GEL FILTRATION CHROMATOGRAPHY (GFC)

TUGAS MATA KULIAH KIMIA ANALITIK II DOSEN : Dr. Imam Santoso, M.Sc

DISUSUN OLEH Ahmad Faiz rrahman Um!ir "##$%&'#$#'( Azmi M hammad I)*a+ "##$%&'#$,&( -.ntia D!/i "##$%&'01#$( E2a Fitrianin3sih "##$%&'&014( Fitrian. E2a Sa5 tri "##$%&'&011( L!+iana 6 tri "##$%&'01,%( Mita D/i 7a.anti "##$%&80'84( 9!n. Ama+ia "##$%&80'%,( : nita Fitriani "##$%&%&$,#( : n s M hadi "##$%&'#$#$( 7U9USAN KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU 6ENGETAHUAN ALAM UNI;E9SITAS NEGE9I 7AKA9TA

MEI $&0& BAB I PENDAHULUAN

I.1 Latar Belakang I+m 2imia ana+iti2 ada+ah i+m zat m!n=adi 2imia .an3 m!n3id!nti<i2asi dan dimana

m!misah2an

2om5on!n>2om5on!nn.a,

2romato3ra<i ada+ah s at

so+ si .an3 s!rin3 di3 na2an da+am s!n.a/a 2imia. ?i+a da+am

m!+a2 2an 5!misahan cam5 ran ata s at

s!n.a/a t!rdiri dari *!r*a3ai 2onstit !n d!n3an 5!r*!daan

2 ran dan 3!om!tri mo+!2 + .an3 *!r*!da, ma2a 2romato3ra<i .an3 coco2 dan !<isi!n di3 na2an da+am 5!misahan t!rs!* t, .ait kromatografi ekslusi. Kromato3ra<i !2s+ si ata 2romato3ra<i 3!+ m!r 5a2an m!tod!

2romato3ra<i .an3 *ar , m!+i5 ti 2romato3ra<i 5!rm!asi 3!+ dan 2romato3ra<i <i+trasi 3!+. 6!r*!daan dari 2!d a macam 2romato3ra<i ini, .ait : 6ada 2romato3ra<i 5!rm!asi 3!+, <asa 3!ra2n.a *!r 5a 5!+ar t or3ani2 dimana +!*ih *an.a2 di3 na2an o+!h ah+i>ah+i 2imia 5o+im!r. 6ada 2romato3ra<i <i+trasi 3!+, <asa 3!ra2n.a *!r 5a 5!+ar t air dimana +!*ih *an.a2 di3 na2an o+!h ah+i>ah+i *io2imia. Isti+ah Kromato3ra<i !2s2+ si st!ri2 +!*ih dian= r2an nt 2

m!n33anti2an 2!d a nama t!2ni2 2romato3ra<i ini. Kromato3ra<i !2s2+ si st!ri2 ada+ah sa+ah sat =!nis 2romato3ra<i dimana <asa

diamn.a *!r 5a 5!n.arin3 mo+!2 +. 6!n.arin3 mo+!2 + ini da5at

KELOMPOK 1

Page 2

*!r 5a 5o+im!r 2ar*ohidrat "d!2stran( dan a2ri+amida .an3 m!m5 n.ai str 2t r rantai h * n3 si+an3 da+am rantai 5o+im!rn.a. Kar!na si<atn.a .an3 hidro<i+i2, 5!n.arin3 mo+!2 + ini da5at m!n3a*sor5si air dan 5!n3!m* n3ann.a m!n.!*a*2an str 2t r>str 2t rn.a m!n=adi t!r* 2a. D!ra=at h * n3 si+an3 dari 5!n.arin3 mo+!2 + ini a2an m!n!nt 2an 2 ran dari 5ori>5orin.a. Kar!na m!tod! ini m +a>m +a di2!m*an32an d!n3an m!n33 na2an 3!+ d!2stran dan 5!+ar t air, 2romato3ra<i ini dis!* t = 3a kr !at gra"# "#ltra$# gel.

I.%

R&!&$an Ma$ala' ?ahasan da+am ma2a+ah ini ada+ah : 0. A5a2ah .an3 dima2s d d!n3an 2romato3ra<i 3!+ @ $. A5a2ah .an3 dima2s d d!n3an 2romato3ra<i <i+trasi 3!+ "GF-( @ #. ?a3aimana m!tod! ata 5rinsi5 2!r=a da+am GF- @ ,. A5a sa=a 2!3 naan ata a5+i2asi dari GF- @

I.(

R&ang L#ngk&) 6ada r an3 +in32 5 ini, 5!n. s n m!m*atasi masa+ah m!n3!nai GF- dan a5+i2asin.a da+am as5!2 2!hid 5an.

I.*

Met +e Pen&l#$an 6!n. s n m!m5!ro+!h data da+am 5!m* atan ma2a+ah ini d!n3an m!n33 na2an t!2ni2 st di 5!r5 sta2aan dan m!dia !+!2troni2a.

