Reporte de prctica 1

PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO PARA

MICROBIOLOGIA
Procesos Biotecnolgicos
Ma. En A. Luz Carmen Castillo Martnez

QUI02SV-13

INTEGRANTES:

Bocanegra Hernndez Pablo Daniel.
Cano Cuevas Diana.
Hernndez Huerta Alexis Alain.
Santiago Pantoja Yetlanezi Atzimba.
Villarruel Garduo Miguel Ivan.
PRCTICA 1
PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO PARA MICROBIOLOGIA
OBJETIVO
El alumno aprender la preparacin de los diferentes medios de cultivo.
INTRODUCCIN
Medios de Cultivo.
Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de microorganismos es observar su
crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material
alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los
microorganismos es el Cultivo. Se han preparado ms de 10.000 medios de cultivo diferentes.
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una
serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presin de oxgeno adecuadas,
as como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los
nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo
contaminante.
La mayora de las bacterias patgenas requieren nutrientes complejos similares en composicin a
los lquidos orgnicos del cuerpo humano. Por eso, la base de muchos medios de cultivo es una
infusin de extractos de carne y Peptona a la que se aadirn otros ingredientes.
El agar es un elemento solidificarte muy empleado para la preparacin de medios de cultivo. Se
lica completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados.
Con mnimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por
aquellas que crecen en l.
La Gelatina es otro agente solidificarte pero se emplea mucho menos ya que bastantes bacterias
provocan su licuacin.
En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de enriquecimiento como
hidratos de carbono, suero, sangre completa, bilis, etc. Los hidratos de Carbono se adicionan por
dos motivos fundamentales: para incrementar el valor nutritivo del medio y para detectar
reacciones de fermentacin de los microorganismos que ayuden a identificarlos. El suero y la
sangre completa se aaden para promover el crecimiento de los microorganismos menos
resistentes.
Tambin se aaden colorantes que actan como indicadores para detectar, por ejemplo, la
formacin de cido o como inhibidores del crecimiento de unas bacterias y no de otras (el Rojo
Fenol se usa como indicador ya que es rojo en pH bsico y amarillo en pH cido. La Violeta de
Genciana se usa como inhibidor ya que impide el crecimiento de la mayora de las bacterias Gram-
positivas).



Condiciones generales para el cultivo de microorganismos.
El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve afectado por una
serie de factores de gran importancia y que, en algunos casos, son ajenos por completo al propio
medio.
1- disponibilidad de nutrientes adecuados
Un medio de cultivo adecuado para la investigacin microbiolgica ha de contener, como mnimo,
carbono, nitrgeno, azufre, fsforo y sales inorgnicas. En muchos casos sern necesarias ciertas
vitaminas y otras sustancias inductoras del crecimiento. Siempre han de estar presentes las
sustancias adecuadas para ejercer de donantes o captadores de electrones para las reacciones
qumicas que tengan lugar.
Todas estas sustancias se suministraban originalmente en forma de infusiones de carne, extractos
de carne o extractos de levadura. Sin embargo, la preparacin de estas sustancias para su
aplicacin a los medios de cultivo provocaba la prdida de los factores nutritivos lbiles.
Actualmente, la forma ms extendida de aportar estas sustancias a los medios es utilizar peptona
que, adems, representa una fuente fcilmente asequible de nitrgeno y carbn ya que la mayora
de los microorganismos, que no suelen utilizar directamente las protenas naturales, tienen
capacidad de atacar los aminocidos y otros compuestos ms simples de nitrgeno presentes en la
peptona.
Ciertas bacterias tienen necesidades nutritivas especficas por lo que se aade a muchos medios
sustancias como suero, sangre, lquido asctico, etc. Igualmente pueden ser necesarios ciertos
carbohidratos y sales minerales como las de calcio, magnesio, manganeso, sodio o potasio y
sustancias promotoras del crecimiento, generalmente de naturaleza vitamnica.
Muy a menudo se aaden al medio de cultivo ciertos colorantes, bien como indicadores de ciertas
actividades metablicas o bien por sus capacidades de ejercer de inhibidores selectivos de ciertos
microorganismos.
2- consistencia adecuada del medio
Partiendo de un medio lquido podemos modificar su consistencia aadiendo productos como
albmina, gelatina o agar, con lo que obtendramos medios en estado semislido o slido.
Los medios solidificados con gelatina tienen el gran inconveniente de que muchos
microorganismos no se desarrollan adecuadamente a temperaturas inferiores al punto de fusin
de este solidificarte y de que otros tienen la capacidad de licuarla.
Actualmente los medios slidos son de uso universal, por su versatilidad y comodidad, pero hay
tambin gran cantidad de medios lquidos cuyo uso est ampliamente extendido en el laboratorio.

