Drojdiile se impart in doua grupe mari: asporogene care nu formeaza spori sporogene. Ultima grupa se subdivide in : balista sporogene unde sporii sunt liberi; ascosporogene, unde sporii sunt inchisi intrun sac. !rupele amintite se subdivid in familii, subfamilii si genuri. "le sunt definite prin caracterele morfologice, genetice si fiziologice. Drojdia de bere apartine grupei ascosporogene, familia #accharom$cetaceae, genul #accharom$ces. %cest gen se distinge prin urmatoarele caractere: inmultirea celulelor se face prin inmugurire; formeaza cateodata pseudomiceliu; sporii sunt de obicei rotunzi sau ovali; fermenteaza intotdeauna alcoolic si nu asimileaza azotatii. Din punct de vedere al fermentarii e&ista : drojdii de fermentatie inferioara (#accharom$ces carlsbergensis) care fermenteaza la temperaturi scazute, mergend chiar pana la ' ( 1 o ) si care se depun pe fundul vasului la sfarsitul fermentatiei; drojdii de fermentatie superioara (#accharom$ces cerevisiae) care fermenteaza la temperaturi ridicate (pot fermenta la temperaturi de chiar 1' o )) , iar la sfarsitul fermentatiei se ridica la suprafata lichidului. Drojdia de bere poate avea dimensiuni si forme diferite: este monocelulara, de obicei are forma rotunda sau ovala cu dimensiuni de * ( 1' microni. )elula este formata dintro membrana celulara si protoplasma. +embrana reprezinta circa ,' - din greutatea celulei si este formata din doua straturi. Un strat interior format din glucani si chitina si un strat e&terior format din manani, substante azotoase si lipide. )elula mai contine si enzime. )onstitutia peretelui celuilar permite schimbul de substante intre celula si mediul de cultura si determina fenomenul de floculare a drojdiei. .n protoplasma celulei de drojdie se distinge un nucleu (care contine cromozomi). %ici se gaseste centrul caracterelor ereditare, fundamentale ale drojdiilor. /estul protoplasmei se numeste citoplasma si este formata dintro substanta (mitocondrii) care joaca rol esential in formarea enzimelor si dau granule de valutina. #e disting in celule si picaturi de grasime. %tunci cand celulele imbatranesc in citoplasma apar vacuole umplute cu lichid care se disting bine la microscop. Drojdia de bere presata contine apro&imativ 0* - apa, iar substanta uscata a celulei contine 1' ( 1* - substanta organica si * ( 1' - substante anorganice. )ompusii principali ai celulei sunt: glicogenuil; trehaloza; substantele azotoase; gumele; lipide; substante minerale )ontinutul acestor constituienti este foarte variabil si depinde de starea fiziologica a celulei. !licogenul (hidrat de carbon cu aceeasi formula bruta ca amidonul, dar cu structura diferita si cu capacitatea de a se colora in brun cu solutia de iod) si trehaloza ( un dizaharid nereducator) constituie rezerva hidrocarbonata a celulei de drojdie. .n mediu nutritiv bogat, glicogenul se acumuleaza, iar in mediu nutritiv sarac el se consuma de catre celule si din aceasta cauza continutul de glicogern din celulele de drojdie variaza intre ' ( 2' -, in functie de starea si stadiul in care se gaseste celula. )ontinutul in substante azotoase este in mod normal de 3* -, dar daca glicogenul scade, el poate ajunge chiar la 0' -. 4rei parti din substantele azotoase sunt formate din albumina (cereveziaca) si o fosfoglobulina (zimocazeina), restul fiind format din nucleoproteine. #ubstantele grase sunt cuprinse intre , ( * -, iar cele minerale reprezinta in mod normal apro&imativ 5 - (majoritatea fosfati). )ontinutul in substante gunoase este de apro&imativ * -, .n celula p6 ( ul este de *,1 ( 7,'. .n afara de substantele amintite, in celula se mai gasesc si o serie de agenti biologici ca : enzime, (carbohidraze, proteaze, transferaze, citocromo&idaze); sisteme de o&idoreducere ( citocromul si glutationul sunt principalele sisteme de o&idoreducere) factori de crestere (inozitolul acidul pantotenic biotina); vitamine (8 1 , 8 , , 8 7 , 8 1, , provitamina vitaminei D, 99): Una din importantele proprietati ale drojdiei este capacitatea sa de floculare (aglutinare). 