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NDICE
TEMA PGINA
RESUMEN DE LA TECNlCA EMPLEADA 2
PRlNClPOS TERlCOS 3
PROCEDlMlENTO EMPLEADO 7
CALCULOS DETALLADOS. TABLA DE RESULTADOS 9
GRAFlCO DE LOS EXPERlEMNTOS l2
DlSCUSlN DE RESULTADOS l3
CONCLUSlONES Y RECOMENDAClONES l4
BlBLlOGRAFlA l5
RESUMEN DE LA TCNICA EMPLEADA
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Para la experiencia, empleamos como muestra a analizar lenteja, a la cual calcinamos
para luego acondicionarla, para ello utilizamos cido ntrico concentrado, una plancha de
calentamiento y HCl concentrado, lo llevamos a distintas diluciones para finalmente
llevarlo al anlisis a una concentracin de 8690ppm.
Para obtener una curva de calibracin y emplearla, para determinar la concentracin de
hierro en la muestra con la absorbancia que leeremos con el espectrofotmetro de
absorcin atmica. Necesitamos elaborar muestras estndares a partir de una solucin
estndar de fe a l000ppm, las soluciones estndares cuyas concentraciones fueron de
0.5, l y 2 ppm las llevamos al espectrofotmetro de absorcin atmica y determinamos
su absorbancia, con estos datos obtenemos la curva de calibracin y empleando
mnimos cuadrados, hallamos la ecuacin que nos servir para hallar la concentracin
de Fe de la muestra y su respectivo % de hierro.
Para el empleo del espectrofotmetro se utiliz una lmpara de catado hueco
multifuncional, y gases Acetileno/aire para la atomizacin.
PRINCIPIOS TEORICOS
ESPECTROSCOPIA
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Espectroscopia es la medicin e interpretacin de la radiacin electromagntica
absorbida, dispersada o emitida por tomos, molculas u otras especies qumicas. Estos
fenmenos estn asociados con cambios en los estados de energa de las diferentes
especies. Por consiguiente, dado que cada especie posee estados
energticos caractersticos, la espectroscopia puede utilizarse para identificarlas y
cuantificarlas.
La espectroscopia constituye la base del anlisis espectro qumico, en el que la
interaccin de la radiacin electromagntica con la materia se utiliza para obtener
informacin cualitativa y cuantitativa acerca de la composicin de una muestra. Dentro
del anlisis espectro qumico, la espectroscopia atmica estudia la absorcin y emisin
de la radiacin por especies atmicas, inicas y moleculares libres. Estas especies son
generadas y examinadas en un medio gaseoso de alta energa, que constituye una
fuente de vaporizacin-atomizacin-ionizacin-excitacin.
TCNICAS DE ESPECTROSCOPIA ATMICA CON LLAMA
Cuando una solucin es introducida por aspiracin en una llama, la mayor parte de los
componentes inorgnicos son vaporizados y convertidos en su forma elemental, y los
tomos son excitados trmicamente por la energa generada mediante reacciones
qumicas.
En un tomo en su estado de menor energa (estado fundamental), uno de los
electrones de valencia correspondiente a un orbital externo es transferido a un estado
electrnico de mayor energa. Al retornar al estado fundamental o a uno de menor
energa, los tomos pierden su energa de excitacin en forma de calor o como
radiacin electromagntica de longitud de onda caracterstica.
La absorcin de energa trmica generada en una llama seguida por la emisin de toda o
parte de esa energa en forma de una lnea espectral discreta se denomina emisin
atmica. La longitud de onda y la intensidad de las lneas de emisin constituyen la base
del anlisis cualitativo y cuantitativo por espectrometra de emisin atmica.
Los tomos neutros gaseosos en su estado fundamental pueden tambin absorber
radiacin a longitudes de onda especfica, correspondiente a las energas de las
transiciones electrnicas en sus orbitales externos. Este fenmeno se denomina
absorcin atmica. La medicin de la magnitud de esa absorcin atmica y su aplicacin
al anlisis cuantitativo constituyen la espectrometra de absorcin atmica.