3- presencia (o ausencia) de oxgeno y otros gases
Gran cantidad de bacterias pueden crecer en una atmsfera con tensin de oxgeno normal.
Algunas pueden obtener el oxgeno directamente de variados sustratos. Pero los microorganismos
anaerobios estrictos slo se desarrollarn adecuadamente en una atmsfera sin oxgeno
ambiental. En un punto intermedio, los microorganismos microaerfilos crecen mejor en
condiciones atmosfricas parcialmente anaerobias (tensin de oxgeno muy reducida), mientras
los anaerobios facultativos tienen un metabolismo capaz de adaptarse a cualquiera de las citadas
condiciones.
4- condiciones adecuadas de humedad
Un nivel mnimo de humedad, tanto en el medio como en la atmsfera, es imprescindible para un
buen desarrollo de las clulas vegetativas microbianas en los cultivos. Hay que prever el
mantenimiento de estas condiciones mnimas en las estufas de cultivo a 35-37C proporcionando
una fuente adecuada de agua que mantenga la humedad necesaria para el crecimiento de los
cultivos y evitar as que se deseque el medio.
5- Luz ambiental
La mayora de los microorganismos crecen mucho mejor en la oscuridad que en presencia de luz
solar. Hay excepciones evidentes como sera el caso de los microorganismos fotosintticos.
6- pH
La concentracin de iones hidrgeno es muy importante para el crecimiento de los
microorganismos. La mayora de ellos se desarrollan mejor en medios con un pH neutro, aunque
los hay que requieren medios ms o menos cidos. No se debe olvidar que la presencia de cidos o
bases en cantidades que no impiden el crecimiento bacteriano pueden sin embargo inhibirlo o
incluso alterar sus procesos metablicos normales.
7- Temperatura
Los microorganismos mesfilos crecen de forma ptima a temperaturas entre 15 y 43C. Otros
como los psicrfilos crecen a 0C y los temfilos a 80C o incluso a temperaturas superiores
(hipertemfilos). En lneas generales, los patgenos humanos crecen en rangos de temperatura
mucho ms cortos, alrededor de 37C, y los saproftos tienen rangos ms amplios.
8- Esterilidad del medio
Todos los medios de cultivo han de estar perfectamente estriles para evitar la aparicin de
formas de vida que puedan alterar, enmascarar o incluso impedir el crecimiento microbiano
normal del o de los especimenes inoculados en dichos medios. El sistema clsico para esterilizar
los medios de cultivo es el autoclave (que utiliza vapor de agua a presin como agente
esterilizante).