9rin floculare se intelege acumularea celulelor de drojdie in flocoane mari, care imediat ce capata o anumita greutate se depun pe fundul vasului de fermentare. Drojdia de obicei in conditii normale de fermentare, floculeaza prea devreme, celulele nu vor mai produce fermentarea mustului, iar daca nu floculeaza la sfarsitul fermentatiei, berea ramane tulbure, produce greutati la filtrare si gustul sau va fi mai putin corespunzator. #e disting 3 categorii de floculari ale drojdiilor si anume: drojdii foarte pulverulente unde aglomeratele se produc pana la circa 1' celule si de obicei se mentin in suspensie in bere; drojdii pulverulente , unde aglomeratele merg pana la 1''' de celule si se formeaza in a doua treime a fermentarii; drojdii floculante in care aglomeratele contin mai multe mii de celule si se formeaza in a doua jumatate a fermentatiei; drojdii foarte floculante. .n acest caz flocularea se produce chiar de la inceputul fermentatiei, celulele ramanand lipite una de alta in timpul cat se multiplica. Drojdiile din prima si ultima categorie sunt inutilizabile. .n practica au importanta cele din categoria a doua si a treia. 9rintre factorii care influenteaza flocularea drojdiei se mentioneaza: sarcina electrica a celulei; slabirea activitatii de inmultire; slabirea activitatii de fermentare; prezenta sarurilor in mediu care pot influenta valoarea p6 ( ului; actiunea produselor de metabolism; influenta bacteriilor; varsta celulei; cationii bi si trivalenti; unii constituienti ai materiilor prime folosite; )elula de drojdie este un coloid incarcat cu electricitate si ea poate sa piarda aceasta sarcina sau sasi schimbe semnul. )elula este incarcata pozitiv la introducerea ei in mediu, dupa cateva ore insa, de la inceputul inmuguririi celula se incarca negativ, iar la sfarsitul fermentarii (p6 3,3 ( 3,0) celulele se incarca din nou pozitiv. ;a p6 3,3 (punctul izoelectric) in practica se produce atat flocularea drojdiilor cat si a proteinelor cu mulecula mare din mustul de malt. )ationii bi si trivalenti produc flocularea drojdiei in solutie apoasa. .onul de calciu are influenta neta asupra flocularii. #a constatat de asemenea ca anumite varietati de orz produc flocularea mai puternica a drojdiei. )ercetarile au aratat ca in cojile de malt e&ista anumite substante care produc flocularea drojdiei. ;a fabricarea berii in multe tari se folosesc doua tulpini de drojdie: una floculanta, care sedimenteaza repede, dand o bere limpede; una pulverulenta, care depune mai greu. )ele mai folosite insa la fermentarea berii sunt drojdiile floculante. Drojdiile pulverulente se folosesc de obicei nu singure ci in asociatie cu cele floculante. Clasificarea drojdiilor Drojdiile apartin urmatoarelor trei clase de ciuperci : ascom$cete ; basidiom$cete; deuterom$cete care grupeaza formele imperfecte de drojdii avand afinitati cu ascom$cetele si basidiom$cetele. .n interiorul acestor clase , drojdiile sunt grupate in familii , subfamilii (eventual) genuri si specii. Clasificarea drojdiilor Ascosporogene (<reger van /ij 1153) #termophthoraceae )occidiascus +etschni=o>ia ?ematospora #accharom$cetaceae #chizosaccharom$cetoideae #chizosaccharom$ces ?adsonioideae 6ansniaspora ?adsonia #accharom$codes @ic=erhamia ;ipom$cetoideae ;ipom$ces #accharom$cetoideae %mbrosioz$ma %rthroascus )iterom$ces )lavispora )$niclom$ces Debor$om$ces De==era !uilliermondella 6ansenulla .ssatchen=ia <lu$veromices ;odderom$ces 9ach$solen 9ach$ticospora 9ichia #accharom$ces #accharom$copsis #ch>aniom$ces #poropach$dermia #tephanoascus 4orulospora @ic=erhamiella @ingea A$gosaccharom$ces %scom$cetele sunt drojdii care se reproduc printrun proces se&uat dintrun asc, care rezulta de la transformarea uneicelule dupa meioza. #unt doua familii de ascom$cete : #permophthoraceae cu trei genuri ; #accharom$cetaceaecu 3 subfamilii si ,3 de genuri. .n aceasta familie se afla numeroase drojdii implicate in procesele de fermentare sau de alterare a produselor agricole sialimentare. Clasificarea drojdiilor basidiosporogene (<reger van /ij 1153) Filobasidiaceae Chinosphaera Filobasidiella Filobasidium Drojdii formatoare de teliospori Leucosporidium Rhodosporidium Sporidiobolus Sirobasidiaceae Fibulobasidium Sirobasidium Tremellaceae Holtermania Tremella Drojdiile din clasa basidiom$cetelor prezinta o reproductie se&uata cu formare de basidiospori pe o basida. 9utine drojdii din aceasta clasa sunt capabile de fermentare. Clasificarea drojdiilor eumycete (<reger van /ij 1153) %scom$cete 6emiascom$cete "ndom$cetale #permophthoraceae #accharom$cetaceae 8asidiom$cete Ustilaginales Bilobasidiaceae Drojdii formatoare de teliospori 4remellales #irobasidiaceae 4remellaceae Deuterom$cete 8lastom$cete )r$ptococaceae #porobolomicetaceae Clasificarea drojdiilor imperfecte (<reger Can /ij , 1153) )riptococcacea %ciculoconidium 8rettanomices )andida )r$ptoccocus <loec=era +alassezia Dosporidium 9haffjia /hodotorula #arcinosporon #chizoblastosporion #terigmatom$ces #$mpodiom$ces 4richosporon 4rigonopsis #porobolom$cetaceae 8ullera #porobollom$ces Drojdiile imperfecte se clasifica in : clasa )ri$ptococcaceae care cuprinde 1* genuri ; clasa #porobollom$ces care cuprinde , genuri. Metode clasice de identificare a drojdiilor .dentificarea se face numai pe o cultura pura de drojdie, izolata in prealabil pe un mediu nutritiv cu geloza , specific pentru drojdii. )riteriile de identificarer a drojdiilor pot fi impartite in trei grupe : criteriile reproductiei vegetative ; criteriile se&uale; criteriile biochimice si fiziologice. Criteriile reproductiei egetatie Modul de reproductie egetatia /eproductia vegetativa se poate face prin inmugurire si sciziune sau prin cateva combinatii intre ele. Bormarea mugurelui incepe printro bombare a peretelui celular (inmugurire), apoi mugurele format creste ( se mareste) inainte de a se separa de celula mama. .nmugurirea poate fi : polara numai la o e&tremitate a celulei ; bipolara la doua e&tramitati ale celulei ; multilaterala mugurii se pozitioneaza pe tot conturul celulei mama. Morfologia celulei egetatie %ceste caracteristici sunt studiate folosind preparatele microscopice efectuate in stare B/%.# pe culturi in mediu lichid sau mediu solid. #e e&amineaza aspectul culturilor in mediu lichid si pe mediul solid dupa termostatare timp de minimum 2 zile la ,5 o ). Cresterea in mediu lichid )ulturile pot fi realizate in medii cu e&tract de malt sau +E!9 (Difco). %spectul cuturilor este notat astfel : formarea sedimentului la fundul tubului si aspect (fin , grosier); pelicula la suprafata ; formare de gaz. Cresterea pe mediu solid )ulturile sunt realizate pe aceleasi medii ca in cazul precedent , la care se adauga , - agar agar si distribuite in cutii 9etri . .nsamantarea se face in strii. Dbservarea culturilor permite definirea : marimii coloniilor ; formei lor (contur net sau neregulat , conve& sau concav); aspectului lor (mat sau stralucitor ); pigmentarii (colorarii ) lor . )elulele pot fi sferice , ovoide , alungite , elipsoidale , apiculate (forma de lamaie) , sub forma de sticla , triunghiulare . )ateaodata forma este caracteristica unui singur gen , de e&emplu , celulele sub forma de sticla apartin genului +%;%##"A.