Contrle molculaire du cycle cellulaire

I. tapes du cycle/Principes du contrle du cycle cellulaire

Les cellules se reproduisent suivant une squence dvnement ordonnes et contrle dans le temps, la consquences de l'entr des cellules dans le cycle cellulaire va tre la division en 2 cellules filles . Avant de se diviser en 2 cellules filles une cellule mre va tout doubler, son noyau mais aussi dans son cytoplasme or!anites, macromolcules". #l s'a!it d'une p$ase de croissance. %me a l'a!e adulte cette prolifration continue. &n effet c$aque secondes plusieurs millions de cellules meurt, il faut maintenir l'$omostasie cellulaire. 'ar e(emple en cas de radiation on observe que le cycle cellulaire est stopp et des individus fortement e(pos a ces radiations vont mourir en quelques )ours * +raduit l'importance du cycle cellulaire. La division cellulaire doit se faire de manire coordonne * la duplication de l'A,- et la croissance. La tac$e fondamentale pour une cellule mre sa va tre de transmettre l'information !ntique intact au( cellules filles. 'our cela il va falloir des systmes de communications fidles au niveau de l'A,- ainsi qu'un systme de s!r!ation prcis du matriel !ntique dans les 2 cellules feuilles, ce systme tant contrl de fa.on trs troites, de fa.on a ce que c$aque cellules filles re.oivent une copie de c$aque information !ntique, et bien /-& seule. 'our atteindre ces 2 principau( buts, les cellules eucaryotes ont cre un rseau comple(e de protines r!ulatrices pour assurer un contrle qualit a c$aque tape du cycle, il va y avoir une vrification permanente du bon droulement des tapes du cycle cellulaire, il va y avoir aussi des systmes pour que les tapes du cycle cellulaire vont se drouler de manire coordonne. ,'autre part on va voir que les cellules qui sont en p$ase de prolifration sont capable de rpondre a des si!nau( internes mais aussi e(ternes. les cellules des or!anismes pluricellulaire se divise et se multiplient en fonction de leur environnement".

Le cycle cellulaire distin!ue 2 p$ases *

 '$ase de mitose ou p$ase %" #nterp$ase 0 La p$ase % est constitu de la p$ase de mitose qui correspond a la division nuclaire suivi par la p$ase cytocinse division cytoplasmique". #l s'a!it d'une p$ase trs rapide environ 1 $eure" 0 Au cours de l'interp$ase il y a une p$ase de rplication de l'A,- !nomique qui prend a peu prs en temps" la moiti du cycle cellulaire * Asse2 lon! car beaucoup d A,- a rpliqu 3 pas mal de contrle. 'endant l'interp$ase les cellules rpliquent aussi leurs or!anites de fa.on a distribuer dans les cellules filles un contenu identique que celui de la cellule initiale. 4'endant l'interp$ase la cellule en prolifration va !rossir, il s'a!it de la croissance cellulaire. L'interp$ase est une p$ase qui dure plus ou moins lon!temps selon le type cellulaire, plusieurs $eures, plusieurs )ours, plusieurs annes ou mme une cellule est capable de s'arrter de se diviser pendant toute sa vie. L'interp$ase se compose de 5 p$ases * la p$ase 61 6 pour !ap " la p$ase de rplication de l'A,-, la p$ase 7 7 pour synt$se " la p$ase 62

Les p$ases 8 !ap 9 ont t appel comme sa car au dbut on pens qu'il ne se passait pas !rand c$ose pendant ces p$ases do: 6ap ; vide". 'uis on c'est rendu compte que ces p$ases sont primordiales pour contrler le cycle cellulaire. <es p$ases de cycle se droulent selon la squence immuable ou l'ordre quoi.... " qui est * '$ase 61 0'$ase 7 0 '$ase 62 0 '$ase %.

II Technique de visualisation
1" +ec$nique cytomtrie en flu( <f <ambar"
'ermet de visualiser, de trier des cellules en fonction de marqueurs fluorescents qui peuvent tre associs au( cellules sous formes d'anticorps spcifiques au( cellules pour reconna=tre tel protine ou alors on utilise un marqueur fluorescent qui est capable de s'intercaler au niveau des molcules d A,- double brins. <e compos devient fluorescent quand il est intercal dans l'A,- double brins, et on peut ainsi dtecter cette fluorescence avec le cytomtre en flu(.

Lorsqu'on passe les cellules dans le cytomtre et qu'on re!arde le nombre de cellules en fonction de l'intensit de fluorescence contenu dans les cellules qui va correspondre a la quantit d'A,contenu dans les cellules. >n va avoir 2 pics principau( , un pic avec quantit 2 c <f <$evret " p$ase61", et un pic avec une quantit ? c p$ase 623%". &ntre ses 2 pics les cellules ayant une quantit d'A,- intermdiaires sont en p$ase de rplication de leurs A,- p$ase 7 ".

2" Autre e(emple de visualisation *

%is en vidence de cellules qui sont en train de synt$tiser leurs A,-. 'our cela on utilise un analo!ue de nuclotide apparemment faut pas l'apprendre mais une connasse reste une connasse * @r,u", possdant un atome de brome contre lequel on peut avoir des anticorps spcifiques, !rAce a des tec$niques d'immuno$istoc$imie <f ,ubus ou la ,ub le sauciflard" on peut visualiser les noyau( de cellules qui ont incorpors de la @r,u. noyau marron diapo". 5" Autre e(emple de visualisation >bservation direct de noyau de cellules * certaines des noyau( ont mi!rs un peu vers le centre de la !lande cellules intestinales, diapo", on voit distinctement des lot de c$romosomes condenss spars ou ali!ns sur une plaque quatoriale au niveau de ces cellules en p$ase %" . 6rAce a cela on va pouvoir dterminer un inde( mitotique, c'est a dire le nombre de cellules observ en p$ase % par rapport au( nombres total de cellules observs sur le prlevement. Les inde( mitotiques sont tou)ours un peu faible sauf cas de tissus $yperprolifratif " , d'environ 1 cellule en p$ase % sur 1BB cellules. %ais cela ne veut pas dire qu'il y a qu'une seule cellule en division C Au moment ou on a prlever puis fi(er le tissus cette cellule tait en p$ase %. 'our comprendre le cycle cellulaire, il faut ima!iner que le cycle est * /ne $orlo!e qui active c$aque vnement D un moment spcifique, et fournit ainsi une dure fi(e pour permettre la terminaison de lvnement. /n mcanisme qui initie les vnements dans lordre correct E lentre en mitose par e(emple, doit tou)ours suivre la rplication de lA,-. /n mcanisme qui assure quune tape ne se dclenc$e quune seule fois par cycle. ,es interrupteurs qui dclenc$ent les vnements de manire complte et irrversible. il serait dsastreu(, par e(emple que la condensation des c$romosomes ou la rupture de lenv.