KELOMPOK 1

Page 3

I.,

T&-&an Pen&l#$an Ada5 n t = an dari 5!n +isan ma2a+ah ini ada+ah s!*a3ai *!ri2 t : 0. Unt 2 m!m!n hi t 3as Kimia Ana+iti2 II $. M!nam*ah 5!n3!tah an *ai2 *a3i mahasis/a ma 5 n *a3i mas.ara2at #. Unt 2 m!n3!tah i a5+i2asi dari 2romato3ra<i 3!+ <i+trasi ,. Unt 2 m!n3!m*an32an da.a 2r!atiAitas mahasis/a da+am m!man<aat2an 5rinsi5 2romato3ra<i 3!+ <i+trasi da+am 2!hid 5an s!hari>hari %. Unt 2 m!+atih mahasis/a *!rtan33 n3>=a/a* atas t 3as .an3 dimi+i2in.a

KELOMPOK 1

Page 4

BAB II PEMBAHA.AN

II.1 /r !at gra"# Gel M!n r t 3am*ar,

Ko+om !2s2+ si m!n3and n3 mo+!2 + 5arti2!+ *!r5ori d!n3an diam!t!r .an3 *!r*!da. S at c 5+i2an dis nti2an 2! da+am 2o+om

s!hin33a *!rdi< si 2! da+am 5ori .an3 m!mi+i2i diam!t!r .an3 +!*ih *!sar dari diam!t!r a2ti< c 5+i2an. 9!t!nsi r!+ati< dari mo+!2 + c 5+i2an dari s at 5arti2!+ *ahan 3!+, s!5!rti 3!+ * +at .an3 *!r5ori d!n3an

2 ran .an3 *!r*!da. Mo+!2 + c 5+i2an t!r+ihat s!*a3ai * +atan hitam. Mo+!2 + .an3 t!r+a+ KELOMPOK 1 *!sar s +it nt 2 m!mas 2i 5ori 3!+ s!hin33a Page 5

*!rada di + ar 5arti2!+. Mo+!2 + ini *!r3!ra2 c!5at m!+!/ati 2o+om dan m nc + 5a+in3 5!rtama da+am 2romato3ram. S!dan32an mo+!2 + .an3 2!ci+ da5at mas 2 2! da+am 5ori 3!+ dan 2! da+am 5arti2!+. S!n.a/a ini t!rtahan 2 at, s!hin33a *!r=a+an c!5at m!+!/ati 2o+om dan m nc + 5!rtama 5ada 2romato3ram dan .an3 *!r3!ra2 +am*at m!+!/ati 2o+om m nc + 5a+in3 a2hir. ?i+a mo+!2 + 5!+ar t 2!ci+, ma2a 5!+ar t t!rs!* t t!r!+ si 5a+in3 a2hir s!hin33a c 5+i2an t!r!+ si s!*!+ m t & . Ha+ ini .an3 m!ndasari 5!r*!daan 2romato3ra<i 3!+ d!n3an 2romato3ra<i .an3 +ain. Mo+!2 + d!n3an 2 ran s!dan3 da5at mas 2 2! *!*!ra5a 5ori .an3 c 2 5

*!sar t!ta5i tida2 2! 5ori .an3 2!ci+. Mo+!2 + m!+!/ati 2o+om d!n3an 2!c!5atan s!dan3 2ar!na 5!misahan didasar2an o+!h 2 ran mo+!2 + .an3 di5isah2an.

M!tod! 2romato3ra<i 3!+ da5at di3 na2an t!rhada5 s at c 5+i2an .an3 +ar t dan *!r3 na mo+!2 + .an3 tin33i, .ait nt 2 5!misahan s5!si!s d!n3an *!rat +!*ih *!sar dari $&&&, t!r tama .an3 ta2 nt 2 m!nda5at2an

t!rion2an. Kromato3ra<i 3!+ s!rin3 di3 na2an

KELOMPOK 1

Page 6

distri* si *!rat mo+!2 t dari 5o+im!r sint!sis. -am5 ran s!d!rhana da5at di5isah2an s!cara m dah d!n3an 2romato3ra<i ini =i2a 5!n. s n cam5 ran m!mi+i2i *!rat mo+!2 + .an3 san3at *!r*!da s!hin33a 5!misahan da5at di+a2 2an da+am = m+ah .an3 *!sar. Kromato3ra<i 3!+ san3at coco2 nt 2 2!r=a a/a+, .ait 5!misahan !2s5+orasi dari s at c 5+i2an .an3 tida2 di2!tah i dimana 5!misahan da5at *!r+an3s n3 san3at c!5at, s!hin33a da5at di2!tah i =!nis cam5 ran "s!d!rhana ata 2om5+!2s( dan *!rat mo+!2 + "r!ndah, s!dan3, ata tin33i(. 6!misahan da+am 2romato3ra<i !2s2+ si st!ri2 atas dasar

