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Fiche synthtique des grandeurs principales en chromatographie

CARACTRISTIQUES D'UN CHROMATOGRAMME Le temps de rtention tR : temps entre l'injection et le sommet du pic. Le temps mort t0 ou tM : temps entre l'injection et la sortie d'un compos non retenu La diffrence entre ces 2 temps est appel temps rduit t'R = tR - t0 La largeur " la base" : mesure en fait 13,5% de la hauteur du pic La largeur mi-hauteur 1/2 ou : grandeur la plus facile mesure Sa surface proportionnelle la quantit de compos Plateaux thoriques La colonne de longueur L est dcoupe en N petits disques fictifs de mme hauteur H. Dans chacun des disques, la concentration en solut dans la phase stationnaire est en quilibre avec sa concentration dans la phase mobile.

H=L/N

Coefficient de distribution K

K = C phase stationnaire / C phase mobile

Le volume de rtention VR

VR = D x tR Avec D le dbit de la phase mobile Le volume mort VM VM = D x tM Le facteur de rtention k (ou de capacit k') :

k' = (tR tM) / tM

[ou tR = tM ( 1 + k')]

Plus k' est grand, plus le compos sera retenu longtemps dans la colonne (mais plus le pic s'largira!). Le contrle de k' peut-tre obtenu en jouant sur la composition et la polarit de l'luant.

Lefficacit Elle se traduit par la finesse des pics obtenus pour les composs. Plus le pic et fin, plus la colonne est efficace. Elle est exprime : En nombre de plateaux thoriques N : N = 16 (tR / ) = 5,54.(tR / ) Il correspond au nombre d'quilibres successifs qu' subi un composant du mlange; Plus le pic est fin, plus N est grand et donc plus la colonne est efficace. * en rduisant le dbit de l'lution (mais le temps de rtention en sera augment galement) * en augmentant la pression La hauteur quivalente en plateaux thoriques HEPT ou H : H=L/N

La slectivit Pour prciser la position relative de 2 pics adjacents ( 1 et 2 ) sur un chromatogramme, on exprime le facteur de sparation (ou de slectivit) selon: = k'2 / k'1 = (tR2 tM) / (tR1 tM) = t'R2 / t'R1

La rsolution Le facteur de rsolution est calcul selon : R = 2 ( tR2 tR1 ) / ( 2 + 1 ) ou R = 1,177 ( tR2 tR1 ) / ( 2 + 1 ) On considre que la sparation est bonne (c'est--dire retour a ligne de base entre les 2 pics) si R>1,5

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