nuclaire soient initis mais se termine pas". ,es mcanismes de secours robustes, de qualit, qui sassurent que le cycle peut fonctionner correctement mme si des parties du systme prsentent un dysfonctionnement. moyen de corri!er des erreurs en p$ase 62 qui va allon!er son cycle afin de les corri!er". /ne adaptabilit, pour pouvoir modifier le comportement du systme afin de sadapter D des types cellulaires ou des conditions environnementales spcifiques. adaptation D ne nombreu( types de cellulaire et de conditions" +ous ces vnements sont coordonnes, l'$orlo!e qui fi(e un temps pour c$aque tape est inform de la pro!ression des cellules dans c$aque tape, si )amais la pro!ression dans une tape suivante est impossible, la cellule va sarrter dans une tape et cet tape la va tre rallon!. ,es points de vrifications ou 8 c$ecFpoints 9 sont ncessaire pour la pro!ression des cellules dans les tapes suivantes du cycle. 'ar e(emple lorsque les c$romosomes s'ali!nent sur la plaque quatorial en mtap$ase il va y avoir un systme qui vrifie que les c$romosomes sont bien ali!ns avant que l'anap$ase soit dclenc$ 7inon <A+A7+G>'H&". 0 7i la cellule rencontre une difficult elle peut rester plus lon!temps dans une tape pour la corri!er, elle peut tre aussi contrl par des vnement e(trieurs. Le principe fondamentale du point de contrle du cycle cellulaire c'est de lever des si!nau( n!atifs. >n peut visualiser qu'a la base le cycle est compltement in$ib, il va falloir donc lever les in$ibitions pour que la cellule puisse pro!resser dans le cycle cellulaire. &(emple ,iapo * <$romosome mal attac$ au niveau du fuseau mitotique * si mal attac$ mauvaise s!r!ation <A+A7+G>'H&C", il va donc avoir des si!nau( n!atifs lev a c$aque c$romosome bien attac$ au fuseau mitotique. 7'il reste un seul si!nal n!atif non lev l'anap$ase ne sera pas dclenc$. #l s'a!it d'un systme beaucoup plus sur que si on avait un systme positif qui serait mis a c$aque c$romosome attac$ au fuseau, ce qui obli!erait la cellule a possder un systme suffisamment sensible pour dtecter une intensit de si!nal positif avant de dclenc$er l'anap$ase. 0 @eaucoup plus facile de dtecter un si!nal n!atif que d'additionner plusieurs si!nau( positif. La pro!ression dans le cycle se crer par limination de tout si!nal n!atif . Les si!nau( n!atifs sont !alement enclenc$ dans le cycle pour stopper le cycle quand il y a un problme dans le cycle.

III - Les points de contrles des transitions du cycle cellulaire

6B * '$ase pour laquel les cellules sont quiescentes, c'est a dire que le cycle cellulaire n'est pas acquis. Les cellules qui sont en p$ase 6B doivent recevoir des si!nau( qui sont ports par des facteurs de croissance, le facteur mitotique pour aller en 61. /ne cellule n'entre pas dans la p$ase 61 quand elle est en 6B spontanment. &lle va recevoir de son environnement des si!nau( positifs pour rentrer en 61. /ne cellule passant de 6B a 61 ne va pas forcment finir son cycle cellulaire puisqu'il y a un point de contrle en 61I7. #l va y avoir des critres pour passer en p$ase 7 * LA,- estIil endomma! J La cellule estIelle asse2 !rosse J LA,- estIil correctement rpliqus J La cellule estIelle asse2 !rosse J Le milieu estIil favorable J Gellement besoin de nouvelle cellule J " 7i ces critres sont remplis le cycle va pouvoir se poursuivre en 7 pour la rplication de l'A,-. Au moment de la transition 62 K% * point de contrle trs important qui va 8 poser les questions suivantes 9 * LA,- estIil endomma! J&ntirement rpliqu J La cellule estIelle asse2 !rosse J LA,- estIil correctement rpliqus J Aprs ce c$ecFpoints il y a donc dclenc$ement de toute la mac$inerie de la mitose, en particulier assembla!e du fuseau mitotique. ,ernier point de contrle * transition mtap$aseIanap$ase * Les c$romosomes sontIils bien attac$s au fuseau J &nfin , aprs ce point de contrle il y a dclenc$ement de l'anap$ase puis de la cytocinse. Les transitions d'une p$ase a une autre via les points de contrles sont #GG&L&G7#@L&.

IV- Les facteurs impliqu s dans le contrle du cycle cellulaire

Au cMur du systme de contrle du cycle cellulaire se trouve une famille de protine Finase E les kinases cyclone-dpendantes : Cdk pour cyclin-dependant kinases". Les <dF dpendent de cyclines, elles permettent leur activation. <e comple(e est fondamental pour le contrle du cycle cellulaire. <es acteurs vont subir successivement des r!ulations positives et n!atives cycliques dont vont dpendre les diffrentes p$ases du cycle. Schma simplifie du cur du systme de contrle du cycle cellulaire : alberts 17-1 ! classes de cyclines, caractristiques dune tape du cycle Cycline "1#S C$% qui fi(ent <dF D la fin de 61 et en!a!ent la cellule dans la rplication de lA, Cycline S <,N qui se fi(e D <dF pendant la p$ase 7 et sont ncessaires D linitiation de la rplication de lA,-, r!ulent positivement la rplication. Cycline & <,N dclenc$ent la p$ase %. Cycline "1 C$%, aide D promouvoir le passa!e dun stade prcoce de 61 point dentre" D un stade tardif de 61 point de restriction".

Lactivit de ces Finases au!mente puis diminue tandis que le cycle cellulaire pro!resse. <ette activit cyclique des <dF dpendent de l'activit des cyclines qui est cyclique. %ilieu de 61* 'roduction de 61O7 , puis diminuer en fin de 61 pour passer ine(prim pour le reste du droulement du cycle cellulaire 0 <ycline 7 qui s'active pour avoir un niveau ma(imal pendant 7, elles restent e(prim pendant 62 puis l'e(pression va diminuer en milieu de mitose 0 <ycline % commence a tre produite au milieu de 62 , niveau ma(imal en fin de 62, puis e(pression qui c$ute )uste aprs la pro!ression de cellule de mtap$ase en anap$ase. 0 Les comple(es <dF cyclines r!ulent donc les vnement ma)eurs du cycle cellulaire. La cycline suit des cycle de synt$se et de d!radation a la diffrence des <dF dont la production reste constante au cours du cycle cellulaire sauf les <dF du dbut de 61 qui sont e(prims en dbut de p$ase 61 au moment ou la cellule passe de 6B a 61 quand elle sort de sa p$ase de quiescence "". Leurs activit est r!ul par l'absence de leurs cyclines associs. Les cyclines ne font pas que activer les <dF mais participe aussi a l'orientation des <dF vers leurs cibles protiques Finase 0 p$osp$oryles protines". <$aque <dF a un !roupe de protine spcifique ce qui va permettre de p$osp$oryler certaines substrats de fa.ons spcifiques pendant le cycle cellulaire. Les comple(es <dFOcyclines subissent diffrentes modifications qui vont soit les activer soit in$iber.

1.

Rgulation positive de lactivation dune Cdk

Au niveau du site actif de la <dF ,qui va permettre le transfert d'un !roupement p$osp$ate d'un A+' donneur vers un acide amin d'une protine cible, il y a une partie du site actif qui est bloqu de part la conformation de la <dF non associ a la cycline. Au niveau du site actif il y a une boucle + qui se forme et qui bloque la fi(ation du substrat de la cycline. Lorsque la cycline se fi(e sur sa <dF il va y avoir un remaniement au niveau du site actif de la <dF qui va dplacer la boucle + et qui va tre une fi(ation du substrat A+', le cycle actif n'est pas encore totalement activ, le comple(e cyclineO<dF n'est que partiellement activ. <e n'est que plus tard lorsque le comple(e <dFOcycline va tre reconnu par une Finase particulire qui va p$osp$oryler un acide amin au niveau du site actif de la <dF et qui va rendre la <dF compltement actif . 0 pour activer une <dF il faut qu'elle soit compl( a sa cycline mais aussi elle doit tre p$osp$oryler au niveau de son site actif par une <dF activatin! Finase on doit pas le retenir, moi )e me mfie de cette sorcire"

2.Rgulation ngative de lactivation dune Cdk

#l y a aussi des p$osp$orylation au niveau de la <dF qui peuvent tre in$ibitrice. Le comple(e actif cyclineI<dF est inactiv lorsquune kinase' ()) 1, p$osp$oryle deu( sites, peu espacs, placs au dessus du site actif. 7i le comple(e <dFOcycline est bien form, si la Finase a eu sa p$osp$orylation activatrice mais quel a aussi des p$osp$ates in$ibiteurs elle est inactive. #l va falloir fournir une Finase spcialis pour liminer les p$osp$ates in$ibiteurs. Llimination de ces p$osp$ates par la phosphatase Cdc*P entra=ne lactivation de comple(e cyclineI<dF. Lactivit de <dc2P est $yper r!ule. Lautre moyen de contrler lactivation du comple(e cest de )ouer sur la conformation tridimensionnelle du comple(e. <est ce que lon appelle la $istorsion : La fi(ation de protines in$ibitrices de la <dF <N#" peut aussi r!uler les comple(es cyclineI<dF. La protine p2Q numro ;masse molculaire" se fi(e sur le comple(e, dformant le site actif de la <dF. &lle insre dans le site de lA+', in$ibant le site encore plus. #l e(iste plusieurs protines in$ibitrices, pas que p2Q. La p2Q est souvent impliqu dans le retrait des cellules du cycle lorsquelles attei!nent leurs diffrenciation terminale. La p21 va tre impliqu dans larrt des cellules du cycles lorsquelles rencontrent un problme. La p1R in$ibe la pro!ression vers le point de contrle 61O7 .