MATERIAL
Cajas petri estriles
Potencimetro
Tubos de ensaye con tapn
Buffer pH 4, 7, 10
2,Mecheros
2 matraz erlenmeyer (250ml)
1probeta de 100ml
Balanza granataria
Parrilla
Esptula
Autoclave
Cinta testigo
2 Cajas Petri
2 Tubos de ensayo medianos
1 Pipeta graduada de 10ml.
1 Pipeta graduada de 1ml.
1 Probeta de 100ml.
1 Frasco de dilucin
1 Balanza Granatara




REACTIVOS
Agua destilada
Sal y manitol
Agar MIO, TSI
Caldo lactosado
Agar Nutritivo
Agar Salmonella o TCBS}
Caldo de infusin cerebro corazn
Algodn
Papel manila
Agua destilada
Solucin de hipoclorito de Sodio al 2
ppm
Solucin salina al 0.9%

PROCEDIMIENTO
1) Leer cuidadosamente la etiqueta en la preparacin del medio de cultivo.
2) Hacer una relacin de gr. de acuerdo a los ml de medio
3) Colocar en el matraz EM y se la mitad de agua destilada, de acuerdo a los ml que sean
cada tipo de medio.
4) Pesar el medio de cultivo, vaciar en el matraz, agitar vigorosamente y despus agregar la
otra parte del agua destilada, seguir mezclando.
5) Colocar el medio (si as lo indica la etiqueta) a la parrilla a calentar a ebullicin; se quita de
la parrilla cuando comienza a hervir y se deja enfriar un poco, para medir pH.
6) Tapar etiquetar, pegar con cinta testigo.
7) Introducir en el autoclave el material por 15Lb/ 15 min.
8) Sacar de la autoclave y se hace el vaciado respectivo si es necesario.
9) Se dejan enfriar y se colocan invertidas en bolsas de plstico, etiquetar correctamente y se
guardar en refrigeracin.
10) Anotar en la bitcora de medios de cultivo.

RESULTADOS
Diagrama de flujo de preparacin de medios de cultivo






Diagrama de flujo de preparacin de solucin Salina

Leer las instrucciones
de preparacion del
medio
Determinar cuanto
medio en polvo se
debe de emplear en
relacion a la cantidad
total a preparar
Pesa ren la balanza
ya calibrada la
cantidad de medio de
cultivo necesaria
Se vierte la mitad de
la cantidad total de
agua destilada a usar
en un matraz
erlenmeyer limpio
Calentar en parrilla
electrica y se aade
un agitador
magnetico
Aadir el medio de
cultivo a el matraz,
agitando y evitando
que se formen
grumos
Aadir el resto de
agua necesaria y se
matiene calentando
para disolver bien
Quitar de la parrilla y
se dejar enfriar un
poco
Verter el medio de
cultivo en la cantidad
adecuada a el frasco
donde se esterelizara
Determinar el pH, de
no ser adecuado se
ajusta con NaOH o
HCl
Etiquetar con cinta
testigo con el
nombre del medio de
cultivo y equipo
se lleva a autoclave a
15 lb /in ^2 durante
15 minutos
Sacar del autoclave y
se guarda en bolsas
de plastico en
refrigeracion

Clculos de preparacin de Medio de cultivo.

Agar: Plate Count
Agar peptona de casena glucosa extracto de levadura para microbiologa

Se requieren usar 22.5 gr de agar para preparar 1000 ml de medio, por lo cual, para preparar 700
ml necesarios para la prctica:

(22.5/ 1000) * 700 = 15.75 gr de agar

Los resultados del pesaje fueron:
Peso vidrio del reloj vaco: 17.4 gr
Peso vidrio del reloj con agar: 33.15 gr
Peso de agar pesado (33.15 17.4): 15.75 gr

Al realizar la medicin del pH el resultado fue de 6.89


Clculos de preparacin de Solucin Salina 0.9 %

Se calcul las cantidades de solucin salina necesaria para que a cada integrante del grupo le
tocaran 9 ml y a cada equipo le tocaran 90 ml, ms una reserva por algn contratiempo, siendo el
total a preparar de 850 ml. Realizando los clculos de acuerdo a la concentracin de 0.9 %:

(9/1000)(850) = 7.65 g de sal.


Menciona cuales seran los puntos crticos en la preparacin.

