ANALISIS KADAR KALSIUM DALAM URIN PEKERJA DI PENGOLAHAN BATU KAPUR DESA KARANGBAWANG KECAMATAN AJIBARANG MENGGUNAKAN METODE

KOLORIMETRI

SKRIPSI

Oleh: TITA PRISTI DWI CAHYANI G1F009069

UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU-ILMU KESEHATAN JURUSAN FARMASI PURWOKERTO 2013

ANALISIS KADAR KALSIUM DALAM URIN PEKERJA DI PENGOLAHAN BATU KAPUR DESA KARANGBAWANG KECAMATAN AJIBARANG MENGGUNAKAN METODE KOLORIMETRI

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi persyaratan memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Jurusan Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu-Ilmu Kesehatan Universitas Jenderal Soedirman Purwokerto

Oleh: TITA PRISTI DWI CAHYANI G1F009069

UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU-ILMU KESEHATAN JURUSAN FARMASI PURWOKERTO 2013

PRAKATA Assalamualaikum warahmatullahi wabarakatuh Puji syukur kepada Allah SWT atas rahmat, hidayah, dan karunia-Nya kepada kita semua sehingga kami dapat menyelesaikan skripsi dengan judul Analisis Kadar Kalsium Dalam Urin Pekerja Di Pengolahan Batu Kapur Desa Karangbawang Kecamatan Ajibarang Menggunakan Metode Kolorimetri. Skripsi ini disusun sebagai salah satu syarat untuk mengerjakan skripsi pada program Strata-1 di Jurusan Farmasi, Fakultas Kedokteran dan Ilmu-Ilmu Kesehatan, Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto. Penulis menyadari dalam penyusunan skripsi ini tidak akan selesai tanpa bantuan dari berbagai pihak. Oleh karena itu pada kesempatan ini kami ingin mengucapkan terima kasih kepada : 1. Ibu Dian Windy Dwiasi, M.Sc., selaku dosen pembimbing I yang telah sabar dan ikhlas meluangkan waktu memberikan bimbingan, dukungan, nasehat, serta kritik dan saran yang membangun dalam penyusunan skripsi. 2. Ibu Rehana, M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing II yang telah sabar dan ikhlas meluangkan waktu memberikan bimbingan, dukungan, nasehat, serta kritik dan saran yang membangun dalam penyusunan skripsi. 3. Keluarga besar Farmasi Universitas Jenderal Soedirman, khususnya teman seperjuanganku Puji Lestari G1F009047. Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam skripsi ini terdapat banyak sekali kekurangan-kekurangan baik dari segi penggunaan kata dan bahasa yang belum memenuhi kaidah yang tepat, maupun dari isi penelitian ini sendiri. Oleh karena itu penulis sangat mengharapkan bantuan, kritik dan saran yang membangun dari berbagai pihak.

Purwokerto, Agustus 2013

Penulis

HALAMAN PERSEMBAHAN
Assalaamu'alaikum warohmatullaahi wabarokaatuh Bismillaahirrohmaanirrohiim, alhamdulillaahi Robbil 'alamiin. Segala puji bagi-Mu, Ya Allah. Tak henti-hentinya rasa syukur ini kuucapkan. Karya ini pertama-tama aku persembahkan terutama untuk Baginda Rasulullah, Nabi Muhammad SAW, beserta keluarga dan sahabatnya. Perjalanan 4 tahun ini akhirnya terselesaikan sudah. Suka duka yang telah dilewati selama ini sungguh sangat berarti. Sampainya aku di titik ini semata-mata tidak hanya karena usahaku sendiri. Doa, bantuan, dan dorongan semangat dari orang-orang terkasih tak sedikit mengambil andil di dalamnya. Bahkan menggoreskan namanya disini pun mungkin tak akan setara dengan apa yang telah mereka berikan. Salam cinta dan kasih sayang untuk Papih dan Mama di Gumelar, my life is begin

because of you, And all of this is blessed by Allah swt . Harapanku, semoga kelak aku
mampu menjadi putri yang bisa membuat kalian merasa bangga. Love you :* Terima kasih buat keluarga di Tanjung, mas ady dan mba cica, dede asyafa dan sasi, mugi-mugi amalipun panjenengan dipun tampi dhumateng Gusti Ingkang Maha Kuaos, Amin. Terimakasih cinta ku, mas Halfa Fandi Septiadi , thanks for ur support, Hope

June 11, 2014 will be come true,,, amin,, Love yaaa :*.
Terima kasih juga untuk Sardotters dan Gondes Mania, Hanung Sardot, Mba Sarjana Lia, Rikha, Chingu Sagita, Ninda Badriyah, Dien, Asih Monica, Puji Katrok, Pitry, Beloved Amilina, Umiss Mitha, Cerigala Avriani, dan segenap keluarga Farmasi Unsoed 2009. Penulis berharap di kehidupan selanjutnya, kelak kita masih ingat kenangankenangan kita semasa kuliah, baik kenangan indah maupun buruk. Wassalamualaikum wr.wb Purwokerto, Agustus 2013

Penulis

DAFTAR ISI Halaman PENGESAHAN ........................................................................................... ii PERNYATAAN ........................................................................................... iii PRAKATA ................................................................................................... iv PERSEMBAHAN ........................................................................................ v DAFTAR ISI ................................................................................................ vi DAFTAR TABEL ........................................................................................ viii DAFTAR GAMBAR .................................................................................... ix DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................. x INTISARI ................................................................................................... xi ABSTRACT .................................................................................................. xii BAB I. PENDAHULUAN ............................................................................ 1 A. Latar Belakang ........................................................................................ 1 B. Perumusan Masalah ................................................................................ 3 C. Tujuan Penelitian .................................................................................... 3 D. Manfaat Penelitian .................................................................................. 3 E. Keaslian Penelitian.................................................................................. 4 BAB II. TINJAUAN PUSTAKA .................................................................. 5 A. Tinjauan Pustaka ..................................................................................... 5 1. Batu Kapur ....................................................................................... 5 2. Kalsium............................................................................................. 5 3. Batu Saluran Kemih ......................................................................... 8

4. Kolorimetri O-Cresolphthalein Complexon ...................................... 8 5. Spektrofotometri Visible ................................................................... 9 B. Landasan Teori ....................................................................................... 12 BAB III. METODE PENELITIAN ............................................................... 13 A. Waktu dan Lokasi Penelitian ................................................................... 13 B. Bahan dan Alat Penelitian ....................................................................... 13 C. Rancangan Penelitian .............................................................................. 14 D. Tahap Penelitian ..................................................................................... 20 E. Analisis Data .......................................................................................... 20 BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ...................................................... 21 A. Pengumpulan Urin .................................................................................. 21 B. Panjang Gelombang Maksimum ............................................................. 22 C. Waktu Operasional.................................................................................. 23 D. Kurva Baku ............................................................................................. 24 E. Hasil Penentuan Kadar Kalsium Dalam Urin ........................................... 25 BAB V. PENUTUP ...................................................................................... 27 A. Kesimpulan ............................................................................................. 27 B. Saran....................................................................................................... 27 DAFTAR PUSTAKA ................................................................................. 28 LAMPIRAN ................................................................................................. 32

DAFTAR TABEL Halaman Tabel 2.1 Diagnosis yang mengarah pada nephrolithiasis ............................. 7

DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 2.1 Struktur Kimia Ortho Cresolphtalein Complexon ................... 9 Gambar 2.2 Instrumentasi Spektrofotometer UV-Visible ............................ 10 Gambar 3.1 Skema Tahapan Penelitian ...................................................... 20 Gambar 4.1 Perolehan Kurva Panjang Gelombang Maksimum .................. 22 Gambar 4.2 Perolehan Kurva Waktu Operasional ...................................... 23 Gambar 4.3 Perolehan Kurva Baku ............................................................ 24 Gambar 4.4 Reaksi Pembentukan Kompleks Kalsium-CPC ...................... 26

DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1. Ethical Approval Penelitian....................................................... 33 Lampiran 2. Lembar Informasi Untuk Persetujuan ........................................ 34 Lampiran 3. Informed Consent Yang Telah Diisi Relawan ............................ 37 Lampiran 4. Prosedeur Kerja Diasys .............................................................. 47 Lampiran 5. Hasil Analisis Kadar Kalsium Dalam Urin ............................... 49 Lampiran 6. Dokumentasi Penelitian ............................................................. 58

Analisis Kadar Kalsium Dalam Urin Pekerja di Pengolahan Batu Kapur Desa Karangbawang Kecamatan Ajibarang Menggunakan Metode Kolorimetri

INTISARI Pemaparan debu kapur berupa kalsium oksida dapat meningkatkan kadar kalsium dalam darah dan mempengaruhi kejenuhan urin sehingga terjadi hiperkalsiuria. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kadar kalsium dalam urin pekerja di pengolahan batu kapur Desa Karangbawang Kecamatan Ajibarang. Penelitian ini dilakukan dengan metode eksperimental laboratorium yang meliputi pengambilan sampel dengan cara mengambil masing-masing 1 sampel secara acak dari tiap-tiap tobong di Desa Karangbawang dilanjutkan analisis kadar kalsium dalam urin menggunakan metode kolorimetri dengan pengompleks ortho cresolphthalein complexon. Data disajikan menggunakan analisis deskriptif dalam bentuk rerata dan standard error (SE). Hasil analisis kadar kalsium dalam urin pekerja di tiap tobong adalah 168, 124 mg 2,052; 139,045 mg 6,356; 152,867 mg 4,731; 196,050 mg 4,656 dan 171,132 mg 5,360 dalam urin 24 jam. Hasil tersebut menunjukan bahwa kadar kalsium dalam urin pekerja di tiap tobong Desa Karangbawang masih dalam rentang nilai normal kalsium dalam urin yaitu 100-300 mg/24 jam.

