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CURSO DE HPLC

NOVIEMBRE DEL 2013 DR. NO COSTILLA SNCHEZ

Fundamentos de la cromatografa liquida de alta performance

Cromatografa Lquida

Cromatograma
HPLC es una tcnica para alcanzar rpida, eficiente y reproducible la separacin de componentes de una mezcla. HPLC puede ser aplicada a muestras con alto y bajo peso molecular, polar o no polar, siempre y cuando sea trmicamente posible.

Columna rellena con material empacado y la fase mvil ascendiendo por la columna.

La muestra es separada en la columna por distribuciones sucesivas entre dos fases, la fase estacionaria y la fase mvil. La fase estacionaria consiste en partculas solidas y porosas empacadas dentro de la columna. La fase mvil , un liquido, sirve para transportar la mezcla a la columna y tambin participa en el proceso de separacin.

Componentes de la mezcla

Columna rellena con material empacado.

La muestra es introducida por la cabeza de la columna como una banda uniforme. Aqu se introduce uno de los tres componentes de la mezcla, crculos azules, cuadrados rojos, y tringulos verdes. Algunos componentes, cuadrados rojos, preferirn permanecer en la fase estacionaria de tal manera q su movimiento en la columna es lento al bajar en la columna. Otros componentes tales como los crculos azules, preferirn la fase mvil y saldrn rpidamente de la columna. La separacin de los componentes ocurre porque estos se mueven a diferentes velocidades a travs de la columna.

Reservorios de solventes Agua Metanol

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