Se determina la cantidad
de sal a usar para la
concentracion y cantidad
de solucion salina a
preparar
pesar en balanza calibrada
la cantidad de sal
verter en un matraz
erlenmeyer agua destilada
suficiente para la cantidad
a preparar
aadir la sal y agitar para
evitar que sedimente
se envasa en frascos y se
etiqueta con cinta testigo
con el nombre de la
solucion y equipo que
preparo
se lleva a esterilizar a
autoclave a 15 lb/ in^2 por
15 minutos
se saca del autoclave y se
alamacena en un lugar
limpio y seco
Los principales puntos crticos durante la preparacin de los medios de cultivos son:

La limpieza del material a usar, ya que de presentarse algn residuo en alguno de los
frascos este afectara las propiedades del medio.
La determinacin de la cantidad adecuada de polvo del medio de cultivo a usar para la
cantidad que requerimos de medio a preparar.
Disolver el medio de cultivo de forma adecuada, empleando calor para facilitar la
disolucin y evitar la formacin de grumos.
Evitar que el medio de cultivo se sobrecaliente y empiece a hervir, ya que esto ocasionara
que las protenas y azucares se descompongan y variara la concentracin de la solucin
preparada.
Describir cada uno de los componentes de los medios de cultivo.

CUESTIONARIO
1.- Qu norma mexicana nos indica el procedimiento para la realizacin de medios de cultivo?
NOM-065 SSA
2.- Qu pasa si el medio de cultivo se excede en el calentamiento?
Produce una falla cambiando el pH, presenta turbidez ennegramiento, produce un
crecimiento escaso de MIO
3.- Cuntos tipos de medio de cultivo existen menciona un ejemplo de cada uno de ellos?
Segn su estado fsico en: lquido o caldo, semislidos o agar blando y solidos o agar.
Segn su clasificacin:
Comunes (Caldo cerebro corazn)
Enriquecidos (Agar sangre Hemina-Menadiona)
Selectivos (Agar Mitis-salivarios)
Diferenciales (Agar sangre para streptococus)
Transporte (Caldo traglicolato)
4.- Cul es la diferencia entre un medio lquido y un slido?
Que el medio de cultivo solido contiene 1.5 - 2% de Agar-Agar mientras que el medio
lquido no contiene Agar-Agar el cual brinda la consistencia.
5.- Usos y cuidados del potencimetro.
Sirve para medir el pH de una solucin y determina si es alcalina o cido.
Cuidados :
Electrodo humedecido siempre.
Guardar en una solucin 4M de KCl o en un buffer de solucin 4 o 7.
No guardar electrodo en agua destilada.
Se debe calibrar por soluciones valoradas.
6.- Investiga la tcnica Gram
La tincin de Gram, tambin conocida como coloracin de Gram, es una tcnica de
laboratorio que se utiliza rutinariamente en los estudios microbiolgicos de las bacterias.
Fue diseada por Christian Gram, un cientfico dans, en el ao 1884. El objetivo de Gram
era conseguir una prueba con la que fuera posible diferenciar diferentes grupos de
bacterias para as poder estudiarlas y clasificarlas. La prueba result todo un xito y pronto
se convirti en una tcnica muy til no solo para el estudio de las bacterias, sino tambin
para poder identificarlas rpidamente en una infeccin y seleccionar el antibitico ms
adecuado para tratarla.
La tcnica se basa en aplicar una serie de colorantes a una muestra de cualquier origen
(esputo, orina, pus, etctera) que supuestamente contenga bacterias no identificadas. Los
colorantes tien la pared de las bacterias de color morado y, tras unos minutos, se realiza
un lavado del colorante. Despus de eso puede que el colorante permanezca en la pared
bacteriana o que se haya ido. En el primer caso permanecera el color morado, y se tratara
de bacterias Gram positivas y, en el segundo, la pared tendra un color rosado, y
seran Gram negativas.
Estos dos grupos de bacterias son los pilares en los que se basa la clasificacin de la amplia
mayora de las bacterias. Cada uno de los grupos responde de forma diferente a cada tipo
de antibiticos, por eso es una tcnica til para seleccionar el frmaco antimicrobiano
inicial ante una infeccin. Hay que tener en cuenta que en ciertas situaciones (como
la sepsis) es muy importante iniciar un tratamiento antibitico adecuado de forma precoz,
por eso la tincin de Gram se pide de urgencia en muchas ocasiones.
La tincin de Gram tambin tiene ciertas limitaciones. Algunas bacterias no tienen pared,
como por ejemplo las Chlamidias, y no se podrn identificar, al igual que los virus. En esos
casos la tincin no colorear ningn germen. Otro aspecto negativo de la prueba es que no
puede identificar el tipo exacto de bacteria responsable de la infeccin. Para ello es
necesario realizar un cultivo microbiolgico que se acompaa siempre de un antibiograma
para estudiar de forma exacta el antibitico ms efectivo.


