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Flores, Ciencia y Algo Mas...: SIEMBRA PARA UNA CEPA (Trichoder...

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VI E R N E S , 23 DE OC TU B R E DE 2 00 9

SIEMBRA PARA UNA CEPA (Trichoderma harzianum)

DE UN CRIOTUBO A UNA CEPA


Se prepara y desinfecta la camara de flujo laminar, se enciende la cabina de flujo Laminar y el mechero de alcohol; Se atomiza alcohol, sobre el material a utilizar (jeringa, agitador, algodon y el vital del antagonista a sembrar). Con un algodn empapado de alcohol, se limpia la mesa de la cabina de flujo laminar. Cerca del mechero de alcohol, se abre el criotubo y con un agitador desinfectado se agita el contenido del vital, para que quede homogneo. Se roca la aguja de la jeringa con alcohol y se acerca a la flama del mechero, mantenindolo hasta que llegue al rojo vivo.

Cuando alcanza el rojo vivo, se enfra la aguja en el medio de una caja Petri. Despus se introduce la aguja en el criotubo y se siembra de varias formas: Se hace un rayado en forma de cuadrado en el medio PDA. Se dejan caer unas gotas en el medio PDA. Se realizan las dos anteriores juntas.

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Cuando se terminan de sembrar todas las cajas Petri, se coloca tape alrededor de cada una, procurando 06/08/2013 19:46

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Cuando se terminan de sembrar todas las cajas Petri, se coloca tape alrededor de cada una, procurando que quede sellada. Luego se corta plstico film y se envuelve la caja Petri, procurando estirarla para que se pegue mejor, despus se marca con la fecha de siembra.

DE UNA CEPA A OTRA (REPLICADO DE CEPAS)

CEPA

Se prepara y desinfecta la camara de flujo laminar, se enciende la cabina de flujo Laminar y el mechero de alcohol; Se atomiza alcohol, sobre el material a utilizar (jeringa, agitador, algodon y el vital del antagonista a sembrar). Con un algodn empapado de alcohol, se limpia la mesa de la cabina de flujo laminar.

Se roca alcohol en el sacabocado y se flamea en el mechero de alcohol hasta que llegue al rojo vivo, se la enfra antes de realizar el bocado. Cerca del mechero de alcohol, se abre caja petri con la cepa y con la ayuda de un sacabocados, se marcan circunferencias de 5 mm de dimetro. Con la ayuda de un agua flameada, se coge un bocado de la cepa y se coloca en el centro de una caja Petri con medio PDA.

Cuando se terminan de sembrar todas las cajas Petri, se coloca tape alrededor de cada una, procurando que quede sellada. Luego se corta plstico film y se envuelve la caja Petri, procurando estirarla para que se pegue mejor, despus se marca con la fecha de siembra.

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DE UN SUSTRATO A UNA CEPA


Se prepara y desinfecta la camara de flujo laminar, se enciende la cabina de flujo Laminar y el mechero de alcohol; Se atomiza alcohol, sobre el material a utilizar (jeringa, agitador, algodon y el vital del antagonista a sembrar). Con un algodn empapado de alcohol, se limpia la mesa de la cabina de flujo laminar.

Se roca alcohol la aguja de una jeringa y se flamea en el mechero de alcohol hasta que llegue al rojo vivo. Luego se enfra la aguja en el medio de cultivo de una caja Petri, y con la misma aguja se coge un grano del sustrato colmado por el antagonista a sembrar y se coloca en el centro de una caja Petri con medio PDA.

Cuando se terminan de sembrar todas las cajas Petri, se coloca tape alrededor de cada una, procurando que quede sellada. Luego se corta plstico film y se envuelve la caja Petri, procurando estirarla para que se pegue mejor, despus se marca con la fecha de siembra.

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Publicado por Especialista de Laboratorio Etiquetas: laboratorio , propagacion

en 13:21

2 comentarios:
eduardo 13 de octubre de 2011 19:30 felicitaciones, muy ilustrativo, mi pregunta es como replicar de un medio liquido con trichoderma a una caja petri con PDA Responder

Especialista de Laboratorio 20:26

1 de noviembre de 2011

hola, gracias por tu comentario... en lugar de sembrar el trichoderma solido, inocula la caja petri con 1 ml del producto liquido; no te preocuoes si se contamina, porque debes ir resembrando en varias cajas, hasta obtener la cepa pura.

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