% , iar cele de forma triunghiulara genului 4rigonopsis. Dar cel mai des forma si talia celulelor culturilor (tulpinilor) din aceeasi specie sunt variate (e&. #. cerevisiae ) Formarea de micelii %ptitudinea de a forma filamente este observata pornind de la o cultura pe lama microscopica. +ediul de cultura folosit este 9D% (9otatoes De&trose %gar) Dbservarea microscopica se face dupa 2* zile de cultivare , cu obiectiv capabil sa mareasca de la 1'' la 3'' de ori . #e e&amineaza marginea ( bordura) coloniei Daca drojdia este filamentoasa se inregistreaza natura miceliului (pseudomiceliului sau miceliului adevarat ) , abundenta si ramificarea sa . Formarea de clamidospori Bormarea de clamidospori este caracteristica drojdiilor )andida %lbicans , drojdiilor +etschni=o>ia si eventual poate fi observata la culturile vechi (batrane) de 4richosporon )utaneum sau )r$ptococcus. "ste vorba de spori ase&uati cu pereti ingrosati , bogati in lipide , bine adaptati pentru perioada de somnolenta (dormitare). Formarea balistosporilor 8alistosporii sunt spori produsi de protuberantele celulei mama si care sunt imprastiati in aer la faza de maturitate ; blastosporii sunt caracteristici genului #porobolom$ces. Caracteristici se!uale Drojdiile ascomicete prezinta fenomene de reproductie se&uata prin formarea unui asc care contine ascospori rezultati prin meioza . Drojdiile pot fi hematolice sau heterotalice , stabilizate in haplofaza sau : si diplofaza , ascul formanduse prin diferite procedee . .n cazul drojdiilor homotalice , stabilizate e&clusiv in haplofaza , plasmogamia , cariogamia si meioza au loc in zigotul format prin fuziunea a , celule vegetative . Diplofaza este redusa la zigot . Diploidizarea sub forma cea mai primitiva se efectueaza intre o celula mama si un mugure; este cazul drojdiilor #ch>anniom$ces , 4orulaspora , Debar$om$ces , @ingea si an umite specii de 9ichia si 6ansenula. Bormarea diploizilor se poate realiza si intre doua celule independente , prin fuziune directa (#chizosaccharom$ces) sau prin intermediul unui tub de fecundare (A$gosaccharom$ces , Debar$om$ces , @ingea , 4orulaspora). .n cazul drojdiilor stabilizate in diplofaza , o singura celula sufera reducere cromatica pentru formarea unui asc . )elula diploida este refacuta prin fecundarea ascosporilor din asc sau prin fuziunea nucleelor rezultate in timpul primei mitoze in sporul aflat in faza de germinare . %cesta este un proces de autoploidizare. Baza haploida este redusa la stadiu de ascospor. .n anumite cazuri , daca zigotul din ciclul haplobiontic se reproduce prin mitoza , sau daca procesul de diploidizare a ascosporilor in ciclul diplobiontic este intarziat , fazele vegetative haploide si diploide e&ista in acelasi ciclu. .n cazul drojdiilor heterotalice , diplofaza este in mod normal un heterozigot pentru genul se&uat si celulele individuale sunt bise&uate. Daca diplofaza este stabilizata , ascul nu este fecundat si se formeaza ascospori de se& opus , unise&uati . %scosporii de se& opus se pot conjuga direct in asc (#accharom$codes) sau pot germina stabilind fazele vegetative haploide . Diplofaza nu poate fi in mod normal stabilita numai prin conjugarea celulelor haploide de genuri opuse . )u toate acestea , celulele haploide de acelasi gen , formeaza cate un asc ca urmare a unei mutatii suferite de celulele se&uate . 9entru identificarea unei drojdii , oricare arfi procesul de formare , este necesar sa se puna in evidenta ascii si ascosporii , daca aceasta este capabila de reproducere se&uata. #porularea drojdiilor se poate pune in evidenta utilizand medii de cultura pentru sporulare , dintre care amintim : mediu nutritiv cu acetat (+c );%/E) pentru drojdiile din genul #accharom$ces ; mediul nutritiv C5 agar pentru drojdiile din genul +etschni=o>ia ; mediul nutritiv malt agar (* -) pentru drojdiile din genul 9ichia si 6ansenula. .n cazul drojdiilor ascosporogene se tine cont de forma ascului , usurinta de rupere , numarul si forma ascosporilor . Caracteristici biochimice si fi"iologice )aracteristicile morfologice si se&uale permit in general identificarea genului , iar caracteristicile biochimice permit stabilirea speciei drojdiei respective . "ste vorba despre utilizarea carbohidratilor , a compusilor cu azot , citeza de crestere la 20 o ) , viteza de crestere in medii fara vitamine si rezistenta la cviclohe&imida. Fermentarea "aharurilor #olutia de baza utilizata pentru fermentarea zaharurilor este mediul care contine e&tract de drojdie * - in apa , eprubetele in care se desfasoara fermentarea fiind prevazute cu tub Durham. .nainte de insamantare in eprubete se adauga solutiile de zaharuri , sterilizate ce urmeaza a se testa . )oncentratia finala a zaharurilor ,trebuie sa fie de , - pentru toate zaharurile mai putin rafinoza, la care trebuie sa fie de 3 -. )ulturile se termostateaza la ,*,5 o ) timp de 35 ore 2 saptamani . Un zahar este fermentat cand se constata prezenta de gaz in tubul Durham. Asimilarea compusilor cu carbon 9entru testele de asimilare , intro prima etapa sunt utilizati urmatorii compusi : he&oze : glucoza , galactoza ,sorboza , metil D glucozida ,arbutina ; pentoze : D &iloza , ; arabinoza , D si ; riboza , ; ramnoza ; dizaharide : zaharoza , lactoza , maltoza , melibioza , trehaloza , celobioza ; trizaharide : rafinoza , melezitoza ; polizaharide : amidon , inulina ; alcooli : metanol , etanol , glicerol , ribitol , galactitol , eritritol , manitol , sorbitol , inozitol ; acizi organici : a&cid lactic , acid succinic , acid citric , acid piruvic , acid malic , acid glucuronic , , cetoglucoric ; decan , he&adecan . +etoda pentru zaharurile simple este metoda au&onografica , care consta in efectuarea de teste in cutii 9etri , folosind mediul de cultura Eeast ?itrogen 8ase (Difco) cu , - agar. Asimilarea compusilor cu a"ot .n general se folosesc , surse de azot : azotatul de potasiu ; clorhidratul de etil amina . %cest test este practic asemanator cu metoda au&onografica , care foloseste mediul de cultura Eeast )arbon 8ase . Teste combinate .dentificarea drojdiilor necesita un numar mare de teste , ceea ce impune un timp indelungat de lucru . 9entru identificarea rapida a drojdiilor se pot folosi testele biochimice de identificare , care cuprind , grupe : o grupa care cuprinde 5 teste de fermentare a zaharurilor , 1o teste de asimilare a zaharurilor si un test de punere in evidenta a rezistentei la ciclohe&amida (actidiona); cea de a doua grupa cuprinde numai teste de asimilare . +etoda permite reducerea duratei de lucru in comparatie cu metoda clasica si scaderea riscului de contaminare cu mucegaiuri. #dentificarea )u ajutorul testelor mentionate se pun in evidenta : caracteristicile de cultura ; caracteristicile morfologice ale celulelor vegetative ; caracteristicile se&uale . )riteriile de identificare nu au toate aceeasi importanta , dar este necesar sa fie utilizate intro anumita ordine . %stfel caracteristicile morfologice si se&uale permit stabilirea genului drojdiei . %poi caracteristicile biochimice permit determinarea speciilor din fiecare gen. )omparatii intre flu&urile glicolitice la ). 4/D9.)%;.# si #.)"/"C.#.%" .ndicatorul Blu& glicolitic e&primat in mmol de glucoza mn 1 g l ),4ropicalis #.)erevisiae Citeza de fermentare in anaerobioza, 1*' ,'' 17o Citeza de fermentare in aerobioza, * 13' Citeza de respiratie, 3, 0 Blu& glicolitic total, 30 130 9rocentul de inhibare a fermentatiei, 10 1, 9rocentul de inhibare a flu&ului glicolitic de o&igen, 02 1 )ompozitia in substante minerale a unei bionase de #accharom$ces cerevisiae 9otasiu Bosfor #ulf +agneziu ?atriu )alciu 8ariu Ainc Bier )upru +angan )obalt ?ichel %rsenic 9lumb .od +olibden 8or %luminiu )rom ,,, 1,7 2'' & 1' 2 ,0' & 1' 2 7' & 1' 2 *' & 1' 2 1* & 1' 2 1, & 1' 2 1' & 1' 2 * & 1' 2 2 & 1' 