5!r*!daan 2 ran mo+!2 + cam5 ran .an3 a2an di5isah2an. Mo+!2 +> mo+!2 + t!rso+Aasi .an3 2 rann.a +!*ih *!sar dari 5ori>5ori t!r*!sar

dari 3!+ .an3 m!n33!+!m* n3, tida2 da5at m!n!m* s 5arti2!+>5arti2!+ 3!+. Mo+!2 +>mo+!2 + ini a2an m!mas 2i 2o+om, m!+!/ati c!+ah>c!+ah diantara 5arti2!+>5arti2!+ indiAid a+ 3!+ dan 2!+ ar 2o+om +!*ih a/a+. Mo+!2 +>mo+!2 + .an3 +!*ih 2!ci+ a2an m!mas 2i =arin3an t!r* 2a di da+am 5arti2!+>5arti2!+ 3!+ 5ada tin32atan .an3 *!rmacam>macam, .an3 dit!nt 2an o+!h 2 ran dan *!nt 2n.a. Kar!na it mo+!2 +>

mo+!2 + ini *!rtahan 5ada *!r*a3ai tin32atan dan a2an m!n=adi t!r!+ si m!n3i2 ti 5!n r nan 2 ran mo+2 +n.a. G!+ d!n3an d!ra=at

5!n3!m* n3an .an3 *!sar di3 na2an

nt 2 m!misah2an mo+!2 +> 5 +a

mo+!2 + *!sar d!n3an *!rat mo+!2 + .an3 *!sar = 3a. ?!3it s!*a+i2n.a.

Distri* si *!rat mo+!2 + dari 5o+im!r>5o+im!r da5at di5!ro+!h d!n3an t!2ni2 2romato3ra<i !2s2+ si, s!hin33a s!n.a/a s!5!rti 5rot!in,

KELOMPOK 1

Page 7

!nzim, 5!5tida asam n 2+!at, hormon, 5o+isa2arida, dan .an3 +ainn.a da5at di5isah2an. 9!a2si 2!s!tim*an3an distri* si 5ada 2romato3ra<i !2s2+ si ada+ah

Bm

Bs

Bm Bs

: *an.a2n.a 2om5on!n da+am <asa 3!ra2 : *an.a2n.a 2om5on!n da+am <asa diam

Ma2a,

K = [ Xs ] / [ Xm ] = k ( Vm / Vs )
Dimana, ;m : ;s : Ao+ m int!rstisia+ tota+ <asa 3!ra2 Ao+ m 5!+ar t di da+am 5ori>5ori 2o+om t!r2!mas, .an3 da5at di3 na2an o+!h mo+!2 + 2om5on!n 2C K : : <a2tor 2a5asitas 2o!<isi!n distri* si

?!rdasar2an 5!rsamaan di atas : 0. 2a+a 5ros!sn.a *!nar>*!nar *!rdasar2an !2s2+ si dan s!m a 5ori da5at m!mas 2i mo+!2 + 2om5on!n, ma2a : DBmE F DBsE, s!hin33a KF0. $. =i2a tida2 ada sat 5 n 5ori3!+ .an3 da5at m!mas 2i 2om5on!n, ma2a DBsEF &, s!hin33a KF&.

KELOMPOK 1

Page 8

Ma2a, har3a K da+am 2romato3ra<i !2s2+ si &GKG0 dimana s!m a 2om5on!n a2an t!r!+ si da+am = m+ah Ao+ m! t!rt!nt t!rhin33a. dan ta2

K! nt n3an Kromato3ra<i G!+

0. Pita-pita sempit, 6ada 2romato3ra<i, 5!+!*aran 5ita da5at m!n.!*a*2an s!nsitiAitas 5ada d!t!2tor. 6ada 2romato3ra<i 3!+, s!m a 5ita m!m*!ri2an is.arat *ai2 d!n3an d!t!2tor r!<ra2tom!t!r. $. Waktu pemisahan pendek, 6ada 2romato3ra<i 3!+, s!m a c 5+i2an t!r!+ si d!n3an c!5at. S!+ain it , tida2 5!r+ 2om5+!2s. #. Waktu pemisahan mudah diramalkan, Dis!*a*2an s!n.a/a t!r!+ si hantaran har3a t 9 *!sar. 4. Mudah mengidentifikasi puncak-puncak cuplikan 5. Hampir tidak ada cuplikan atau perubahan kimia selama pemisahan 6. Tidak ada kecenderungan akumulasi senyawa tertahan salam k l m !aik dari pelarut yang tidak murni maupun cuplikan yang k t r nt 2 mo+!2 + !+ si 3radi!n ata cara +ain .an3 +!*ih

K!r 3ian Kromato3ra<i G!+

". #apasitas terbatas $. Tidak dapat digunakan untuk cuplikan dengan ukuran hampir sama KELOMPOK 1 Page 9

%. Prinsip pemisahan tidak sama dengan kr mat grafi lain

Macam-macam gel S!5had!H M!r 5a2an *ahan 5!n.arin3 mo+!2 + .an3 5o5 +!r di3 na2an nt 2 5!misahan 5rot!in. ?ahann.a t!r* at dari 5o+isa2arida d!2stran .an3 2ar!na m!m at 3 3 s hidro2si+ di s!5an=am3 rantai 5o+im!rn.a m!n=adi2an 3!+ ini *!rsi<at +!*ih 5o+ar dan da5at m!n.!ra5 air. 7 m+ah h * n3an si+an3 dari 5!m* atann.a da5at di2!nda+i2an nt 2 m!n3at r 2 ran 5ori dan *atas !2s2+ si. G!+

di2ara2t!risti2 *!rdasar2an 2!mam5 an 5!n33!+!m* n3ann.a dan 2!mam5 an m!m5!ro+!h air 2!m*a+i .an3 t!rs!ra5 o+!h 3!+ 5ada 5!n33!+!m* n3an "/at!r r!3ain(. -ontohn.a : G>0& m!m5 n.ai har3a 5!ro+!han 2!m*a+i 2ira>2ira 0 mLI3 3!+ 2!rin3 dan G>$&& m!m5 n.ai har3a 5!ro+!han 2!m*a+i 2ira>2ira $& mLI3 3!+ 2!rin3.