OBSERVACIONES

En la realizacin de esta prctica pudimos observar que el conocimiento que
supuestamente ya tenamos que tener, fue factor para la realizacin de esta prctica, ya
que por falta de prctica lo que vimos en TSU no estaba del todo fresco, as que fue
necesaria la ayuda de la maestra Luz para recordar el procedimiento de la prctica.

Otra cosa que pudimos observar, fue que la prctica se atras un poco debido a que una
autoclave se encontraba tapada y esto ocasiono que para poder meter todo el material
esperamos a que la otra autoclave estuviera desocupada.

La prctica es indispensable para nosotros que no estamos forjando como Ingenieros
Qumicos ya que debemos de saber cul es el origen de un problema o que cosa podemos
usar como fuente alternativa para optimizar un proceso, y con los grandes avances de la
ciencia podemos ver que la bacterias pueden ser una fuente muy til para la realizacin de
procesos.

CONCLUSIONES

Los medios de cultivo son sustancias adecuadas para el estudio de los microorganismos ya que
proveen los sustratos adecuados para que se desarrollen y se puedan analizar sus caractersticas
bioqumicas de forma fcil, adems, al existir diferentes medios de cultivos con cualidades
especializadas, se pueden usar en diferentes ocasiones, dependiendo del tipo de bacteria, el tipo
de estudio o las condiciones que se quieren desarrollar para el anlisis.
En esta prctica fue muy importante conocer los cuidados que se deben de llevar a cabo para la
preparacin, ya que de no ser llevada a cabo de forma correcta puede afectar la composicin del
medio de cultivo y ocasionar problemas durante los anlisis de los microorganismos.
En el caso de nuestro equipo preparamos un agar deshidratado que se encontraba en la
universidad, para su preparacin adecuada nos apegamos a las indicaciones que da el fabricante,
mismas que se encuentran en la etiqueta.
Con esto procedimos a determinar las cantidades que debamos emplear para la cantidad de
medio de cultivo que vamos a preparar, posterior a esto llevamos a cabo la preparacin como lo
indica el fabricante y analizamos el pH para determinar que cumpliera con lo que requeramos.
Finalmente llevamos el medio a esterilizar a autoclave en frascos limpios, y etiquetados con cinta
testigo para confirmar que se esterilicen adecuadamente.
As mismo preparamos solucin salina al 0.9%, para lo cual, en base a la cantidad que requeramos
preparar determinamos la cantidad de sal adecuada, pesamos y disolvimos en agua destilada,
llevamos la solucin a frascos y los tapamos y etiquetamos de forma adecuada con cinta testigo
antes de llevar al autoclave a esterilizar.