5"G!ulation de l'activit d'une <,N par protolyse .

,eu( sortes de comple(es * 7<S nom de certaines des sous unit qui le constitue" * intervient surtout en p$ase 61O7. A'< anap$ase promotin! comple(e" * intervient dans la p$ase %.

<es deu( comple(e sont des comple(es multiIprotiques qui ont une activ e5ubiquitine li!ase. <'est D dire, quils vont induire la !reffe de protine ubiquitine, qui sont des petites tiquettes qui si!nalent que tel ou tel protines cellulaires doit tre d!rad dans le protasome cest un comple(e multiIprotiques constitus par des protases qui sont dans un canal ferm, ces protases a!issent en prsence dA+' et D un pH Q dit p$ysiolo!ique". @eaucoup de protines dans le cycle cellulaire vont voir leurs prsences r!ules dans la cellule, par l'activit de ces deu( comple(es ou plutt leur absence du coup".

Le comple(e 7<S * 7on activit est constante au cours du cycle cellulaire. 'our que ces cibles ne soient pas systmatiquement d!rades, elles vont tre reconnu ou non, par ce comple(e, !rAce D des systmes de p$osp$orylations le plus souvent". ,onc lorsque que la protine D d!rader est p$osp$oryle, elle va tre reconnu par une des protines du comple(e et va tre ensuite ubiquitinyl on lui !reffe des ubiquitines". ,e plus, la spcificit se fait par la bo=te * SIbo( TQB nuclotides". Le comple(e A'< anap$ase promotin! comple(e" * #l est r!ul un petit peu diffremment * son activit est variable au cours du cycle cellulaire, elle dpend de son association avec des sous units activatrices qui intera!issent avec ce comple(e pendant la p$ase % et en dbut de 61 o: il reste actif", elle son activit" est aussi active par des p$osp$orylations, induites par des comple(es % et <,N. <ertaines des protines activatrices de

lA'<, ne peuvent se fi(er D ce comple(e que pendant la p$ase %, et il est !alement r!uls par p$osp$orylation des comple(e cycline % et <,N. L'action du 7<S *

7c$ma qui montre laction du 7<S. ,onc le comple(e est en p$ase 61O7. La cible est un in$ibiteur de <,N. ,onc, on a une protine <Fi, qui pourrait tre prsente pendant la p$ase 61 les in$ibiteurs de <,N in$ibent les <,N, mme si elles sont lis D leurs cyclines, mme si elles ont re.ues leurs p$osp$orylations activatrices, et mme si elles ont eu leurs p$osp$orylations in$ibitrices leves". 'our permettre la pro!ression dans le cycle cellulaire, sil y a des in$ibiteurs, il va falloir les limins, et cela se fait !rAce au comple(e 7<S. ,es Finases vont alors p$osp$oryl les protines <Fi qui vont tre reconnues par le 7<S, et avec association d'autres en2ymes importantes pour lubiquitinylation elles ne sont pas D apprendre", le <Fi est ubiquitinyl puis limin dans le protasome. L'action de l'A'< *

>n a ici un comple(e cycline % et <,N, qui va tre la cible de l'A'<, pendant la p$ase %. &n dbut de p$ase %, lA'< va se comple(er avec une protine activatrice le nom nest pas D apprendre". <ette protine activatrice, va lui c$an!er de conformation qui sera alors une

conformation active, qui sera rendu encore plus active par la p$osp$orylation de l'A'< activ, par le comple(e cycline % et <,N. Le comple(e va avoir pour cible entre autre, les cyclines de la p$ase %. >n voit ici, que les cyclines de la p$ase % vont tre polyIubiquitinyl et d!rader dans le protasome. ,u coup, la <,N de la p$ase % va tre inactiv. Le comple(e % et <,N va induire sa propre inactivation. >n verra par la suite, que le comple(e A'< va induire la d!radation dune protine qui sappelle la scurine, pendant la p$ase %, pour promouvoir l'anap$ase. Gsum * Le comple(e de la p$ase 61O7, qui r!ule le cycle cellulaire par protolyse, va permettre la destruction des <Fi. #l va aussi avoir pour cible les cycline 61O7, et il va aussi participer D la promotion, plus tard, de la p$ase % en dtruisant les in$ibiteur de l'A'<. Tout ce systme de rgulation est compltement cyclique : tout est lis. Les activits des diffrents complexes sont lies les unes aux autres. Le comple(e intervient surtout en fin de 61, et il est encore actif en dbut de 62 il est actif tout le temps, mais il a encore des cibles spcifiques en 62" #l y a beaucoup de SIbo( diffrentes qui reconnaissent les cibles, et leurs e(pressions peuvent tre r!ul au cours du cycle cellulaire. 'endant la p$ase %, l'A'< permet de dtruire des cyclines % et il dtruit aussi quelques cycline 7 qui avaient persist pendant la p$ase %. <ette destruction des cyclines % va induire une dp$osp$orylation des cibles du comple(e % et <,N. 'ar e(emple, les lamine nuclaires. ,onc, tout cela va promouvoir la pro!ression de la cellule en p$ase %. L'A'< va rester actif )usqu'au dbut de la p$ase 61, car il est associ avec une sous unit spcifique activatrice dont le nom nest pas D apprendre". La quantit de cycline peut tre rgule par protolyse, videmment elle est rgule aussi par la transcription des gnes qui codent pour le cycline. Le premier niveau de rgulation c est la transcription des gnes qui codent pour la cycline. !ependant, cette transcription est active en fonction de la p"ase du cycle, dans laquelle se trouve la cellule. #nsuite, la prsence de la protine est rgule par protolyse.

V-Les diff rents points de contrle pour pro!resser dans le cycle "

La diapositive montre les diffrents niveau( de r!ulation du cycle cellulaire, par les comple(es cyclines <,N, en fonction de la p$ase du cycle. #ci, pendant la p$ase 61, on a deu( types de cyclines qui sont e(prims * 61 et 61O7. Les cyclines 61 vont avoir leurs e(pressions induites par l'environnement des facteurs e(traIcellulaires qui vont indiqus D la cellule quil est tant de rentrer activement dans le cycle cellulaire si elles taient en p$ase 6B. <es comple(es 61 <,N vont induire la synt$se des cyclines 61O7 qui elles, permettent le passa!e du point de contrle 61O7. #l va y avoir aussi, rtrocontrle positif par les comple(es 61O7 <,N pour leur propre activation et pour la propre synt$se des cyclines 61O7 et aussi activation de la synt$se des cyclines 7 pour ensuite pouvoir passer la p$ase 7. &nsuite l'apparition des cyclines %O<,N en fin de 62 et vont promouvoir le passa!e des cellules de 62 en %, et en milieu de p$ase %, il va y avoir activation du comple(e A'< qui va permettent la pro!ression des cellules dans la p$ase %. +out .a, va tre r!ul aussi n!ativement et va avoir des effets n!atifs sur d'autres p$ases du cycle. 'ar e(emple la <,NO% va in$iber l'initiation de la rplication, pour que la rplication de lA,- ne se fasse qu'une fois par cycle et il va y avoir diffrents systmes de contrles qui vont stopper le cycle, si )amais la cellule rencontre des problmes. &n particulier ici, pendant les p$ases 61, 62, et 7", si l'A,- est endomma!, le cycle va s'arrter de fa.ons D permettre D la cellule de rparer lA,-. ,e mme que si en p$ase 62, la rplication est incomplte, le cycle va s'arrter. Le point principale de la p$ase %, cest de vrifier que les c$romosomes sont bien attac$er au fuseau pour avec une s!r!ation !ale des c$romatides sMurs pendant lanap$ase.

