Microwave yang dibantu ekstraksi flavonoid dari Cina herbal Radix puerariae (Ge Gen) Y an-ling Wang 1 *, Guang-Sheng

Xi 1 , Y ong-Chun Zheng 1 dan Fu-Sheng Miao 2 1 Departemen Kedokteran Cina, Jilin Pertanian Ilmu dan T echnology College, Jilin, Provinsi Jilin, 132101, Republik Rakyat Cina. 2 Sekolah Tinggi Pendidikan Jasmani, Normal University Liaoning, Dalian, Provinsi Liaoning, 1 16029, Republik Rakyat Cina. Yang diterima 27 Januari 2010 Microwave yang dibantu ekstraksi (MAE) teknik dikembangkan untuk ekstraksi flavonoid dari Radix puerariae (FRP). Beberapa parameter yang berpengaruh dari prosedur MAE (konsentrasi etanol, volume pelarut, microwave daya dan waktu ekstraksi) dipelajari melalui eksperimen faktor tunggal dan ortogonal percobaan untuk optimasi dari protokol ekstraksi. Yang optimal kondisi MAE adalah: konsentrasi etanol 70%, volume pelarut 35 ml microwave daya 255W dan ekstraksi waktu 6,5 menit, sedangkan ekstraksi hasil FRP adalah 8,37 mg / g. Metode MAE maju memberikan yang baik alternatif untuk ekstraksi flavonoid dari puerariae R.. Kata kunci: microwave-dibantu ekstraksi (MAE), flavonoid, Radix puerariae. PENDAHULUAN Radix puerariae adalah akar kering dari Pueraria Lobata (Willd.) Ohwi dan Pueraria thomsonii Berth. Di Cina, R. puerariae adalah dikenal sebagai 'Ge Gen', dan telah digunakan sebagai ramuan tradisional Cina, yang juga diterima secara luas oleh konsumen dunia untuk efek yang sehat. Memiliki telah digunakan untuk pengelolaan berbagai penyakit, termasuk gangguan kardiovaskular (Y eung et al, 2006.; Wang et al, 2008.), Atau sebagai, antimikroba sakit-releasing dan nafsu makan-merangsang agen (Keung dan V allee, 1998). Itu juga terbukti berguna dalam pengobatan penyalahgunaan alkohol dan hipertensi (Fan et al, 1985;. Keung et al, 1997.; Lukas dkk, 2005.). Flavonoid, turunan dari benzo--pyrone, tersebar luas pada tanaman (Burda dan Oleszek, 2001) dan mereka dianggap sebagai bahan aktif dalam R. puerariae (Li et al., 2003). Xu dan Dia (2007) memiliki

menunjukkan bahwa puerarin (daidzein 8-C-glukosida), daidzein dan rutin adalah flavonoid utama dalam puerariae R.. Di tahun terakhir, flavonoid telah menarik minat peneliti karena mereka menunjukkan janji sebagai antioksidan kuat yang dapat melindungi tubuh manusia dari radikal bebas (Bors et al, 1996;. Halliwell dan Gutteridge, 1999). * Sesuai penulis. E-mail: ylwxgs@yahoo.cn. Telp: +86-0432-3509060. Fax: +86- 0432-3509711. Konvensional teknik sebagai pemanasan, mendidih, atau refluks dapat digunakan untuk mengekstrak flavonoid, namun, Kerugiannya adalah hilangnya flavonoid karena ionisasi, hidrolisis dan oksidasi selama ekstraksi sebagai serta lama ekstraksi (Li et al, 2005;. Huang et al, 2009.). Teknik lainnya yang meliputi superkritis karbondioksida ekstraksi, ekstraksi air subkritis, ekstraksi dibantu ultrasonik (UEA) dan microwave-dibantu ekstraksi (MAE) juga menjadi kepentingan sebagai alternatif untuk metode konvensional. Antara ini, MAE adalah yang paling sederhana dan paling ekonomis teknik untuk ekstraksi tumbuhan berasal senyawa (Zhang et al, 2005;.. Hemwimon et al, 2007). Peningkatan pemulihan produk dengan microwave umumnya dikaitkan dengan efek pemanasan, yang terjadi karena dengan rotasi dipol pelarut dalam bidang microwave. Hal ini menyebabkan suhu pelarut meningkat, yang kemudian meningkatkan kelarutan senyawa yang menarik. Secara khusus, pemanasan pelarut dengan microwave terjadi ketika molekul pelarut polar tidak bisa menyesuaikan diri cukup cepat untuk bidang listrik frekuensi tinggi dari microwave. Perbedaan ini menyebabkan pelarut molekul untuk mengusir energi yang diserap dalam bentuk panas (Hemwimon et al., 2007). Namun demikian, tidak ada laporan pada MAE flavonoid dari R. Puerariae (FRP) telah dipublikasikan. Dalam penelitian ini, MAE untuk flavonoid dari R. puerariae (FRP) yang diselidiki dan operasional parameter yang dioptimalkan menggunakan faktor tunggal pengalaman-dokumen dan desain eksperimen ortogonal. Tujuannya dari pekerjaan ini adalah untuk menetapkan kondisi dioptimalkan dari MAE untuk FRP untuk pengembangan dan penerapan obat sumber daya tanaman. Terials ma DAN METODE Tanaman bahan R. puerariae dibeli dari pasar komersial di Jilin, Cina. Sebuah spesimen voucher (No. 2036) diendapkan di Museum, Ilmu Pengobatan Tradisional Cina, Jilin Pertanian