Bocanegra Hernndez Pablo Daniel


El estudio de microorganismos y las condiciones de supervivencia de los mismos es de vital
importancia para la vida humana, puesto que la mayora de las reacciones qumicas son
efectuadas por stos.
Al realizar la presente prctica retomamos conocimiento de microbiologa, desde la correcta
esterilizacin de material en autoclave hasta preparar el medio de cultivo en el que crecer el
microorganismo deseado, la preparacin del agar implica condiciones detalladas en el frasco, en
nuestro caso eran 22.5g por litro, pero de acuerdo a los 100 mL que se ocuparn se realizaron los
clculos pertinentes; la preparacin de la solucin salina solo implic una dilucin al 9%.
Es importante recalcar que cada medio de cultivo tiene una preparacin diferente de acuerdo a las
condiciones de su composicin, agar nutritivo y sangre son los dos grupos representativos, y de
acuerdo a este trato el medio de cultivo cumplir con su funcin; tambin es conveniente cuidar
demasiado la temperatura, ya que de lo contrario en el agar podran caramelizarse los azcares y
perder protenas, as como repetir la prctica. Mantener con vida al medio de cultivo tambin
requiere controlar condiciones de pH, puesto que, para que las bacterias crezcan adecuadamente
en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura,
grado de humedad y presin de oxgeno, adecuadas, as como un grado correcto de acidez o
alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios
y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.
Industrialmente son procesos o anlisis que se realizan a diario y la preparacin de un medio de
cultivo es la base para llevar a cobo los mismos, ya que a partir de ellos vienen actividades
posteriores.

Cano Cuevas Diana

Por medio de la realizacin de esta prctica se concluy que se cumpli satisfactoriamente con el
objetivo, el cual era aprender a preparar diferentes medios de cultivo, aunque en aos anteriores
ya fue realizada una prctica similar, as que fue ms sencillo la realizacin de la prctica,
aunque algunas cosas no fueron recordadas hoy se puede decir que ya somos capaces de preparar
medios en alguna empresa en la que podamos trabajar y se realicen este tipo de prcticas.
Se determinaron las cantidades a emplear para preparar el medio de cultivo, en ciertas ocasiones
estas cantidades vienen dadas por el fabricante, ya una vez preparadas se analiza el pH para saber
si estaba apto para usarse o sino para tener el pH indicado, ya con el pH adecuado se llev a
esterilizar a autoclave, a los frascos limpios se le coloco un pedazo de cinta testigo para confirmar
que se esterilizaron adecuadamente.
Con el conocimiento adquirido se pudo entender que un medio de cultivo es un sustrato o una
solucin de nutrientes que permite el desarrollo de microorganismos. En las condiciones de
laboratorio para realizar un cultivo, se debe sembrar sobre el medio de cultivo elegido las
muestras en las que los microorganismos van a crecer y multiplicarse para dar colonias.
Los microorganismos son los seres ms abundantes de la tierra, pueden vivir en condiciones
extremas de pH, temperatura y tensin de oxgeno, colonizando una amplia diversidad de nichos
ecolgicos. Entre los requerimientos ms importantes para su desarrollo estn el carbono, el
oxgeno, nitrgeno, dixido de carbono e hidrgeno. Muchas bacterias sin embargo necesitan del
aporte extra de factores de crecimiento especficos en forma de suero, sangre y extracto de
levadura entre otros.