1"<ontrole pour passer de 6B en 61

>n part du principe que la cellule est en p$ase 6B, qui est une p$ase de quiescence, elle )oue son rle pour lor!anisme mais ne prolifre pas. 'our que elle puisse entrer dans le cycle, il faut lui apporter des si!nau( e(trieurs qui sont sous deu( formes * Les facteurs mito!nes * vont activer des voies de si!nalisation intra cellulaire qui vont permettre la production de protines ncessaires pour contrler le cycle cellulaire. Les facteurs de croissance * activent aussi des voies de si!nalisation intra cellulaire, qui vont activer des protines ncessaires pour rcuprer les nutriments et les utiliser dans la cellule, c'est D dire pour favoriser les p$ases de croissance. Laction combine de ces facteurs va permettre D la cellule dentrer en p$ase de croissance donc !rossir", et rpliquer son A,- pour se diviser en deu( cellules filles quivalentes. #l y a diffrents niveau( de coordinations des cellules entre la croissance et la division. ,ans certaines cellules, les facteurs e(tra cellulaire sont apport, et cela va induire une p$ase de croissance de la cellule qui sera suivi par une p$ase de division. ,'abord la cellule !rossit, puis elle se divise. <est dans cet ordre pour que la division ne se fasse pas trop prmaturment, sinon les cellules filles seraient trop petites. 7i )amais la croissance et la division sont des p$nomne contrler par des facteurs diffrents * il faut alors des facteurs mito!ne et de croissance. #l peut aussi y avoir des facteurs e(tra cellulaires qui activent des voies de si!nalisation diffrentes mais qui vont conduire D la croissance cellulaire et D la division cellulaire simultanment. ,ans tout les cas, quelques soit le cas de fi!ure reprsenter ici, la consquence cest que les cellules vont avoir des actions pour coordonner la croissance et la division, c'est D dire que la division ne va pas se faire avant la cellule est atteint une taille critique, de fa.ons tou)ours, D conserver une taille optimale D la cellule.

Lorsque les cellules sont dans la p$ase de quiescence, pour rentrer en 61, il faut qu'elles re.oivent des si!nau( spcifiques. #ci, cest un e(emple qui montre que l'entre de cellules ad$rentes dans le cycle cellulaire, dpend de leur ad$rence au support. Ad$sion cellulaire nest pas un terme appropri, car en fran.ais il est diffrent de Ad$rence qui est le bon terme". <ependant, le mot an!loIsa(on pour Ad$rence cest Ad$esion et donc par dformation, on entend souvent Ad$esion. &(prience illustrative *

>n prend des cellules ad$rentes, on les met dans un milieu en suspension, c'est D dire quelles ne sont pas capables dad$rer au support. 7i on les incube avec une analo!ue de nuclotide qui va permettre de dterminer le pourcenta!e de cellule en p$ase 7, et bien trs peu de cellules vont tre en p$ase 7, que UV. 7i on permet au( cellules dad$rer au support de fa.ons limiter, .a va induire l'entre en p$ase 7 puisqu'on aura 5BV de cellules qui rentrent en p$ase 7. 7i on permet au( cellules dad$rer comme elles veulent au support, c'est D dire en leur fournissant des molcules dad$rences sur le support, il y aura WBV des cellules qui vont prolifrer en p$ase 7.

<ette e(prience montre bien que les cellules ont besoin de si!nau( d'ad$rences pour prolifrer. <'est un des facteurs environnementau( qui influence la prolifration cellulaire. <ette ad$rence passe par la formation de points focau( dad$rence" qui sont mis en vidence par #H< fluo, avec marqua!e des filaments d'actine en vert, et en rou!e avec un anticorps antiI p$osp$otyrosine avec une certaine Finase qui intervient dans l'ad$rence. +out ces petits points oran!s sont des point focau( d'ad$rences et donc !rAce auquel la cellule s'attac$e au support. <es point sont coupl D une Finase et ces Finases vont envoyer des si!nau( intra cellulaire qui vont dire D la cellule * l'environnement est favorable D une prolifration, donc un si!nal pour rentrer en p$ase 61 depuis la p$ase 6B. La cration de points focau( d'ad$rence va favoriser la si!nalisation intra cellulaire pour faire entre la cellule en p$ase 61 et donc produire des protine ncessaires pour pro!resser en p$ase 61 notamment les cyclines de la p$ase 61". ,eu(ime mode de r!ulation de la prolifration cellulaire *

7i on prend des cellules en culture, D une faible densit, elles vont prolifrs et au bout d'un moment, quand le support sera replie, les cellules arrtent de prolifrer en tout cas les cellules issu de culture primaire". >n dit qu'elles ont atteintes une p$ase de confluence et elles sont une in$ibition qui dpend de la densit quon appelait 8 in$ibition de contact 9. %aintenant * 8 in$ibition densit dpendante 9. #l n'y a plus de place dans la boite, mais aussi parce quil y a puisement des facteurs de croissance, des nutriments ncessaires. ,onc les cellules arrtent de prolifrer. ,e la mme fa.on, si on ra)oute du milieu frais des nutriments ncessaires, et les facteurs mitotiques et de croissance ncessaires D lentre en 61", on va avoir au niveau du milieu frais, des cellules qui vont entre en prolifration a pro(imit du flu( de 8 milieu neuf 9. <ette e(prience dmontre bien D quel point l'environnement influence l'entre des cellules en 61.

Xu'estIce quil se passe enfaite J

#ma!inons quon a un facteur mito!ne ou croissance" qui se fi(e D un rcepteur de la %', et ici on q c$oisit de dire que la si!nalisation cellulaire va passer par les %ap Finases. Le rcepteur du facteur mito!ne va permettre l'activation dune petite protine 6 monomrique qui sappelle Gace, cest une protine centrale du contrle du cycle cellulaire, mais aussi de la survit des cellules et enfaite beaucoup de cellules cancreuses ont une protine Gace mut donc active tout le temps, ce qui favorise la pro!ression tumorale. La protine Gace active, entra=ne la cascade de p$osp$orylation des %ap Finases, qui a pour cible en particulier, des facteurs de transcription, qui vont !nrs une 8 rponse prcoce immdiate 9, c'est D dire, qu'ils vont activ la transcription de !nes qui codent pour d'autres facteurs de transcription, et qui vont tre spcifique du cycle cellulaire, spcifique de !nes utiles pour le cycle cellulaire. ,onc activation d'un rcepteur au facteur de croissance, ou dun rcepteur D un facteur mito!ne, activation de %ap Finases et activation de facteur de transcription spcifique * 8 rponse tardive 9.

&(emple de facteurs de transcription, qui va induire la rponse tardive associ D la pro!ression des cellules dans le cycle cellulaire, cest le facteur de transcription spcifique <Imyc ou myc". &t celuiIci, va permettre l'e(pression de cyclines, par e(emple, de la p$ase 61, ce qui va favoris l'activation des <,N de la p$ase 61.

Alors, sur la diapositive suivante, on a diffrentes actions de <Imyc facteur de transcription", qui va activer la transcription de !nes qui vont permettre D la cellule de pro!resser dans la p$ase 61. &n particulier ici, dans le promoteur du !ne de la cycline , cycline de la p$ase 61", il y a un lment de rponse qui permet de fi(er le facteur de transcription <Imyc et donc qui va permettre d'activ la transcription du !ne de la cycline ,, puis la traduction de lAG- messa!er de la cycline ,, et donc lau!mentation de la concentration protique intra cellulaire de la cycline ,. La cycline , va se coupler D sa <,N favorite et il va y avoir activation des comple(es 61 <,N. -e pas retenir cycline , car cest un e(emple. &nsuite, <Imyc va pouvoir aussi favoriser la transcription puis par cascade la traduction, de sous units du comple(e qui r!ule le cycle cellulaire par protolyse dans la p$ase 61, qui sappelle le comple(e 7<S. <es sous units peuvent tre spcifiques de certains in$ibiteurs des comple(es <,N cycline, comme ici, le(emple du <FiI'2Q. +out cela va concourir, aussi, D lactivation des comple(es 61I<,N et 61O7I<,N. Les comple(e 61I<,N et 61O7I<,N vont p$osp$oryls une protine importante dans la r!ulation cellulaire qui sappelle la protine pr,. <ette protine pr,, quand elle est p$osp$oryl, elle est in$iber et cela va permettre dactiver le cycle cellulaire leve d'in$ibition". Le cycle cellulaire est souvent activ par leve din$ibition. Autre cible de <Imyc, ce sont les !nes qui codent pour les facteurs de transcription qui sappelle les facteurs 8 e2f 9 pas D apprendre". <es facteurs de transcription, eu(, vont tre des facteur de transcription spcifique de !nes implique dont les protine sont implique" dans le droulement

