CINCO REINOS DE LA NATURALEZA

Rango de tamaos que presentan las clulas procariotas en relacin a otros organismos y biomolculas

CELULAS EUCARIOTAS Y PROCARIOTAS

COMPONENTE DE LA CLULA Ncleo DNA extracromosmico Organelos en el citoplasma PROCARIOTAS Sin membrana, con un solo cromosoma circular A menudo presente en forma de plsmidos Ninguno EUCARIOTAS Recubiertos de membrana, diversos cromosomas individuales En organelos Mitocondrias (y cloroplastos en organismos fotosintticos) aparato de Golgi Capa semipermeable que no posee las funciones de la membrana procariota No hay peptidoglucano (en algunos casos existe celulosa) Por lo general presente 80S en el retculo endoplsmico

Membrana citoplasmtica

Pared celular

Esteroles Ribosomas

Contiene enzimas para la respiracin; secrecin activa de enzimas; sitio de la sntesis de fosfolpidos y DNA Capa rgida de peptidoglucano (ausente en Mycoplasma) Ausente (excepto en Mycoplasma) 70 S en el citoplasma

Comparacin de clula eucariota y procariota

Tema 2

TINCIN DE GRAM

BACTERIAS GRAM POSITIVAS BACTERIAS GRAM NEGATIVAS

FORMAS TIPICAS
Cocos Bacilos Espirilos Vibrios Otras formas:
Filamentos Anillos casi cerrados Con prolongaciones (prostecas)
Tema 3

FORMAS TIPICAS

AGRUPACIN DE COCOS

ESTRUCTURA BACTERIANA

CPSULA BACTERIANA

CAPSULA CONTRA FAGOCITOSIS

1.2.3.-

4.-

5.-

6.-

CAPSULA CONTRA FAGOCITOSIS

MICROORGANISMOS ENCAPSULADOS

Cryptococcus neoformans.

Imagen a microscopa ptica de la cpsula del neumococo (Streptococcus pneumoniae)

Cpsulas de neumococo observadas con tincin negativa (tinta china)

CPSULA Y SUS FUNCIONES

mejora difusin nutrientes proteccin contra la desecacin proteccin frente a la predacin proteccin contra agentes antibacterianos adhesin a sustratos

ESTRUCTURAS EXTRACELULARES

Estructuras extracelulares bacterianas: 1-CPSULA 2-GLICOCLIX (capa mucosa) 3-SLIME (capa de limo)

La biopelcula que cubre las superficies dentarias recibe el nombre de placa bacteriana

PARED BACTERIANA

Paredes de las eubacterias

Peptidoglucano: composicin qumica

Repeticiones (n=10-100) de una unidad disacardica, unida a su vez a un tetrapptido Distintas cadenas de PG se unen entre s por determinados enlaces peptdicos entre tetrapptidos de cadenas diferentes

PEPTIDOGLUCANOS EN LA PARED BACTERIANA

GRAM POSITIVAS

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GRAM NEGATIVAS

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REPRESENTACION GRAFICA DE LA TINCION DE GRAM

Gram positivas
fijacin Cristal violeta

Gram negativas

Lugol decoloracin safranina

BACTERIAS GRAMPOSITIVAS Y GRAMNEGATIVAS

Bacilo grampositivo

Cocos gramnegativos

Bacilos Gramnegativos

Cocos grampositivos

ESPACIO PERIPLSMICO

PORINAS

LIPOPOLISACRIDO LPS

Composicin 1) Un ncleo (CORE, clave para la viabilidad de la bacteria) 2) Antgenos O polisacridos 3) Lpido A (El lpido A es el responsable de la actividad endotxica del LPS, por lo tanto esencial para la viabilidad de la bacteria)

BACTERIAS GRAMPOSITIVAS Y GRAMNEGATIVAS

Caractersticas Gram positivas ausente gruesa ausente presente ausente cido teicoico Esporulacin Gram negativas presente delgada presente Lipopolisacridos Endotoxina

Membrana externa
Pared celular

presente algunas presente a veces sensible

ausente ausente presente a veces resistente

Cpsula Lisozima Actividad penicilinas

> susceptible

< susceptible

BACILOS CIDO ALCOHOL RESISTENTES (BAAR)