Kata kunci : Hiperkalsiuria,

Kalsium Urin, Metode Kolorimetri,

Ortho

Cresolphthalein Complexon.

Analysis of Calciu m Levels in Limestone Processing Workerss Urine at Karangbawang Village Using Colorimetric Method

ABSTRACT High calcium levels in blood and urine potentially induce hypercalciuria which can be caused lime dust expotion of calcium oxide. The objeck of this study is to determine calcium level in limestone processing workerss urine at Karangbawang Village. The study will be conducted using laboratory experimental method. Sample was taken randomly from each Tobong in Karangbawang Village, continued by analysis of calcium in urine using colorimetric method with ortho cresolphthalein complexon as reagent. Data will be present as mean and standard error (SE). The result of analysis of calcium levels in limestone processing workerss urine are 168,124 mg 2,052; 139,045 mg 6,356; 152,867 mg 4,731; 196,050 mg 4,656 and 171,132 mg 5,360 in urine 24 hours. This result show that calcium levels in limestone processing workerss urine at Karangbawang Village still in the range of normal urinary calcium 100-300 mg/24 hr.

Keyword

: Hypercalciuria, Urinary Calcium, Colorimetric Method, OrthoCresolphthalein Complexon

BAB I PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Desa Karangbawang merupakan salah satu desa yang mempunyai sumber daya alam kapur cukup besar di Kabupaten Banyumas yaitu 190 juta ton (Iswinarno, 2012). Tempat pembakaran batu kapur yang sering disebut tobong berdiri di sepanjang jalan hingga ke perbatasan desa. Terdapat 5 tobong yang aktif di Desa Karangbawang yaitu tobong DN, tobong Selobakti I, tobong Selobakti II, tobong Karangbawang I dan tobong Cikruk, dimana setiap tobong terdapat 5-7 pekerja. Pekerja di tobong DN, tobong Karangbawang I dan tobong Cikruk rata-rata bekerja 12 jam per hari dengan sistem 6 hari kerja per minggu, sedangkan pekerja di tobong Selobakti I dan Selobakti II bekerja 24 jam per hari dengan sistem 3 hari kerja per minggu. Sebagian besar pekerja telah memiliki alat pelindung diri (APD) seperti masker, sepatu boot dan sarung tangan standar, namun yang sering digunakan hanya sepatu boot sedangkan masker dan sarung tangan tidak pernah dipakai. Debu dan gas dari proses pengolahan batu kapur akan terkumpul di lingkungan kerja yang dapat memapar pekerja pada konsentrasi maupun ukuran yang berbeda beda (Nukman, 2005). Hasil pembakaran batu kapur yang berupa partikel debu (CaO dan MgO) dan gas (SO2, NO2 dan CO2) dapat mencemari udara di lingkungan tobong. Kalsium oksida dapat terabsorbsi melalui mukosa saluran nafas dan saluran pencernaan ke dalam sirkulasi darah. Kalsium akan digunakan untuk kebutuhan fisiologis tubuh

melalui sirkulasi darah, kemudian diekskresikan melalui urin. Pemaparan CaO yang berlangsung lama pada pekerja pengolah batu kapur dapat menimbulkan hiperkalsiuria karena adanya deposit kalsium dari intake kalsium yang berlebihan (Rao, 2006). Menurut National Institute of Health (2011), nilai normal kalsium dalam urin 24 jam adalah 100-300 mg. Kadar kalsium dalam urin perlu dimonitoring sebelum terjadi hiperkalsiuria sehingga perlu dilakukan penelitian tentang analisis kadar kalsium dalam urin pekerja di pengolahan batu kapur Desa Karangbawang Kecamatan Ajibarang.

B. Perumusan Masalah Rumusan masalah pada penelitian ini adalah sebagai berikut: 1. Berapa kadar kalsium dalam urin pekerja di pengolahan batu kapur Desa Karangbawang Kecamatan Ajibarang Kabupaten Banyumas Propinsi Jawa Tengah? 2. Apakah kadar kalsium dalam urin pekerja di pengolahan batu kapur Desa Karangbawang melebihi batas nilai normal 300 mg/24 jam?

C. Tujuan Penelitian Tujuan dari penelitian ini adalah : 1. Mengetahui kadar kalsium dalam urin pekerja di pengolahan batu kapur Desa Karangbawang Kecamatan Ajibarang Kabupaten Banyumas. 2. Mengetahui apakah kadar kalsium dalam urin pekerja di pengolahan batu kapur Desa Karangbawang melebihi batas nilai normal 300 mg/24 jam.

D. Manfaat Penelitian Manfaat yang dapat diperoleh dari penelitian ini adalah 1. Memberikan informasi mengenai dampak pemaparan debu kapur terhadap kesehatan para pekerja pengolah batu kapur di Desa Karangbawang Kecamatan Ajibarang. 2. Memberikan informasi dan masukan kepada pemerintah Kabupaten Banyumas tentang kesehatan dan keselamatan pekerja pengolahan batu kapur di Desa Karangbawang Kecamatan Ajibarang.

E. Keaslian Penelitian Ada beberapa penelitian sebelumnya yang menjadi dasar penulis dalam melakukan penelitian. Penelitian-penelitian tersebut antara lain : 1. Parentoni et al. (2001) mengenai The Determination of Total Calcium in Urine : A Comparison Between The Atomic Absorption And The o-Cresolphtalein Complexone Methods. Metode kolorimetri dengan reagen o-CPC memiliki batas linearitas yang lebih tinggi dari Metode Spektrofotometri Serapan Atom. 2. Gowans dan Fraser (1966) mengenai Five Methods for Determining Urinary Calcium Compared. Perbandingan antara Metode Spektrofotometri Serapan Atom, Metode Kolorimetri dengan reagen Metiltimol Biru, Metode Titrasi Fluorometri EGTA, Metode Kolorimetri o-CPC dengan Technicon RA-100 dan Du Pont aca. Kedua Metode Kolorimetri dengan reagen o-CPC memiliki nilai presisi paling baik dan nilai recovery yang lebih baik dari metode Kolorimetri dengan reagen Metiltimol Biru dan metode Titrasi Fluorometri EGTA. Penelitian yang akan dilakukan adalah penelitian eksperimental laboratorium yaitu analisis kadar kalsium dalam urin pekerja di pengolahan batu kapur Desa Karangbawang.

BAB II A. TINJAUAN PUSTAKA 1. Batu Kapur Pengolahan batu kapur secara umum meliputi pemecahan batu kapur, pengisian ke dalam tanur, pembakaran, pengambilan atau pembongkaran, pengecoran dengan air, pengadukan dan pengemasan (Breck, 1986). Proses pengolahan batu kapur, meliputi : 1) Kalsinasi pada suhu 9001.000C sehingga terurai menjadi CaO dan CO2, selanjutnya CO2 dilepaskan ke udara. CaCO3 CaO + CO2 (1)

2) Hasil kalsinasi berupa kapur tohor (CaO) dan kapur padam Ca(OH)2, yaitu setelah CaO disiram air. CaO + H2O Ca(OH)2 + kalor (2)

Kalor yang dihasilkan dari reaksi ini sangat besar dan menghasilkan panas serta menimbulkan partikel CaO ke udara (Breck, 1986). Kalsium Oksida (CaO) berupa bubuk, berwarna putih sampai agak kuning atau coklat. Kalsium Oksida bersifat basa dan mempunyai kelarutan yang rendah dalam air (Newman dan Price, 1999). 2. Kalsium Kalsium adalah logam metalik terbanyak kelima di kerak bumi setelah silikon, alumunium, besi dan natrium (Mohsin, 2006; Rahman, 2006). Unsur ini merupakan bahan baku utama tulang belulang, gigi, kerang dan kulit telur.

