Procesamiento de subproductos de la pesca

Extraccin de Quitosano del exoesqueleto de crustceos

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UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA





Facultad de Pesquera
Departamento Acadmico de Acuicultura e Industrias Pesqueras

CURSO : Procesamiento de Sub-productos de la Pesca
INFORME : Extraccin de Quitosano del exoesqueleto de
crustceos
PROFESOR : Cesar Meja Soria
MESA : 4
INTEGRANTES : Bulln Zamora, Yoana Cintia
Cardenas Barzola, Joanne
Correa Silva, Anthony
Fabin Llantoy, Gianella
Mamani Hilasaca, Joyce
FECHA DE ENTREGA: 03 de Junio del 2014

2014-I


Procesamiento de subproductos de la pesca
Extraccin de Quitosano del exoesqueleto de crustceos
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I. INTRODUCCIN
La quitina es el polmero natural ms abundante despus de la celulosa. Fue descubierta en 1811
por Bracconot, al aislar un material nitrogenado en sus estudios sobre la qumica de los hongos.
Rouget descubri en 1859 que el tratamiento de la quitina con una solucin concentrada de
hidrxido potsico a ebullicin la modificaba transformndola en un compuesto soluble en
soluciones de cidos diluidos, ms tarde designado como quitosano por Hoppe-Seiler. (Gasen,
1996)
Las industrias procesadoras de mariscos presentan dentro de sus principales problemas la
disposicin final de los desechos generados a partir de las conchas y caparazones de los diversos
tipos de crustceos (Acevedo, 2011).
A manera de solucin, la utilizacin de los exoesqueletos de cangrejo, langosta y camarn ha sido
planteada como fuente de materia prima para la obtencin de quitina y quitosano y como una
oportunidad concreta para mejorar las condiciones socioeconmicas y ambientales de estas
zonas. La obtencin de quitina y quitosano significara la solucin de un problema
medioambiental, reconversin de un residuo en un producto innovador con alto valor agregado,
un emprendimiento industrial con creacin de fuentes de trabajo y potenciales perspectivas para
la instalacin de otras industrias derivadas en base a sus distintas aplicaciones (Acevedo y Caprile
2011).
En el presente trabajo se realizara la extraccin del quitosano a partir del exoesqueleto de
cangrejo ensayando una metodologa para su obtencin.

II. REVISIN BIBLIOGRFICA

QUITOSANO

En lo que al quitosano se refiere, se sabe que es el derivado ms importante de la quitina, est
formado por molculas de N-acetil-glucosamina-co--glucosamina y puede ser obtenido
mediante un proceso qumico sencillo de des acetilacin eliminando al menos un 50% de los
grupos acetilo presentes en la quitina. Bajo este trmino se agrupa una familia de copolmeros
con diferencias en el nmero de unidades desacetiladas y en el peso molecular, debido a la
dificultad de controlar la distribucin de los grupos acetilo a lo largo de la cadena polimrica que
hace difcil conseguir reproducibles polmeros iniciales. El quitosano posee un comportamiento
marcadamente bsico debido al grupo amino libre en su estructura, lo cual adems le
proporciona ciertas caractersticas qumico-fsicas de gran inters industrial. (Acevedo, 2011).
A diferencia de la quitina, el quitosano es soluble en agua en un medio cido. La ventaja del
quitosano frente a otros polisacridos (celulosa, almidn galactomananos, etc.) es que su
estructura qumica permite modificaciones especficas sin demasiadas dificultades. Cabe destacar
que grupos especficos pueden ser introducidos en el diseo de polmeros para determinadas
aplicaciones, puesto que es un material fungicida, antiviral, biocompatible, biodegradable,
antimicrobiano, no txico, emulsionante, absorbente de grasas, absorbente de metales
contaminantes, filmognico, etc. (Acevedo, 2011).

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Figura no. ESTRUCTURA DEL QUITOSANO

