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MarccTo R. Lury1crnar
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un:u::6z.jun.Iu:
s uoonas inlocciosas ostao
ontro as principais causas uo
morto ua populaao huma-
na. Esso lato uoviuo, om
granuo parto, ao surgimonto uo micro-
organismos multi-rosistontos aos anti-
liticos. Portanto, aposar ua uisponili-
liuauo uo um granuo numoro uo antili-
ticos uo ultima goraao, torna-so ain-
ua lunuamontal luscar compostos guo
possam atuar como novas urogas a
sorom utilizauas no comlato as uoon-
as inlocciosas tIohnor 8 Stauuoggor,
2001).
O surgimonto uo granuo numoro
atual uo copas lactorianas rosistontos
pouo tor vrias origons, sonuo uma
uolas uocorronto uo prprio tipo uo
viua uo sor humano. O principal lator ,
som uuviua, o consumo oxcossivo o
inapropriauo uos antiliticos por ho-
mons, outros animais o na agricultura.
A proscriao uo antilitico goralmon-
to omprica o som a iuontilicaao prvia
uo agonto patognico atravs uo oxa-
mos laloratoriais. Alm uisso, a sua
vonua som oxigncia uo uma proscri-
ao muica om alguns pasos, associa-
ua ao suprimonto irrogular uosso moui-
camonto,, laixa gualiuauo ua moui-
caao o ao sou mal uso polos paciontos
tguo muitas vozos nao complotam o
tratamonto), contriluom para a soloao
uo novos microorganismos multirosis-
tontos. Associaua a isso, uma granuo
guantiuauo uo agontos antimicrolia-
nos vom sonuo usauo na agropocuria
para promovor o croscimonto uo plan-
tas o animais, o guo ocasiona um au-
monto ua rosistncia uo microorganis-
mos guo sao transmitiuos para o ho-
mom. Ao mosmo tompo, o aumonto ua
migraao ua populaao o o transporto
uo animais ou uo prouutos uo origom
animal trazom uoonas para roas onuo
nunca haviam so instalauo, rosultanuo
no ospalhamonto uo microorganismos
rosistontos aos antiliticos. Vuuanas
FIgura 1. Possvois mocanismos uo aao uos poptuoos antimicrolianos
tIohnor, 2001)
Fotos couiuas polos autoros
1.I~uIg.n .~u.n 1~:~u:I:.u~uI - u 2 - u:~u:u~z~u: 2UUI 49
amliontais, tais como uosmata-
monto o altoraos climticas
tamlm proporcionam contato
mais ntimo uos homons com
animais o insotos guo transmi-
tom uoonas muitas vozos uos-
conhociuas tIohnor 8 Stauuo-
ggor, 2001).
Assim sonuo, vrias mouiuas
scio-poltico-oconomicas uovo-
riam sor tomauas para a conton-
ao uo uosonvolvimonto o uo
transmissao uo rosistncia anti-
microliana. Rouuao uo uso ina-
propriauo o oxcossivo uos anti-
liticos no tratamonto uo uoon-
as om goral, tanto humanas
guanto uo animais uomsticos o
ua prpria agricultura, pouoria
sor uma uossas mouiuas. Paralo-
lamonto, para guo so consiga um
olotivo controlo uas uoonas in-
locciosas, tornou-so vital invostir
om posguisa o om posguisauo-
ros guo possam so uouicar
lusca uo sulstncias naturais ou
sintticas guo oxilam ativiuauos anti-
microlianas ospoclicas o, acima uo
tuuo, guo as oxoram atravs uo moca-
nismos uo aao altornativos uaguolos
uos antiliticos uisponvois.
Nosso contoxto, a posguisa, a puri-
licaao, o a caractorizaao gumica,
liolgica o ostrutural uo novas sulstn-
cias antimicrolianas provoniontos ua
launa o ua llora lrasiloira sao valiosas,
uma voz guo a prpria ovoluao tratou
uo solocionar um vastssimo ospoctro
uo sulstncias oliciontos guo uolon-
uom contra inlocos.
Diariamonto, ns humanos ostamos
oxpostos a muitos patgonos om po-
toncial atravs ua ingostao, inalaao o
contato com suporlcios inloctauas.