Kalsium tidak pernah ditemukan di alam tanpa terkombinasi dengan unsur lainnya. Banyak terdapat sebagai batu kapur, gipsum, dan fluorit (Mohsin, 2006). Kalsium dalam bentuk CaO di udara masuk ke dalam tubuh manusia melalui saluran pernafasan dan saluran pencernaan, sedangkan absorbsi melalui kulit sangat kecil sehingga dapat diabaikan. Absorbsi kalsium melalui saluran nafas dipengaruhi oleh tiga proses yaitu deposisi, pembersihan mukosiliar, dan pembersihan alveolar. Deposisi terjadi di nasofaring, saluran trakeobronkial dan alveolar. Deposisi tergantung pada ukuan partikel CaO, volume pernafasan dan daya larut. Pembersihan mukosiliar membawa partikel dari saluran nafas bagian atas ke nasofaring kemudian di telan (Bahdarsyam, 2003). Rata-rata 10-30% CaO yang terinhalasi diabsorbsi melalui paru-paru dan sekitar 5-10% dari yang tertelan diabsorbsi melalui saluran cerna. Fungsi pembersihan alveolar adalah membawa partikel ke ekskalator mukosiliar, menembus lapisan jaringan paru kemudian menuju kelenjar limfe dan aliran darah. Sebanyak 30-40% Ca yang diabsorbsi melalui saluran pernafasan akan masuk ke aliran darah. Masuknya Ca ke aliran darah tergantung pada ukuran partikel, daya larut, volume pernafasan dan variasi faal antar individu (Bahdarsyam, 2003). Ion kalsium dalam sirkulasi bekerja langsung pada kelenjar paratiroid dengan mekanisme umpan balik negatif untuk mengatur sekresi PTH. Apabila kadar kalsium darah menurun, PTH akan disekresi sehingga merangsang osteoklas untuk memobilisasi kalsium dari tulang ke darah, mengaktifkan vitamin D dalam bentuk 1,25(OH)2D3 sehingga akan merangsang peningkatkan reabsorbsi

kalsium di tubuli renalis. Namun jika konsentrasi kalsium darah meningkat, kelenjar tiroid akan melepaskan hormone kalsitonin yang kemudian akan mengembalikan konsentrasi kalsium ke dalam range normal dengan jalan mengurangi perombakan kalsium dari tulang dan meningkatkan ekskresi kalsium di ginjal sehingga kadar kalsium urin menjadi tinggi yang disebut hiperkalsiuria (Bahdarsyam, 2003; Baron, 2003, Bredbenner et al. 2007). Urin normal jumahnya rata-rata 600-1600 mL sehari, tetapi berbeda-beda sesuai dengan jumlah cairan yang dimasukan. Kekurangan minum atau keadaan dehidrasi menyebabkan kepekatan urin meningkat (kosentrasi semua substansi dalam urin meningkat), sehingga mempermudah pembentukan batu (Pearce, 2006).
Tabel 2.1 Diagnosis yang mengarah pada nephrolithiasis menurut Bhairvi dan Trivedi (1993)

Disorder Hypercalciuria Hyperuricosuria Hyperoxaluria Hypocitraturia Gouty Diathesis Hypomagnesuria

Diagnostic Findings Urinary calcium > 300 mg/24 hr Urinary uric acid > 750 mg/24 hr Urinary oxalate > 40 mg/24 hr Urinary citrate < 320 mg/24 hr Urinary pH < 5,5, gouty arthritis Urinary magnesium < 50 mg/24 hr and no diarrheal disorder

3. Batu Saluran Kemih Batu Saluran Kemih adalah penyakit dimana didapatkan masa keras seperti batu yang terbentuk di sepanjang saluran kemih baik saluran kemih atas (ginjal dan ureter) dan saluran kemih bawah (kandung kemih dan uretra), yang dapat menyebabkan nyeri, perdarahan, penyumbatan aliran kemih dan infeksi. Menurut Bahdarsyam (2001) dan Purnomo (2011), kalsium adalah jenis batu yang paling banyak menyebabkan BSK yaitu sekitar 70-80% dari seluruh kasus BSK. Batu ini kadang-kadang di jumpai dalam bentuk murni atau juga bisa dalam bentuk campuran, misalnya dengan batu kalsium oksalat, batu kalsium fosfat atau campuran dari kedua unsur tersebut. Terbentuknya batu tersebut diperkirakan terkait dengan kadar kalsium yang tinggi di dalam urin atau darah dan akibat dari dehidrasi. Berikut merupakan faktor-faktor yang mempengaruhi terjadinya batu saluran kemih menurut Purnomo (2011) : 1) Umur 2) Jenis Kelamin 3) Heriditer atau Faktor Keturunan 4) Jumlah dan Kandungan Air minum 5) Pola Makan 4. Kolorimetri o-Cresolphthalein Complexon (o-CPC) Kolorimetri adalah suatu metode analisis kimia yang didasarkan pada perbandingan intensitas warna standar. Metode ini merupakan bagian dari analisis fotometri. Metode kolorimetri o-CPC berdasarkan pada ikatan spesifik atau

kompleks (warna ungu) antara o-CPC sebagai indikator metalorkromik dengan kalsium pada pH basa (Diasys, 2009). Peningkatan pH diatas 7 dapat menyebabkan proses reaksi laktonolisis (terbukanya cincin lakton) pada o-CPC (Rasmussen & Givskov, 2006). Ikatan kompleks warna ungu, terjadinya ikatan kompleks warna ungu karena adanya formasi lakton di bagian phthalein dari molekul (Chawla, 2003).

Gambar 2.1. Struktur Kimia o-Cresolphthalein Complexon

5. Spektrofotometri Visible Spektrofotometer adalah suatu instrumen untuk mengukur transmitan atau absorbansi suatu sampel sebagai fungsi panjang gelombang, pengukuran terhadap sederetan sampel pada suatu panjang gelombang tunggal. Pada Spektrofotometri Visible digunakan sumber sinar/energi cahaya tampak. Cahaya tampak termasuk spektrum elektromagnetik yang dapat ditangkap oleh mata manusia. Panjang gelombang sinar tampak adalah 400 sampai 780 nm (Gandjar dan Rohman, 2007).

Gambar 2.2. Instrumentasi Spektrofotometer UV-Visible

a) Sumber Cahaya Lampu deuterium untuk UV (190 -400 nm), lampu halogen kuarsa / tungsten untuk Visible (400 780nm). b) Monokromator Berfungsi untuk merubah sinar polikromatis menjadi sinar monokromatis sesuai yang dibutuhkan oleh pengukuran. c) Kuvet Pada pengukuran di daerah sinar tampak digunakan kuvet kaca dan daerah UV digunakan kuvet kuarsa. d) Detektor Fungsinya untuk merubah sinar menjadi energi listrik yang sebanding dengan besaran yang dapat diukur. Penilaian spektroskopi UV-Vis didasarkan pada suatu persamaan matematis yang disebut hukum Lambert-Beer, yaitu absorbansi (A) adalah hasil

perkalian antara absorptivitas (a) dengan tebal kuvet (b), dan konsentrasi larutan (C). Namun, dalam hukum Lambert-Beer ini ada beberapa pembatasan, yaitu : a. sinar yang digunakan dianggap monokromatis. b. penyerapan terjadi dalam suatu volume yang mempunyai penampang luas yang sama. c. senyawa yang menyerap dalam larutan tersebut tidak tergantung terhadap yang lain dalam larutan tersebut. d. tidak terjadi peristiwa fluoresensi atau fosforesensi. e. indeks bias tidak tergantung pada konsentrasi larutan (Gandjar dan Rohman, 2007). Prinsip penentuan spektrofotometer UV-Vis adalah aplikasi dari Hukum Lambert-Beer, yaitu: A = - log T = - log It / I0 = a . b . C (1)

Keterangan : A = absorbansi dari sampel yang akan diukur T = transmitans I0 = intensitas sinar masuk It = intensitas sinar yang diteruskan a = absorptivitas b = tebal kuvet yang digunakan C = konsentrasi dari sampel (Gandjar dan Rohman, 2007).