de la p$ase 7. ,onc, la transcription de ces !ne va permettre une au!mentation de la quantit de ces facteur de transcription, qui par ailleurs ne seront plus in$iber par la protine pr,, donc au final, une action concordante pour au!ment la quantit et lactivation de ces facteurs de transcription, ncessaire rentrer les cellules en p$ase 7. ,onc facteur mito!ne ou facteur de croissance, activation de la transcription de !nes qui codent pour des facteurs de transcriptions spcifiques comme par e(emple, cImyc", on est rentrer en p$ase 61 puisque ces facteurs de transcriptions spcifiques vont activer la transcription de cyclines de 61, et vont activer la transcription de !nes impliqus dans la pro!ression de 61 vers 7. ,onc ici, lau!mentation de lactivit de ces facteurs de transcription va permettre la transition 61O7, ils participent D cette transition mais ce nest pas le seul vnement.

Alors videment, comme ce facteur de transcription D une action central dans la pro!ression des cellules en 7, son activation est trs r!ule, et en particulier, si )amais il y avait une activation de la si!nalisation intra cellulaire e(cessive, lie D la prsence trop prolon! de facteurs mito!nes, on a un production e(cessive du facteur de transcription <Imyc. ,onc du coup, la cellule a des systme de verrou, des systmes de contrle n!atif de <Imyc, pour viter une action prolon!e de <Imyc et donc viter dr!lement du cycle cellulaire. <ela passe par laction dune autre protine centrale * la pP5. &lle est trs important puisque cest une protine qui r!ule n!ativement le cycle cellulaire, mais positivement les cellules en mort cellulaire elle est mute dans plus de PBV des cancers". <omme elle a une action in$ibitrice, elle est bloqu en condition normale, par un in$ibiteur * protine %dm2 pas D retenir". <eluiIci, permet sa p$osp$orylation et sa d!radation par ubiquitinylation dans le protasome. La cellule produit la protine pP5 constamment, quelle d!rade quand elle nest pas utile. 7i )amais il y a un problme, on a besoin de mobiliser rapidement la protine, de fa.ons D stopper la prolifration des cellules dans le cycle, si besoin. #l ne sa!it pas de repasser dans une p$ase de transcriptionOtraduction, qui serait trop lon!ue, donc on va lever son in$ibition sur la protine pP5. 7i )amais la protine <Imyc est produite D trop fort niveau dans la cellule, cela va induire l'activation d'une protine qui in$ibe l'in$ibiteur de pP5. <est la protine Arf ne pas retenir". 'our librer pP5, on va squestrer lin$ibiteur de pP5. ,onc l'in$ibiteur de pP5, ne va plus pouvoir se fi(er sur pP5, ce qui va stabiliser la protine pP5, elle ne va plus tre p$osp$oryl, ni ubiquitinyl, donc du coup, on va pouvoir la mettre en vidence dans les cellules. >n dit qu'elle est stabilise.

La protine pP5 est capable, cest un facteur de transcription, elle donc va r!uler la transcription de !nes cible, en particulier des !nes qui codent pour les <Fi, et puis si )amais les problmes que rencontrer la cellule, comme l'$yperI activation sont trop important, et que la cellules est dpasser, pP5 induit lapoptose de la cellule mort cellulaire pro!ramme de la cellule". /n si!nal proI mitotique ou si!nal onco!nique, peut induire une mort cellulaire. 'ar e(emple, la cellule na pas de problmes pour elle, mais elle en a pour les cellules voisines, elle peut rentrer en apoptose. Autre systme de r!ulation * r!ulation de l'apport des nutriments dans les cellules, par les facteurs de croissance *

#ci, on a un facteur de croissance lis sur son rcepteur ce qui va activ le rcepteur qui peut activer une Finase * la p#5IFinase. &lle va avoir plusieurs autres protines Finases comme cible, elle va les p$osp$oryls et les activs, et ces diffrentes protines Finases vont avoir des influence de r!ulation positive sur des facteurs de traduction pour au!menter la capacit de traduction de la cellule car elle va croitre donc il va falloir plus de protines D parta!er entre deu( cellules filles" donc la traduction va tre r!uler positivement par r!ulation des facteurs dinitiations de la traduction, et puis il va y avoir une action positive sur la formation des ribosomes. +oute la mac$inerie de la traduction va tre au!ment pour !rossir, et avoir beaucoup de protines. &n parallle, ces Finases vont in$iber la d!radation des protines. L'action combine sur ces deu( voies in$ibition de la d!radation des protines, et au!mentation de la traduction des AG- messa!er", va induire une stimulation de la croissance cellulaire pendant la p$ase 61. ,onc ces protines Finases peuvent tre stimuler, par laction de facteurs de croissance via un rcepteur et des protines de si!nalisation intra cellulaire, mais par des p$nomnes par encore bien connu, on sait que ces protines Finases peuvent tre directement r!uler par lapport de nutriments, qui peuvent r!uler directement et positivement ces Finases, et les Finases peuvent aussi au!menter lentre de ces nutriments dans la cellule. +outes ces actions concertes vont permettre la croissance de la cellule pendant la p$ase 61.

2"'assa!e de 61 en 7
!omment la cellule contr$le t-elle l entre en p"ase % &

G@ est une protine mise en vidence dans les cas de cancer de la rtine. -ormalement, dans une cellules quiescente, il peut y avoir production de ces facteurs de transcriptions e2S qui sont trs important pour activer la transcription de !nes impliqus en p$ase 7, et comme la cellule est en p$ase 6B, et quelle ne doit pas prolifre, ces facteurs de transcription sont in$ib par la protine G@ qui est active de par sa conformation qui a beaucoup d'affinits pour les facteurs de transcription e2S. ,onc, ces facteurs de transcription ne peuvent pas se fi(er sur les promoteurs des !nes cibles, qui sont squestrer par la protine G@. Xuand la cellule rentre en p$ase 61, il va y avoir une activation de <,N de la p$ase 61 sous forme de comple(e 61O<,N et une de leurs cibles activ cest la protine G@. &lle va tre p$osp$oryl par ces comple(es. <est un e(emple de p$osp$orylation in$ibitrice, la protine G@ p$osp$oryls c$an!e de conformation, et elle n'est plus capable de s'associe au facteur de transcription e2S. ,u coup, ces facteurs de transcription e2S vont tre actifs, il vont pouvoir se fi(er sur les promoteurs de leurs !nes cibles, et vont activer la transcription de !nes impliqus dans la p$ase 7. <es trois premiers points sont des situations linaires. Gtrocontrle *