(Fotografa reproducida por cortesa de la Universidad de Iowa, EE.UU.) Coloracin de Ziehl-Neelsen obtenida a partir de un esputo x 400, mostrando bacilos acido alcohol resistentes, correspondientes a M. tuberculosis Bacilos de M. paratuberculosis teidos mediante Ziehl-Neelsen en frotis de mucosa intestinal aparecen agrupados en forma caractersticas

Figura 1. Mecanismos de resistencia

FORMAS L

Comparacin de clulas normales de Bacillus subtilis a la izaquierda con las respectivas formas L a la derecha.
Crecimiento de formas pleomrficas (formas L) de Mycobacterium tuberculosis. Note la tincin ms oscura de las formas cocoides y los grandes globos translcidos. Fotografa con microscopio electrnico.

Membrana citoplasmtica

MEMBRANA CITOPLASMTICA

Una primera imagen de una membrana citoplsmica bacteriana. Por lo pronto salta a la vista la bicapa proteolipdica

Una primera imagen de una membrana citoplsmica bacteriana. Por lo pronto salta a la vista la bicapa proteolipdica

Membrana citoplsmica: composicin qumica

Bicapa proteolipdica que delimita al protoplasto Su proporcin protenas:lpidos es alta (80:20), mayor que en eucariotas Carece de esteroles (salvo excepciones), pero muchas bacterias poseen hopanoides (triterpenoides pentacclicos), que confieren parte de la rigidez a la membrana

Funciones de la membrana citoplsmica procariota

Barrera osmtica Lmite entre el protoplasto y el medio Permite el paso selectivo de molculas Interviene en procesos de obtencin de energa (respiracin, fotosntesis) Participa en biosntesis de componentes de envueltas (pared, membrana y cpsulas) Secrecin de protenas y otras macromolculas

BARRERA OSMTICA

Transporte de nutrientes
Tipos de transporte:
Pasivo inespecfico (difusin simple) Pasivo especfico (difusin facilitada) Activo

DIFUSIN SIMPLE
La difusin simple es el movimiento neto de molculas o iones de una zona de alta concentracin a otra de baja concentracin

DIFUSIN FACILITADA

Cuando tiene lugar la difusin facilitada la sustancia a transportar (por ejemplo, glucosa) se combina con una protena transportadora en la membrana citoplasmtica. Tales transportadores se llaman a veces permeasas.

TRANSPORTE ACTIVO

Al llevar a cabo el transporte activo la clula consume energa en forma de trifosfato de adenosina (ATP) para mover sustancias a travs de la membrana citoplasmtica.

SISTEMAS DE TRANSPORTE DE NUTRIENTES

TRANSLOCACIN DE GRUPOS

En la translocacin de grupos, una forma especial de transporte activo que tiene lugar exclusivamente en procariotas, la sustancia es alterada qumicamente durante su transporte a travs de la membrana.

CITOPLASMA

CITOPLASMA Y SU CONTENIDO

Citoplasma procariota es un sistema coloidal:

Fase dispersante: agua con sustancias en disolucin (citosol) Fase dispersa: macromolculas y partculas supramoleculares Material gentico: cromosoma (y plsmidos) Ribosomas Inclusiones y orgnulos (no en todas)

Contiene:

CITOPLASMA

El nucleoide

El ADN procariota no est rodeado por membrana Contenido en una regin discreta del citoplasma, llamada nucleoide El genoma est compuesto por

Normalmente un solo cromosoma Opcionalmente, adems, por plsmidos

CROMOSOMA NICO
ADN girasa

ADN topoisomerasa-I

El cromosoma procariota: composicin qumica y estructura

Los cromosomas aislados constan de

60% de ADN 30% de ARN 10% de protenas

Normalmente, un solo cromosoma circular, cerrado covalentemente (c.c.c.) Haploida, pero pueden existir varias copias del cromosoma cuando la bacteria crece rpido

Algunas excepciones al cromosoma tpico procariota

Borrelia: cromosoma lineal con extremos cerrados formando un bucle de horquilla Streptomyces: cromosoma lineal con extremos a base de secuencias repetidas acomplejas con protenas Bacterias con dos o ms cromosomas