B. LANDASAN TEORI Desa Karangbawang merupakan salah satu desa yang memiliki komoditas batu kapur terbesar di Kabupaten Banyumas. Desa Karangbawang memiliki beberapa tempat pembakaran batu kapur yang sering disebut tobong . Terdapat 5 tobong yang aktif di Desa Karangbawang yaitu Tobong DN, Tobong Karangbawang I dan Tobong Cikruk dengan rata-rata bekerja 12 jam per hari, dengan sistem 6 hari kerja per minggu, serta Tobong Selobakti I dan Selobakti II bekerja 24 jam per hari dengan sistem 3 hari kerja per minggu. Debu kapur berupa kalsium oksida yang terhirup akan terabsorbsi lewat mukosa saluran pernafasan dan saluran pencernaan ke dalam sirkulasi darah. Kalsium di distribusikan melalui sirkulasi darah untuk memnuhi kebutuhan fisiologis, kemudian setelah dimetabolisme kalsium dieksresikan ke dalam urin. Peningkatan kadar kalsium dalam darah dapat mempengaruhi kadar kalsium dalam urin sehingga terjadi hiperkalsiuria. Menurut National Institiute of Health (2011) nilai normal kadar kalsium dalam urin 24 jam adalah 100-300 mg. Metode kolorimetri o-CPC berdasarkan pada terbentuknya kompleks kalsiumCPC pada pH basa. Kompleks kalsium-CPC secara teoritik menyerap radiasi elektromagnetik (REM) pada panjang gelombang 570 nm (20-25oC) dan 578 nm (37oC) (Diasys, 2009).

BAB III METODE PENELITIAN A. Waktu dan Lokasi Penelitian Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Kimia Anorganik MIPA Universitas Jenderal Soedirman. Pengambilan sampel urin dilakukan di Desa Karangbawang Kecamatan Ajibarang Kabupaten Banyumas. Penelitian ini dilaksanakan selama 3 bulan.

B. Alat dan Bahan Penelitian 1. Alat penelitian Peralatan yang digunakan meliputi Spektrofotometer UV-Vis Shimadzu UV-100, mikropipet 20 L, alat-alat gelas, vortex, cool box dan botol sampel. 2. Bahan Penelitian Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah urin pekerja di pengolahan batu kapur Desa Karangbawang Kecamatan Ajibarang, ice gel, CaCl2.2H2O p.a, aquades, HCl 6 N, Reagensia-1 yang berisi etanolamin pH 10,7 750 mmol/L dan surfaktan; Reagensia-2 berisi o-Cresolphthalein Complexon 0,13 mmol/L; 8-hidroksiquinolin 35 mmol/L dan HCl pH 1,1 100 mmol/L.

C. Rancangan Penelitian 1. Metode Penelitian Penelitian ini dilakukan dengan metode eksperimental laboratorium yaitu analisis kadar kalsium urin pekerja di pengolahan batu kapur di Desa Karangbawang menggunakan metode kolorimetri. 2. Variabel Penelitian a. Variabel Bebas Variabel bebas dalam penelitian ini adalah lama pemaparan debu kapur. b. Variabel Tergantung Variabel terikat dalam penelitian ini adalah kadar kalsium dalam urin pekerja industri batu kapur di Desa Karangbawang Kecamatan Ajibarang Kabupaten Banyumas. c. Variabel Kendali Variabel kendali dalam penelitian ini adalah suhu penyimpanan urin saat pengambilan sampel. 3. Sampel dan teknik sampling Pengambilan sampel dilakukan dengan mengambil urin 24 jam pada pekerja di pengolahan batu kapur Desa Karangbawang. Populasi pekerja dengan lama kerja lebih dari 3 tahun dengan umur 35-55 tahun tercatat 30 orang. Sampel dipilih dari relawan yang memenuhi kriteria inklusi dan yang tidak termasuk kriteria ekslusi serta bersedia menandatangani lembar persetujuan ( Informed Consent) menjadi relawan setelah memperoleh penjelasan. Teknik pengambilan sampel dilakukan dengan cara mengambil masing-masing 1 sampel secara acak

dari Tobong DN, Tobong Karangbawang I, Tobong Cikruk, Tobong Selobakti I dan Tobong Selobhakti II. Berikut merupakan kriteria inklusi dan ekslusi yang digunakan dalam penelitian ini : a. Kriteria Inklusi 1) Lama kerja sebagai penambang batu kapur di area tobong minimal 3 tahun. 2) Aktif bekerja di tobong. 3) Berusia antara 35-55 tahun. 4) Menggunakan air bersih yang disediakan pemerintah. b. Kriteria Ekslusi 1) Mempunyai riwayat keluarga batu saluran kemih. 2) Sering mengkonsumsi suplemen kalsium, susu dan makanan tinggi kalsium. 4. Cara Kerja Cara kerja analisis kadar kalsium urin adalah sebagai berikut: 1) Pengambilan Sampel Urin Penampungan urin dilakukan sesaat setelah relawan mengosongkan kandung kemihnya. Urin waktu ke-0 hingga urin ke-24 jam ditampung dalam botol yang sama untuk relawan yang sama. Sampel urin disimpan dalam lemari pendingin dengan suhu 2-8oC. Masing-masing sampel urin diberi tanda, sampel A untuk tobong DN, sampel B untuk tobong Karangbawang I, sampel C untuk tobong Cikruk, sampel D untuk tobong Selobhakti I dan

sampel E untuk tobong Selobhakti II. Volume urin lengkap harus dikirim ke laboratorium pada hari yang sama setelah pengumpulan selesai (Oregon Health & Science University, 2012). 2) Pembuatan Larutan Kerja Reagensia-1 dicampur dengan Reagensia-2 dengan perbandingan 4:1. Larutan tersebut stabil selama 3 hari pada suhu 15-25oC (Diasys, 2009). 3) Penentuan Panjang Gelombang Maksimum 74,7 mg serbuk CaCl2.2H2O p.a dilarutkan dalam aquades hingga diperoleh 100 mL larutan stok kalsium 20,327 mg/dL. 25 mL larutan stok kalsium 20,327 mg/dL dilarutkan dalam aquades hingga diperoleh 50 mL larutan kalsium 10,164 mg/dL. Larutan kalsium 10,164 mg/dL diambil sebanyak 5 mL kemudian diencerkan dalam aquades hingga diperoleh 10 mL larutan standar kalsium 5,082 mg/dL. 20 L larutan standar kalsium 5,082 mg/dl ditambah 1 mL larutan kerja kemudian dicampur. Larutan dapat dibaca absorbansinya setelah 5-30 menit. Larutan standar diukur absorbansinya pada rentang panjang gelombang 400-780 nm dengan blanko 1 mL larutan kerja ditambah 20 L aquades. Secara teoritik, kompleks kalsium-CPC menyerap radiasi elektromagnetik (REM) pada panjang gelombang 570 nm (20-25oC) (Diasys, 2009). 4) Penentuan Waktu Operasional (Operating Time) 25 mL larutan kalsium 20,327 mg/dL dilarutkan dalam aquades hingga diperoleh 50 mL larutan standar kalsium 10,164 mg/dL.

20 L larutan standar kalsium 10,164 mg/dl ditambah 1 mL larutan kerja kemudian dicampur. Larutan dapat dibaca absorbansinya setelah 5-30 menit. Larutan standar diukur absorbansinya pada panjang gelombang maksimum dengan blanko 1 mL larutan kerja ditambah 20 L aquades, selama 60 menit dengan interval pengukuran 1 menit (Diasys, 2009). 5) Pembuatan Kurva Baku 66,8 mg CaCl2. 2H2O p.a dilarutkan dalam aquades hingga diperoleh 100 mL larutan stok kalsium 18,177 mg/dL. Larutan stok kalsium 18,177 mg/dL diambil sebanyak 4 mL, 3 mL, dan 2 mL lalu masing-masing diencerkan dengan aquades sehingga diperoleh 10 mL larutan standar 7,271 mg/dL, 5,453 mg/dL dan 3,636 mg/dL. Larutan stok kalsium 18,177 mg/dL diambil 25 mL kemudian diencerkan dengan aquades hingga diperoleh 50 mL larutan stok kalsium 9,089 mg/dl. Larutan stok 9,089 mg/dL diambil sebanyak 5 mL dan 7 mL lalu masing-masing diencerkan dengan aquades sehingga diperoleh 10 ml larutan standar 4,545 mg/dL dan 6,362 mg/dL. Absorbansi seri larutan standar 7,271 mg/dL, 6,362 mg/dL, 5,453 mg/dL, 4,545 mg/dL, 3,636 mg/dL dan 0 mg/dL dibaca pada panjang gelombang maksimum dengan blangko 1 mL larutan kerja ditambah 20 L aquades. Kemudian dibuat persamaan regresi linear hubungan konsentrasi kalsium terhadap absorbansi pada panjang gelombang maksimum. y = bx + a Keterangan: y = absorbansi (1) a = intersept

x = konsentrasi kalsium (mg/dL) b = kemiringan (slope) 6) Analisis sampel Volume urin setiap relawan diambil 50 mL kemudian diasamkan dengan 0,5 mL HCl 6 N dan dipanaskan pada suhu 56 oC selama 10 menit (Ronald et al, 1984; Diasys, 2009). Sampel urin diambil 2 mL kemudian diencerkan dengan aquades sampai volume 10 mL. 20 L sampel urin yang telah diencerkan, kemudian ditambah 1 mL larutan kerja dan dicampur. Larutan sampel dapat dibaca absorbansinya setelah 5-30 menit. Larutan sampel diukur absorbansinya pada panjang gelombang maksimum dengan blanko 1 mL larutan kerja ditambah 20 L aquades dalam rentang waktu operasional (Diasys, 2009). Kadar kalsium dalam sampel dihitung dengan rumus berikut : Kadar kalsium (mg) = (2) Keterangan : a b : intersep 10- 2 : konversi mg/dL ke mg/mL : faktor pengenceran

: kemiringan (slope) fp

Pembacaan absorbansi larutan sampel dilakukan dengan tiga kali replikasi. Data kadar kalsium dalam sampel dinyatakan dalam i. Kadar rata-rata dihitung dengan persamaan: = (3) SE.

