CBTis 103

Materia: bioqumica Alumnos: Barrios Hernndez Nadia Gabriela Flores Gerardo Claudia Marlene Garca Hernndez Yadira Gmez Hernndez lluvia Jazmn Prez Jernimo Yazmin Alejandra Rodrguez Pea Carlos Emmanuel Maestra: Elizabeth lima lima Equipo: 3 Semestre: 6 grupo: AVQ

FUNDAMENTO
Las protenas debido al gran tamao de sus molculas forman con el agua soluciones coloidales que pueden precipitar formndose cogulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70C o al ser tratadas con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc. La coagulacin de las protenas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalizacin por los agentes indicados que al actuar sobre la protena la desordenan por destruccin de sus estructuras secundaria y terciaria.

RECONOCIMIENTO DE PROTENAS

Coagulacin de protenas
Para conseguir ms volumen puede prepararse para toda la clase una dilucin de clara de huevo en agua de forma que quede una mezcla aun espesa

Desarrollo:

-Colocar en un tubo de ensayo una pequea Cantidad de clara de huevo

-Aadir 5 gotas de acido actico

Aadir 5 gotas de acido acetico

-Calentar el tubo a la llama del mechero

Observaciones:
Primero colocamos una pequea cantidad de clara de huevo en el tubo, le agregamos 5 gotas de cido actico con el cual no hubo cambio alguno. Despus lo colocamos en el mechero por 2 minutos aproximadamente, vimos los cambios al momento de calentarse que la muestra se haca ms brumosa, como si tuviera una especie de masa dentro del tubo, eso era la coagulacin de protenas, el proceso fue muy rpido, otra observacin fue que sali mucho humo y tena un olor poco agradable y as conclu la prctica

Conclusiones:
La coagulacin de la protena de huevo es la conversin del huevo lquido a un estado slido o semislido, generalmente acompaado de calentamiento, as como lo calentamos en el mechero y dio como resultado a una especie de masa, esto es la coagulacin de protenas.

Reacciones coloreadas
Reaccin xantoproteica
Es debido a la formacin de un compuesto aromtico pintado de color amarillo, cuando las protenas son tratadas con acido ntrico concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas protenas con aminocidos portadores de grupos bencnicos, especialmente en presencia de tirosina, una vez realizada la prueba se neutraliza con un alcalivina a un color anaranjado oscuro

Desarrollo:

-Aadir 1cc de HNO3 concentrado -poner en el tubo de ensayo 2cc de solucin problema clara de huevo

-calentar al bao mara a 100c

- enfriar en agua fra

- aadir gota a gota una disolucin de

sosa al 40%

Observaciones: AL aadir el ml de HNO3 concentrado a la clara de huevo dio como resultado la formacin de un compuesto de color amarillo ; se calent a bao mara a 100C, se enfri en agua fra y se aadi de gota a gota la disolucin de sosa al 40% obtenindose un color anaranjado oscuro. Conclusin: La reaccin xantoproteica dio como resultado positivo, ya que al neutralizar la muestra con disolucin de sosa al 40% viro a un color anaranjado oscuro, esto significa que la muestra es portadora de grupos benceticos, con presencia de tirosina.

Reaccin de biuret
La producen las pptidos y las protenas pero no los aminocidos, ya que se debe a la presencia del en lance peptidico (-CO-NH-) que se destruye al liberarse los aminocidos cuando una protena se pone en contacto con un lcali concentrado se forma una sustancia compleja denominado biuret

Desarrollo:

-Tomar un tubo de ensayo y poner unos 3cc e albumina de huevo

-Aadir 2cc e solucin e hidrxido sdico al 20%

-A continuacin 4 o 5 gotas de solucin de sulfato cprico diluida al 1%

-Debe aparecer una solucin violeta

Observaciones:
Al agregar el hidrxido sdico al 20% solo se pudo observar que la llama de huevo se separaba una poco Pero al agregar gota a gota solucin de sulfato cprico diluido al 1% cambiaba la llama de huevo a color violeta

Conclusin:
Se detecta la presencia de protenas, pptidos cortos y otros compuestos con dos o ms enlaces peptdicos en sustancias de composicin desconocida. Est hecho de hidrxido potsico (KOH) y sulfato cprico (CuSO4), junto con tartrato de sodio y potasio (KNaC4H4O64H2O). El reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de protenas, y vira a rosa cuando se combina con polipptidos de cadena corta. El hidrxido de potasio no participa en la reaccin, pero proporciona el medio alcalino necesario para que tenga lugar.