KELOMPOK 1

Page 10

 ?io3!+ M!r 5a2an 3!+ 5!n.arin3 mo+!2 + .an3 +!*ih in!rt, t!rdiri dari 5o+ia2ri+ amida. ?io3!+ di* at dari r!a2si 2o5o+im!risasi s!n.a/a a2ri+amida d!n3an N,N m!ti+!n *is a2ri+amida. ?ahan ini tida2 +ar t da+am air dan 5!+ar t or3ani2 m mn.a dan da5at di3 na2an 5ada r!ntan3an 5H $ sam5ai d!n3an 00. Adan.a matri2s 5o+ia2ri+amida m!n r n2an 2!m n32inan 5!n.!ra5an zat>zat 5o+ar. ?io3!+

m!mi+i2i *atas !2s2+ si *!rat mo+!2 + antara 0'&&>,&&.&&&. Stira3!+ M!r 5a2an 3!+ 5o+istir!na .an3 san3at *!r3 na nt 2 5!misahan

+ar tan ta2 *!rair .an3 m rni di da+am m!ti+!n 2+orida, to+ !na, tri2+oro*!nz!na, t!tra hidro < ran, 2r!so+, dan dim!ti+ s +<o2sida. G!+

KELOMPOK 1

Page 11

ini tida2 da5at di3 na2an da+am air, as!ton dan a+2oho+. G!+ ini m!mi+i2i *atas !2s2+ si *!rat mo+!2 + antara 08&&>,&.&&&.&&&.

II.% Gel F#ltrat# n C'r !at gra)'0 (GFC)

Ko+om .an3 di3 na2an ada+ah 2o+om *ia.a dimana !+ !n di*iar2an m!n3a+ir 2ar!na 3raAitasin.a. La= m!nin32atn.a 5orositas 3!+. a+iran a2an *!rtam*ah d!n3an

2 ran 5arti2!+ .an3 = 3a di5!n3ar hi o+!h Aariasi

6aram!t!r>5aram!t!r 2o+om da5at dih * n32an s!cara mat!mati2 : Vb = Vo + Vi +Vr = Vo Vs Vi = m Sr / s Vi = Sr r / s (1+ Sr / s) = Vo + K Vi Vi / Vo = 1+ K Vi / Vo K!" = (V#$Vo) / (Vb$Vo) K!" Ks = K Vi T!2ni2 ini didasari atas in2+ si dan !2s+ si s at zat t!r+ar t m!+a+ i <asa diam .an3 t!r* at dari 3!+ 5o+im!r .an3 *!ri2at si+an3 dan *!r5ori KELOMPOK 1 Page 12

h!t!ro3!n. Da+am 2romato3ra<i zat 5adat t!r=adi 5!misahan antara <asa cair di da+am 5arti2!+ 3!+ dan cairan di + ar .an3 m!n3!+i+in3i 5arti2!+ 3!+. A2i*at dari 5!r*!daan +a= 5!rm!asi, masin3>masin3 mo+!2 + zat t!r+ar t dari dan 2! int!rior 5arti2!+ 3!+. D!n3an a+iran cairan, mo+!2 + *!rdi< si 2! s!m a *a3ian 3!+ t!ta5i mo+!2 + *!sar tida2 mas 2 2! da+am ron33a>ron33a 3!+. A2i*atn.a mo+!2 + +!/at tan5a rintan3an m!+a+ i int!rstisi Ao+ m! cairan, t!ta5i mo+!2 + 2!ci+ t!r5!n!trasi 2! c!+ah 3!+. S!*a3ai 5!n n=an3 <asa diam di3 na2an H!ro3!+, .ait s at s!+ or3ani2 da5at *!rsi<at hidro<i+i2 ".ait a3ar dan d!2stran .an3 t!ri2at si+an3 5ada 5o+ia2ri+amida( ata 5 n hidro<o*i2 "5o+istir!na(. S/!++in3 a2an t!r=adi *i+a 3!+ hidro<i+i2 .an3 tida2 +ar t 5ada air ditam*ah2an air.