Keterangan

= rata-rata kadar n = jumlah sampel x = kadar sampel

ii.

Nilai SD dihitung dengan persamaan : (4) Keterangan SD = standar deviasi xi = kadar sampel n = jumlah sampel = kadar rata- rata

iii.

Nilai SE dihitung dengan persamaan : SE = Keterangan = rerata t = 1,96 untuk taraf kepercayaan 95% SE = standard eror n = jumlah sampel (5)

D.

Tahap Penelitian

Pengambilan Sampel Urin 24 jam

Pembuatan Larutan Kerja

Penentuan Panjang Gelombang Maksimum

Penentuan Waktu Operasional

Pembuatan Kurva Baku

Analisis Sampel

Hasil

Gambar 3.1 Skema Kerja Penelitian

E. Analisis Data Data disajikan secara deskriptif dalam bentuk rerata dan SE. (6) Keterangan : : rerata SE : Standard Error

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN Tujuan dari analisis kadar kalsium dalam urin pekerja di pengolahan batu kapur ini adalah untuk mengetahui kadar kalsium dalam urin pekerja selama 24 jam karena adanya pemaparan debu batu kapur berupa kalsium oksida. Umumnya pengumpulan urin 24 jam dilakukan untuk substansi urin yang memiliki variasi berbeda-beda, dimana ditemukan kadar yang tinggi di pagi hari namun menurun di siang atau sore hari (CLSI, 2010). Langkah-langkah yang dilakukan untuk memperoleh kadar kalsium dalam urin meliputi pengumpulan urin, penentuan panjang gelombang maksimum, penentuan waktu operasional, pembuatan kurva baku, dan penentuan kadar kalsium dalam sampel urin. A. Sampel Urin Selama proses pengumpulan urin, urin harus disimpan dalam suhu dingin 28oC agar tidak terkontaminasi oleh bakteri pemecah urea (urea splitting bacteria) atau bakteri penghasil urease contohnya Proteaus spp, Kleibsiella, Serratia, Enterobakter, Pseudomonas dan Staphilococcus. Urease ini akan menghidrolisa urea membentuk ammoniak terlarut dalam urin yang lepas menjadi bentuk gas seperti yang ditunjukan pada reaksi berikut (Hellstrom et al., 1998).
Urease

CO(NH2)2(aq) + 3H2O (l)

urea

2NH4+ + HCO3- + OHammonium bikarbonat

(1)

NH4OH + 2OHammonium hidroksida

NH3 (aq) + 3H2O (l)

ammoniak

(2) (3)

NH3 (aq) ammoniak terlarut dalam urin

NH3 (g)
ammoniak dalam bentuk gas

Konsentrasi ammoniak yang tinggi menyebabkan peningkatan pH pada urin, sehingga harus dilakukan pencegahan dengan penambahan asam karena kalsium akan mengendap pada kondisi pH basa (Ronald et al., 1984; Purnomo, 2011). B. Panjang Gelombang Maksimum Larutan Standar Kalsium 5,082 mg/dL Penentuan panjang gelombang maksimum dilakukan dengan mengukur serapan larutan standar kalsium 5,082 mg/dL pada rentang 400-780 nm menggunakan reagen o-Cresolphthalein Complexon. Panjang gelombang maksimum kompleks CaCPC ditunjukan pada Gambar 4.1.
0.500 0.450 0.400 0.350 Absorbansi 0.300 0.250 0.200 0.150 0.100 0.050 0.000

550

572

580

552

554

556

558

560

562

564

566

568

570

574

576

578

582

584

586

588

Panjang Gelombang (nm) Gambar 4.1. Perolehan maks menggunakan larutan standar kalsium 5,082 mg/dL adalah 573,4 nm

Panjang gelombang maksimum yang diperoleh adalah 573,4 nm. Panjang gelombang tersebut melebihi rentang penerimaan panjang gelombang maksimum menurut European Pharmacopeia (1956) yaitu 2 nm dari panjang gelombang teoritik yaitu 570 nm (Diasys, 2009). Pergeseran panjang gelombang maksimum

590

kemungkinan dikarenakan adanya kontaminasi oleh CO2 dari udara pada saat kerja. Karbondioksida yang diabsorbsi dari udara akan bereaksi dengan air membentuk asam karbonat. Asam karbonat terionkan menjadi ion bikarbonat dan ion hidrogen (Kleypas et al., 2010). Atom oksigen karbonil pada ion bikarbonat memiliki keelektronegatifan lebih besar dibandingkan atom oksigen karbonil dari o-CPC sehingga satu ikatan kovalen antara kalsium dengan atom oksigen pada o-CPC terputus kemudian kalsium mengikat ion bikarbonat. Terikatnya ion bikarbonat menyebabkan pergeseran panjang gelombang lebih panjang karena jumlah auksokrom pada ion bikarbonat lebih banyak. C. Waktu Operasional (Operating Time) Penentuan waktu operasional dilakukan dengan mengukur serapan larutan standar kalsium 10,164 mg/dL pada menit ke-7 hingga menit ke-66 dan interval pengukuran 1 menit. Kestabilan kompleks kalsium-CPC dalam suasana basa dibuktikan dengan diperolehnya nilai absorbansi yang stabil pada saat pengukuran waktu operasional menit ke 35-65.
0.680 0.675 0.670 0.665 0.660 0.655 0.650 0.645 0.640 0.635 0 10 20 30 40 Waktu (menit) 50 60 70

Absorbansi

Gambar 4.3. Kurva waktu operasional larutan standar kalsium 10,164 mg/dL

Pada menit ke-52 terjadi peningkatan absorbansi karena adanya noise drift yang disebabkan oleh fluktuasi arus listrik dan suhu (Owen, 1996). Hasil dari pengukuran waktu operasional tersebut selanjutnya digunakan dalam pembuatan kurva baku yang menyatakan hubungan antara konsentrasi larutan standar dengan respon instrumen berupa hasil absorbansi. D. Kurva Baku Kurva baku diperoleh dari pembacaan serapan larutan standar kalsium dengan konsentrasi 0 mg/dL; 3,636 mg/dL; 4,545 mg/dL; 5,453 mg/dL; 6,362 mg/dL dan 7,271 mg/dL pada panjang gelombang maksimum 573,4 nm. Kurva hubungan antara konsentrasi dan serapan larutan standar kalsium ditunjukan pada Gambar 4.3.
0.700 0.600 0.500 Absorbansi 0.400 0.300 0.200 0.100 0.000 0 2 4 Konsentrasi (mg/dL) 6 8 y = 0,082x + 0,003479 r = 0,99983

Gambar 4.3. Kurva baku larutan standar kalsium

Perhitungan kadar didasarkan pada persamaan regresi linier y = 0,082x + 0,003479 dimana titik potong sumbu Y / intercept (a) = 0,003479, kemiringan / slope (b) = 0,082 dengan koefisien korelasi (rhitung) = 0,99983. Nilai rhitung tersebut lebih besar dari r95%:4 yaitu 0,811 yang berarti terdapat hubungan yang linier antara

konsentrasi dengan absorbansi sehingga persamaan regresi tersebut dapat digunakan untuk menghitung kadar kalsium dalam sampel urin. Pengujian linearitas dilakukan dengan membandingkan nilai koefisien regresi kurva baku dengan koefisien regresi pada tabel regresi dengan taraf kepercayaan 95%. E. Hasil Pengukuran Kadar Kalsium Dalam Urin Penentuan kadar kalsium dalam urin dilakukan dengan mengukur absorbansi larutan sampel pada panjang gelombang maksimum 573,4 nm. Sebelum dilakukan pengukuran, urin diasamkan terlebih dahulu menggunakan HCl 6 N dan dipanaskan pada suhu 56oC selama 10 menit bertujuan untuk melarutkan endapan kalsium oksalat (Guder et al., 2001; Diasys, 2009). Pengukuran kadar kalsium dalam urin ini menggunakan reagensia-1 dan reagensia-2 dengan perbandingan 4:1 (Diasys, 2009). Reagensia-1 berisi etanolamin pH 10,7 dan surfaktan, dimana etanolamin merupakan basa amin yang berperan sebagai larutan penyangga atau buffer untuk memberikan dan mempertahankan suasana basa pada reaksi pembentukan kompleks antara o-CPC dengan ion kalsium (Stavropoulos et al., 1976; Zhou et al., 2009) dan surfaktan untuk mengurangi kekeruhan pada urin sehingga meningkatkan intensitas warna dari kompleks tersebut (Hissami, 1994). Reagensia-2 berisi o-CPC, 8-hidroksiquinolin dan asam klorida. Reagen oCPC yang berfungsi untuk mengikat kalsium pada suasana basa sehingga terbentuk kompleks warna ungu (Diasys, 2009). Dalam suasana basa, cincin lakton pada

phthalein akan terbuka dan berikatan dengan kalsium sehingga terbentuk kompleks warna ungu (Chawla, 2003). Reaksi laktonolisis (terbukanya cincin lakton) dari

senyawa o-CPC terjadi pada pH diatas 7 atau basa (Rasmussen & Givskov, 2006). Kompleks kalsium-CPC dapat dilihat pada Gambar 4.4.