<e systme est renforc par des rtrocontrles positifs, comme ici, par e(emple, certains des !nes

de la p$ase 7 vont avoir une action positive sur l'activation des !ne e2S. <ela peut tre des facteurs qui vont activer encore plus la transcription de ces !nes. <ertains !nes de la p$ase 7 vont tre des cyclines pour faire la transition 61O7 et les cyclines de la p$ase 7. <e sont des cibles des facteurs de transcription e2S. /ne fois que les <,NI61O7 seront active, donc en fin de 61, elles vont avoir elles aussi pour cible la protine G@ participe a l$yper p$osp$orylation", et donc l'in$iber, renforc l'in$ibition, ce qui va avoir pour consquence un effet positif sur la pro!ression des cellules dans le cycle cellulaire * lactivation des <,NI61O7 a un effet de rtrocontrle positif sur ce systme initial. ,e mme que les comple(es 7I<,N actif en dbut de p$ase 7 vont renforcer aussi, l$yper p$osp$orylation de G@, car cette protine est aussi une cible de ces <,N associs au( cyclines 7. &n !ros, la protine G@ peut tre p$osp$oryl par les 61I <,N, les 617I<,N, et les 7I<,N et toutes ces p$osp$orylations concourent D l'in$ibition de cette protine et D la pro!ression des cellules dans le cycle. Le !ne codant pour la protine G@ est un !ne suppresseur de tumeur comme le !ne pour la protine pP5 puisque ces protines, quand elles sont prsentes et activs, in$ibent la pro!ression o: active la mort cellulaire. >n les appelle !nes suppresseurs de tumeurs, comme la protine G@ et la protine pP5. 'our permettre la transition de la p$ase 61 D 7, il faut non seulement in$iber la protine G@ mais aussi, in$iber les in$ibiteur des comple(e <,NIcycline. <es comple(es <,NIcyclines pourraient tre inactivs notamment par la prsence des <Fi, comme ici, pendant la p$ase 6B, on peut avoir des <Fi associs au comple(e <,NI<ycline et les in$ibant. 'endant la pro!ression de la p$ase 61 vers 7, ces <Fi vont tre la cible du comple(e 7<S, ils vont tre p$osp$oryl, puis ubiquitinyl, puis d!rader dans le protasome, et ils vont dispara=tre. Leur disparition va concourir D linactivation de la protine G@, et D la pro!ression des cellules dans la p$ase 7. #l faut que la cellule fasse appara=tre plusieurs p$nomnes pour pouvoir pro!resser dans le cycle, parce quil faut absolument contrler la prolifration cellulaire. Les comple(e de <,NIcycline de la p$ase 7, vont permettre l'activation de la transcription ou lactivation direct de protine implique dans la p$ase 7 en particulier des en2ymes de synt$se des nuclotides, des $licase, des topoIisomrases, des A,- polymrase de la rplication et la p$osp$orylation de certaines $istone qui vont concourir D la compaction ou la dcompaction de lA,- !nomique".+outes ces r!ulations favorisent la pro!ression des cellules dans la p$ase 7. 'uels types de rgulations trouve t-on pour l entre de la cellule en p"ase de rplication &

>n va voir que des comple(es <,NIcycline de la p$ase 7, peuvent a!ir directement sur des protines qui sont associs au( ori!ines de rplication. 'endant la p$ase 61, les ori!ine de rplication qui sont trs nombreuses sur les c$romosomes sont associs D des comple(es de prIrplication, et pendant lactivation de la p$ase 7, il va y avoir un basculement, c'est D dire que les comple(es de prIrplication vont tre remplac par des comple(es de prIinitiation, puis en comple(e de rplication, pendant la p$ase 7. >n va voir que certaines protines restent associes au( ori!ines de rplication pour ne pas avoir une deu(ime rplication pendant le cycle cellulaire, donc elle ne sinitie qu'une fois. 'endant la p$ase %, il va y avoir activation des comple(es %I<,N, la s!r!ation des c$romosomes, puis ensuite assembla!e de nouveau( comple(es de prIrplication, au niveau des ori!ines de rplications des c$romosomes s!r!s. <et assembla!e dpend de lactivation de la '< et de linactivation des <,N. Lassembla!e du comple(e de prIrplication est in$iber pendant la p$ase 7, par les Finase 7I<,N, ce qui va favoriser le comple(e de prIinitiation. &n revanc$e, l'assembla!e du comple(e de prIrplication, il est stimuler par l'A'<, lA'< tant actif en fin de p$ase % et en dbut de p$ase 61. ,u coup, l'assembla!e ne peut avoir lieu qu'en fin de p$ase % et pendant la p$ase 61. ,onc ces proprits font que la rplication ne peut tre initier quune fois dans les cellules. <omme il est in$iber pendant la p$ase 7 et que l'assembla!e de ce comple(e est in$iber pendant la p$ase 7, et lassembla!e est stimuler en fin de mitose et pendant la p$ase de 61, il ne sassocie quD ce moment lD. >n est alors en 61, avec l'ori!ine de rplication qui est reconnu par un comple(e de reconnaissance de lori!ine de rplication, pendant la p$ase 61, il y assembla!e dun comple(e de prIrplication. <e comple(e de prIrplication, permet de recruter des $licases qui vont tre ncessaires pour drouler lA,- lors de la formation de la fourc$e de rplication. <'est important que ce comple(e se forme pour que ensuite l'A,- puisse tre droul. 'endant la p$ase 7, les <,NIcycline de la p$ase 7, vont p$osp$oryl un des constituants du comple(e de prIrplication, et induire sa d!radation dans le protasome, puisque ce constituant p$osp$oryl va tre ubiquitinyl puis d!rader dans le protasome. /n des constituants du comple(e de prIrplication est une cible des <,NIcycline de la p$ase 7 et qui vont le p$osp$oryl pour induire sa d!radation. /n autre constituant de ce comple(e de prI rplication est in$ib par association avec une autre protine !minine * ne pas retenir". A retenir * L'association du comple(e prIrplication pendant la p$ase 7, est r!ulerOin$iber de deu( fa.ons par destruction par protolyse r!uler de l'un des ces constituant, et dautre par, par association d'un autre de ces constituant avec une protine qui le squestre". ,u coup, la disparition de ces deu( facteurs va permettre l'assembla!e du comple(e de prIinitiation au niveau des ori!ine de rplication, les $licases tant d)D prsentes, la fourc$e de rplication va pouvoir se propa!er et la rplication va pouvoir avoir lieu. Lorsque le comple(e de prIrplication se dissocie, les comple(es cyclineI<,N de la p$ase 7 vont aussi p$osp$oryler les comple(es de reconnaissance de lori!ine de rplication. <ette p$osp$orylation va empc$er un nouvel assembla!e de comple(e de prIrplication.

'endant la p$ase 61 et la p$ase 7, l'A,- peut subir des domma!es et la cellule va arrter la pro!ression dans le cycle de fa.on D pouvoir rparer son A,-. &(emple de r!ulation n!ative du cycle alors que la cellule est en!a!e * #xemple de voies de signalisations actives en cas de dommage ( l )*+, vala,le en p"ase -., en p"ase % et aussi en p"ase -/.

La cellule est soumise D une irradiation, D des rayons, qui va induire des cassures au niveau de l'A,- !nomique. #l e(iste des protines de surveillance qui en permanence 8 scannent 9 lA,!nomique pour vrifier son int!rit. ,es cassures dA,- vont induire l'activation de certaines Finases. Lorsque certaines protines de reconnaissance se fi(e sur lA,-, elles vont activer des Finases, qui vontIellesImmes activer des cascades de p$osp$orylation qui sont ici notes comme <HN1 et <HN2 Finase dactivation * <$ecF 'oint Ninase * ne pas apprendre". &t ces Finases vont avoir pour cible la protine pP5, qui va tre p$osp$oryle sur certains cites ce qui va l'empc$er dtre associe avec la protine %dm2. <e p$osp$ate va empc$er l'association de pP5 avec %dm2 et elle va devenir stabiliser. &lle va pouvoir activer la transcription car cest un facteur de transcription" du !ne qui code pour la protine p21 cest un in$ibiteur de <,N". Les Finases qui taient actives au moment de l'irradiation vont tre in$ibes par la prsence de cet in$ibiteur de <,N. La cellule va s'arrter dans la p$ase 61. 'P5 associe D %dm2 va tre normalement d!rade, ici lorsque ces Finases sont actives aprs un domma!e D lA,-, 'P5 est p$osp$oryl, cela empc$e son interaction avec lin$ibiteur, donc elle va pouvoir tre translocquer dans le noyau tout cela se passe dans le cytosol". La transcription dun !ne pour un in$ibiteur de <,N le <,NIcycline", va tre active et les comple(es <dFIcycline de la transition 61O7 de la p$ase 7 vont tre in$ibs et la cellule va s'arrter.