Como a rosposta humoral o colular
auaptativa roguor a oxpansao clonal
uos linlcitos B o T, o lova at uias
para pouor roalmonto licar ativa contra
as inlocos, ola nao a rosponsvol
polo impouimonto inicial ua instalaao
uossos organismos. Portanto, uoponuo-
mos ua rosposta imuno inata para nos
uolonuor uo inlocao tJanovay, 1998).
Os olotoros ua rosposta imuno inata
incluom as clulas lagocticas, tais como
noutrlilos o macrlagos, uo outros
louccitos, incluinuo mastcitos, uas
protonas uo soro, tais como as uo
sistoma uo complomonto, o uos popt-
uoos antimicrolianos tHancock 8 Dia-
monu, 2000). Essos ultimos sao olo-
montos primitivos ua rosposta imuno
uo touas as ospcios uo sor vivo, cujas
vias uo inuuao sao rolativamonto con-
sorvauas om vortolrauos, insotos o plan-
tas tHollman ot al., 1999, Dangl 8
Jonos, 2001). Rocontomonto, loi uo-
monstraua a participaao uolos na
mouulaao uo procosso inllamatrio
uo mamloros tHancock 8 Diamonu,
2000).
Vais uo 00 poptuoos antimicroli-
anos j loram iuontilicauos om touas as
ospcios vivas, incluinuo lactrias, lun-
gos, insotos, moluscos, crustcoos, arac-
nuoos, plantas, pssaros, anllios, poi-
xos, mamloros, ontro outros thttp:
llcm1.univ.triosto.it-tossipag1.htm).
Em goral, sao molculas poguonas uo
at 5 kDa guo oxilom um alto toor uo
aminociuos lsicos o, polo monos,
50` uo aminociuos hiurolli-
cos tvor rovisos om Anurou 8
Rivas, 1998, Bulot ot al., 1999,
Hancock 8 Diamonu, 2000).
Aprosontam um amplo ospoctro
uo ativiuauo contra lactrias,
lungos, vrus o parasitas. O mo-
canismo uo aao mais lom co-
nhociuo atravs ua sua insor-
ao na momlrana colular guo
causa a uostruiao ou a pormoa-
lilizaao ua mosma, lovanuo o
microorganismo morto tFigura
1). Altornativamonto, os popt-
uoos antimicrolianos pouom so
ligar a um rocoptor ua momlra-
na, lovanuo a uma porua ospoc-
lica uo sua lunao. Alm uisso,
ao so translocarom atravs ua
momlrana, ossas molculas po-
uom atuar intracolularmonto, im-
pouinuo a sntoso uo motalli-
tos importantos para o microor-
ganismo. Por atuarom om uilo-
rontos compartimontos colula-
ros, ossos compostos tornam-so
canuiuatos promissoros para o uoson-
volvimonto uo urogas importantos no
comlato a patgonos rosistontos aos
antiliticos convoncionais tIohnor,
2001).
Os poptuoos antimicrolianos po-
uom sor agrupauos uo acoruo com suas
propriouauos gumicas o ostruturais om
2 classos: linoaros o cclicos. Os linoa-
ros, nao aprosontam o aminociuo cis-
tona om sua composiao, o pouom sor
suluiviuiuos nos guo lormam uma -
hlico anliptica aps contato com a
momlrana colular tpor oxomplo, ma-
gainina uo sapo, Hara ot al., 2001) o os
ricos om um uotorminauo tipo uo ami-
nociuo, tais como prolina, histiuina o
triptolano tpor oxomplo, inuoliciuina
uo lovino, Rozok ot al., 2000). Os
FIgura 2. Estruturas triuimonsionais ua
magainina tHara ~I nI, 2001). inuoliciuina
tRozok ~I nI, 2000), urosomicina tIanuon
~I nI, 199) o tota-uolonsina tTrali ~I nI,
2001). Roprosontauas, om amarolo, a
ostrutura lolha -proguoaua o, om rosa, a
ostrutura -hlico)
FIgura 3. Alinhamonto ua gomosina com outros poptuoos antimicrolia-
nos: taguiplosina o polilomusina uo lmulos, anuroctonina uo oscorpiao o
protogrina uo suno tSilva, Jr. ~I nI, 2000)
50 1.I~uIg.n .~u.n 1~:~u:I:.u~uI - u 2 - u:~u:u~z~u: 2UUI
cclicos sao poptuoos guo aprosontam
rosuuos uo cistona om sua ostrutura,
pouonuo tor as oxtromiuauos amino-
torminal alortas tpor oxomplo, uroso-
micina ua mosca Drosophila molano-
gastor, Ianuon ot al.199) ou as oxtro-
miuauos lochauas tpor oxomplo, tota-
uolonsina uo macaco, Trali ot al. 2001)
tFigura 2).