Gambar 4.4. Reaksi Pembentukan Kompleks Kalsium-CPC

Selain kalsium, magnesium dalam urin juga dapat berikatan dengan o-CPC dalam suasana basa membentuk kompleks warna ungu, sehingga 8-hidroksiquinolin ini berfungsi untuk menghilangkan gangguan dari magnesium tersebut dengan cara mengikat magnesium (Gitelman, 1967). Asam klorida pada pH 1,1 digunakan untuk melarutkan o-CPC dan 8-hidroksiquinolin (Kaur, 2007). Perolehan kadar kalsium dalam urin 24 jam sampel A, B, C, D dan E berturutturut adalah 168,124 mg 2,052; 139,045 mg 6,356; 152,867 mg 4,731; 196,050

mg 4,656 dan 171,132 mg 5,360. Hasil tersebut menunjukan bahwa kadar kalsium dalam urin pekerja dari tiap-tiap tobong masih dalam rentang normal kadar kalsium dalam urin 24 jam yaitu 100-300 mg (NIH, 2011). Sampel A, B dan C merupakan sampel urin dari relawan tobong DN, tobong Karangbawang I dan tobong Cikruk yang mempunyai jam kerja 12 jam per hari selama 6 hari kerja, sehingga dimungkinkan akumulasi debu kapur yang terhirup lebih rendah dari tobong Selobhakti I dan tobong Selobhakti II dengan jam kerja 24 jam selama 3 hari kerja. Kalsium oksida yang terhirup terus menerus selama 3 x 24 jam kerja lebih berpotensi meningkatkan kadar kalsium dalam darah. Peningkatan kadar kalsium dalam darah ini dapat mempengaruhi kadar kalsium dalam urin. Kemungkinan adanya inhibitor berupa asam sitrat yang diperoleh dari konsumsi makanan sehari-hari juga mempengaruhi ekskresi kalsium melalui urin. Asam sitrat memiliki peran sebagai inhibitor terhadap supersaturasi kalsium. Konsumsi asam sitrat berdampak pada penurunan konsentrasi kalsium yang diekskresi (Goldberg, et al., 1989; Seltzer, et al., 1996).

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan 1. Kadar kalsium urin 24 jam pekerja di tiap-tiap tobong Desa Karangbawang Kecamatan Ajibarang adalah 168,124 2,052 mg; 139,045 6,356 mg; 152,867 4,731 mg; 196,050 4,656 mg dan 171,132 5,360 mg. 2. Hasil analisis data menunjukkan bahwa kadar kalsium dalam urin 24 jam dari pekerja di tiap-tiap tobong Desa Karangbawang Kecamatan Ajibarang masih dalam rentang normal yaitu 100-300 mg.

B. Saran Perlu dilakukan penelitian tentang hubungan lama kerja dengan kadar kalsium dalam urin pekerja di pengolahan batu kapur Desa Karangbawang Kecamatan Ajibarang.

DAFTAR PUSTAKA Anderreg, G., Flashka, H., Sallmann, R., and Schwartzenbach, G., 1954, Metallindikatoren VII, Fasciculus, USA. Anizar, 2009, Teknik Keselamatan dan Kesehatan Kerja Di Industri. Graha Ilmu, Yogyakarta. Anonim, 1996, Laboratorium Geokimia Direktorat Vulkanologi Yogyakarta, Tentang Analsisis Kimia Batuan, http://www.JogjaLib.net, diakses 16 januari 2013. Bahdarsyam, 2003, Absorbsi dan Metabolisme Epidemiologi, Universitas Sumatera Utara. Kalsium, Tesis, Magister

Baron, D. N., 1995, Kapita Selekta Patologi Klinik, EGC, Jakarta. Basuki, S., 1991, Pengantar Ilmu Perpustakaan, PT. Gramedia Pustaka Tama, Jakarta. Berkel, E.A.T., Schel, O., and Boer, A. K., 2010, Influence of the Storage Temperature on Urine Analysis in Timed Samples, vol. 35, no. 3, Clinical Laboratory, Catharina Hospital Eindhoven, 173-174. Bhairvi, K., dan Trivedi, MD., 2007, Nephrolithiasis How It Happens and What To Do About It, http://www.uro.com/, diakses pada 1 Februari 2013. Breck, W. G., 1986, Chemistry for Science and Enginering, Mc. Graw Hill International Book Company, America. Chang, E., 2009, Aplikasi Pada Praktik Keperawatan, EGC, Jakarta. Chawla, R., 2003, Practical Clinical Biochemistry: Methods and Interpretations, 3rd edition, Google Book, Jaypee Brothers Publishers, new dehli, india, 224-225. Cook, J.D., Strauss, K.A., Caplan, Y.H., Todico and Bush, D.M., 2007, Urine pH: the Effects of Time and Temperature after Collection, Journal of Analytical Toxicology, Department of Pathology, Mercy Medical Center, Baltimore, Maryland, Vol. 31, 492-493. CLSI, 2010, Urinalysis, In Approved Guideline - Third Edition, Clinical and Laboratory Standards Institute, USA. Diasys, 2009, Diagnostic Reagent For Quantitative In Vitro Determination Of Calcium In Serum, Plasma or Urine On Photometric Systems, Diasys Diagnostic System GmbH, Germany.

European Pharmacopeia, 1956, Spectrophotometry UV-Visible, Europe. Gandjar, I.G., dan Rohman, A., 2007, Kimia Farmasi Analisis, Pustaka Pelajar, Yogyakarta. Ganong, W. R., 1992, Fisiologi Kedokteran, EGC, Jakarta. Gitelman, H., 1967, Anal. Biochem, USA 18:521. Gowans, Elizabeth M.S. dan Fraser, Callum G., 1986, Five Methods for Determining Urinary Calcium Compared, Department of Biochemical Medicine, Scotland. Guder, W.G., Zawta, B., et al., 2001, The Quality of Diagnostic Samples, 1st ed, GIT Verlag, Darmstadt. Goldberg, H., Grass, L., Vogl, R., Rapoport, A., and Oreopoulus, D.G., 1989, Urine Citrate and Renal Stone Disease. Can Med Assoc J, 217-21. Hellstrom, D., Hanaeus, A., and Johansson, E.,1996, Conversion of urea during storage of human urine , Vol. 52, Vatten, 263-270. Hissami, 1994 O., 1994, Calcium Assay Reagent, Abbott Laboratories, Abbott Park Road, Texas. Iswinarno, C., 2012, Eksplorasi Karst Banyumas, http://www.VHRmedia.com, diakses 15 Januari 2013. Kasri, N., 1999, Kawasan Karst di Indonesia, Potensi dan Pengelolaan Lingkungannya, Kantor Menteri Lingkungan Hidup, Jakarta. Kaur, D., 2007, Development of a Cheap and Rapid Method to Determine Calcium in Milk Fractions in an Industrial Environment, Thesis, Auckland University of Technology, Auckland. Kleypas, J., 2010, Ocean Acidification, National Centre for Atmospheric Research, USA. Kristanto, P., 2001, Ekologi Industri, Penerbit ANDI, Yogyakarta. Mohsin, Y., 2006, Kalsium, http://www.Kalsium-Chem-Is-Try.org, diakses tanggal 12 Desember 2012.