III.( Mekan#$!e Gel F#ltrat# n C'r !at gra)'0 (GFC) Ek$kl&$# I n E2s2+ si ion ada+ah s at 5ros!s nt 2 m!misah2an mat!ri ioni2 dari mat!ri non ioni2 2ar!na 5!r*!daan distri* si 2!d a ti5! zat 5!+ar t 5ada <asa r!sin 5!n 2ar ion dan +ar tan air. 7i2a s at r!sin 5!n 2ar ion di+!ta22an da+am +ar tan !+!2tro+it !nc!r "da+am air(, 2ons!ntrasi !+!2tro+it 5ada 2!s!tim*an3an da+am <asa r!sin +!*ih 2!ci+ dari +ar tan s!2!+i+in3, .ait <as! + arn.a, *i+a r!sin di+!ta22an 5ada +ar tan non di>!+!2tro+it ma2a non !+!2tro+it *!r saha t!rdistri* si s!cara m!rata 5ada 2!d a <asa. 7i2a s at +ar tan

m!n3and n3 mat!ri>mat!ri ioni2 dan non ioni2 di+!ta22an 5ada +a5isan atas 2o+om *!risi r!sin dan dic ci d!n3an air, mat!ri ioni2 a2an m!n3a+ir m!n3!+i+in3i 5arti2!+ r!sin. S!dan32an non ioni2 KELOMPOK 1 Page 13

*!rdi< si 2! <asa r!sin dan mas 2 2! da+am 5arti2!+ r!sin +a= 5!r5indahan mat!rin.a. Non ioni2 a2an +!*ih r!ndah 2om5on!n.a =i2a di*andin32an d!n3an 2om5on!n ioni2.

M le1&lar .#e2e An rgan#134e l#t J!o+it a+am dan sint!sis m!m*!nt 2 s at sarin3an mo+!2 +

nt 2 5!misahan 3as>3as dan mo+!2 + or3ani2 *!r 2 ran 2!ci+. ;o+ m! s at z!o+it o+!h t!r*!nt 2 dari ron33a>ron33a dan .an3 a2si

dih * n32an

sa+ ran>sa+ ran.

6!n.arin3an

5!n3ham*atan di2om*inasi2an o+!h a2tiAitas adsor5si 5!rm 2aan matri2s 2rista+ s!hin33a z!o+it da5at m!misah2an mo+!2 +>mo+!2 + .an3 +!*ih 2!ci+ dan +!*ih *!sar dari sa+ ran. A2tiAitas 5!rm 2aan dan 3!om!tris mo+!2 +ar san3at 5!ntin3 da+am 5!misahan ini. J!o+it ada+ah ran32a t!trah!dra+ .an3 *!rsat m!m*!nt 2

str 2t r saran3 +!*ah d!n3an ron33a *!sar dan sa+in3 *!rh * n3an m!+a+ i sa+ ran 2!ci+. 6!nam5an3 +intan3 dari sa+ ran m!n!nt 2an 2 ran mo+!2 + .an3 da5at mas 2 2! da+am ron33a. U2 ran dari 5osisi ion +o3am da+am 2rista+ z!o+it dan ti5! str 2t r =arin3an ran32a t!trah!dra+ a+ mina si+i2at z!o+it m!n!nt 2an diam!t!r !<!2ti< dari sa+ ran t!rs!* t. Macam>macam ti5! z!o+it, .ait ti5! mo+!2 +ar si!A! , a

DNa0$"A+O$(0$"SiO#(0$E, mo+!2 +ar si!A! m!m5 n.ai a<initas +!*ih *!sar d!n3an mo+!2 + 5o+ar dan s!n.a/a .an3 t!r5o+arisasi 2ar!na ind 2si 5ada mo+!2 + non 5o+ar d!n3an 2 ran sama.

KELOMPOK 1

Page 14

Fa$a D#a! Fasa diam san3at m!n!nt 2an 5ros!s 5!misahan da+am 2romato3ra<i 3!+. Fasa diam .an3 di3 na2an har s coco2 nt 2

5!misahan s!n.a/a d!n3an *!rat mo+!2 +n.a, misa+n.a 5o+istir!na *!r5ori .an3 m!mi+i2i i2atan si+an3 di><!ni+ *!nz!na. Da+am <i+trasi 3!+, 5!+ar t *!rair *an.a2 di3 na2an d!n3an 3!+ a3a2 2a2 . Fa$a Gerak Da+am 2romato3ra<i 3!+, <asa 3!ra2 tida2 di *ah> *ah nt 2 m!n3at r r!so+ si dan 2!2!nta+an .an3 r!ndah 5ada s h 5!misahan "$%>%&&-(, ind!2s r!<ra2tra2si o5tim m Da+am <i+trasi 3!+ har s ditam*ah2an 3aram 5ada <asa 3!ra2 nt 2 m!n=a3a

2!2 atan ion, s!*a+i2n.a ion c 5+i2an *!r=a+an m!+!/ati <asa diam .an3 *!ra2i*at 5!n. s tan 3!+ dan 5!n r nan 5!rm!a*ititas 2o+om.

6!rsamaan nt 2 r!so+ si .an3 di3 na2an da+am 2romato3ra<i 3!+ :

Dimana, ;r0 dan ;r$ ada+ah Ao+ m! !+ si K0 dan K$ ada+ah *!rat dari c 5+i2an

KELOMPOK 1

Page 15

Unt 2 m!nda5at2an ni+ai r!so+ si .an3 tin33i, t!r3ant n3 dari <a2tor><a2tor *!ri2 t: 0. S!+!2tiAitas .an3 *ai2 m!nci5ta2an 2ondisi .an3 =ara2 antara da!rah c 5+i2an = 3a *ai2. $. S!+!2tiAitas .an3 *ai2 m!m*!ri2an 5 sat a2si L!<!2

m!m5!r*!sar da!rah ata zonaM.