Ilmu dan T echnology College. Sampel dilumatkan dalam pisau pabrik dan yang dilewatkan melalui saringan 20-mesh. Gelombang mikro yang dibantu ekstraksi (MAE) MAE percobaan dilakukan dengan MSP-100E multimode microwave ekstraksi sistem. Instrumen MSP-100E memiliki suhu internal sistem kontrol dengan probe temperatur serat dan kontrol tekanan sistem, yang masing-masing memonitor suhu dan tekanan di dalam kapal. Di semua percobaan, tekanan didirikan di bawah 300 kPa untuk mencegah pembubaran senyawa target (Liu et al, 2007;.. Zhang et al, 2009). Sebuah 15 ml larutan etanol ditambahkan ke 0,5 g sampel kering bubuk ditempatkan di sebuah kapal batin. Ekstraksi dilakukan dengan kondisi ekstraksi yang berbeda. Ekstrak disaring dan Filtrat dikumpulkan dan beku-kering untuk penentuan flavonoid. Penentuan flavonoid Para UCARY -100 spektrofotometer (Varian, USA) digunakan untuk menentukan isi dari flavonoid dalam produk terpencil di atas pada 510 nm (Zhuang dkk, 1992;. Chen dan Li, 2007). Flavonoid isi dihitung menggunakan persamaan linear berikut berdasarkan kurva kalibrasi dibuat dengan rutin, berkisar 8,0-40? g ml -1. A = 1 1.237C - 0,0141, R2 = 0,9997 Dimana; adalah absorbansi, C adalah kandungan flavonoid dalam g ml? -1 . Hasil Proses TS DAN PEMBAHASAN Pengaruh konsentrasi etanol terhadap hasil ekstraksi FRP Faktor-faktor tentang MAE termasuk etanol konsentrasi-tion, volume pelarut, daya microwave dan ekstraksi waktu. Pengaruh setiap faktor dipelajari oleh tunggal faktor percobaan (Chen et al, 2006;. Zhang et al,. 2009). Pemilihan pelarut yang paling sesuai untuk mengekstraksi analit yang menarik dari matriks sampel adalah langkah mendasar dalam mengembangkan metode ekstraksi. Metanol memiliki faktor disipasi yang relatif lebih tinggi, yang berarti bahwa hal itu bisa menyerap banyak microwave energi dan mengubahnya menjadi panas yang lebih baik dari pelarut lainnya. Wang et al. 305 5 5.5 6 6.5

