Centro de Bachillerato Tecnolgico industrial y de servicios N168 Francisco I.

Madero

Practica #1 RECUENTO DE PLAQUETAS

Grado y grupo: 5to A Mesa: 2 Integrantes: Brcena Vallejo Patricia. Gallardo Jimnez Hilda Vanessa. Hernndez Garca Edgar Andrs. Morales Corrales Claudia Scarlett. Muoz Aguilar ngeles Karina.
Profesor:

seccin: 1

Benjamn Hernndez Meja.

Aguascalientes, Ags. 26 de agosto de 2013

INTRODUCCIN: Los trombocitos o plaquetas constituyen una parte esencial del organismo hemosttico del cuerpo. Son cuerpecillos hialinos incoloros que miden de 2-4 , de bordes irregulares, pero pueden tener forma esfrica u ovalada, carecen de ncleo y son muy frgiles. Provienen de una clula gigante que mide de entre 50-100 de dimetro llamada megacariocito. Una de las principales funciones de las plaquetas es participar en los mecanismos de la hemostasia (Hemos=sangre, stasis=detencin) adhirindose entre ellas y a las paredes de los vasos sanguneos lesionados, para formar as el trombo plaquetario o tapn hemosttico. En las mujeres, el recuento plaquetario es un 20% mayor que el de los hombres. Una reduccin en el recuento plaquetario puede producirse en las mujeres en el momento de la menstruacin. En el primer ao tras el nacimiento, el recuento plaquetario tiende a estar en el valor mximo del intervalo de referencia normal en el adulto. El ejercicio intenso produce un aumento del 30-40% en el recuento plaquetario. FUNDAMENTO: El lquido diluyente puede ser una solucin estril de p-aminobenzoato de dietilaminoetilo (85 milimolar) y cloruro de sodio (31 milimolar). Este lquido se provee listo para usar y su conservacin es indefinida en refrigerador (2 - 10 C) o puede ser tambin oxalato de amonio al 1%.El oxalato de amonio se emplea en el recuento de plaquetas presentes en una muestra de sangre. Este resultado es importante ya que desempea un papel importante en la hemostasia. Permite la lisis de las clulas, con el propsito de mantener intactas estas para su conteo. La cmara de Neubauer es una cmara de contaje adaptada al microscopio. Se trata de un portaobjetos con una depresin en el centro, en el fondo de la cual se ha marcado con la ayuda de un diamante una cuadrcula. La pipeta de Thomas es una pipeta graduada con una incertidumbre de +- 3ml, y funciona como cuentaglbulos. En ella podemos realizar una dilucin 1:100 la cual ser empleada para el conteo, en este caso de las plaqutas. Las plaquetas se cuentan ms fcilmente utilizando microscopio de contraste de fase, pero si el microscopio de luz se adeca correctamente y el conteo se hace con un estricto control de calidad el resultado ser igualmente confiable. Especial atencin debe tenerse con las soluciones diluentes. Estas no deben estar contaminadas, pues tanto las partculas como las bacterias pueden similar plaquetas. Los lquidos diluentes se deben mantener refrigerados y filtrar antes de su uso. La limpieza de la cmara de Neubauer y de las pipetas es importante en este procedimiento, Si se observan agregados en el recuento, el procedimiento debe repetirse. El uso de EDTA como anticoagulante ayuda a disminuir la agregacin plaquetaria. El rango de error para el

recuento de plaquetas en el microscopio de luz es de 16 25%. No se debe informar el recuento de plaquetas sin confrontarlo con el extendido de sangre perifrica, coloreado con Wright. PROPSITO: Realizar el conteo de plaquetas existentes en un milmetro cbico de sangre total. Identificar morfolgicamente las plaquetas. De esta manera se podrn concluir si la muestra cuenta con los valores normales plaquetarios, elevados o disminuidos para el diagnstico de alguna patologa. TCNICA: Consiste en la produccin de hemlisis por la utilizacin de un lquido hipotnico, y el mantenimiento de las plaquetas intactas y sin agrumar por la presencia de p-aminobenzoato de dietilaminoetilo. En el recuento directo de las plaquetas mediante la cmara de Neubauer, se mezcla la sangre en la pipeta de Thoma con un diluyente que cause la hemlisis de los eritrocitos. Se mezcla y se deja reposar por unos minutos, de desechan las primeras gotas y se llena el hemocitmetro con dicha mezcla. Se recuentan las plaquetas en la cuadrcula central, de preferencia con microscopio de contraste de fases y con el objetivo de 40X.