Dari 3am*ar diatas, da5at di2!tah i *ah/a r!so+ si .an3 tin33i dida5at dari 5!misahan .an3 c 2 5 5ada c 5+i2an,5 nca2 5ada s!+!2tiAitas tin33i m!mi+i2i =ara2 .an3 +!*ih +!*ar di*andin32an d!n3an s!+!2tiAitas .an3 r!ndah. Garis *ir m!/a2i+i !<isi!nsi .an3 tin33i dan 3aris hi=a m!/a2i+i !<isi!nsi r!ndah.

KELOMPOK 1

Page 16

II.* A)l#ka$# Gel F#ltrat# n C'r !at gra)'0 (GFC) P&r#"#ka$# Pr tea$e +ar# Ek$ekret r#5.ekret r# .ta+#&! L( Ascaridia galli A?ST9AK : Enzim 5rot!o+iti2 .an3 dis!2r!si2an o+!h 5arasit m!main2an 5!ran 5ada 5ros!s 5!n!trasi dan mi3rasi =arin3an inan3. 6!n!+itian ini *!rt = an nt 2 m!m rni2an 5rot!as! .an3 di+!5as2an m!+a+ i !2s2r!toriIs!2r!tori stadi m L# &. galli. L# di5!ro+!h dari s s ha+ s 0&& !2or a.am 5!t!+ r H.S!H ?ro/n t = h hari s!t!+ah 5!m*!rian dosis 8&&& L$ m!+a+ i o!so<a3 s a.am. S!*an.a2 % N 0& !2or L# di2 +t r s!cara in 'itr da+am s!tia5 m+ m!di m ( sswell Park Mem rial )nstitute *(PM) "64+,, 5H 8,', tan5a m!rah <!no+ da+am in2 *ator 5ada t!m5!rat r #4odan %O -O$ s!+ama #

hari.E2s2r!toriIs!2r!tori di5r!5arasi dari 5rod 2 m!ta*o+ism! L# .an3 di+!5as2an 2! da+am m!di m 2 +t r. 6rot!as! dim rni2an KELOMPOK 1 Page 17

d!n3an kr !at gra"# "#ltra$# gel matri2s s!5had!H G>0&& dan ani n e-change matri2s DEAE s!5had!H A>%&. A2tiAitas 5rot!as! di =i t!rhada5 2as!in. Kons!ntrasi 5rot!in dihit n3 m!n3i2 ti m!tod! ?rad<ord. Hasi+ 5!n!+itian m!n n= 22an *ah/a a2tiAitas !nzim 5ada <ra2si #0 2romato3ram <i+trasi 3!+ +!*ih tin33i di*andin32an d!n3an ani n e-change. 6rot!as! .an3 dis!2r!si2an o+!h stadi m L# &. galli da5at dim rni2an *!rdasar2an *!rat mo+!2 +n.a.

P&r#"#ka$# Dan /arakter#$a$# Pr te#n Ant#kanker Hat# Dar# /a)ang En+ "#t A?ST9AK : Kan2!r hati m!r 5a2an =!nis 2an2!r .an3 s!rin3 di= m5ai di Indon!sia. Kan2!r .an3 dit +ar2an m!+a+ i cairan t * h ini 2!ra5 di2ait2an d!n3an in<!2si h!5atitis ? ata h!5atitis -. 6ada Um mn.a, 5!nd!rita 2an2!r hati 5!rnah t!rin<!2si h!5atitis ? ata h!5atitis -. S!+ama ini, 5!n3o*atan 5!nd!rita 2an2!r hati di+a2 2an d!n3an 5!m*!rian o*at sora<!ni*. Nam n o*at t!rs!* t tida2 da5at m!n.!m* h2an s!cara tota+, han.a mam5 m!m5!r+am*at 5!r2!m*an3an s!+ 2an2!r hatin.a sa=a. O+!h 2ar!na it , 5!ncarian o*at anti2an2!r hati s!rta 5rod 2si s!cara masa+ m!r 5a2an sa+ah sat a+t!rnati< so+ si. Um mn.a o*=!2 .an3 di=adi2an tar3!t

5!n!m an o*at anti 2an2!r ada+ah s!n.a/a 2imia. S!*a+i2n.a, =aran3 ada st di .an3 m!n<o2 s2an 5!n!+itian 5ada 5rot!inn.a. 6ada 5!n!+itian ini, a2an dicari 5rot!in anti 2an2!r hati dari KELOMPOK 1 Page 18

2a5an3 !ndo<it. Iso+at 2a5an3 !ndo<it 2o+!2si 6 s+it ?iot!2no+o3i LI6I t!+ah dis2rinin3 2!mam5 ann.a s!*a3ai inhi*itor 9NA h!+i2as! H-;. 6rot!in a2an di5 ri<i2asi d!n3an m!n33 na2an *!*!ra5a st!5 2romato3ra<i, s!5!rti anionIcation !Hchan3! 1'r !at gra)'0 danIata gel "#ltra$#. S!+an= tn.a di+a2 2an