7 7.5 8 50 60 70 80 90 Etanol solusi (%) Ekstraksi hasil (mg / g) Gambar 1. Pengaruh konsentrasi etanol terhadap hasil ekstraksi FRP. Namun, metanol tidak diuji dalam penelitian ini, karena sangat beracun dan tidak praktis untuk digunakan dalam makanan dan farmasi pengolahan (Hemwimon et al., 2007). Untuk alasan ini, campuran etanol-air diuji di bawah sama kondisi. Hasilnya dirangkum dalam Gambar 1. Hal ini dapat diamati bahwa hasil ekstraksi FRP yang sangat dipengaruhi oleh etanol konsentrasi-trasi sipil. Hasil ekstraksi FRP meningkat tajam dengan peningkatan konsentrasi etanol hingga 70%. Ketika konsentrasi etanol meningkat dari 70 sampai 90%, Namun, hasil ekstraksi sedikit menurun. Saat itu di sesuai dengan studi ada (Duan et al, 2001;. Ma et al, 2005).. Dari hasil ini, jelas bahwa penambahan dari beberapa jumlah air meningkatkan ekstraksi efisiensi. Satu kemungkinan alasan untuk peningkatan efisiensi dengan adanya air beberapa mungkin disebabkan karena peningkatan pembengkakan bahan tanaman oleh air, yang meningkatkan bidang kontak permukaan antara tanaman matriks dan pelarut (Chen et al., 2008). Oleh karena itu, penelitian lebih lanjut dilakukan dengan etanol 70%. Pengaruh volume pelarut terhadap rendemen ekstraksi FRP Umumnya dalam teknik ekstraksi konvensional, yang lebih tinggi volume pelarut akan meningkatkan pemulihan, tetapi dalam MAE, volume pelarut yang lebih tinggi dapat memberikan pemulihan yang lebih rendah (Eskilsson dan Bjorklund, 2000; Guo et al, 2001;. Xiao et al, 2008.). T o mengetahui pengaruh volume pelarut pada ekstraksi hasil FRP, percobaan dilakukan dengan meningkatkan volume pelarut ekstraktan 20 sampai 60 ml di bawah kondisi percobaan yang dijelaskan di atas. Hal ini dilihat pada Gambar 2 bahwa hasil ekstraksi FRP meningkat dengan peningkatan volume pelarut dan mencapai maksimum pada 30 ml / g. Ini menurun sebagai pelarut volume adalah di atas 30 ml / g. Ini mungkin karena lebih besar volume etanol 70% menyebabkan pembengkakan yang berlebihan dari bahan dengan air dan menyerap efektif con-

306 J. Med. Tanaman. Res. 4 4.5 5 5.5 6 6.5 7 7.5 8 8.5 10 20 30 40 50 Pelarut volumn / Contoh rasio (mL / g) Ekstraksi hasil (mg / g) Gambar 2. Pengaruh volume pelarut terhadap rendemen ekstraksi FRP. 2 3 4 5 6 7 8 9 85 170 255 340 425 Microwave daya (W) Ekstraksi hasil (mg / g) Gambar 3. Pengaruh daya microwave pada hasil ekstraksi FRP. stituent (Xiao et al., 2008). Oleh karena itu, volume 30 ml sudah cukup untuk ekstraksi. Pengaruh daya microwave pada hasil ekstraksi FRP Energi gelombang mikro iradiasi mengganggu ikatan hidrogen, karena gelombang mikro diinduksi dipol rotasi molekul dan migrasi ion terlarut. Microwave energi radiasi dapat meningkatkan penetrasi pelarut ke dalam matriks dan memberikan efisien untuk bahan melalui interaksi molekul dengan elektromagnetik lapangan dan menawarkan kecepatan transfer energi untuk pelarut dan matriks, yang memungkinkan pembubaran komponen yang akan diekstraksi (Duan et al, 2001;. Hu, 2003;. Guo et al, 2003). Untuk mengevaluasi pengaruh daya microwave MAE, kekuatan microwave berbeda dikontrol selama 6 menit, misalnya, 85, 170, 255, 340 dan 425 W. Hasilnya ditunjukkan pada Gambar 3. Hasil percobaan menunjukkan bahwa hasil ekstraksi FRP meningkat dengan meningkatkan-2