GomcsIna c outros pcptIdcos antI-
mIcrobIanos da aranLa
carangucjcIra
Entro os invortolrauos, os ostuuos
guo visam caractorizar a ostrutura o a
ativiuauo uos poptuoos antimicrolia-
nos, assim como a rogulaao gnica
uolos concontram-so, principalmonto,
no grupo uos insotos tBullot ot al.,
1999). J h alguns anos, o grupo uo
posguisa ua Dra. Sirloi Dallro tDoparta-
monto uo Parasitologia, lCB-lSP) vom
tralalhanuo ativamonto na iuontilica-
ao o caractorizaao uo poptuoos om
uuas ospcios uo aracnuoos: a aranha
caranguojoira Acanthoscurria gomosia-
na o o carrapato uo loi Boophilus
microplus. Essos poptuoos sao impor-
tantos para a uolosa uossos animais
contra inlocos o, como tal,
pouorao sor usauos no uo-
sonvolvimonto uo novas uro-
gas para uso na mouicina o
na agricultura. Nos ultimos
anos, o roloriuo grupo pas-
sou a contar com a colalora-
ao uo outros trs grupos uo
posguisa: o ua Dra. V. Toro-
sa V. Viranua tDopartamon-
to uo Biogumica, lQ-lSP),
o uo Dr Philippo Bulot tCon-
tro National uo la Rochorcho
Sciontiliguo, CNRS, Estras-
lurgo, Frana) o o uo Dr.
Antonio Viranua tDoparta-
monto uo Biolsica, lNl-
FESP). Quatro poptuoos lo-
ram isolauos ua homolinla
tsanguo) ua aranha caran-
guojoira tTalola l, Silva Jr.,
2000). lm uolos, uonomina-
uo gomosina, aprosontou um
amplo ospoctro uo ativiuauo
contra lactrias, lungos o o
parasita causauor ua loish-
manioso tSilva Jr., 2000, Sil-
FIgura 4. Estrutura triuimonsional ua gomosina uotorminaua por
rossonncia magntica nucloar tRVN). A uiroita, a roprosontaao
osguomtica ua molcula tVanuaru ~I nI., 2001)
TabcIa 1. Poptuoos antimicrolianos isolauos ua homolinla ua aranha nuII:u::.n gu~:.nun
1.I~uIg.n .~u.n 1~:~u:I:.u~uI - u 2 - u:~u:u~z~u: 2UUI 51
va Jr. ot al., 2000). um octauocapop-
tuoo uo massa molocular oguivalonto a
220,4 Da aprosontanuo guatro rosuu-
os uo cistona onvolviuos om uuas pon-
tos uissulloto t2-15 o 6-11), um ciuo
piroglutmico na oxtromiuauo N-tormi-
nal o uma arginina -amiuaua como
rosuuo C-torminal. Sua ostrutura ccli-
ca com torminaao alorta aprosontan-
uo um ciuo piroglutmico N-torminal
o a amiuaao C-torminal possivolmonto
protogom o poptuoo contra uograua-
ao por protoasos. A gomosina um
poptuoo altamonto lsico tpl calcula-
uo uo 12,), pois contm sois rosuuos
uo aminociuos carrogauos positiva-
monto tcinco argininas o
uma lisina). Aprosonta
um alto grau uo similari-
uauo com a lamlia uos
poptuoos lsicos uos l-
mulos: taguiplosinas o
polilomusinas t50`,
Nakamura ot al., 1988,
Viyata ot al., 1989), ua
anuroctonina isolaua uo
oscorpiao t23`, Ehrot-
Solatior ot al, 1996) o ua
protogrina prosonto om
louccitos uo sunos
t1`, Kokryakov ot al.,
1993) tFigura 3). A uis-
posiao uas pontos uis-
sulloto, Cys1-Cys4 o
Cys2-Cys3, iuntica
para touos ostos popt-
uoos, sugorinuo guo a
gomosina pouo auotar
uma ostrutura -hair-
pin` como a oncontraua
nas taguiplosinas tKava-
no ot al., 1990, Tamamu-
ra ot al., 1993), protogri-
