LA RUTA DEL SHIKIMATO: AMINOCIDOS AROMTICOS Y FENILPROPANOIDES

Por: Rubn Daro Ramrez Montoya

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INTRODUCCIN
La va del shikimato provee una ruta para compuestos aromticos, particularmente los AA aromticos: L-fenilalanina, L-tiroxina y L-triptfano. Esta va es empleada por microorganismos y plantas, pero no por animales. Un intermedio central en la va es el cido shikimico, un componente que ha sido aislado de especies de Illicium (shikimi Japons) muchos aos antes que su rol en el metabolismo haya sido descubierto.

INTRODUCCIN
El cido shiqumico es un precursor de:

los aminocidos aromticos Fenilalanina y tirosina, Indol, derivados del indol y el aminocido aromtico triptfano, Alcaloides y otros metabolitos aromticos taninos, flavonoides, y lignina.
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INTRODUCCIN
Este compuesto fue aislado en 1885 y su intervencin en la bioformacin de fenoles naturales fue establecida en 1955
Shikimic Acid as a Precursor in Lignin Biosynthesis. Nature 175, 688 - 689 (16 April 1955)

INTRODUCCIN

AMINOCIDOS AROMTICOS Y CIDOS BENZOICOS SIMPLES

La va del shikimato empieza con un acoplamiento de fosfoenolpiruvato (PEP) y Deritrosa 4-fosfato para obtener una especie de 7 carbonos: cido 3-desoxi-D-arabinoheptulosonico 7-fosfato (DAHP)
Reaccin aldlica E1

E1: DAHP sintetasa

AMINOCIDOS AROMTICOS Y CIDOS BENZOICOS SIMPLES

Eliminacin de HOP

Esto representa una simplificacin excesiva. La eliminacin de cido fosfrico en realidad sigue una oxidacin de NAD+- dependiente del hidroxilo central, y este vuelve a formarse en una reaccin de reduccin dependiente de NADH sobre el compuesto de carbonilo intermedio, antes de la reaccin aldlica. Todos estos cambios se producen en la presencia de una sola enzima. 3-deshidroquinato sintetasa

E2: 3-deshidroquinato sintetasa NAD+: Nicotinamida adenina dinucletido

AMINOCIDOS AROMTICOS Y CIDOS BENZOICOS SIMPLES

Luego de la eliminacin de cido fosfrico del DAHP se presenta una reaccin aldlica intramolecular para generar el primer intermediario carboxiclico cido 3-deshidroquinico.

Reaccin aldlica

c. 3-deshidroquinico

AMINOCIDOS AROMTICOS Y CIDOS BENZOICOS SIMPLES

c. shiquimico

c. 3-deshidroshiquimico

c.3-deshidroqunico

c. qunico

Encontrado en forma libre o en combinacin con alcaloides como la quinina

E3: 3-deshidroquinasa E4: shikimato deshidrogenasa E5: quinato deshidrogenasa

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Deshidratacin c. 3-deshidroshiquimico Oxidacin y enolizacin

Enolizacin

c. protocatecuico

c. glico
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E6: 3-deshidroshikimato deshidratasa

AMINOCIDOS AROMTICOS Y CIDOS BENZOICOS SIMPLES

Fosforilacin Adicin nucleoflica Eliminacin de HOP

Ac. shikimico

Ac. Shikimico 3-fosfato Eliminacin de HOP

Ac. corsmico

EPSP

E1: shikimato quinasa E2: cido 5-enolpiruvilshikimico 3-fosfato (EPSP) sintetasa 11 E3: corismato sintetasa

AMINOCIDOS AROMTICOS Y CIDOS BENZOICOS SIMPLES

Eliminacin con estereoqumica syn de cido pirvico como cido enolpirvico

c. 4-hidroxibenzoico

c. corsmico

12 E1: corismato liasa (con este tipo de enzimas se forman frecuentemente anillos)

AMINOCIDOS AROMTICOS Y CIDOS BENZOICOS SIMPLES

Los cidos 2,3-dihidroxibenzoico (producido por microorganismos y no por plantas) y saliclico son derivados del cido isocorsmico.

Isomerizacin

Eliminacin

c. corsmico

c. isocorsmico

c. salicilico

La isomerizacin involucra una reaccin tipo SN2. Una molcula de agua como nuclefilo atacando al sistema dinico, desplaza el grupo hidroxilo. E2: isocorismato sintetasa E3: salicilato sintetasa
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AMINOCIDOS AROMTICOS Y CIDOS BENZOICOS SIMPLES

La cadena lateral de c. isocorsmico es eliminada, primero por hidrlisis, luego deshidrogenacin de 3-hidroxi a 3-ceto, seguido de enolizacin y formacin del anillo aromtico.

isocorismato

c. 2,3-dihidro-2,3-dihidroxibenzoico

c. 2,3-dihidroxibenzoico

E8: isocorismatasa E9: 2,3-dihidro-2,3-dihidroxibenzoato deshidrogenasa

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AMINOCIDOS AROMTICOS Y CIDOS BENZOICOS SIMPLES

El cido 2,3-dihidroxibenzoico es uno de los componentes del agente quelante de hierro (siderforo) denominado enterobactina encontrado en Escherichia coli y mucha otras bacterias Gram negativas. Este compuesto juego un papel importante en el crecimiento bacteriano, dado que hace disponible las concentraciones mnimas de hierro. Qumicamente la enterobactina est compuesta por tres molculas de cido 2,3-dihidroxibenzoico y tres del AA Lserina, en forma de triester cclico.