ATOMIZACIN CON LLAMA
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La disolucin de la muestra es nebulizada mediante un flujo de gas oxidante, mezclado
con el gas combustible, y se transporta en una llama donde se produce la atomizacin,
una seria compleja de procesos encadenados tiene lugar en la llama. El primero es la
desolvatacin, en el que se evapora el disolvente hasta producir un aerosol molecular
solido finamente dividido. Luego la disociacin de la mayora de estas molculas
produce un gas atmico. La mayora de los tomos formados se ionizan formando
cationes y electrones. lndudable mente tambin se producen otras molculas y tomos
en la llama como resultado de las interacciones del gas combustible con el gas oxidante
y con las distintas especies de la muestra. Como se indica en la figura, una fraccin
de las molculas, tomos e iones tambin se excita por calor de la llama, producindose
a si espectros de emisin moleculares, atmicos e inicos, producindose tantos
procesos complejos, no es sorprendente que la atomizacin es la etapa ms crtica en al
espectroscopia de llama y la que limita la precisin de dichos mtodos.
Figura N 1 procesos que tienen lugar durante la atomizacin
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ESTRUCTURA DE LA LLAMA
Las regiones ms importantes de la llama son la zona de combustin primaria, la regin
interconal y la zona de combustin secundaria. El aspecto y el tamao relativo de estas
regiones, vara considerablemente con la regin combustible-oxidante, as como el tipo
de combustible y oxidante. La zona de combustin primaria en una llama de
hidrocarburos se reconoce por el color azul que proviene de los espectros de bandas C2
y CH y otros radicales. En general en esta zona no se alcanza el equilibrio trmico, y por
ello, esta zona rara vez utiliza en la espectroscopia de llama.
La regin interconal, es relativamente estrecha en llamas de hidrocarburo
estequiometrias, puede alcanzar varios centmetros de altura con fuentes ricas en
combustibles de acetileno/oxigeno o acetileno/xido nitroso. La zona es frecuentemente
rica en tomos libres y es la parte de la llama ms utilizada ampliamente es
espectroscopia. En la zona de combustin secundaria, los productos formados en la
regin interior se convierten en xidos moleculares estables que se dispersan por los
alrededores.
Figura N ! regiones en una llama
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LMPARA DE MULTIELEMENTO
Estas fuentes de radiacin poseen n un ctodo hueco, que contiene ms de dos
elementos que emiten todas las lneas de cada analito presente el ctodo. Este tipo de
dispositivo presenta varias desventajas:
a) Al ser el espectro ms complejo se pueden presentar interferencias espectrales.
b) El tipo y la presin del gas de relleno, as como la forma y el tamao del catado,
deben ser atomizados para cada elemento individualmente. Con este diseo no
se puede lograr el ajuste satisfactorio de todos y cada uno de los elementos.
c) Al tener que someter a los varios elementos a una sola intensidad de corriente
elctrica, se llega a una situacin de compromiso. escogemos el desgaste
acelerado que normalmente se trabajan con menor amperaje, o sacrificamos la
intensidad luminosa de los elementos poco sensibles? En el primer caso, se
acorta el tiempo de vida de la lmpara para esos elementos. En el segundo no se
podra cuantificar los analitos poco sensibles que estn presentes en
concentraciones pequeas.
Figura N ", esquema de una lmpara hueca
Figura N # Esquema de espectrofotmetro de absorcin atmica
PROCEDIMIENTO EMPLEADO
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A. PREPARAClON DE LA MUESTRA
Pesar 0.l g de muestra (lenteja molida) en una capsula de porcelana.
Calcinar en una mufla a 750C durante una hora.
Agregar a la ceniza en frio, 2 gotas de cido ntrico concentrado.
Colocar en una plancha de calentamiento y llevar a sequedad, cuidando de no
perder muestra.
Aadir l0 ml de agua destilada y 2 gotas de HCl.
Calentar 5 minutos en un plancha de calentamiento.
Enfriar, filtra si hubiera residuo, colocar en una fiola de 50ml, hacer los enjuagues
respectivos y enrasar con agua destilada.
Transferir 20ml de la muestra a una fiola de 50ml y enrasar.
Realizar el mismo procedimiento para el blanco.
Proceder a la lectura de la muestra en el espectrofotmetro de absorcin
atmica.
B. PREPARAClON DE LOS ESTANDARES
Tomar lml del estndar de l000ppm de Fe y llevar a volumen de fiola de l00ml
con agua destilada. (patrn a l0ppm).
Tomar el patrn A 5ml y llevar a fiola de l00ml. Enrasar con agua destilada.
Tomar el patrn A 5ml y llevar a fiola de 50ml. Enrasar con agua destilada.