Lautre voie de si!nalisation peut tre active pendant la p$ase 61, si la cellule re.oit des si!nau( de l'environnement qui in$ibe sa croissance. Xuand on parle de facteur de croissance, on pense r!ulation positive de croissance. %ais ca peut tre aussi n!ativement comme +6S beta qui sont des facteurs de croissance qui se lient sur des rcepteurs spcifiques au niveau de la %embrane 'lasmique. <es rcepteurs sont spcifiques D lactivit srine t$ronine Finase qui est couple D des facteurs de transcription. Xuand ces rcepteurs de srine t$ronine Finase sont activs, les facteurs de transcription cibles sont p$osp$oryls. <e qui permet leur activationOdimrisation notamment et ils vont pouvoir aller sur les promoteurs de leur !ne cible. #ci en particulier, cela va induire la transcriptionOproduction du !ne qui code pour la protine '1P in$ibiteur cyclineI<,N", et donc il va y avoir in$ibition du comple(e 61O7I<,N, bloca!e de la p$osp$orylation nuclaire et arrt de la cellule en 61. <est un autre moyen darrter la croissance, que dobtenir des si!nau( n!atifs D partir de lenvironnement.

5"<ontrle de la transition 62I% * <ontrle du droulement de la mitose *

0ci, sur le sc"ma, on va se rappeler comment un complexe 1-!dk est activ en d,ut de p"ase 1.

,onc en fait, les comple(es %I<dF se sont accumuls pendant la p$ase 62 mais ils restent inactifs puisquon a vu prcdemment que pour les comple(es <dF cycline, cela ne suffit pas dassocier la cycline D la <dF pour activer la <dF. #l faut aussi quelle soit p$osp$oryle pour tre active et dI

p$osp$oryle pour lever une certaine in$ibition. <est ce que lon voit ici, le comple(e <dF cycline % se forme en fin de 62, et ce comple(e est p$osp$oryl par la <dF spcifique qui p$osp$oryle le comple(e m <dF. <e comple(e va tre aussi p$osp$oryl par une autre Finase qui va lui !reffer des p$osp$ates in$ibiteurs. 'our passer de 62 en %, il va falloir activer une p$osp$atase essentielle qui sappelle la p$osp$atase cdc2P on ne sait pas trop encore ce qui permet de l'activer. >n pense que c'est une cible de comple(e 7 <dF qui serait encore active en fin de 62, mais on n'est pas trop sur de ce qui l'active". %ais visiblement cette p$osp$atase est active sous forme p$osp$oryle. #l faut comprendre que les systmes de p$osp$orylationOdp$osp$orylation sont des systmes dinterrupteur on ou off pour activerOdsactiver les protines. <ette p$osp$atase inactive va tre p$osp$oryle. &lle va tre active et va dIp$osp$oryler le comple(e m <dF au niveau des cites in$ibiteurs et rentre la <dF m compltement active et faire basculer la cellule de 62 en %. >n voit que ce comple(e m <dF actif va avoir plusieurs cibles dans la cellule, en particulier elle va permettre la p$osp$orylation des condensine impliques dans la condensation des c$romosomes" et aussi les lamines nuclaires protine de la matrice nuclaire" et une fois p$osp$oryl, elles vont se dsassembler ce qui va permettre la dissociation du noyau pendant la p$ase %. &lle va aussi p$osp$oryler certaines protines associes au( tubules fuseau mitotique", ainsi que la protine de H1 et des p$osp$orylations de diffrentes protines du cytosquelette qui va se ror!aniser. ,e plus, on aura le G&G et 6ol!i, dont on ne conna=t pas trop leur or!anisation pendant la p$ase %, qui vont se remanier. +outes ces cibles protiques vont concourir D diffrentes modifications de la cellule cest D dire lassembla!e du fuseau mitotique, la rupture de lenveloppe nuclaire, la condensation des c$romosomes, et le rarran!ement du cytosquelette. 'endant la p$ase 62, les cyclines de la p$ase % se sont assembles D <dF. Les <dF ne sont pas vraiment r!ules, mais sont e(primes de fa.on continue au cours du cycle cellulaire. <'est l'e(pression des cyclines qui va faire que les comple(es vont tre actifs ou non et constants. #l va y avoir activation du comple(e, il y aura des rtrocontrles positifs de ce comple(e m <dF pour sa propre activation. &n particulier, le comple(e m <dF activ est capable de p$osp$oryler cdc2P pour renforcer son activation rtro contrle positif". &n mme temps, les m <dF actives vont p$osp$oryles la Finase qui normalement in$ibe leur activation. ,onc l'activation des comple(es m <dF va permettre de lever la propre in$ibition de cette activation. Xuand on lve une in$ibition, on active encore plus. <es <dF cycline % actives sont des lments centrau( dans l'entre en mitose. &nsuite il va falloir les inactiver pour promouvoir l'anap$ase et la s!r!ation des c$romosomes. <omme on la vue prcdemment, au cours, ou en milieu de la mitose, on va avoir lactivation de lA'<. <e comple(e A'< va tre activ de deu( fa.ons. Association dune protine qui le r!ule de fa.on positive, association d'une sous unit spciale, protine qui r!ule positivement l'A'<. '$osp$orylation par le comple(e m <dF.

Le comple(e A'< inactif s'associe avec sa sous unit r!ulatrice positive et p$osp$orylation par le comple(e <,N m. Les c$romatides sMur sont apparies pendant le dbut de p$ase % )usqu'D la mtap$ase et leur appariement dpend de la formation de comple(es dpendants qui sont constitus des co$sine. <es comple(es co$sine sont dposs le lon! des c$romatides sMurs. &n parallle, en fin de 62, on a un comple(e protique qui sest form, constitu de scurine et sparase deu( protines". La sparase va permettre de favoriser la sparation des c$romatides sMurs aprs la mtap$ase pour promouvoir l'anap$ase car la cible de la sparase est la co$sine. <ette en2yme va dtruire les co$sine. ,onc, en dbut de la p$ase % et D la fin de a p$ase 62, la sparase est in$ibe par la scurine. 'ar association, elle lempc$e daller a!ir sur les protines cibles de la sparase. L'A'< active va favoriser l'ubiquitinylation de la scurine et cette scurine ubiquitinyl va tre d!rade dans le protasome. <e qui va librer la sparase qui va tre active et qui va pouvoir d!rader les comple(es de co$sine et donc favoriser la sparation des c$romatides sMurs * c'est un vnement brutal . Le comple(e <dF m va favoriser la transition de la mtap$ase vers l'anap$ase en favorisant l'activation du comple(e A'< qui lui va permettre de librer de la sparase et elle va permettre la sparation des c$romatides sMurs qui taient associs au( comple(es de co$sine. 7i )amais les c$romosomes ne sont pas bien apparis ou s'ils n'taient pas bien fi(s au( fuseau( mitotiques, le comple(e A'< est in$ib, donc tout ceci ne pourrait pas survenir. <es systmes de contrles din$ibitions doivent tre levs avant que le p$nomne ne puisse intervenir.

L'A'< est p$osp$oryle et donc active par les comple(es m <dF. Lorsque l'A'< cible la cycline % pour ca poly ubiquitinylation et sa d!radation, cela va participer D lactivation de lA'<. <'est une sorte de rtro contrle n!atif. 'endant la p$ase 62 m, si on voulait revenir sur les comple(es m <dF, et bien on a une p$osp$orylation. Les comple(es m <dF p$osp$orylent le comple(e de reconnaissance des ori!ines de rplication et cette p$osp$orylation va in$iber lassociation du comple(e de prIrplication qui se produit en 61. #l va falloir attendre que les m <dF et s <dF soit compltement inactivs pour que les comple(es de reconnaissance des ori!ines de rplications soit dIp$osp$oryls. 'our que ce comple(e de pr rplication puisse s'associer D nouveau au( comple(es de pr rplication. &videment, comme on a vu que la cellule pouvait s'arrter en 61, la cellule peut s'arrter en 62. Les lsions D lA,- peuvent intervenir n'importe quand pendant la vie de la cellule. #l y a des protines qui sont vrifies r!ulirement et sur toute sa lon!ueur l'int!rit des c$romosomes de fa.on D prvenir des transcriptions de matriels !ntiques endomma!s. Aprs rplication, les protines c$ecF points sont lD au cas o: il y est des domma!es D l'A,- qui seront actives Finase en !nrale". 7i tout va bien, le comple(e m <dF va tre activ !rAce D la cdc2P. 7i )amais il y a un domma!e D lA,-, la <dc 2P peut tre la cible de ces fameuses Finases actives en cas de domma!es ce qui va la rendre inactive. 7i la <dc 2P est inactive par p$osp$orylation, le comple(e va pouvoir tre p$osp$oryl par la Finase et sera in$iber. La cellule va donc s'arrter en 62.