Muslim, R., 2007, Batu Saluran Kemih Suatu Problem Gaya Hidup dan Pola Makan Serta Analisis Ekonomi Pada Pengobatannya, http://www.kalbe.co.id/, di akses 15 Januari 2013. Newman, D. J. dan Price, C. P., 1999, Renal calculi and renal stone analysis, In: CA Burtis, ER Ashwood, editors, Tietz textbook of clinical chemistr, 3rd Ed, WB Saunders Company, Philadelphia, 1231-2. NIH, 2011, Optimal Calcium Intake, National Institute of Health, Bethesda. Nukman, A., 2005, Analisis Manajemen dan Komunikasi Risiko Kesehatan Pertambangan Kapur. Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta. Nursalam, M., 2006, Asuhan Keperawatan pada Pasien dengan Gangguan Sistem Perkemihan, Penerbit Salemba Medika, Jakarta . Oregon Health & Science University, 2007, Instructions For 24 Hour Urine Collection, Oregon Health & Science University, Department of Pathology, USA. Owen, T., 1996, Fundamentals of UV-Vis Spectroscopy, Hewlett Packar Company, Germany. Parentoni, L. S., Pozeti, R. C. S., Figueiredo, J. F., Faria, E. C., 2001, The Determination of Total Calcium In Urine : A Comparison Between The Atomic Absorption And The Ortho-Cresolphthalein Complexone Methods, Artigo Original, Rio de Janeiro, Vol. 37, 235-238. Peterson, R., Johnson, V., Olsen, K., 2005, Heavy Metal Transport and Behavior In The Lower Columbia River, Environmental Monitoring and Assessment (Springer), USA, Vol. 110, 271289. Pilasri, C., 2007, Epidemiology Study of Urolithiasis in South of Northteast Thailand, http://cmp.ubu.ac.th., di akses 15 Januari 2013. Purnomo, B. B., 2011, Dasar-dasar Urologi, Edisi 3, CV. Sagung Seto, Jakarta. Rahman, A., 2006, Kelimpahan Logam Di Bumi, Geologis Media, Yogyakarta. Rao, 2006, Epidemiology of Urolithiasis and Chemical Composition of Urinary Stones in Purnia Division of Bihar. http://medind.nic.in/, di akses 15 januari 2013. Rasmussen, T.B.,dan Givskov, M., 2006, Quorum sensing inhibitors: a bargain of effects, Microbiology, 895-904.

Ronald, H.N., Mani, M., and Jack, H.L., 1984, Collecting and Handling of 24 Hours Urine specimen for Measurement of Analytes Related to Renal Calculi, Clinical Chemistry, vol 30, No.3, 467-471. Samekto, A., 2005, Kapitalisme, Modernisasi dan Kerusakan Lingkungan, Pustaka Pelajar, Yogyakarta. Sanusi, A., 2003, Metodologi Penelitian Praktis Untuk Ilmu Sosial dan Ekonomi, Edisi Pertama, Penerbit Buntara Media, Malang. Seltzer, M.A., Low, R.K., McDonald, M., Shami, G.S., and Stoller, M.L., 1996, Dietary Manipulation with Lemonade to Treat Hypocitraturic Calcium Nephrolithiasis. J Urol, 907-909. Sinaga, D. K. M., 2005, Karekteristik Penderita Batu Saluran Kemih Rawat Inap di Rumah Sakit Haji Medan Tahun 2000-2004, Skripsi, Fakultas Kesehatan Masyarakat, Universitas Sumatera Utara, Medan. Smeltzer, S. C., Bare, B.G., 2001, Buku ajar Keperawatan Medikal-Bedah Brunner Dan Suddarth. Edisi 8, Penerbit Buku Kedoktean EGC, Jakarta, Vol. 2. Stamatiou, K. N., 2006, Prevalence of Urolithiasis http://rrh.deakin.edu.au, di akses 15 Januari 2013. in Rural Thebes,

Stavropoulos, W.S., Thiegs, B.J., and Mack, R.F., 1976, Determination of Calcium, United Stated Patent, United Stated. Tietz, N.W., 1987, Fundamental of Clinical Chemistry, 3rd ed, Saunders Company, Auflage, Philadelphia. Tjokronegoro, A., Utama, H., 2003, Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam, Jilid II. Penerbit FK UI, Jakarta. Widmann, Frances K., 1989, Clinical Interpretation of Laboratory Test, diterjemahkan oleh R. Gandasoebrata et al, Edisi 9, EGC, Jakarta.

LAMPIRAN

Lampiran 1. Persetujuan Etik Penelitian

Lampiran 2. Lembar Informasi Dan Persetujuan Relawan

LEMBAR INFORMASI DAN PERSETUJUAN RELAWAN A. PENJELASAN UNTUK MENDAPAT PERSETUJUAN (INFORMATION FOR CONSENT)

Selamat siang pak, Saya mahasiswa Farmasi Unsoed sedang melakukan penelitian dengan judul Analisis Kadar Kalsium dalam Urin Pekerja di Pengolahan Batu Kapur Desa Karangbawang. Untuk melaksanakan penelitian tersebut, saya mengharapkan partisipasi Bapak menjadi relawan. Adapun yang bapak lakukan adalah

mengumpulkan air kencing selama 24 jam dengan langkah-langkah sebagai berikut: 1. Air kencing yang dikeluarkan pada pagi hari (setelah bangun tidur) tidak ditampung, jam setelah Bapak buang air kencing dicatat sebagai waktu ke-0. Kemudian Bapak dapat makan, minum, dan beraktivitas seperti biasa. 2. Air kencing yang dikeluarkan berikutnya ditampung dalam botol yang telah disediakan, kemudian botol ditutup dan simpan dalam kotak pendingin yang telah disediakan. 3. Setiap buang air kencing catat waktu penampungan air kencing pada catatan pengumpulan air kencing. 4. Air kencing ditampung dalam botol yang sama.

5. Pengumpulan air kencing hingga keesokan harinya pada jam yang sama dengan waktu ke-0. Misalnya ketika Bapak buang air kecil jam 6 pagi maka

Bapak mengumpulkan air kencing dan mencatat waktunya hingga jam 6 pagi keesokan harinya, setelah jam 6 pagi air kencing tidak ditampung lagi. 6. Apabila Bapak menemui kesulitan atau ada hal-hal yang ingin ditanyakan, Bapak dapat menghubungi saya selama 24 jam. Berikut adalah nomor yang bisa dihubungi Tita (085647948965). Kami sangat mengharapkan partisipasi Bapak. Apabila Bapak bersedia untuk berpartisipasi sebagai relawan dalam penelitian ini, Bapak dapat

menandatangani lembar persetujuan berikut.

B. PERNYATAAN PERSETUJUAN SETELAH PENJELASAN (INFORMED CONSENT)

Saya telah menerima dan membaca Lembar Informasi dan Persetujuan Relawan tertulis ini. Saya telah mendapatkan penjelasan secara rinci dan mengerti mengenai Lembar Informasi dan Persetujuan Relawan tertulis ini. Saya memberikan persetujuan untuk ikut serta dalam penelitian ini dan saya menyadari bahwa keikutsertaan saya sepenuhnya sukarela. Dengan menandatangani Lembar Informasi dan Persetujuan Relawan berikut, saya menyetujui bahwa saya akan melakukan prosedur sesuai dengan yang dijelaskan pada Lembar Penjelasan untuk Mendapatkan Persetujuan.

Ajibarang, Juni 2013 Relawan,

Nama Lengkap

Lampiran 3. Lembar Persetujuan Setelah Penjelasan Yang Telah Diisi Relawan

Lampiran 4. Prosedur Kerja Diasys Diagnostic System GmbH

Lampiran 5. Hasil Analisis Kadar Kalsium Dalam Urin a. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum 1) Pembuatan Larutan Kalsium 20 mg/dL Perhitungan massa CaCl2.2H2O yang akan ditimbang :

Massa CaCl2.2H2O = = 73,5 mg 2) Penimbangan

botol timbang+ tutup

= 30838,4 mg

botol timbang+tutup+ CaCl2.2H2O

= 30918,3 mg

botol timbang+tutup+sisa bobot CaCl2.2H2O

= 30843,6 mg = 30918,3 mg - 30843,6 mg = 74,7 mg

74,7 mg CaCl2.2H2O tersebut dilarutkan dalam 100 mL aquades sehingga diperoleh larutan stok dengan konsentrasi 20,327 mg/dL. 3) Pembuatan larutan kalsium 5,082 mg/dL M1 x V1 = M2 x V2 20,327 mg/dL x V1 = 10,164 mg/dL x 50 mL V1 = 25 mL M1 x V1 = M2 x V2 10,164 mg/dL x V1 = 5,082 mg/dL x 10 mL V1 = 5 mL

Panjang gelombang maksimum larutan standar kalsium 5,082 mg/dl = 573,4 nm. b. Penentuan Waktu Operasional Larutan kalsium 10,164 mg/dL dibaca absorbansinya pada panjang gelombang selama 60 menit dengan interval 1 menit.

