esfregaos com a soluo de cristal violeta. Esperar 1 minuto. 4. Escorrer a violeta genciana e cobrir os esfregaos com lugol. Esperar 1 minuto. 5. Escorrer o lugol e descorar os esfregaos pelo lcool-acetona. Para isto, deixe o lcool cair, gota a gota, sobre a lmina, mantendo-a inclinada. 6. Lavar a lmina em gua corrente. 7. Cobrir os esfregaos com a soluo de fucsina, esperar de 30 segundos a 1 minuto. 8. Lavar a lmina em gua corrente. Secar com auxlio de papel de filtro. 9. Observar ao microscpio.

2 Lmina Forma:________________ Gram:_________________

Lmina Forma:________________ Gram:_________________

3 PROVA PARA IDENTIFICAO DE BACTRIAS PROVA DA CATALASE PRINCPIO A catalase uma enzima que decompe o perxido de hidrognio (H 2O2) em gua e oxignio. UTILIDADE Para Staphylococcus, Streptococcus, Enterococcus, Listeria, Corynebacterium, Micrococcus, Bacillus, Moraxella catarrhalis. INOCULAO
1.

Colocar uma gota de perxido de hidrognio (gua oxigenada) 3% sobre uma lmina; Com auxlio de uma ala, agregar a colnia em estudo na gota de perxido de hidrognio.

2.

INTERPRETAO + Positivo: Presena imediata de bolhas - a produo de efervescncia indica a converso do H2O2 em gua e oxignio gasoso. - Negativo: Ausncia de bolhas ou efervescncia.