nas tAumolas ot al., 1996,
Fahrnor ot al., 1996), o
anuroctonina tVanuaru
ot al., 1999). Rosultauos
rocontos ua anliso ua
gomosina por rossonn-
cia magntica nucloar
tRVN) om soluao com-
provam a ocorrncia
uossa ostrutura na mol-
cula tVanuaru ot al.,
2001, Figura 4). A gomo-
sina lorma uma ostrutu-
ra uo tipo -hairpin`
com lolhas lota proguo-
auas anti-paralolas liga-
uas por uma volta osta-
lilizaua por uuas pontos
uissulloto. Ela ainua
aprosonta uma caracto-
rstica anliptica lom uo-
liniua, uo lorma similar
s ostruturas uotormina-
uas para sous anlogos
taguiplosina o protogri-
na. Esso tipo uo ostrutu-
ra loi olsorvauo tam-
lm om vrios outros poptuoos anti-
microlianos, cujos aminociuos lsi-
cos tcarrogauos positivamonto om pH
lisiolgico) soriam rosponsvois pola
intoraao inicial olotrosttica com os
grupos carrogauos nogativamonto uos
lipuoos uas momlranas uos microor-
ganismos. Postoriormonto, ocorroria a
FIgura 5. Ativiuauos
antimicrolianas uos anlogos
sintticos uo gomosina tGm).
As ativiuauos sao oxprossas
atravs ua concontraao mni-
ma uo poptuoo guo causa
100` uo iniliao uo crosci-
monto. PB
1
21 mOsV, 1.0
g uo Poptona + 86 mV NaCl
om 100 mI uo H
2
0. PB
2
36
mOsV, 1.0 g uo Poptona +
13 mV NaCl om 100 mI uo
H
2
0. PDB
3
9 mOsV, 1.2
g uo uoxtroso uo latata om
100 mI uo H
2
O). PDB
4

333 mOsV, 1.2 g uo uoxtroso
uo latata om 100 mI uo H
2
O
+ 13 mV NaCl
52 1.I~uIg.n .~u.n 1~:~u:I:.u~uI - u 2 - u:~u:u~z~u: 2UUI
insorao ua porao hiurollica uos
poptuoos na momlrana, promovonuo
a sua uma uosostalilizaao tOron 8
Shai, 1998).
A gomosina mostrou uma lorto aao
antimicroliana contra 14 lactrias
Gram-positivas, 10 lactrias Gram-no-
gativas, 9 lungos lilamontosos o 5 lovo-
uuras tSilva Jr. ot al., 2000). Entro ossos
microorganismos, oxistom vrias lac-
trias causauoras uo inlocos hospita-
laros, tais como a Staphylococcus au-
rous, a Staphilococcus saprophiticus, a
Stroptococcus pyogonos o a Psouuo-
monas aoruginosa. Alm uo causauoras
uo inlocos hospitalaros, a Staphylo-
coccus aurous causa moningito o lurun-
culos, a Staphilococcus saprophiticus
provoca inlocao no trato urinrio o a
Stroptococcus pyogonos, a lolro rou-
mtica. Ainua como patognicas aparo-
com a Klolsiolla pnoumoniao, causa-
uora ua pnoumonia, a Iistoria mono-
cytogonos, associaua moningito o
pnoumonia, a Canuiua allicans, ros-
ponsvol pola canuiuaso, a Cryptococ-
cus noolormans, causauora ua monin-
gito, a Salmonolla thyphimurium, ros-
ponsvol pola salmonoloso o a Trico-
phyton montagrophytos, causauora ua
micoso suporlicial.
Emlora aprosonto uma corta ativi-
uauo homoltica tSilva Jr. ot al., 2000), a
gomosina tom-so mostrauo um antimi-
croliano com um granuo potoncial
para aplicaos toraputicas om huma-
nos, outros animais o om plantas. Essa
alirmaao uocorro ua comlinaao uas
soguintos propriouauos: amplo ospoc-
tro uo ativiuauo, rpiua aao antimicro-
liana o caractorsticas ostruturais guo
conlorom alta ostaliliuauo molcula.