FUENTES DE QUITINA Y QUITOSANO
La fuente industrial principal de quitina, actualmente es el exoesqueleto (caparazn) de muchos
crustceos (cangrejos, langostas, camarones y langostinos) debido a la facilidad de encontrar
estos materiales como desecho de las plantas procesadoras de estas especies (Tabla 1). En el
caso del camarn y el cangrejo, la quitina representa el 14-27% y 13-15%, respectivamente. En
cutculas de crustceos, la quitina est ntimamente asociada con las protenas, sales inorgnicas
tales como el carbonato de calcio y lpidos incluyendo los pigmentos, as el aislamiento abarca
varias etapas de purificacin. (Acevedo, 2011).
Las cscaras de almeja y ostra contienen cantidades significativas de quitina. Sin embargo, las
producciones del polmero son bajas y el contenido mineral es muy alto en ambos. Contienen
quitina al 6 y 4% y cenizas al 90 y 85%, respectivamente. La pluma del calamar es en hecho la
nica fuente importante de p-quitina polimorfa, puesto que los crustceos contienen
exclusivamente -quitina. (Acevedo, 2011).
Por su parte, el quitosano se puede encontrar en forma natural en las paredes celulares de
algunas plantas y hongos, por ejemplo en el Mucor rouxi y Choanephora cucurbitarum con 30 y
28% de quitosano, respectivamente.
Tambin, dos diatomeas marinas, Cyclotella cryptica y Thalassiosira fluviatilis han demostrado ser
una fuente de quitosano puro que no se asocia a las protenas. Las propiedades de la quitina y el
quitosano dependen principalmente de la fuente de obtencin y el mtodo de preparacin. Estos
polmeros difieren entre s por su distribucin, masa molecular y grado de acetilacin. Adems se
ha reportado que el quitosano controla el crecimiento de bacterias, hongos y levaduras y ha sido
aplicado para suprimir estos organismos en tejidos de plantas y alimentos. Se ha establecido que
el quitosano no puede ser digerido por los seres humanos as que est considerado como una
fibra diettica con un contenido calrico cero. (Acevedo, 2011).





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Tabla 1. Composicin qumica de algunas fuentes de materia prima para la obtencin de
quitina/quitosano.

OBTENCIN DEL QUITOSANO MEDIANTE EL MTODO QUMICO Y MTODO ENZIMTICO

La obtencin del quitosano se produce por desacetilacin de la quitina y se puede realizar
mediante procesos qumicos o enzimticos. Sin embargo, las condiciones especficas de la
reaccin dependern de diversos factores, tales como el material de partida, el tratamiento
previo, y el grado de des acetilacin deseado.

Mtodo Qumico: se puede llevar a cabo de dos formas, homogneo y heterogneo.
a) La des acetilacin homognea.
Mima y et al., citado por Garca y Roca (2008) explican que esta consiste en que la quitina es
suspendida en el lcali y la suspensin es refrigerada con hielo para disolver la quitina en la
solucin. Luego se somete a des acetilacin a temperaturas cercanas a la del ambiente durante
periodos largos de tiempo. Esto permite que la reaccin no se localice en determinados lugares de
la cadena y que el ataque a los grupos amidas sea ms uniforme.

b) La des acetilacin heterognea.
Consiste en que las molculas de quitina son dispersadas en una solucin alcalina caliente,
generalmente de hidrxido de sodio. Las condiciones en las que se lleva a cabo la des acetilacin
heterognea pueden reducir la longitud de la cadena, por este motivo es conveniente repetir
varias veces el tratamiento alcalino por cortos periodos de tiempo y aislando el producto en cada
etapa. Para disminuir la prdida de peso molecular del polmero es conveniente la ausencia de
oxigeno o la presencia de un antioxidante para evitar su despolimerizacin. Se ha demostrado que
mientras que el quitosano obtenido en el proceso heterogneo presenta poli dispersin del grado
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de acetilacin de sus cadenas, mientras que el obtenido por va homognea tienen la misma
composicin.

Mtodo Enzimtico:
Goycochea, citado por Garca y Roca (2008) nos habla que la ventaja de este mtodo respecto al
qumico es la obtencin de un material uniforme en sus propiedades fsicas y qumicas, hecho
muy apreciado para aplicaciones biomdicas.
La quitina desacetilasa es la enzima que cataliza la conversin de quitina a quitosano por la des
acetilacin de los residuos N-acetil-D-glucosamina. La limitacin de este mtodo es que la enzima
no es muy efectiva en la des acetilacin de quitina insoluble, y por lo tanto es necesario un pre
tratamiento.
En la actualidad, se exploran otros mtodos ms novedosos para desacetilar la quitina que hace
uso de la radiacin con microondas o de tratamientos termo-mecnicos, entre otros.