2 ',* & 1' 2 ,*' & 1' 7 15' & 1' 7 1*' & 1' 7 1,* & 1' 7 0 & 1' 7 * & 1' 7 1 & 1' 7 1' & 1' ,7 Canadiu * & 1' ,7 Fi"iologia cresterii )resterea unui microorganismpoate fi considerata ca o serie de interactiuni intre celule si "nvironnement , mediul nutritiv asigurand elementele necesare cresterii. .n plus , pe langa aportul de elemente nutritive , mediul de cultura creaza in jurulcelulelor un "nvironnement mai mult sau mai putin favorabil in functie de umiditatea sa , de temperatura , de p6 sau de prezenta substantelor antimicrobiene. $ecesitatile nutritie +ediul de cultura trebuie sa asigure toate elementele necesare sintezei celulare si nevoilor energetice ale drojdiei. Un mediu nutritiv ( de cultura ) optim trebuie sa contina )6 1,0, . D ',33 . ? ',1* , la care se adauga 1' - substante minerale . Carbonul )arbonul este componentul principal al celulei de drojdie reprezentand circa *' - din substanta uscata. )ompusii cu arbon sunt utilizati in acelasi timp ca sursa de energie si ca sursa de carbon. )apacitatea de utilizare a anumitor compusi cu carbon variaza : anumite drojdii pot utiliza o gama larga de compusi , dar altele numai un numar limitat. 9rintre sursele de carbon , glucidele sunt utilizate cel mai frecvent. !lucidele simple asa cum sunt he&ozele , dizaharidele si trizaharidele sunt metabiolizate de un numar mare de drojdii. #accharom$ces cerevisiae este incapabila sa utilizeze pentozele , dar anumite specii de )andida , +etschni=o>ia , 9ach$solen si 9ichia pot transforma D &$loza in metanol. 9atru specii de #ch>anniom$ces fermenteaza amidonul producand alcoo, dar in medii cu concentratie redusa. Din pacate amidonul nu este utilizat (transformat) in totalitate. #accharom$ces diastaticus (in prezent considerata o varietate de #.cerevisiae) contine o amiloglucozidaza capabila sa hidrolizele in totalitate de&trinele. ?ici o drojdie nu este capabila sa o&ideze metanolul , dar mai multe specii sunt in stare sa asimileze metanolul si sunt cultivate ca sursa de proteine. 9rincipalele genuri capabile sa asimileze metanolul sunt )andida , 6ansenula , 9ichia si 4orulopsis. )omponentii cu carbon asimilati de #. cerevisiae sunt prezentati in tabelul nr. : 4abelul nr. Dglucoza Dgalactoza +anoza Bructoza Aaharoza +altoza +elibioza +erlizitoza 4rehaloza /afinoza +altotrioza Deo&iriboza Dmanitol "tanol Dglucitol %cid lactic A"otul Din punct de vedere cantitativ, azotul este al doilea component pe care il aduce mediul de cultura. "l este utilizat de celula de drojdie in sinteza aminoacizilor , a nucleotidelor si a anumitor vitamine . 4oate drojdiile sunt capabile sa asimileze azotul sub forma de ion de amoniu . .n mediul de cultura , ionii de amoniu pot proveni din clorura de amoniu , azotatul de amoniu , fosfatul si in special sulfatul de amoniu care asigura in acelasi timp sulful necesar sintezei anumitor aminoacizi (cistina , cisteina si metionina) . %numite drojdii (6ansenula , 9ach$solen , )iterom$ces si anumite specii de )andida si 4richosporon ). )ea mai mare parte a aminoacizilor poate fi utiulizata ca sursa de azot .n tabelul nr. 7 sunt prezentati aminoacizii asimilati de catre celulele de drojdie in functie de viteza de crestere pe care o asigura. Clasamentul mediu al surselor de a"ot in functie de ite"a de crestere a celulelor de drojdie 4abelul nr. Un amestec de aminoacizi permite o mai mare viteza de crestere a celulelor de drojdie comparativ cu un singur aminoacid . .n acest sens ,cele mai bune surse de azot sunt hidrolizatul de caseina si mustul de malt . Dipeptidele si tripeptidele pot fi deasemeni utilizate ca surse de azot Utilizarea polipeptidelor este limitata de marimea moleculelor de azot . Utilizarea polipeptidelor este limitata de marimea moleculelor . .n sfarsit , ca sursa de azot se poate utiliza ureea in amestec cu