GomcsIna: ImportncIa das
pontcs dIssuIIcto para
sua atIvIdadc
Com o oljotivo uo oluciuar a impor-
tncia uas pontos uissulloto na oxpros-
sao ua ativiuauo liolgica uosso popt-
uoo o, ao mosmo tompo, luscar anlo-
gos mais solotivos oou mais ostvois
uograuaao onzimtica guo olo, loram
sintotizauos manualmonto polo mto-
uo ua laso sliua, os compostos listauos
na FIgura 5. Essos compostos loram
purilicauos por cromatogralia lguiua
uo laso rovorsa tRP-HPIC) o caractori-
zauos por RP-HPIC o cromatogralia
liguiua acoplaua a um ospoctromotro
uo massa uo tipo oloctrospray tICVS).
As ativiuauos antimicrolianas loram
uotorminauas polo onsaio lguiuo uo
iniliao uo croscimonto contra M.:-
u: IuI~u: tlactria Gram-positiva),
1:I~:.I.n I. tlactria Gram-nogati-
va) o nuu.un nI.nu: tlovouura),
sonuo oxprossas atravs ua concontra-
ao mnima uo poptuoo guo causa
100` uo iniliao uo croscimonto tSilva
Jr ~I nI, 2000). Como pouo sor olsorva-
uo na FIgura 5, os anlogos guo apro-
sontam somonto uma uas pontos uis-
sulloto, os monocclicos |CystAcm)6,
11}, |Cys tAcm) 2,15}, |Sor6,11} o |Sor2,15}
- Gomosina, loram uo 2 a 4 vozos
monos ativos guo a gomosina nativa
para os trs microorganismos tostauos,
tanto nos moios com laixa concontra-
ao uo NaCl t86 mV, PB
1
) ou som sal
tPDB
3
), como naguolos com uma con-
contraao lisiolgica uo NaCl compar-
vol ao uo soro humano t13 mV NaCl,
PB
2
o PDB
4
). J os anlogos som as uuas
pontos uissulloto, os linoaros
|Sor2,6,11,15} o |CystAcm)2,6,11,15}
Gm loram uo 2 a 16 vozos monos ativos
guo a gomosina nativa, na ausncia o
om laixa concontraao uo NaCl, sonuo
ossa ativiuauo rouuziua mais ainua nos
moios com uma concontraao uo 13
mV uo NaCl tcorca uo 4 a 64 vozos).
FIgura 6. Procossamonto ua Gomosina. O transcrito uo gono ua
gomosina trauuziuo om uma protona procursora uo 9,kDa. Essa
protona aprosonta um poptuoo sinal tamarolo) o uma rogiao carloxi
torminal carrogaua nogativamonto tazul). A protona procursora pro-
cossaua pola romoao uo poptuoo sinal o ua rogiao carloxitorminal,
a glutamina ua oxtromiuauo amino-torminal mouilicaua om ciuo
piroglutmico o a arginina carloxi-torminal amiuaua
FIgura 7. Possvol mocanismo uo procossamonto ua cauoia ua
homoglolina lovina no intostino uo carrapato uo loi 1 u.:jIu: o
goraao uo lragmonto antimicroliano 33-61. A cauoia clivaua
ontro os rosuuos uo motionina t32) o uo lonilalanina t33) pola
cnzIma 1 o ontro os rosuuos uo lisina t61) o valina t62) pola
cnzIma 2, goranuo o poptuoo antimicroliano
1.I~uIg.n .~u.n 1~:~u:I:.u~uI - u 2 - u:~u:u~z~u: 2UUI 53
Olsorvamos guo h uma variaao nos-
ta rouuao uoponuonuo uo microorga-
nismo, sonuo signilicativamonto maior
para 1I. t32 a 64 vozos). A inlluncia
uo sal na ativiuauo ua gomosina pouo
sor oxplicaua polo lato uo o suio ostar
compotinuo com os grupos carrogauos
positivamonto ua gomosina uuranto a
intoraao inicial olotrosttica ontro os-
tos o os grupos carrogauos nogativa-
monto ua momlrana colular uo micro-
organismo tFzio ~I nI, 2001).