Tomar el patrn A l0ml y llevar a fiola de 50ml. Enrasar con agua destilada.
C. PROCEDlMlENTO PARA PARA LA OPERAClN DEL
ESPECTROFOTOMETRO DE ABSORClON ATOMlCA ANALYST 200 PERKlN
ELMER
Encender la compresora de aire y luego abrir la llave del baln de acetileno.
Luego encender el extractor de gases.
Encender el estabilizador de corriente, colocar la lmpara de Fe y luego encender
el espectrofotmetro. Esperar unos minutos hasta escuchar la seal de
conformidad, en caso de no escuchar la seal, apagar el quipo y volver
encenderlo.
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Encender el monitor y la computadora. Hacer clic en AA-WlNLAB32, esperar que
complete la verificacin.
Hacer clic en WORK SPACE, luego ir al MANUAL, ah hacer clic despus en
METHOD y seleccionar el mtodo.
Para la creacin de un mtodo de un elemento, seleccionar el icono METHOD y
seleccionar NEW METHOD. Escoger el elemento de inters y hacer clic en OK y
colocar nuevos parmetros.
Presionar en el icono LAMP y en la pantalla que aparece hacer clic en ON para
encender la lmpara esperar unos segundos, luego hacer clic en SET
MlDDLESCALE.
En la pantalla PANEL FLAME CONTROL hacer clic en Switch para encender la
flama. Colocar en el capilar agua ultra pura. Abrir en la barra de herramientas el
icono CONTlNNUOUS GRAPHlCS y esperar unos minutos para que aparezca la
seal de la lmpara, luego de algunos minutos presionar AUTOZERO GRAPH.
Colocar el capilar en el blanco y en la pantalla SAMPLE PROGRESS presionar
Analyze BLank y leer, luego en analize standar y finalmente en analize sample.
D. LECTURAS DE LA MUESTRA
Leer el blanco
leer los estndares 0.5, l y 2ppm
leer la muestra A Y B
limpiar el equipo con agua ultra pura
E. PROCEDlMlENTO PARA APAGAR EL ESPECTROFOTOMETRO DE
ABSORClON ATOMlCA ANALYST 200, PERKlN ELMER
Apagar la lmpara y luego de l5 minutos (para apagar el sistema) apagar la
flama, luego salir del software, aparece un mensaje SHUTDOWN apagar la PC y
finalmente el equipo.
Apagar el estabilizador y dejar por l5 minutos encendido el extractor para
eliminar gases.
F. HALLAR LA CONCENTRAClON DE HlERRO EN LA MUESTRA.
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CALCULOS DETALLADOS$ TA%LA DE RESULTADOS
TA%LA N 1 formulas empleadas para la ecuacin de la curva de calibracin
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Ta&'a N 1 resultados experimentales, absorbancias de las muestras.
&'a()* +,a1 +,a! +,a"
1 0.ll6 0.026 0.052 0.l60
! 0.ll5 0.026 0.053 0.l59
" 0.ll5 0.026 0.053 0.l59
-r*./0i* 1$112 1$1!3 1$12" 1$124
TA%LA N ! datos empleados en la curva de calibracin
ID A0+*r)i5( )*()/(,ra)i5(
%'a()* 0.00 0.00
+,a1 0.0257 0.5
+,a! 0.0527 l.0
+,a" 0.l594 3.0
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Gr6fi)* N 1, curva de calibracin de las muestras estndar.
Ta&'a N " resultados obtenidos de la muestra
Mu/+,ra A0+*r)i5( C*()/(,ra)i5(
1 0.060 l.l52
! 0.060 l.5l6
" 0.060 l.l5l
Pr*./0i* 1$131 1$121
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Ta&'a N # ecuacin de la curva de calibracin y concentracin de la muestra
E)ua)i5( 0/ 'a )ur7a C*()/(,ra)i5( 0/ 'a .u/+,ra 8--.9
:;1$12"!#<=>1$111#2#! 1$1"2"
Ta&'a N 2, porcentaje de hierro terico, experimental y % de error
? ,/5ri)* ? /=-/ri./(,a' ? 0/ /rr*r
1$1"2" l.l5l l.4
DISCUSIN DE RESULTADOS O%TENIDOS
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Para poder aplicar la ecuacin de la curva de calibracin hallada por mnimos
cuadros, los datos ya sea de absorbancia para determinar concentracin o
concentracin para determinar absorbancia, deben encontrarse dentro de la
curva, ya que no es adecuado aplicar esta ecuacin si los datos no se
encuentran dentro de ella. Si utilizramos estndares cuyas concentraciones nos
ayuden a formar una curva de calibracin en la cual nuestros datos puedan
encontrarse dentro de ella, verificaremos que la pendiente y el intercepto con las
ordenadas varia, esta la razn por la cual no podemos suponer que la curva se
mantendr constante para datos que se encuentren por encima o debajo de ella,
si aplicamos esos datos fuera de la curva, nos llevaran a un error en los clculos.