MATERIAL: Pipeta de Thoma para glbulos rojos (perla roja) Equipo para venopuncion (Tubo lila) Boquilla roja Tubo de goma Tubos de ensayo Papel parafilm Cmara de Neubauer Cubrehematimetro. Gasas Caja de Petri Papel filtro EQUIPO. Microscopio Agitador elctrico. SUSTANCIAS Alcohol al 70% Diluyente de plaquetas (oxalato de amonio). MATERIAL BIOLGICO. Sangre venosa METODOLOGA: 1. Obtener 10 ml de sangre venosa, en un tubo con anticoagulante EDTA 2. Agitar la sangre de manera suave en el tubo para mezclarla con el anticoagulante 3. Llevar la sangre hasta la marca 1.0 de la pipeta de Thoma. Limpiar la punta con una gasa. 4. Aforar con liquido diluyente de plaquetas hasta la marca 101 de la pipeta (Dilucin 1:100) 5. Tapar los extremos con papel parafilm y mezclar durante 1 minuto 6. Colocar la Cmara de Neubauer sobre una superficie horizontal y poner el cubrehematmetro sobre las mesetas 7. Descartar las primeras 4 gotas de la pipeta. Con la quinta gota cargar la cmara, depositndola entre la meseta y el cubrehematmetro y dejarla difundir por capilaridad, teniendo cuidado de que no se formen burbujas o se derrame el lquido hacia los surcos 8. Colocar la cmara de Neubauer ya cargada en el interior de una caja de Petri, con papel filtro humedecido en agua para evitar la evaporacin, dejar en reposo de 10 a 15 minutos. 9. Observar al microscopio contando en la cuadricula central (para glbulos rojos) las

plaquetas que aparecen mucho ms pequeas que los hemates, redondas, alargadas u ovales, altamente refringentes 10. El cuadro central de la cuadricula mide 1.0 mm por lado y est dividido en 16 cuadritos ms pequeos, de tal manera que el nmero total de estos ltimos es de 400, mismos en los que se lleva a cabo el recuento de plaquetas. RESULTADOS: Los recuentos de plaquetas, al igual que los eritrocitos y leucocitos, se expresan como concentraciones, que en este caso seran nmero de clulas por unidad de volumen de sangre, que es 1mm3 Despus de contar las plaquetas presentes en los 400 cuadritos centrales, el nmero obtenido se multiplica por el factor de dilucin de la siguiente manera: N de plaquetas x mm3 = No. De plaquetas contadas X dilucin X 10 Dilucin: 1:100 3 Este factor corresponde, para obtener los resultados por mm ya que el volumen de la cmara es de 0.1 mm3 El nmero de plaquetas fue de 535, por lo que al realizar los clculos quedaron as: No. de plaquetas = 535 X 100 X 10= 535 000 plaquetas por mm3, lo que indica un ndice elevado de plaquetas. VALORES DE REFERENCIA
(Millones de clulas/mm3) Hombres y Mujeres:..200 000 - 400 000

Recuento de plaquetas 400000/mm3 CONCLUSN:

/mm3. REFERENCIA 200000-

BIBLIOGRAFA: DACIE, LEWIS., HEMATOLOGA PRCTICA, ESPAA, ELSEVIER MOSBY, 2008, Pag. 19 http://edurirom.blogspot.mx/2012/03/practica-no-6-recuento-de-plaquetascon.html http://www.labsar.com/archivos/fichastecnicas/OXALATO%20DE%20AMO NIO.pdf http://recuentodeplaquetas.blogspot.mx/2008/02/recuento-de-plaquetas.html