EXTRACCIN DE QUITINA A PARTIR DE CAPARAZONES DE CRUSTCEOS Y TRANSFORMACIN A
QUITOSANO

El trabajo realizado por Ayeln et al. (2012) para la obtencin de quitosano, muestra que el
proceso inicial se basa en la extraccin de minerales y luego, la protena aunque esta secuencia
puede invertirse en algunos casos. El procedimiento realizado para la obtencin de quitosano por
los autores mencionados, consiste en:

1. Aislamiento de la quitina
a) Preparacin de la materia prima: Se pesan y lavan con agua potable y se separaran las colas y
restos de pulpa de las cscaras y se separan de otros residuos orgnicos e impurezas que
contiene el exoesqueleto. Se secan y se trituran en morteros con el piln hasta obtener un
polvo rosado que se tamiza con un tamiz de 20 - 30 unidades mesh.

b) Desmineralizacin: El contenido mineral de los residuos de los crustceos oscila entre 30% y
55%, y est constituido, principalmente, por carbonato de calcio y en menor proporcin
(10%), por fosfato de calcio. La re-mocin del carbonato de calcio se realiza por tratamiento
acido. Para ello, se utiliz cido clorhdrico (HCl) a una concentracin de 1,3 N, a temperatura
ambiente (25C) durante una hora.
Al concluir la operacin se produce el lavado de la quitina con abundante agua destilada
hasta pH neutro. Se filtra con papel de filtro y se obtiene el slido seco para la prxima etapa.
c) Desproteinizacin: En el proceso qumico para separar la protena presente en el material
biolgico, los exoesqueletos de crustceos son tratados usualmente con soluciones de NaOH
0,8 N a 80C durante un periodo de 4 horas. Desproteinizacin NaOH 0.8 30 80 240

Al concluir la etapa se lava nuevamente la quitina con abundante agua destilada hasta pH
neutro, se filtra con papel de filtro y se obtiene el slido seco para la prxima etapa. A esta
etapa debera seguirle una decoloracin con agentes decolorantes del tipo del agua
oxigenada al 0,5 3 % pero como el pigmento es escaso y no afecta el producto final, en este
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caso este paso se omiti.

2. Obtencin del quitosano
La principal reaccin de des acetilacin de la quitina es la hidrlisis de los grupos acetamida
para generar el polmero desacetilado, quitosano aunque las amidas, en principio, pueden
hidrolizarse bajo condiciones acidas o alcalinas, se excluye el uso de hidrlisis acida debido
a la susceptibilidad a la misma de los enlaces glicosidicos de la quitina. Esta reaccin se
conduce bajo condiciones alcalinas muy severas, con hidrxido de sodio 13 N y una
temperatura de 100C durante 15 horas.
Una prueba rpida para saber si el producto obtenido es quitosano es ver la cantidad que
se solubiliza en ci-do actico al 5%, si solo queda retenido luego del filtrado del mismo una
proporcin menor al 20% estamos en presencia de un buen producto.

III. MATERIALES Y MTODOS

ETAPA I: PREPRACIN DE LA MUESTRA





Quitar toda la materia
organica
1. Prepracin de
MP
Estufa: 80C x2hs
2. Secado
3. Molido
0.8-1.5 mm
4. Tamizado
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ETAPA II: OBTENCION DE QUITINA










3,5 % de
NaOH
sol:liq - 1:10
90C x 2h
1.Inmersin en
NaOH
(arrastar lipidos y
pigementos)
2. Lavado y secado
HCl 2N
sol:liq - 1:5
T amb. x 90 min
3. Inmersin en HCl
(solubilizacion de
minerales)
80C x 30 min
4. Lavado y secado
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ETAPA III: OBTENCIN DE QUITOSANO












NaOH 50%
sol:liq - 1:10
90C x 1h (agitacion
constante)
1. Inmersin en NaOH
Agua destilada
2. Lavado
3. Filtrado
Estufa: 80C x 30
min.
4. Secado
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IV. RESULTADOS
V. DISCUSIONES
VI. CONCLUCIONES

VII. BIBLIOGRAFA

Acevedo M. 2011.Diseo de un proceso econmico y competitivo para la extraccin de quitina y
produccin de quitosano a partir de exoesqueleto de crustceos. Ttulo de Ingeniero Qumico.
CO. Universidad de Cartagena. Pg. 17-26.

Ayeln et al. 2012. Obtencin de Quitosano (en lnea).Santa Cruz, AR. Consultado 1 jun. 2014.
Disponible en http://www.produccion-animal.com.ar/produccion_peces/piscicultura/173-
Quitosano.pdf

Garca T; Roca J. 2008. Industrializacin de los crustceos para la obtencin de Quitosano en
ungento con efecto cicatrizante (en lnea).PE. Industrial Data, vol. 11, nm. 2. Consultado 1
jun. 2014. Disponible en http://www.redalyc.org/pdf/816/81619829004.pdf

Caprile, D. Obtencin y Utilizacin de Quitina y Quitosano a partir de desechos de crustceos (en
lnea). Buenos Aires, AR. Consultado 1 jun. 2014. Disponible en
http://www.ceiso.com.ar/documentos/caprilequitina.pdf