oxtromamonto importanto oscla-
rocor guo omlora os anlogos sintoti-
zauos tonham aprosontauo ativiuauos
antimicrolianas mais laixas uo guo a
gomosina nativa, olos oxiliram ativiua-
uos homolticas rouuziuas om rolaao
uola: uo 2 a 11 vozos na concontraao
uo 100 V. Essos rosultauos sugorom
guo amlas as pontos uissulloto sao
importantos para a oxprossao ua ativi-
uauo antimicroliana ua gomosina o
guo os anlogos ostuuauos aprosontam
uma ospociliciuauo uo aao uiloroncia-
ua contra cortos microorganismos. lsso
ocorro, muito provavolmonto, uoviuo
s variaos ua composiao ua mom-
lrana uo caua microoorganismo, alo-
tanuo na intoraao inicial olotrosttica
ontro os grupos carrogauos positiva-
monto ua gomosina com os grupos
nogativos ua momlrana, oou na insor-
ao ua gomosina na porao hiurollica
ua momlrana. Estuuos onvolvonuo
mouilicaos auicionais ua gomosina
ostao sonuo roalizauos com o oljotivo
uo so oltor om anlogos mais ativos o
solotivos nao homolticos.
Prccursor da gomcsIna
Atravs ua clonagom uo cDNA ua
gomosina, vorilicamos guo osso popt-
uoo trauuziuo na lorma uo uma
protona procursora uo 9, kDA tFigura
6, Ioronzini ot al., 2001). Essa protona
aprosonta um poptuoo sinal, inuican-
uo guo o procursor ua gomosina
uirocionauo ao rotculo onuoplasmti-
co, guo ost provavolmonto ligauo via
uo transporto para vosculas oxocticas
para a liloraao uo poptuoo no moio
oxtracolular. A rogiao carloxi-torminal
ua protona procursora composta uo
aminociuos ciuos, onguanto guo a
rogiao guo corrosponuo ao poptuoo
mauuro composta uo aminociuos
lsicos. A porao carloxi-torminal car-
rogaua nogativamonto pouo intoragir
com a parto cationica uo poptuoo para
ostalilizar a conlormaao uo procursor
o pormitir o procossamonto protoolti-
co ou ainua protogor a clula prouutora
uo intoraos uo suas momlranas com
a rogiao lsica uo poptuoo, ovitanuo
assim a ativiuauo txica contra a mos-
ma.
A gomosina oncontra-so armazona-
ua nos grnulos uos homcitos, como
oviuonciauo por tcnicas uo imunollu-
oroscncia usanuo o anticorpo anti-
gomosina, sonuo socrotaua para o plas-
ma ua aranha polo monos 2 horas aps
uma inlocao oxporimontal. Vorilicou-
so guo o gono guo couilica para o
poptuoo transcrito prouominanto-
monto nos homcitos uo animais nao
inloctauos oxporimontalmonto, tonuo
uma laixa oxprossao nos outros toci-
uos analisauos: coraao, intostino, ho-
patopncroas, ovrios, musculos o gln-
uula uo vonono tIoronzini ot al., 2001).
Fragmcnto da LcmogIobIna
bovIna com atIvIdadc antImIcrobI-
ana no IntcstIno do carrapato
A invostigaao ua prouuao uo pop-
tuoos antimicrolianos om outro arac-
nuoo, o carrapato uo loi Boophilus
microplus, loito no nosso laloratrio,
lornocou-nos um rosultauo surproon-
uonto. Foi iuontilicauo um lragmonto
ua cauoia ua homoglolina lovina
roloronto rogiao comproonuiua ontro
os rosuuos 33 ao 61, com propriouauos
antimicrolianas tFogaa ot al., 1999).
Esso poptuoo, com massa molocular
uo 3.205,6 Da, loi inicialmonto isolauo
uo intostino uo carrapato. Para uotormi-
nar sou ospoctro uo aao, sintotizou-so
guimicamonto o mosmo guo, aps ca-
ractorizaao apropriaua, loi tostauo
contra vrias copas uo lactrias o uo
lungos. Olsorvou-so guo o lragmonto
ua cauoia ua homoglolina lovina
ago om concontraos micromolaros
aponas contra lactrias Gram-positivas
o contra lungos, nao tonuo siuo ativo
contra lactrias Gram-nogativas. No
ontanto, a molcula ua homoglolina
intacta nao aprosonta ativiuauo antimi-
croliana guanuo tostaua om concon-
traos suporioros uo lragmonto 33-
61 ua cauoia ua homoglolina lovina.