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cido 2,3dihidroxibenzoico

L-serina

Enterobactina como quelante de hierro

El cido 2,3-dihidroxibenzoico y la serina se activan a travs de un ATP, antes de la unin con el complejo de la enzima a travs de un enlace tioster. Un enlazador fosfopantetena tambin se utiliza. Son catalizados Los pasos de formacin de lactona, con una lactonizacin intramolecular final para dar el trmero, que se libera de la enzima

Enterobactina
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AMINOCIDOS AROMTICOS Y CIDOS BENZOICOS SIMPLES

Los compuestos aminados anlogos a los cidos fenlicos son producidos desde el cido corsmico por transformaciones en las cuales amoniaco - aportado por la glutamina- acta como nuclefilo. El cido corsmico puede ser aminado en el : 1. C-4 para dar cido 4-amino-4-desoxi corsmico y luego el cido p-amino benzoico (PABA). 2. C-2 para obtener - el anlogo del cido isocorsmico- el cido 2-aminobenzoico (cido antranlico)
L-glutamina c. corsmico E4

Aminacin C-4
cido 4-amino-4-desoxicorismico

Eliminacin syn

c. p-aminobenzoico E4: 4-amino-4-desoxicorismato sintetasa/glutamina aminotransferasa 17 E5: 4-amino-4-desoxicorismato liasa PLP: piridoxal fosfato

AMINOCIDOS AROMTICOS Y CIDOS BENZOICOS SIMPLES

Los compuestos aminados anlogos a los cidos fenlicos son producidos desde el cido corsmico por transformaciones en las cuales amoniaco - aportado por la glutamina- acta como nuclefilo. El cido corsmico puede ser aminado en el : 1. C-4 para dar cido 4-amino-4-desoxi corsmico y luego el cido p-amino benzoico (PABA). 2. C-2 para obtener - el anlogo del cido isocorsmico- el cido 2-aminobenzoico (cido antranlico)
L-glutamina c. corsmico E4

Aminacin C-4
cido 4-amino-4-desoxicorismico

Eliminacin syn

c. p-aminobenzoico E4: 4-amino-4-desoxicorismato sintetasa/glutamina aminotransferasa 18 E5: 4-amino-4-desoxicorismato liasa PLP: piridoxal fosfato

AMINOCIDOS AROMTICOS Y CIDOS BENZOICOS SIMPLES

Los compuestos aminados anlogos a los cidos fenlicos son producidos desde el cido corsmico por transformaciones en las cuales amoniaco - aportado por la glutamina- acta como nuclefilo. El cido corsmico puede ser aminado en el : 1. C-4 para dar cido 4-amino-4-desoxi corsmico y luego el cido p-amino benzoico (PABA). 2. C-2 para obtener - el anlogo del cido isocorsmico- el cido 2-aminobenzoico (cido antranlico)
L-glutamina c. corsmico E4

Aminacin C-2

c. 2-amino-2-desoxi-isocorsmico
Eliminacin syn

c. antranlico
E6: 2-amino 2-desoxi isocorismato sintetasa E7: 2-amino 2-desoxi isocorismato liasa
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AMINOCIDOS AROMTICOS Y CIDOS BENZOICOS SIMPLES

Formacin de Indol y triptfano
En un proceso de mltiples reacciones, el anillo indlico se forma por incorporacin de dos tomos de carbono aportados por el fosforribosil difosfato, con prdida de carboxilo en el antralinato. El resto de carbonos son removidos por una reaccin retro-aldlica. Luego la estructura indlica es modificada por la incorporacin de L-serina, reaccin catalizada por el complejo enzimtico triptfano sintetasa
Importancia: En la dcada de 1930, el inters por el indol se intensific cuando se conoci que el 20 ncleo indol est presente en muchos alcaloides, as mismo en el triptfano y las auxinas, y se mantiene todava como tema de investigacin activa

AMINOCIDOS AROMTICOS Y CIDOS BENZOICOS SIMPLES

SN2 c. antranlico Fosforribosil PP c. fosforribosilantranlico
Tautomera ceto-enol Tautomera Iimina-enamina

Retro-aldlica

Indol-3-glicerol P

1-(2-carboxianilino)-1desoxirribulosa 5-P

Indol L-triptfano

E1: antranilato fosforribosil transferasa E2: fosforribosil antranilato isomerasa 21 E3: indol-3-glicerol fosfato sintetasa E4: triptfano sintetasa