2ara2t!risasi t!rhada5 5rot!in anti 2an2!r hati t!rs!* t, t!rmas 2 s 2 !n asam amino dari N t!rmina+n.a, dan 2!m dian di+a2 2an homo+o3. s!arch a5a2an 5rot!in t!rs!* t *ar ata nt 2 m!n!nt 2an tida2.Iso+at t!rs!* t

dihara52an mam5 m!n3hasi+2an 5rot!in anti2an2!r hati. Iso+at .an3 m!m5 n.ai a2tiAitas 5!n3ham*atan .an3 5a+in3 tin33i a2an di5 ri<i2asi dan 2ara2t!risasi s!rta dit!nt 2an s!2 !n asam amino>n.a, nt 2 2!m dian diana+isa 2!*ar ann.a.

S!+an= tn.a dit!nt 2an 3!n .an3 m!n32od!n.a. 6rod 2si masa+ 5rot!in m!n33 na2an t!2ni2 r!2a.asa 3!n!ti2a. Dari 5!n!+itian ini dihara52an a2an dida5at2an 5rot!in *ar .an3 m!m5 n.ai ni+ai nt 2 di3 na2an da+am ind stri 5an3an dan <armasi.

Pe!#$a'an +an )e!&rn#an )ar$#al en6#! 7#lana$e +ar# Bacillus circulans +engan kr !at gra"# "#ltra$# gel A?ST9AK : Bi+an m!r 5a2an 2om5on!n h!mis!+ +osa m!mi+i2i 5ot!nsi tin33i a2hir KELOMPOK 1 .an3 *!r3 na. Bi+anas! tama dari

nt 2 di=adi2an 5rod 2 "!ndo>0,,>P>D>Hi+anas!( Page 19

m!r 5a2an

2!+om5o2

!nzim

.an3

m!mi+i2i

2!mam5 an

m!n3hidro+isis Hi+an. Sa+ah sat 2!3 naan Hi+anas! ada+ah 5ada 5ros!s 5!m tihan 5 +5 2ra<t 5ada ind stri 5 +5 dan 2!rtas. Iso+at !acillus circulans m!mi+i2i a2tiAitas Hi+anas! tin33i, m!mi+i2i d a =!nis Hi+anas! d!n3an *!rat mo+!2 + *!r*!da. T = an dari 5!n!+itian ini ada+ah m!misah2an 2!d a =!nis Hi+anas! dari !. circulans dan m!m rni2an Hi+anas! s!cara 5arsia+ d!n3an m!tod! kr !at gra"# "#ltra$# gel s!rta m!n3!tah i

2ara2t!risti2n.a. !. circulans di2 +t r da+am m!di m Hi+an 2!m dian di =i a2tiAitas Hi+anas! s!cara 2 a+itati< d!n3an 5!/arnaan . ng (ed dan 2 antitati< d!n3an 5!n3 2 ran 3 +a 5!r!d 2si. Enzim !2stras!+ +!r diiso+asi dan dim rni2an s!cara 5arsia+ d!n3an <ra2sinasi *!rtin32at m!n33 na2an amoni m s +<at "$&>'&O( dan 2romato3ra<i <i+trasi 3!+ S!5hacr.+ $&& H9. Enzim hasi+ 5!m rnian 2!m dian di2ara2t!risasi 5H dan s h o5tim nn.a s!rta diana+isis *!rat mo+!2 +n.a d!n3an SDS 6AGE. Bi+anas! dari !. circulans t!+ah dim rni2an s!cara 5arsia+ m!n n= 22an adan.a 5!nin32atan a2tiAitas s5!si<i2 "0$,,#1 UIm3( d!n3an tin32at 2!m rnian 4,'8 2a+i =i2a di*andin32an d!n3an !2stra2 2asar Hi+anas! "0,%41 UIm3(. Hasi+ ana+isis 5ita 5rot!in di2!tah i *!rat mo+!2 + Hi+anas! hasi+ 5!m rnian 5arsia+ *!r 2 ran $4 2Da. Kara2t!risasi !nzim m!n n= 22an Hi+anas! dari !. circulans m!mi+i2i 5H o5tim m ',% d!n3an s h o5tim m 8&-.

KELOMPOK 1

Page 20

 Pe!&rn#an +an

/arakter#$a$# En6#! En+ k#t#na$e +ar#

Agen Pengen+al# Ha0at# Trichoderma reesei A?ST9AK : 6!n!+itian ini *!rt = an nt 2 m!m rni2an dan m!n32ara2t!risasi Enzim! di5rod 2si !ndo2itinas! d!n3an dari Trich derma =am r reesei. a3!n

m!n m* h2an

5!n3!nda+i ha.ati T. reesei iso+at T0# da+am m!di m .an3 m!n3and n3 2o+oida+ 2itin s!*a3ai s m*!r 2ar*on. Lan32ah 5!m rnian !nzim m!+i5 ti 5!n3!nda5an amoni m s +<at, kr !at gra"# "#ltra$# gel dan di+an= t2an d!n3an

2romato3ra<o2 sin3. Hasi+ 5!n!+itian m!n n= 22an T. reesei m!n3hasi+2an !ndo2itinas! d!n3an *!rat mo+!2 + #$ 2Da, s!rta m!m5 n.ai a2tiAitas o5tim m 5ada 5H %,% dan s h #&>#% -.