biotina si cu unele baze purinice si pirinidinice . Daca mai multe surse de azot sunt disponibile simultan , acestea nu vor fi asimilate cu aceeasi viteza , iar drojdia va asimila preferential sursa cea mai buna , definita prin trei criterii : penetratie rapida ; conversie rapida in celula de drojdie in amoniac si acid glutamic ; lipsa efectelor secundare to&ice. Fosforul Bosforul se afla inclus in acizii nucleici , in nucleozide si trifosfati . Bosforul , subforma de polimeri lineari ai polifosfatilor , joaca un rol important in reglarea metabolismului celular. Bosforul este asimilat de celula sub forma de ioni de ortofosfat (6 , 9D 3 ) . #ursa principala de fosfor este fosfatul acid de potasiu (< 6 , 9D 3 ) sau fosfatul acid de sodiu (?a 6 , 9D 3 ) ..n cazul in care in mediul de cultura se afla o cantitate limitata de fosfor , celula sintetizeaza un fosfat acid , localizat in peretii celulari , care elibereaza fosforul din esterii fosforici . Sulful 7' - din sulf este incorporat in proteine , iar * - este sub forma de sulfat anorganic liber . #ursa de sulf cea mai frecventa este sulfatul de amoniu . Drojdiile din genul #accharom$ces sunt capabile sa asimileze sulful si tiosulfatul. +etionina poate fi considerata ca o sursa de sulf si permite o crestere mairapida a celulelor de drojdie comparativ cu ionii sulfati. %otasiul 9otasiul este elementul minimal cantitativ cel mai important pentru drojdie , cu rol fiziologic insemnat si anume : cation regulator : pentru fiecare penetrare a unui cation metalic divalent, se inregistreaza o eliminare de , < F ; la p6 acid , potasiul stimuleaza fermentarea si respiratia; este stimulator pentru diferite enzime : piruvat =inaza ,aldolaza , aldehid dehidrogenaza , permeaza ; intervine in structura %?D . #ursele de potasiu cele mai raspandite sunt clorura de potasiu , fosfatul mono si di potasic (< 6, 9D 3 si < , 6 9D 3 ) . .n timpul procesului de fermentare (anaerobioza) drojdia consuma de doua ori mai mult potasiu decat in aerobioza. Magne"iul +agneziul esdte necesar functionarii unei anumite enzime din ciclul metabolic si are rol de : activator al enzimelor glicolitice; stimulator al sintezei acizilor grasi; participa alaturi de potasiu la patrunderea fosforului in celula; regleaza continutul de adenin trifosfataze din membrana celulare. +agneziul este in egala masura implicat in structura ribozomilor , a membranelor celulare si a acizilor nucleici. )arenta de magneziu in timpul procesului de fermentare conduce la producerea de acid citric . .n mediul de cultura magneziul se afla sub forma de sulfat sau clorura de magneziu . Calciu )alciu nu este indispensabil cresterii , dar stimuleaza activitatea drojdiilor #accharom$ces . %cesta este utilizar in timpul fazei de crestere a celulei si este incorporat in peretii si membranele citoplasmice . Goaca rol in flocularea drojdiei. &incul Aincul joaca rol esential in metabolism : este cofactorul unei enzime asa cum este aldolaza si este indispensabil glicolizei; este necesar in sinteza vitaminelor asa cum este riboflavina ; stimuleaza penetrarea maltozei si maltotriozei ; stimuleaza actiunea magneziului . Manganul %ditia de mangan permite cresterea continutului de azot , sinteza proteinelor si randamentul celular. Alti ioni Bierul nu are influenta asupra randamentului celular dar este activator al unor enzime. 8ariu , in concentratie mica , stimuleaza cresterea celulelor de drojdie. )lorul este util in procesul de crestere al celulelor de drojdie , dar rolul sau nu este inca precis cunoscut. #odiul este necesar in doze foarte reduse (mai precis sub forma de urme). Unii ioni ca aluminiu , plumbul , arsenicul , cromul si vanadiu sunt inhibitori ai drojdiei. %lti ioni , asa cum sunt cuprul , nichelul si iodul , se pot adauga in mediul de cultura sub forma de urme.