Rhodobacter, Vibrio, Leptospira, Brucella: dos cromosoma lineales Sinorhizobium meliloti: tres cromosomas circulares Burkholderia cepacia: 2-4 cromosomas Agrobacterium tumefaciens: 1 lineal y 1 circular

Plsmidos: definicin y conceptos generales

Plsmidos: elementos genticos extracromosmicos autorreplicativos La mayora son de ADN c.d., c.c.c. Episomas: plsmidos que pueden integrarse en el cromosoma bacteriano Tamao: desde 2 kb hasta >1000 kb Plsmidos segn el n de copias y el control de la replicacin:

Bajo n de copias control estricto Alto n de copias control relajado

PLSMIDOS

RIBOSOMAS

Estructura de los mesosomas

Estructura

En Gram-positivas:
Suelen ser muy patentes Repetidas invaginaciones, primarias y secundarias, con forma de sculos

En Gram-negativas:
Menos patentes (ms pequeos y sencillos) Pequeas invaginaciones de membrana:

Forma laminar Forma verticilada

Mesosoma en Bacillus
Grnulo de reserva

Nucleoide

Mesosoma

Mesosoma en Staphylococcus

Micrografas electrnicas de transmisin de cortes ultrafinos de Staphylococcus, donde se muestra la presencia de mesososomas.

Inclusiones de reserva

Inclusiones orgnicas

Inclusiones polisacardicas Grnulos de poli-hidroxialcanoatos Inclusiones de hidrocarburos Grnulos de cianoficina Grnulos de polifosfato Glbulos de azufre

Inclusiones inorgnicas

Orgnulos citoplsmicos

No existen orgnulos procariticos rodeados de unidad de membrana (salvo los tilacoides de las cianobacterias) Ciertas bacterias presentan orgnulos sin envuelta lipdica:

Carboxisomas Vacuolas de gas Clorosomas Magnetosomas

Protoplastos y esferoplastos son osmticamente sensibles

Los protoplastos (a) en medios hipotnicos el agua entra y termina lisando la clula; (b) en una solucin isotnica, el agua no entra al protoplasto, y este permanece estable. Recuerdas dnde acta la lisozima para desorganizar el peptidoglucano?

FLAGELOS

Patrn de flagelacin

Monotricas: un solo flagelo

Insercin polar Insercin subpolar

Lofotricas: dos o ms flagelos en penacho, desde uno de los polos Anfitricas: dos penachos, uno en cada polo Peritricas: flagelos alrededor del cuerpo celular Insercin lateral

El flagelo bacteriano es un apndice movido por un motor rotatorio. El rotor puede girar a 6.00017.000 rpm, pero el apndice usualmente slo alcanza 200-1000 rpm. 1-filamento, 2espacio periplsmico, 3codo, 4-juntura, 5-anillo L, 6-eje, 7-anillo P, 8pared celular, 9-esttor, 10-anillo MS, 11-anillo C, 12-sistema de secrecin de tipo III, 13-membrana externa, 14-membrana citoplasmtica, 15-punt

Observacin de los flagelos

Proteus vulgaris

Serratia m.

Proteus mirabilis

Aerobacter sp

Pseudomonas aeruginosa

Antigenicidad del filamento

El filamento y la flagelina constituyen el antgeno flagelar (H) El antgeno H es caracterstico de cada especie y de cada cepa Las bacterias flageladas reaccionan in vitro con anticuerpos especficos dando una aglutinacin laxa La aglutinacin con flagelos es la base de la clasificacin de cepas de Salmonella (clasificacin de Kauffmann-White)

FILAMENTO AXIAL O ENDOFLAGELO

La Borrelia burgdorferi es una espiroqueta que causa la enfermedad de Lyme y es similar en forma a las espiroquetas causantes de otras enfermedades, tales como la fiebre recurrente y la sfilis. (Cortesa de los Centros para el Control y la Prevencin de Enfermedades -CDC- de los Estados Unidos)