AMINOCIDOS AROMTICOS Y CIDOS BENZOICOS SIMPLES

Volviendo a la ruta del shikimato, se produce un proceso de reordenamiento singular, la transformacin de cido corsmico en cido prefnico. Esta reaccin, denominada reordenacin de Claisen, transfiere la cadena lateral derivada del PEP, al C-1. La acumulacin del esqueleto C6C3 es la base de la fenilalanina y la tirosina.
La reaccin es catalizada en la naturaleza por la enzima corismato mutasa, y aunque tambin puede ocurrir trmicamente, la tasa aumenta al menos 106 veces en presencia de la enzima..

c. corsmico

Confrmero ecuatorial

Confrmero axial

c. prefnico

E1: corismato mutasa

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ceto-cido

amino-cido

Transaminacin PLPdependiente Aromatizacin descarboxilativa c. fenilpirvico L-fenilalanina Aromatizacin descarboxilativa

Transaminacin

c. prefnico

c. arognico
E2: prefenato deshidratasa E3: arogenato deshidratasa E4: prefenato deshidrogenasa E5: arogenato deshidrogenasa E6: fenilpiruvato aminotransferasa E7: prefenato aminotransferasa E8: 4-hidroxifenilpiruvato aminotransferasa
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Transaminacin

c. prefnico

c. arognico
E2: prefenato deshidratasa E3: arogenato deshidratasa E4: prefenato deshidrogenasa E5: arogenato deshidrogenasa E6: fenilpiruvato aminotransferasa E7: prefenato aminotransferasa E8: 4-hidroxifenilpiruvato aminotransferasa

c. 4-hidroxifenil pirvico

L-tirosina
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CIDOS CINMICOS
La L-fenilalanina y la L-tirosina como bloques C6C3, son precursores de un amplio rango de productos naturales. En plantas, una primera etapa es la eliminacin de amoniaco para generar el cido trans-cinmico. En el caso de la fenilalanina se formara cido cinmico, mientras que desde la tirosina se produce el cido 4-cumrico. Tambien puede generarse cido 4cumrico por hidroxilacin de cido cinmico en una reaccin citocromo P450 dependiente.
Cinnamomum verum

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CIDOS CINMICOS
Cinnamomum verum

Otros cidos cinmicos obtenidos son el cafeico, ferlico y el sinpico. Estos pueden ser encontrados en plantas en forma libre y en un rango de formas esterificadas, por ejemplo, con cido qunico como el cido clorognico (cido 5-O-cafeoilquinico), con glucosa como un 1-O-cinamoilglucosa, y con colina como sinapina.

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Eliminacin de amoniaco c. cinmico Hidroxilacin Metilacin

L-fenilalanina

E1: Fenilalanina amonio liasa (PAL) E2: tirosina amonio liasa (TAL) E3: cinamato 4-hidroxilasa E4: p-cumarato 3-hidroxilasa E5: cido cafeico O-metiltransferasa/ S-adenosil-metionina (SAM)

L-tirosina

c. 4-cumrico

c. cafeico

c. ferlico

c. 5-hidroxiferlico c. sinpico

Alcohol p-cumarlico

Alcohol coniferlico POLMEROS

Alcohol sinaplico

LIGNANOS

LIGNINA

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LIGNANOS Y LIGNINA
LIGNANOS: son sustancias polifenlicas, relacionadas con el metabolismo de la fenilalanina a travs de la dimerizacin de alcoholes cinmicos sustituidos. La estructura bsica de estas sustancias son dos unidades C6C3 unidas por enlaces , Se encuentran en una gran variedad de plantas que incluyen las semillas de lino, semillas de calabaza, ajonjol, entre otras.

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Inhibe la -glucosidase, Agente hipoglicemiante

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LIGNANOS Y LIGNINA
LIGNINA: Polmero de elevado peso molecular, que resulta de la unin de varios cidos y alcoholes fenilproplicos (cumarlico, coniferlico y sinaplico). Las gimnospermas polimerizan alcohol principalmente alcohol coniferlico, las plantas dicotiledneas alcohol coniferlico y sinaplico, mientras las monocotiledneas utilizan los tres alcoholes. La lignina representa una gran reserva de materiales aromticos, principalmente sin explotar debido a las dificultades asociadas con la liberacin de estos metabolitos. La accin de los hongos que pudren la madera ofrece la forma ms eficaz de hacer estos productos tiles ms accesible.

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Lignina

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REFERENCIAS
DEWICK PAUL. MEDICINAL NATURAL PRODUCTS A BIOSYNTHETIC APPROACH. 3 EDICIN. 2009

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CATECOLAMINAS Y MELANINAS

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Cloranfenicol
Producidos por L-fenilalanina y L-tirosina, como bloques C6C3

El Streptomyces venezuelae fue aislado en 1947 de una muestra de tierra obtenida en Per. A fines del mismo ao se utiliz la escasa reserva del frmaco que se dispona para 36 tratar un brote de tifus endmico en Bolivia y se obtuvieron resultados impresionantes.

PLP (PIRIDOXAL FOSFATO)

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cido flico

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LIGNANOS

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