Vorilicou-so tamlm guo osso lrag-
monto aprosonta ativiuauo homoltica
laixa, uoscartanuo uma possvol lun-
ao uigostiva.
Dauos na litoratura mostram guo a
homoglolina uigoriua uontro uos
oritrcitos uo mamloros goranuo lrag-
montos com uilorontos ativiuauos lio-
lgicas, tais como liloraao uo corticro-
pina .u :.I: o a marcaao uas uoonas
Alzhzoimor o isguomia, ontro outras
tlvanov ~I nI, 199). Rocontomonto, loi
uoscrita a goraao uo lragmontos uo
homoglolina com ativiuauo antimicro-
liana aps sou tratamonto .u :.I: com
onzimas comorciais tVak ~I nI, 2000,
Froiuovaux ~I nI, 2001). No ontanto,
at o momonto, o unico lragmonto
antimicroliano ua homoglolina guo
gorauo lisiologicamonto o 33-61 ua
cauoia ua homoglolina lovina, uo-
toctauo no intostino uo carrapato 1
AranLa carangucjcIra
Acar1Locurr1a yonc1ara
54 1.I~uIg.n .~u.n 1~:~u:I:.u~uI - u 2 - u:~u:u~z~u: 2UUI
u.:jIu: tFogaa ~I nI, 1999). Com
laso nossas inlormaos, loi analisauo
so os oritrcitos lovinos rompiuos .u
:.I: aprosontavam ativiuauo antimi-
croliana. Nonhuma ativiuauo loi uo-
toctaua, sugorinuo guo a homoglolina
uovor ostar sonuo procossaua no intos-
tino uo carrapato por onzimas prouuzi-
uas nosto rgao, goranuo assim o lrag-
monto 33-61 com propriouauos antimi-
crolianas tFIgura 7). lniciou-so a in-
vostigaao uas onzimas intostinais uo
1 u.:jIu: rosponsvois pola cliva-
gom ua homoglolina o a goraao uo
lragmonto ativo. Aps a inculaao ua
homoglolina lovina com um oxtrato
uo intostino uo carrapatos, loi olsorva-
ua a oxprossao uo ativiuauo antimicro-
lina. Essa loi iniliua pola inculaao
simultnoa com um iniliuor uo spar-
tico-protoinaso tpopstatina) o um inili-
uor uo cistoino-protoinaso tE-64). Esso
rosultauo sugoro guo, polo monos, uuas
onzimas - uma spartico o uma cisto-
no-protoinaso - ostojam onvolviuas na
goraao uo lragmonto antimicroliano a
partir ua protoliso ua homoglolina. A
purilicaao o caractorizaao uossas on-
zimas ostao sonuo roalizauas.
A prosona uo uma ativiuauo anti-
microliana no intostino uos carrapatos
uo oxtroma importncia para a uolosa
contra inlocos uossos animais, uma
voz guo as lmoas pouom ingorir lac-
trias uo couro uo hospouoiro uuranto
a alimontaao. Alm uisso, aps a ali-
montaao, as lmoas so uospronuom
uo couro uo lovino cainuo ao solo,
colocanuo sous ovos om um amlionto
muitas vozos lastanto contaminauo por
microorganismos. No ontanto, nao s o
intostino uos carrapatos suscoptvol
s inlocos. A prosona uo outros trs
poptuoos antilactorianos, contonuo
cistona, na homolinla uossos animais
loi tamlm uotoctaua tFogaa ~I nI,
2001). A prosona uo vrios poptuoos
antimicrolianos om um mosmo animal
importanto para garantir um ospoctro
uo aao amplo contra vrios tipos uo
patgonos, garantinuo assim a solrovi-
vncia uo animal alvo. Alm uisso, os
poptuoos pouom atuar sinorgisticamon-
to uuranto o comlato s inlocos.