FILAMENTO AXIAL O ENDOFLAGELO

Fotomicrografa de Treponema pallidum en campo oscuro. Teido con un a tcnica de anticuerpos fluorescentes. Aumento 54X

Fimbrias o pelos (pili)

Apndices filamentosos rectos y rgidos, ms cortos y finos que los flagelos Ensamblaje helicoidal de subunidades de pilina. Pelo tiene un pequeo hueco central Implantados a nivel de membrana citoplsmica De uno a varios cientos o miles. Frecuentemente periplsmicos Ensamblaje: en la base del pelo, una vez que cada subunidad de pre-pilina se procesa (eliminacin del pptido lder)

FIMBRIAS O PILI

Fimbrias adhesivas (I)

De 4 a 7 nm de dimetro, repartidas por toda la superficie Permiten la adhesin a sustratos Condicionan varias propiedades:

Formacin de microcolonias y velos Adhesin a superficies inertes Adhesin a superficies vivas En bacterias patgenas: factores de virulencia e invasividad de tejidos. Ejemplos:
En formacin de placa dental Colonizacin tejidos por Neisseria gonorhoeae (gonococo) y por E. coli uropatognicos

Fimbrias adhesivas (II)

La funcin de adhesina reside en una protena especial en la punta del pelo. Funciona como lectina (capaz de unirse con residuos azucarados de glucoprotenas de membrana) Aspectos genticos:

Codificacin cromosmica Fenmenos de variacin de fase: desde fenotipo Fim+ Fim- (evitacin fagocitosis) Fenmenos de variacin antignica (evitacin del sistema inmune, incluyendo anticuerpos)

Pelos sexuales

Ms largos y gruesos (10 nm) que las fimbrias adhesivas En menor nmero (de 1 a 10) Funcin: permitir los contactos celulares iniciales en la conjugacin Sus genes son de codificacin plasmdica Dos principales tipos de pelos sexuales:

Pelos de tipo F (ej.: del plsmido F de E. coli) Pelos de tipo I

Algunos de ellos son usados como receptores por ciertos fagos

Introduccin a las endosporas

Producidas por ciertas bacterias Gram-positivas: Bacillus, Clostridium, Sporosarcina, Cuando la bacteria detecta bajos niveles de nutrientes (C, N, P) desencadena el proceso de esporulacin La espora se forma dentro de la clula vegetativa Esporangio = clula madre + endospora Al final de la esporulacin, la clula madre se autolisa, y la espora queda libre La endospora aguanta largusimos periodos en ausencia de nutrientes. Resiste estrs ambientales En condiciones adecuadas, la espora germina y se transforma en una clula vegetativa

ESPORULACIN

Significado adaptativo de la formacin de endosporas

Proceso muy refinado que apareci evolutivamente en ciertas bacterias para lograr supervivencia en ausencia de nutrientes durante largos periodos Las endosporas son formas de reposo, con el metabolismo prcticamente parado (criptobiosis) Como consecuencia de su diseo, aguantan fuertes agresiones fsicas y qumicas (radiaciones UV, calor, sequedad, disolventes orgnicos, etc)

ENDOESPORAS
Centro: protoplasto de la espora, contiene al cromosoma, energa 3-fosfoglicerato. Pared: Capa > profunda, rodea la membrana interna, pptidoglucano, transforma en la pared celular.

Corteza: Capa > gruesa, pptidoglucano es sensible a lisoenzima.

Exosporio: Lipoprotena de membrana con carbohidratos

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TIPOS DE ESPORA

Segn su dimetro relativo al de cl. madre: Deformantes No deformantes Segn su localizacin dentro del esporangio: Terminales Subterminales Centrales Tpicos esporangios deformantes de Clostridium: En palillo de tambor o cerilla (plectridios) En huso (clostridios)

Observacin de la endospora a microscopio ptico en fresco

Tres especies de bacterias esporulantes Observar el esporangio = clula madre + endospora Observar la gran refringencia de las endosporas

Imagen de esporas teidas con verde malaquita

FORMACIN DE ESPORAS
Las bacterias de la imagen presentan unos engrosamientos terminales y refringentes que corresponden a esporas, en este caso endosporas.

Bacterias de antrax

fin