3 4 5 6 7 8 9 345678 Ekstraksi waktu (menit) Ekstraksi hasil (mg / g) Gambar 4. Pengaruh waktu ekstraksi terhadap rendemen ekstraksi FRP. katan kekuatan maju microwave ketika kekuatan pemrosesan depan adalah di kisaran 85-255 W, dan kemudian hasil ekstraksi FRP tidak signifikan berubah 255-425 W. Hal ini disebabkan oleh fakta bahwa ekstraksi flavonoid dipercepat dengan meningkatkan daya microwave berhubungan dengan efek langsung dari energi gelombang mikro pada biomolekul oleh konduksi ionik dan rotasi hasil yang dipol dalam daya yang dihamburkan dalam bahan pelarut dan pabrik dan kemudian menghasilkan molekul gerakan dan pemanasan (Chen et al., 2008). Lebih banyak energi elektromagnetik dipindahkan ke sistem ekstraksi cepat dan ditingkatkan ekstraksi efisiensi ketika kekuatan microwave meningkat dari 85 sampai 255 W. Oleh karena itu, diputuskan untuk menggunakan 255 W mikro-gelombang listrik dalam percobaan berikut. Pengaruh waktu ekstraksi terhadap rendemen ekstraksi FRP Waktu ekstraksi merupakan faktor yang harus dipelajari untuk meningkatkan efektivitas ekstraksi analit mempekerjakan MAE (Zhou et al., 2007). Studi dilakukan keluar pada waktu yang berbeda, misalnya, 3, 4, 5, 6,7 dan 8 min. Itu Hasilnya ditunjukkan pada Gambar 4. Para eksperimental hasil menunjukkan bahwa hasil ekstraksi FRP dengan meningkatkan dari waktu ekstraksi dari 3 sampai 8 menit, tidak mengubah 6-8 min. Arti penting dari ekstraksi waktu dapat diduga berkaitan dengan waktu yang dibutuhkan untuk proses desorpsi berlangsung (Chen et al. 2008). Oleh karena itu, 6 min dianggap sebagai ekstraksi yang tepat waktu. Optimasi kondisi MAE FRP Karena berbagai parameter berpotensi mempengaruhi MAE proses, optimasi kondisi eksperimental merupakan langkah penting dalam pengembangan MAE metode (Pan et al., 2008). Dalam karya ini, empat parameter

dievaluasi: (A) konsentrasi etanol, (B) pelarut Wang et al. 307 Tabel 1. Faktor dan tingkat untuk desain ortogonal. Etanol konsentrasi Volume microwave daya Ekstraksi Larutan waktu Tingkat ABCD 1 65 25 170 5,5 2 70 30 255 6,5 3 75 35 340 6,5 Tabel 2. Hasil percobaan ortogonal L9 (3 4 ). Uji nomor A B C D Ekstraksi hasil FRP 1 1 1 1 1 7.18 2 1 2 2 2 7.92 3 1 3 3 3 8,03 4 2 1 2 3 8.15 5 2 2 3 1 8.11 6 2 3 1 2 7.96 7 3 1 3 2 7,93 8 3 2 1 3 7,81 9 3 3 2 1 8,06 K1 7,710 7,753 7,650 7,783 K2 8,073 7,947 8,043 7,937 K3 7,933 8,017 8,023 7,997 R 0,363 0,264 0,393 0,214 volume, (C) daya microwave, (D) waktu ekstraksi. Di dasar efek dari faktor tunggal dalam bab-bab di atas, untuk setiap variabel, tiga tingkat yang ditetapkan untuk mendeteksi paling kondisi ekstraksi yang cocok seperti yang dijelaskan dalam 1 dapat T. Di umum, evaluasi penuh efek dari empat parameter pada empat tingkat pada hasil akan membutuhkan 81 (3 4 ) Pengalaman-unsur. Untuk mengurangi jumlah percobaan, sebuah L 9 (3 4 ) Grafik desain ortogonal digunakan (T mampu 2). Di cara ini, hanya 9 eksperimen yang diperlukan. Seperti yang terlihat dari 2 T mampu, kita dapat menemukan bahwa pengaruh terhadap rata-rata ekstraksi hasil FRP menurun dalam urutan: C> A> B> D sesuai dengan nilai-nilai R. Microwave kekuasaan adalah ditemukan menjadi penentu paling penting dari ekstraksi menghasilkan FRP. Kombinasi terbaik ditunjukkan adalah A2B3C2D3 yang di khusus, konsentrasi etanol adalah 70%,

volume pelarut adalah 35 ml, daya microwave 255 W adalah dan waktu ekstraksi selama 6,5 menit. Itu juga optimal ekstraksi kondisi, sedangkan ekstraksi hasil FRP adalah 8,37 mg / g. Kesimpulan Microwave yang dibantu ekstraksi bertekad untuk menjadi efektif metode untuk mengekstraksi flavonoid dari R. Puerariae. Ekstraksi hasil FRP dipengaruhi oleh etanol konsentrasi, volume pelarut, daya microwave dan ekstraksi waktu. Kondisi optimal melalui tunggal faktor eksperimen dan percobaan ortogonal yang menghalangi-ditambang sebagai berikut: konsentrasi etanol 70%, pelarut Volume pelarut 35 ml, daya microwave 255 W dan ekstraksi waktu 6,5 menit. Ini menunjukkan potensi besar untuk industri aplikasi dalam waktu dekat.