Hernndez Huerta Alexis Alain


Los medios de cultivo constituyen el aporte de nutrientes indispensables para el crecimiento de
los microorganismos. La composicin depender de la especie que se quiera cultivar, porque las
necesidades nutricionales varan. Hay microorganismos muy poco exigentes que crecen bien en
medios de laboratorio normales y microorganismos muy exigentes que necesitan de crecer.
Durante la prctica se prepararon medios de cultivo de composicin variada y de tres tipos
diferentes en cuanto a consistencia: medios slidos, semislidos y lquidos y se record el uso de
la autoclave.
Existen medios de cultivo natural y sinttico, en esta ocasin nuestro equipo se encarg de
preparar el agar nutritivo (medio sinttico).
La autoclave es un instrumento habitual en los laboratorios de Microbiologa. Es un sistema
cerrado donde se forma vapor de agua que se somete a una presin elevada, una atmsfera, lo
que hace que el agua alcance una temperatura de 121C causando la desnaturalizacin de
enzimas lo que conlleva a la muerte de los microorganismos y la destruccin de las esporas.
La preparacin del agar consisti en partir de un medio deshidratado con el que cuenta la
universidad en donde el fabricante indica la cantidad de medio necesaria por cada litro de agua as
como las condiciones a las cuales se debe de manejar; ya que se tena el clculo de la cantidad
necesaria, se coloc la mitad de agua en un matraz y se le agrego el agar hasta disolverlo
completamente y posteriormente se le agrego el agua restante y se llev a ebullicin, se modific
el pH con cido ya que sali ms alto que lo que requera y por ltimo se esterilizo en el autoclave.
Tambin se prepar una solucin salina a concentracin de 0.9% y se esterilizo en tubos de ensayo
en la autoclave.
Como se mencion arriba cada equipo preparo diferentes medios de cultivo cada uno con
caractersticas y composiciones diferentes para permitir el crecimiento de microorganismos con
diferentes caractersticas.

Yetlanezi Santiago Pantoja

Los medios de cultivo que se prepararon en la prctica, de forma grupal, son los necesarios para el
desarrollo de las practicas siguientes, por consecuencia dependemos de una buena colaboracin
en equipo. Estos medios y su preparacin no tiene mayor dificultad, algunos son con
requerimientos ms estrictos como la realizacin de algn biselado, condiciones de ebullicin y su
obvio cuidado para evitar derrames y perdida de este, condiciones de pH rigurosos, como ejemplo
el agar nutritivo plate count, tena que estar a un pH de 7 con un rango de 2 mas menos, una
ebullicin previa y prepararse tambin a una concentracin establecida en su contenedor, este
ejemplo fue el caso de nuestra preparacin. Por otra parte haba algunos otros medios que
requeran menos condiciones especficas de preparacin como lo es la solucin salina, (otro caso
de nuestra preparacin) que solo debe estar a una concentracin determinada.
Aun as todos estos deben someter sea una esterilizacin en autoclave, para que en su utilizacin
no tengamos contaminaciones cruzadas.
Con todo esto se reafirm el conocimiento adquirido en T.S.U. acerca de la preparacin de un
medio de cultivo para microorganismos, las tcnicas necesarias para el manejo de los mismos,
poniendo en prctica conocimientos tcnicos de laboratorio.
De forma general, y por ltimo, la forma de elaborar un medio de cultivo es relativamente sencilla,
siendo muy til para el estudio de microorganismos debido a que presentan condiciones aptas
para la reproduccin y sobrevivencia del mismo.
Villarruel Garduo Miguel Ivan

MSDS

HIPOCLORITO DE SODIO
FORMULA: NaClO
COMPOSICION: Na: 13.97%; O: 58.35 % y Cl: 21.55 %.
PESO MOLECULAR: 164.53 g/mol
NOM 114: Salud: 3 Reactividad: 1 Fuego: 0

CLORURO DE SODIO
FRMULA: NaCl
COMPOSICIN: 99 % mnimo de pureza
Salud: 1 Reactividad: 0 Fuego: 0



BIBLIOGRAFIA

Clavell, L.; Pedrique de Aulacio, M. 1992. Microbiologa. Manual de Mtodos Generales
(2da edicin). Facultad de Farmacia. Universidad Central de Venezuela

Sofa Gutirrez de Gamboa, Octubre 2001.


http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_Preparaci
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Dugas Beverly Tratado de Enfermera Prctica Nueva Editorial Interamericana Mxico,
1999.

http://es.scribd.com/doc/14173118/4-Esterilizacion-y-Preparacion-de-Medios-de-Cultivo

Biotecnologa Vegetal (cultivo de tejidos, manual )Gonzalez, Cruz, Camarillo, Silos. 2000.
SEP. 133p.


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http://exa.unne.edu.ar/biologia/fisiologia.vegetal/CultivoTejidos.pdf