Pembuatan larutan standar kalsium 10,164 mg/dl : M1 x V1 = M2 x V2 20,327 mg/dL x V1 = 10,164 mg/dL x 50 mL V1 = 25 mL

0.68 0.675 0.67 Absorbansi 0.665 0.66 0.655 0.65 0.645 0.64 0.635 0 20 40 Waktu (menit) 60 80

Mnt ke 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16

Abs 0,638 0,642 0,646 0,651 0,655 0,657 0,659 0,663 0,664 0,665

Mnt ke 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26

Abs 0,666 0,667 0,669 0,669 0,670 0,670 0,669 0,670 0,671 0,671

Hasil Pengukuran Operating Time Mnt Abs Mnt Abs Mnt Abs ke ke ke 0,671 37 0,674 47 0,674 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 0,672 0,672 0,673 0,673 0,673 0,673 0,673 0,674 0,674 38 39 40 41 42 43 44 45 46 0,674 0,674 0,674 0,674 0,674 0,674 0,674 0,674 0,674 48 49 50 51 52 53 54 55 56 0,674 0,674 0,674 0,674 0,675 0,674 0,674 0,674 0,674

Mnt ke 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66

Abs 0,674 0,674 0,674 0,674 0,674 0,674 0,674 0,674 0,674 0,673

c. Pembuatan Kurva Baku Pembuatan Larutan Stok Kalsium 20 mg/dL Perhitungan massa CaCl2.2H2O yang akan ditimbang :

Massa CaCl2.2H2O = = 73,5 mg

Penimbangan :

botol timbang+ tutup

= 30826,6 mg

botol timbang+tutup+ CaCl2.2H2O

= 30907,3 mg

botol timbang+tutup+sisa

= 30840,5 mg

bobot CaCl2.2H2O diperoleh

= 30907,3 mg - 30840,5 mg = 66,8 mg

66,8 mg CaCl2.2H2O tersebut dilarutkan dalam 100 mL aquades sehingga diperoleh larutan stok dengan konsentrasi 18,177 mg/dL. d. Pembuatan larutan standar kalsium 3,636; 4,545; 5,453; 6,362; 7,271 mg/dl
M1 (larutan stok) 18,177 mg/dL Ca 9,089 mg/dL Ca 18,177 mg/dL Ca 9,089 mg/dL Ca 18,177 mg/dL Ca * M1 x V1 = M2 x V2 M2 (konsentrasi yang diinginkan) 3,636 mg/dL Ca 4,545 mg/dL Ca 5,453 mg/dL Ca 6,362 mg/dL Ca 7,271 mg/dL Ca V1 (volume diambil)* 2 mL 5 mL 3 mL 7 mL 4 mL V2 (volume akhir) 10 mL 10 mL 10 mL 10 mL 10 mL

e. Hasil pembacaan absorbansi larutan standar pada panjang gelombang maksimum.

Absorbansi No 1. 2. 3. 4. 5. Konsentrasi (mg/dL) 0 3,636 4,545 5,453 6,362 573,4 nm 0,000 0,306 0,380 0,454 0,521

6.

7,271

0,598

Persamaan regresi : y = 0,082x + 0,003479 r = 0,99983 Konsentrasi Ca (mg/dL) = absorbansi- 0,003479 0,082

f. Hasil Analisis Kadar Kalsium Dalam Urin 1) Preparasi sampel Pembuatan HCl 6 N

Pada kemasan botol HCl pekat tertera konsentrasi 37 %, untuk mendapatkan konsentrasi HCl 6 N dilakukan perhitungan : Konsentrasi 37% = 37 gram/100 mL N = = 10,14 V1 x N1 = V2 x N2 V1 x 10,14 N = 10 mL x 6 N V1 = 5,9 mL ditambahkan aquades hingga 10 mL xvalensi = x1

2)

Kadar kalsium dalam urin

Volum Urin 24 jam (mL) 825 Faktor Pengenceran Absorbansi 573,4 nm 0,368 0,373 0,366 *Konsentrasi Atom Ca (mg/dL) 4,064 4,125 4,039 **Kadar (mg ) 167,621 170,136 166,615 168,124 1,814 2,052

Sampel

Replikasi 1. 2. 3.

A SD SE

5 5 5

Sampel

Volum Urin 24 jam (mL) 653

Faktor Pengenceran 5 5 5

Replikasi 1. 2. 3.

Absorbansi 573,4 nm 0,369 0,397 0,386

*Konsentrasi Atom Ca (mg/dL) 4,076 4,417 4,283

**Kadar (mg) 133,073 144,221 139,842 139,045 5,616 6,356

B SD SE

Sampel

Volum Urin 24 jam (mL) 696

Faktor Pengenceran 5 5 5

Replikasi 1. 2. 3.

Absorbansi 573,4 nm 0,387 0,392 0,406

*Konsentrasi Atom Ca (mg/dL) 4,295 4,356 4,526

**Kadar (mg) 149,474 151,589 157,538 152,867 4,181 4,731

C SD SE

Sampel

Volum Urin 24 jam (mL) 631

Faktor Pengenceran 5 5 5

Replikasi 1. 2. 3.

Absorbansi 573,4 nm 0,542 0,535 0,556

*Konsentrasi Atom Ca (mg/dL) 6,185 6,100 6,356

**Kadar (mg) 195,152 192,459 200,539 196,050 4,114 4,656

D SD SE

Sampel

Volum Urin 24 jam (mL) 622

Faktor Pengenceran 5 5 5

Replikasi 1. 2. 3.

Absorbansi 573,4 nm 0,482 0,476 0,500

*Konsentrasi Atom Ca (mg/dL) 5,454 5,381 5,673

**Kadar (mg) 169,620 167,337 176,440 171,132 4,736 5,360

E SD SE

Persamaan regresi y = 0,082x + 0,003479 *Konsentrasi Ca (mg/dL) = Keterangan : a : intersept **Kadar Ca dalam sampel (mg) = b : kemiringan/slope

Keterangan : a : intersept 10-2 : konversi mg/dL ke mg/mL b : kemiringan/slope fp : faktor pengenceran

Lampiran 6. Dokumentasi Penelitian

Gambar 1. Penjelasan untuk memperoleh persetujuan menjadi relawan

Gambar 2. Pengambilan urin dengan cool box

Gambar 3. Larutan Kerja

Gambar 4. Sampel urin dengan reagen o-CPC

Gambar 5. Sampel urin

Gambar 6. Ice Gel

Lampiran 7. Biodata

BIODATA

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.

Nama Lengkap : Tita Pristi Dwi Cahyani Tempat/ Tanggal Lahir : Banyumas, 11 Juni 1991 Agama : Islam Alamat Asal : Desa Cihonje RT 01 RW 06 Gumelar, Banyumas Nomor telp : 085647948965 e-mail : thamon_ta@yahoo.com Judul penelitian : Analisis Kadar Kalsium Dalam Urin Pekerja Di Pengolahan Batu Kapur Desa Karangbawang Kecamatan Ajibarang Menggunakan Metode Kolorimetri.

Riwayat Pendidikan : Sekolah Dasar ( SD) Sekolah Menengah Pertaman Sekolah Menengah Atas Perguruan Tinggi

: SD Negeri I Cihonje 1997-2003 : SMP Negeri I Gumelar tahun 2003-2006 : SMA Negeri I Purwokerto tahun 2006-2009 : Jurusan Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu-Ilmu Kesehatan Universitas Jenderal Soedirman Angkatan 2009

Pengalaman organisasi dan kepanitiaan : 1. Sekretaris II Organisasi Pelayanan Informasi Obat (PIO) 2. Bendahara KKN UNSOED 2012 Desa Galuhtimur Kec. Tonjong, Brebes Kegiatan ilmiah yang pernah diikuti: 1. Peserta Seminar Nasional Herbal Cosmetics as Alternative for Topical Disease Preventive pada tanggal 21-23 Oktober 2011. 2. Peserta Seminar Nasional Islami Pro Kontra Vaksin pada tahun 2012.

3. Finalis lomba Pekan Ilmiah Mahasiswa Farmasi Indonesia (PIMFI) Unair tahun 2011 Surabaya. 4. Peserta Kuliah Tamu Mr.Surakit.,Ph.D di Kampus Farmasi Unsoed Farmasi Komunitas pada tahun 2011. Kegiatan Pengembangan diri yang dilakukan: 1. Orientasi Study Mahasiswa Baru (OSMB) Sosialisasi Dini Menuju Pengenalan Diri Sebagai Farmasis Sejati pada tanggal 27 -29 Agustus 2009. 2. Peserta Training Motivation tahun 2010 Purwokerto.

Purwokerto, 22 Agustus 2013

Tita Pristi Dwi Cahyani