ConcIuso
Alm uo vitais para o ontonuimonto
ua aao antimicroliana lisiolgica uo-
somponhaua nos aracnuoos ostuua-
uos, os poptuoos uotoctauos tamlm
pouorao sor usauos como molculas-
laso para o uosonvolvimonto uo novas
urogas antiliticas. Como j uoscrito
acima, nao h uuviua uo guo, com o
surgimonto uo novos microorganismos
rosistontos antiliticos, oxisto a no-
cossiuauo urgonto uo so uosonvolvo-
rom novas classos uo antiliticos. Pop-
tuoos antimicrolianos purilicauos, uo
uivorsas ospcios uo animais, aproson-
tam caractorsticas uosojvois a uma
nova classo uo antiliticos: um largo
ospoctro uo ativiuauo, incluinuo isola-
uos rosistontos a antiliticos convonci-
onais, matam rapiuamonto, ovitanuo a
soloao uo mutantos rosistontos, apro-
sontam sinorgia com outros antiliti-
cos, noutralizam onuotoxinas o, por-
tanto, lloguoiam a rosposta sopticmi-
ca, o pouom matar microorganismos
om animais mouolos. No ontanto, vri-
os prollomas procisam sor rosolviuos
para sorom prouuziuos om oscala in-
uustrial. lm uolos por aprosontarom
uma massa molocular rolativamonto
granuo om rolaao aos antiliticos usa-
uos comorcialmonto, torao ontao, guo
sor prouuziuos por tcnicas uo liologia
molocular, uo mouo a oltor-so molcu-
las rocomlinantos, com um custo mais
laixo. Aposar uo vrias motouologias
torom siuo uoscritas, nonhuma uolas
at agora loi usaua om oscala inuustrial
tHancock 8 Scott, 2000). lma altorna-
tiva soria a prouuao por rocomlina-
ao om gontica om plantas tParizotto
~I nI, 2000). Outro prolloma a toxi-
ciuauo guo alguns uossos poptuoos
aprosontam contra clulas uo mamlo-
ros. Como citauo antoriormonto, isso
pouor sor consoguiuo por moio uo
mouilicaos gumicas na ostrutura
uossas molculas. Outro aspocto a sor
consiuorauo a rosistncia uossos pop-
tuoos aao protooltica uo nosso
organismo. No ontanto, oxistom ostra-
tgias para protogor os poptuoos con-
tra protoasos, tais como a uo incorpor-
los om lipossomos ou a uo usar moui-
licaos gumicas tHancock 8 Scott,
2000). J oxistom, polo monos, cinco
omprosas no munuo tralalhanuo na
prouuao o ostalolocimonto uo popt-
uoos antimicrolianos como novos an-
tiliticos: Vagainin tElA), PPI Thora-
poutics tlnglatorra), lntraliotics tElA),
Vicrologix tCanau) o Entomou tFran-
a), o guo inuica sor osso um campo
lastanto promissor. Portanto, os popt-
uoos antimicrolianos nao sao somonto
importantos como componontos uo sis-
toma imuno inato participanuo uo com-
lato s inlocos, mas sous anlogos
gumicos ou rocomlinantos aproson-
tam um granuo potoncial para sorom
aplicauos como antiliticos no comla-
to contra microorganismos rosistontos a
antiliticos conhociuos ou mosmo con-
tra novos alvos.
AgradccImcntos
Os autoros agrauocom o suporto
tcnico uauo por Susana Possoa uo
Iima o o tralalho uos alunos uo lnici-
aao Ciontlica Ernosto S. Nakayasu,
Alino H. Fukuzava o Iuciana V. Kaku.
Sirloi Dallro, V. Torosa V. Viranua o
Antonio Viranua rocolom lolsa prouu-
tiviuauo uo CNPg. Alossanura Vacha-
uo, Anura C. Fogaa, Daniol V. Ioron-
zini, Eliano Estovos, Iourivaluo uos
Santos Poroira sao lolsistas ua FAPESP.
Varcolo Russo Burgiorman rocolo lol-
sa ua CAPES. Varcos Antonio Fzio
lolsista uo CNPg. Esto tralalho rocolo
apoio linancoiro ua FAPESP atravs uo
projoto Tomtico 981132-4 o uo pro-
joto inuiviuual 0003642-3.
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