Para determinar el porcentaje de Fe en la muestra es necesario conocer la
concentracin final que tena la muestra de lenteja antes de ser analizada, para
poder compararla con la concentracin que obtendremos al aplicar la ecuacin
de la curva de calibracin y que estas se encuentren en las mismas unidades.
El porcentaje de error que encontramos en el resultado de la concentracin
obtenida a partir de la curva de calibracin con el dato terico, se debe a factores
como errores en las diluciones de los estndares, en las muestras, tambin el
deterioro de la lmpara de ctodo hueco, perdida de muestra al ser llevada a la
plancha de calentamiento.
El espectrofotmetro de absorcin atmica necesita de gases combustible y
oxidante, para poder llevar la muestra al proceso de atomizacin en llama, estos
gases fueron aire (oxidante) y acetileno (combustible), que tienen inrvalos de
temperatura de 2l00 a 2400 grados Celsius y velocidad e combustin mxima de
l58 a 266 cm s
-l
.
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CONCLUSIONES : RECOMENDACIONES
La ecuacin de la curva de calibracin, nos proporcion resultados confiables.
El porcentaje de hierro se determin con la concentracin final de la muestra y la
concentracin que nos dio la ecuacin de la curva en las mismas unidades.
El % de error fue por mala dilucin de las muestras, mala dilucin de los
estndares, perdida de muestra en la plancha de calentamiento y el deterioro de
la lmpara de ctodo hueco.
Los reactivos empleados para la oxidacin de la muestra y la dilucin del hierro
fueron cido ntrico concentrado y Hcl concentrado respectivamente.
Los gases empleados para la atomizacin en llama de la muestra fueron
acetileno como combustible y aire como oxidante.
Se debe tener cuidado al momento de preparar las muestras y los estndares,
porque podran llevarnos a un error en los clculos.
Utilizar guantes y mascarillas para el empleo de los cidos concentrados.
Evitar la prdida de muestra al ser esta calentada en la plancha.
%I%LIOGRAFA
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Alva, H. 2009. ESPECTROSCOPlA DE ABSORClON ATOMlCA. Revisado el l6
de mayo del 20l3. Disponible en: http://absorcion-
atomica.blogspot.com/2009/07/componentes-de-un-espestrometro-de.html
Anlisis instrumental. ESPECTROSCOPlA DE EMlSlON Y ABSORClON
ATOMlCA. Revisado el l5 de mayo del 20l3. Disponible en:
http://www.qi.fcen.uba.ar/materias/ai/laboratorio/absorcion_emision.pdf
Ruiz, M. 20l2. EL SABER DE LA NUTRlClON. Revisado el l6 de mayo del 20l3.
disponible en: http://elsaberdelanutricion.wordpress.com/
Villegas C, W A. Anlisis Ultravioleta- visible. Lmparas multielemento. Revisado
el l5 de mayo del 20l3. Disponible en: http://books.google.com.pe/books?
id=dOuvlq3ZtXAC&pg=RA4-PAl2&lpg=RA4-
PAl2&dq=lampara+de+catodo+hueco+multielemento&source=bl&ots=iruaq88dD
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oNBXNA9EDGo2OhY2MyGtWg38&hl=es&sa=X&ei=evOWUceHM4ng0QGpvoH
YDQ&ved=0CDwQ6AEwBA#v=onepage&q&f=false
Skooog, D A; Holler, J. ; Crouch, S R. 2008. PRlNClPlOS DE ANALlSlS
lNSTRUMENTAL: Captulo 9, ESPECTROSCOPlA DE ABSORClON ATOMlCA
Y DE FLUORESCENClA ATOMlCA. SEXTA EDlClON. Pginas 230 -23l.

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