METODO DEL ROJO CONGO DE BENNHOLD PARA AMILOIDE

FUNDAMENTO
La tincin de Rojo Congo cuenta con dos teoras aceptadas explicadas a continuacin:
La molcula de Rojo Congo, dado a su tamao de 21 amstrong, tiene un tamao similar al de la
protena amiloide, el cual es de 19 amstrong, el componente glcido (asociado a la sustancia P).
Por lo tanto, ambas estructuras se unirn a travs de puentes de hidrgeno, entre los grupos
Carboxilos (COOH) de la protena amiloide y el grupo Amino (NH2) que se encuentra en el
colorante.
La segunda teora estudiada, nos dice que la molcula de Rojo Congo se intercala entre protenas
adyacentes, las cuales normalmente estaran unidas por puentes de hidrgeno. La molcula de
colorante interrumpira estas uniones, creando nuevas uniones de puente de hidrgeno entre el
colorante y la protena, estabilizndose de esta forma. La distancia aparente entre protenas
adyacentes sera de 4,8 amstrong.
PRODECIMIENTO
FIJACION: Formalina neutra al 10% estabilizada
SECCIONES: En parafina, de 6 a 12 micrones
SOLUCIONES
SOLUCION DEL ROJO CONGO AL 1%
Rojo Congo....................................................................................................... 1.0g
Agua destilada............................................................................................ 100.0 ml
SOLUCIONES DE HIDROXIDO DE SODIO al 1%
Hidroxido de Sodio ......................................................................................... 1.0 g
Agua destilada.............................................................................................. 99.0 ml
SOLUCION ALCOHOLICA ALCALINA
Solucin de Hidroxido de sodio 1% ................................................................ 1.0 ml
Solucin de Alcohol etlico............................................................................. 99.0 ml
PROCEDIMIENTO
1. Desparafinizar e hidratar hasta llegar al agua destilada.
2. Colorear con una solucion filtrada de Rojo de Congo durante 1 Hora

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Enjuagar brevemente con agua destilada

Diferenciar rpidamente en solucin alcohlica alcalina
Lavar con agua corriente durante 5 minutos
Contrastar con la solucin de Hematoxilina de Mayer durante 5 minutos
Lavar con agua corriente durante 15 minutos
Deshidratar y aclarar a travs de alcohol etlico al 95% , alcohol etlico absoluto y xileno, 2
cambios cada uno, 2 minutos cada uno
9. Montar con un medio resinoso.
RESULTADOS
AMILOIDE .............................................................................. de rosado a rojo y manzana
verdoso bajo luz polarizada
NUCLEOS...................................................................................... azul