Reaccin de los aminocidos azufrados

Se pone de manifiesto por la formacin de un precipitado de sulfuro de plomo. Se basa esta reaccin en la separacin mediante un lcali, del azufre de los aminocidos, el al reaccionar con una solucin de acetato de plomo forma el sulfuro de plomo

Desarrollo:

-Poner en el tubo de ensayo de 2 a 3cc de albumina de huevo

-Aadir 2cc de solucin de hidrxido sdico 20%

-Aadir 10gotas de solucin de acetato de plomo al 5%

-Calentar el tubo hasta ebullicin

Observaciones:
Se puso 3 ml de clara de huevo en tubo de ensayo y se le agrego 2 ml de NaOH al 20% y observamos que rpidamente se vio la separacin de la clara del huevo y el NaOH y se le agrego 10 gotas de acetato de plomo y la separacin que exista en la parte inferior que era el NaOH cambio a blanco se calent a ebullicin y rpidamente se observo el cambio de coloracin a negro y con centro negro y nos dimos cuenta que haba formado sulfuro de plomo

Conclusin:
El cambio de color se debe a la formacin de un precipitado de aspecto negruzco llamado sulfuro de plomo, el cual fue el producto final de la reaccin de ovoalbmina con hidrxido de sodio y acetato de plomo, de manera indirecta, es decir, mediante la obtencin de un compuesto derivado de azufre, podemos comprobar que la ovoalbmina contiene aminocidos azufrados (cistena o metionina).

Cuestionario
1.- Cules son los Aminocidos (fenolicos) que forman parte de las protenas? (formulas) R= Serina: OH-CH2-CH (NH2)-COOH Treonina: OH-CH (CH3)-CH (NH2)-COOH Tirosina: OH-C6H4-CH2-CH (NH2)-COOH 2.- Cules son los agentes que ocasionan la desnaturalizacin de las protenas? R=agentes fsicos: pH, temperatura Agentes qumicos: congelamiento, presin Agentes mecnicos: alcohol, acetona 3.- Qu le sucede a la protena desnaturalizada? R=La mayora de las protenas pierden su funcin biolgica cuando estn desnaturalizadas, por ejemplo, las enzimas pierden su actividad cataltica, porque los sustratos no pueden unirse ms al centro activo, y porque los residuos del aminocido implicados en la estabilizacin de los sustratos no estn posicionados para hacerlo 4.- Qu le pasa estructuralmente a las cadenas proteicas? R=hay rompimiento de enlaces ya sean hidrofobicos, puentes de hidrogeno o inicos 5.- Anota las reacciones de la prctica. -Coagulacin de protenas: Protena con aminocido aromatico+C2H4O2+CALOR=coagulacin de protenas -Reaccin xantoproteica:

-Reaccin de biuret: O=C(NH2)2 + O=C(NH2)2 ----> O=C(NH2)-NH-C(NH2)=O + NH3.

-Reaccin de los aminocidos azufrados: cys+NaOH----->H2S (acido sulfhdrico) ---->Pb(CH3COO)2----->SPb (precipitado) Donde: Cys= al aminocido cistena Pb (CH3COO)2= acetato de plomo SPb= sulfuro de plomo

Conclusin general:
Las protenas son compuestos qumicos muy complejos que se encuentran en todas las clulas vivas: en la sangre, en la leche, en los huevos En todas se encuentran un alto porcentaje de nitrgeno, as como de oxgeno, hidrgeno y carbono. En la mayor parte de ellas existe azufre, y en algunas fsforo y hierro. Posteriormente al reconocimiento de las protenas se precedi a la siguiente practica denominada desnaturalizacin de la protena por pH extremos y temperatura, en este caso utilizamos una clara de huevo, la practica tuvo como objetivo Observar el comportamiento de una protena globular hidrosoluble en diferentes medios para relacionar los cambios con su estructura molecular, al ser expuesto a temperaturas elevadas en el bao mara