KELOMPOK 1

Page 21

BAB III PENUTUP

III.1

/e$#!)&lan

0( Kromato3ra<i 3!+ ada+ah m!tod! 2romato3ra<i .an3 da5at di3 na2an t!rhada5 s at c 5+i2an .an3 +ar t dan *!r3 na nt 2 5!misahan s5!si!s d!n3an *!rat mo+!2 + .an3 tin33i, .ait +!*ih *!sar dari $&&&, t!r tama .an3 ta2 t!rion2an. $( Kromato3ra<i <i+trasi 3!+ ada+ah t!2ni2 2romato3ra<i .an3 didasari atas in2+ si dan !2s+ si s at zat t!r+ar t m!+a+ i <asa diam .an3 t!r* at dari 3!+ 5o+im!r .an3 *!ri2at si+an3 dan *!r5ori h!t!ro3!n. #( 6rinsi5 2!r=a 2romato3ra<i 3!+ didasari atas in2+ si dan !2s+ si s at zat t!r+ar t m!+a+ i <asa diam .an t!r* at dari 3!+. Da+am 2romato3ra<i zat 5adat t!r=adi 5!misahan antara <asa cair di da+am 5arti2!+ 3!+ dan cairan di + ar .an3 m!n3!+i+in3i 5arti2!+ 3!+. Mo+!2 + *!rdi< si 2! s!m a *a3ian 3!+ t!ta5i mo+!2 + *!sar tida2 mas 2 2! da+am ron33a>ron33a 3!+ s!hin33a mo+!2 + +!/at tan5a rintan3an m!+a+ i int!rstisi Ao+ m! cairan dan mo+!2 + 2!ci+ t!r5!n!trasi 2! c!+ah 3!+. ,( A5+i2asi 2romato3ra<i <i+trasi 3!+ da+am 2!hid 5an diantaran.a ada+ah nt 2 5!misahan, 5!m rnian, dan 2ara2t!risasi *!r*a3ai macam !nzim .an3 t!r2and n3 di da+am t * h ma2h+ 2 hid 5,

KELOMPOK 1

Page 22

.an3 *!r3 na *a3i *idan3 2!hid 5an +ainn.a s!5!rti *idan3 2!s!hatan dan 2!ma= an i+m 5!n3!tah an.

III.%

.aran D!n3an 5!m* atan ma2a+ah 2romato3ra<i !2s2+ si ini, 5!n. s n *!rhara5 a3ar : Mahasis/a +!*ih m!mahami 2romato3ra<i 3!+ <i+trasi M!nam*ah /a/asan +!*ih *an.a2 t!ntan3 2romato3ra<i 3!+ <i+trasi M!n32a=i +!*ih da+am t!ntan3 man<aat dan a5+i2asi .an3 m!n33 na2an 2romato3ra<i 3!+ <i+trasi. 5rinsi5 2!r=a

KELOMPOK 1

Page 23

DAFTAR PU.TA/A

Adnan, Mochamad. 0114. Teknik #r mat grafi untuk &nalisis !ahan Makanan. :o3.a2arta : Andi. 7ohnson, Ed/ard dan St!A!nson, 9o*!rt. 0110. /asar

#r mat grafi .air. ?and n3 : IT?. Kho52ar. 011&. # nsep /asar #imia &nalitik. 7a2arta : UI 6r!ss. So!*a3io, !t.a+. $&&#. 0ica c mm n te-t b Ma+an3 : UNM. S d=adi. 01'#. Met de Pemisahan. :o3.a2arta : Kanisi s. Und!r/ood. 011'. &nalisis #imia #uantitatif 1disi #eenam. 7a2arta : Er+an33a. 'tt)855"#g.1 7.!#a!#.e+& 'tt)855999.+a!an+#r#. r.#+5"#le5&!!&:al;#$#)::a:*.)+" 'tt)855999.l#)#.g .#+5999.1g#< )r 0ek=1%>(?@(?A@=1==1A(>AA>%?A=%A11 %&&'(//simo)b*i +!)!rko,-i./s,*or 'r/ss,#om/2008/10/08$1/.$-i.&r!s$ 'ri)si'$'ros/ 2ri,' %&&'(//sm*i 0!s&2&i,s&!--,21m,!#,i /#"/'2b.ik!si/34521,' %&&'(//***,si&%,i&b,!#,i /!bs&r!#&/s1/20095S156k!7208i. !7209&!mi 720:5;/mis!%!)720 !)720'/m2r)i!)720'!rsi!.720/)<im 720=i.!)!s/720 !ri720>!#i..2s720#ir#2.!)s720 /)1!) 720krom!&o1r!-i720-i.&r!si7201/.720,' k #imia &nalitik )).

KELOMPOK 1

Page 24