IODO IODETO LUGOL 2%

"SOMENTE PARA DIAGNSTICO IN VITRO" - Marca: QEEL

- Finalidade: Produto somente para uso in vitro. Para colorao de bactrias Gram positivas e/ou Gram negativas em esfregaos de material colhido em reas diversas (cavidade bucal, secreo vaginal, superfcies com infeco bacteriana, secrees, etc). Utilizado tambm no processo de identificao de colnias bacterianas isoladas em meios de cultura slidos ou lquidos. - Principio: Considerando-se a constituio das membranas das clulas bacterianas, podemos observar, basicamente, dois grupos de bactrias. Em um grupo predominam cidos teicicos e no outro, lipopolissacardeos. Em 1984, Christian Gram desenvolveu uma tcnica de colorao onde um grupo de bactrias se corava de azul escuro, enquanto outro grupo permanecia incolor, ou se corava por um segundo corante. As bactrias gram positivas possuem grande quantidade de cidos teicicos na membrana. Aps colorao por violeta de genciana, seguida de tratamento com soluo de iodo (lugol), forma-se um complexo corado, cor escura, entre a violeta de genciana e o iodo. Essa colorao fortemente retida pelas bactrias, no sendo facilmente removida aps tratamento com lcool. As demais bactrias descoradas (gram negativas), so reveladas com soluo de Fucsina e apresentam colorao avermelhada. Fungos e famlias bacterianas so, em geral, gram positivos. Protozorios e clulas animais so gram negativos. -Reagentes e Apresentao: Iodo Ressublimado Iodeto de Potssio gua qsp 20 g/L 40 g/L

Apresentao: Frasco de vidro de 500mL ou 1000mL - Materiais necessrios no inclusos: Suporte para colorao Lminas para colorao Etanol 96 GL Violeta Segundo Gram Fucsina Fenicada Segundo Gram - Armazenamento e estabilidade dos reagentes: As datas de vencimento aparecem no rtulo de cada embalagem. No utilizar reagentes cuja data de validade tenha expirado. O material deve ser armazenado de acordo com os dizeres do rtulo, no caso exemplificado deste produto, a condio de armazenagem a temperatura ambiente (15 a 30C) Para manter a integridade do produto, o transporte a longas distncias dever ser feito em embalagens que mantenham a temperatura ideal. - Cuidados e precaues com o uso dos reagentes: No se tem conhecimento de alteraes nas caractersticas do produto.

Produto somente para uso in vitro.

Evitar contato do produto com a pele e mucosa; em caso de contato com a pele lavar a rea afetada com gua corrente abundante por pelo menos 15 minutos. No ingerir o produto, caso a ingesto ocorra procurar orientao mdica. No reaproveitar a embalagem. Descartar em local apropriado para dejetos potencialmente contaminados. Aps a mistura com amostras de material biolgico, devem ser observados os procedimentos padronizados de Boas Prticas de Laboratrio para o descarte deste tipo de material. Os componentes deste produto no so de origem biolgica. - Amostra: A amostra deve ser de esfregaos feitos a partir de colnias bacterianas, esfregaos de secrees colhidas em diversas reas do organismo ou esfregaos de sedimento urinrio. A coleta deve ser realizada com cuidado e as amostras devem ser utilizadas frescas. Ter em mente que as amostras utilizadas so materiais biolgicos e pedem por cuidados especiais no manuseio; tomar os cuidados normais de manuseio de laboratrio. Evitar contato do produto com a pele e mucosa; em caso de contato com a pele lavar a rea afetada com gua corrente. No ingerir o produto, caso a ingesto ocorra procurar orientao mdica. Utilizar sempre luvas. Utilizar culos de segurana Utilizar aventais de proteo O material deve ser descartado em um recipiente com uma soluo 0,5% de hipoclorito de sdio, importante ressaltar que para a confeco dos esfregaos, as lminas devem encontrar-se limpas e isentas de gorduras. - Procedimento Tcnico: 1. Fixar os esfregaos atravs das tcnicas usuais. 2. Dispor as lminas em um suporte de colorao 3. Cobrir as lminas com a soluo de violeta de genciana durante 1 minuto. 4. Escorrer a soluo de violeta de genciana e lavar rapidamente a lmina em gua (tirar o excesso do corante). 5. Cobrir a lmina com soluo de lugol, durante 1 minuto. Drenar a soluo de lugol e lavar com gua corrente. 6. Cobrir a lmina com etanol 96GL, completamente, durante 1 minuto. 7. Lavar a lmina com gua e observ-la. Se ainda tiver manchas de cor violeta, repetir o processo com lcool por 15 a 30 segundos. Lavar com gua. 8. Cobrir a lmina com soluo de Fucsina de Gram diluda 1:10, durante 20 segundos. 9. Escorrer e lavar rapidamente com gua, deixando-a secar ao ar, em posio vertical - Valores de referncia: As bactrias gram positivas coram-se de roxo. As bactrias gram negativas assumem a colorao de fundo, um tom avermelhado definido pela Fucsina. - Limitaes do sistema: Para se obter timo desempenho do sistema, necessrio que o procedimento tcnico seja rigorosamente seguido conforme instrues de uso. Qualquer alterao poder levar resultados errneos. No usar detergente base de fosfato. - Controle de qualidade do sistema: 1. O controle de qualidade em microscopia de esfregao bacteriolgico depende diretamente da formao e da experincia do profissional que avaliar a qualidade dos esfregaos, colorao, etc.

2. 3. 4. 5.

A limpeza e a secagem adequada do material a ser utilizado so de fundamental importncia para a estabilidade dos reagentes e obteno de resultados corretos. A gua usada na limpeza deve ser de boa qualidade. Colunas deionizadoras saturadas liberam ons diversos, aminas e agentes oxidantes, o que provoca o deterioramento dos reagentes. As lminas devem encontrar-se limpas e isentas de gorduras.

- Referncias Bibliogrficas: 1. Otto Bier: Bacteriologia e imunologia, 19 edio, 1978. 2. Who: Manual of basic techniques for a helath laboratory 1980 3. Balous A.: Hausler W.J.; Hermann K.L.; Isenberg H.D; Shadomy HJ: Manual of clinical microbiology, 1289 a 1314; 1991 4. Howard B.J.: Clinical and pathogenic microbiology, 107-112; 1994 - Fabricante: Nome: QEEL Qumica Especializada Erich Ltda CNPJ: 64.822.885/0001-97 Endereo: Rua Afonso Vidal, 192 - So Paulo - CEP: 05723-330 - Servio de Atendimento ao Consumidor (SAC) Em caso de dvida ligue para o sistema de atendimento ao consumidor: Fone: (011) 3742-5113 - Fax: (011) 3772-7246 E-mail: vendas@qeelquimica.com.br Site: www.qeelquimica.com.br

N Registro no Ministrio da Sade: 80127400006 Responsvel Tcnico: Sabrina Thomaz Vicente CRQ N 04200279 Reviso: 01 (08/2012)