+,-$r.ulation du cycle cellulaire et ses cons/uences

<ertains virus ont pour cible des protines du cycle cellulaire. <omme certaines papilloma virus qui sont impliques particulirement dans le cancer du col de l'utrus. 'our une cellule quiescente, on peut avoir au niveau de !ne impliqu dans la pro!ression dans le cycle cellulaire, des facteurs de transcription e2f associs D la protine G@ et in$iber par la protine G@. ,ans le mme temps, la quiescence peut tre maintenue par une protine pP5 active qui est spare de son in$ibiteur et qui va permettre la transcription de !ne in$ibiteur des comple(es des cyclines <dF comme la protine 21.Les virus papilloma codent pour des protines qui vont cibler D la fois la protine G@ et pP5. <ertaines protines spcialises de ces virus vont pi!er la protine G@ ce qui fait qu'on ne va plus pouvoir tre associ au facteur &2S. ,u coup, cela va favoriser la pro!ression des cellules de 61 vers 7. <ertaines protines virales peuvent in$iber la protine G@ par squestration. ,ans le mme temps, une autre protine virale spcialise va !alement squestrer pP5 et induire sa protolyse ce qui va lever la transcription de !nes qui codent pour les in$ibiteurs de cycline <,N * les <N#. <ertains virus codent pour des protines qui ont de l'affinit D la fois pour la protine G@ ou pP5 ou simultane, deu( en un. &videmment, le dveloppement de cancers est trs li D la r!ulation du cycle cellulaire et D la r!ulation de la survie, de la mort cellulaire.

Les cancers sont souvent d'ori!ines plurifactorielles. <e n'est pas un seul vnement qui va entrainer la cellule dans une pro!ression tumorale, parce que le cycle est r!ul D diffrents niveau( donc il faut quil y ai beaucoup d'vnements qui modifient la r!ulation du cycle cellulaire et des vnements en parallles qui modifient les p$nomnes de survies et de mort cellulaire pour que les cellules soient transformes, c'est D dire que la cellule perd son arrt de prolifrer, elle prolifre de fa.on infini, et ensuite, il va falloir qu'elles subissent d'autres modifications qui vont les rendre plus a!ressives de fa.on D ce que la tumeur puisse se dvelopper et devenir mali!ne et mortel. #ci, on a la fa.on dont il va falloir dr!uler des !nes qui codent pour des protines impliques dans le contrle du cycle cellulaire, pour avoir une production e(cessive des cellules, normale. >n a un certains nombres de !nes qui vont avoir un effet in$ibiteur !ne suppresseur de tumeur" ou activateur protoIonco!ne" * ce sont des !nes qui lorsquils sont dr!uls positivement, leur e(pression est ncessaire pour la croissance et la survit de la cellule mais sils sont dr!uls, ils sont protoIonco!niques. Au dpart, on a dcouvert c$e2 les virus, puis on a dcouvert lquivalent c$e2 les mammifres. ,ans une cellule normale, la prolifration est r!ule. >n a un quilibre entre l'e(pression des !nes suppresseurs et protoIonco!nes pour que la croissance et la division soient bien r!ules. <roissance et prolifration". 'our obtenir une prolifration e(cessive, il va y avoir plusieurs fa.ons de procder * La premire ca peut tre dactiver de fa.on anormale l'e(pression d'un proton onco!ne. La cellule doit avoir subi une modification !nomique d'un seul des deu( allles du !ne qui code pour le proton onco!ne. &(emple de protoIonco!ne * cImyc, Gace, e2f, cyclines puisquelle favorise la pro!ression des cellules dans le cycle cellulaire. /n seul ne suffit pas pour avoir une perte de contrle, mais si on en dr!ule plusieurs, il peut y avoir effectivement une pro!ression e(cessive des cellules. >n na pas touc$ au niveau des !nes suppresseurs du !nome mais on a permis par une mutation la sur activation d'un protoIonco!ne qui devient onco!nique. >n peut mettre en vidence des mutations onco!niques et des mutations de !nes suppresseurs de tumeur pour quils s'e(priment p$notypiquement pas une $yper prolifration. #l faut que les deu( allles soient touc$s. <e qui conduit D une $yper prolifration. &n !nral, dans les tumeurs, il peut avoir perte d'un allle du !ne suppresseur et puis dans un vnement beaucoup plus tardif, il peut y avoir perte des deu( allles. #l peut favoriser D la prolifration de la tumeur, dans des p$nomnes plus importants et plus tardifs.

Lorsqu'elle n'est pas associe D ces in$ibiteurs, la pP5 va permettre et induire l'arrt du cycle cellulaire. &lle va favoriser l'apoptose des cellules cest D dire la mort cellulaire pro!ramme et va aussi concourir l'entre des cellules dans la senescence des cellules arrt irrversible de la prolifration cellulaire qui est naturelle dune sorte de vieillissement cellulaire" et au bout d'un moment, elles vont mourir. ,onc la pP5 est capable d'activer tous ces p$nomnes qui r!ulent n!ativement la survie, la lon!vit des cellules, la prolifration. &t elle va tre active par diffrents si!nau( de domma!es D lA,- qui vont activs la pP5, raccourcissement des tlomres on va perdre l'activit de certaines !nes, ce qui va induire entre autre, lactivation de pP5 et l'arrt du cycle". ,e fa.on a ne pas transmettre au( cellules filles les c$romosomes incomplets. L'importance de la pP5 * &(prience

&(prience qui a t faite dans deu( types cellulaires * normal et un autre ou la pP5 est inactive sur les deu( allles. >n est en cytomtrie en flu(. >n voit deu( pics qui correspondent D une quantit d'A,- et une quantit double d'A,- sur le pic de droite des cellules en 61, 62 et %. &ntre les deu(, les cellules pro!ressent en p$ase 7. >n peut

dire que les cellules ne sont pas sync$ronises puisqu'elles sont distribues dans toutes les p$ases du cycle cellulaire. 7i on avait des cellules sync$ronises, au cours du temps, on naurait qu'un seul pic. >n irradie ces cellules normales et on re!arde plus tard U$eures aprs, comment elles sont distribues dans le cycle des cellules normales. Les cellules qui devaient tre en 7 ont presque compltement disparues. A la place, on voit que le pic de 62 % a lar!ement au!ment. <e qui veut dire que les cellules se sont alors arrtes dans la p$ase 62 pas en p$ase % car cette p$ase dure trs peu de temps, quand l'activation est dclenc$e, cest lactivation du comple(e l'A'< permet soudainement en anap$ase, pas d'arrt dans cette p$ase !nralement". <omme la p$ase 7 a lar!ement diminu, ca veut dire que les cellules au moment de lirradiation sont restes en 61 car il ny a plus dentre en p$ase 7. >n a un arrt dans les deu( p$ases en 61 et 62. ,ans les cellules pP5 mutantes ou il ny a plus de(pression de la protine pP5, il va y avoir la mme au dpart, population cellulaire distribution des cellules normales. Xuand il ny a pas de problme, la pP5 n'est pas active donc ne c$an!e pas. &n revanc$e, aprs irradiation, on voit alors qu'on navait plus de p$ase 7, on a des cellules qui rentrent quand mme en p$ase 7. %al!r lirradiation, le contrle d'arrt mis en vidence pour les cellules normales a disparu en absence de pP5. >n a donc perdu un point de contrle d'entre en p$ase 7. &n revanc$e pour cette li!ne cellulaire, on voit que le pic 62 % a quand mme au!ment. %al!r l'absence de pP5, il y a un contrle darrt en 62 li a lirradiation et au( cassures qui a t maintenu. ,onc pP5 a un rle central dans le contrle du droulement du cycle cellulaire mais n'est pas la seule protine intervenant dans le cycle entier. #l y a d'autre protine contrleuses.