Introduccin

En la industria farmacutica y a nivel hospitalario la produccin de medicamentos estriles esta

enfocada en minimizar el riesgo de contaminacin por partculas y microorganismos, por lo cual los
procesos deben realizarse en una zona limpia. A su vez las operaciones de preparacin de los
componentes, preparacin del producto y llenado deben hacerse en reas separadas dentro de la
zona limpia (reas crticas dentro de una zona controlada). (1) En estas reas se pueden dar casos
donde es necesario proteger el producto, ya sea del medio ambiente o del personal, y otros donde se
trabajan productos biolgicos de forma que es necesario proteger al operador y al medio ambiente.
Dependiendo de esto se dispone de campanas de flujo laminar y gabinetes de seguridad biolgica.
(2)

Definiciones

Aire de suministro: aire que entra a la cabina a travs de la abertura frontal o de trabajo y que
reemplaza el aire extrado de la cabina. (3)

Filtro HEPA (High Efficiency Particulate Air): filtro absoluto de partculas, desechable, retiene los
microorganismos y partculas en suspensin en el aire, con una eficiencia de 99,97% o ms para las
partculas mayores de 0,3 micrones de dimetro. (4) Estn construidos por microfibras de boro silicato
que han sido unidas con un pegante resistente al agua. El medio filtrante se encuentra plegado dentro
de un marco, con el fin de incrementar el rea de filtracin. (3)

Flujo de aire laminar: masa de aire que se desplaza en un recinto confinado a una velocidad uniforme
y prefijada, en lneas paralelas provenientes de la superficie de un filtro de alta eficiencia. (4) Se
presenta cuando el nmero de Reynolds [Re] es menor a 3 000. (3)

Plenum: Es un encerramiento para el flujo de gases en el cual la presin esttica en todos los puntos
es relativamente uniforme. (5)

Seguridad biolgica/ Riesgo biolgico: Los microorganismos, con base en el anlisis de factores
como la patogenicidad, la dosis infecciosa, los modos de transmisin, la variedad de huspedes que
pueden utilizar, la disponibilidad de medidas preventivas y tratamientos efectivos, han sido
clasificados en cuatro categoras: (3)

Nivel
de
riesgo
Probabilidad de infeccin
Riesgo
individual
Riesgo
comunitario
Medidas y
tratamientos
Ejemplo
1
Muy improbable en humanos
sanos o animales.
Bajo Bajo Si B.Subtilis
2
Pueden causar enfermedades a
los humanos o animales.

En circunstancias normales es
improbable que sean peligrosos
para trabajadores de los
laboratorios, la comunidad, los
animales domsticos o el
ambiente.
Moderado Limitado Si VIH
3
Usualmente enfermedades
graves a humanos y animales.

No es comn su contagio por
contacto indirecto de un
individuo a otro.
Alto Bajo Si TBC
4
Usualmente enfermedades muy
graves en humanos y animales.

Contagio por contacto directo e
indirecto.
Alto Alto No Ebola

Cabinas de flujo laminar y de bioseguridad

El procedimiento con flujo de aire laminar para la obtencin de reas muy limpias y libres de polvo se
desarroll en 1961. En un dispositivo de flujo laminar la cantidad total de aire en el interior de un rea
se mueve con una velocidad uniforme a lo largo de lneas de flujo paralelas (flujo tipo pistn).
Mediante el empleo de prefiltros y filtros bacterianos de alta eficiencia, el aire suministrado al rea es
esencialmente estril y barre todo el polvo y las partculas transportadas por la atmosfera. (6) La
caracterstica ms importante de este tipo de flujo es la capacidad de asegurar que el patrn de flujo
de aire es perturbado lo menos posible en la zona central del proceso. En un plano perpendicular al
flujo de aire limpio, todas las posiciones ofrecen el mismo nivel de limpieza. (7)

Las operaciones crticas de alto riesgo como por ejemplo, llenado, bandejas de tapones, ampollas,
viales abiertos y realizacin de conexiones aspticas, se realizan en salas limpias grado A GMP.
Estas condiciones se consiguen normalmente en un flujo laminar. Los sistemas de flujo laminar deben
proporcionar una velocidad homognea del aire en un intervalo de 0,45 m/s +/-20% (0,36 0,54 m/s)
en el punto de trabajo concreto de estas operaciones, siendo el patrn del flujo de aire unidireccional.
(7)

La seleccin del tipo de cabina depende de la operacin propiamente dicha. Para la mayora de las
operaciones para pruebas de esterilidad las unidades de flujo laminar horizontal son superiores a las
unidades de flujo vertical en la medida que es menos probable que el movimiento del aire transporte
microorganismos desde las manos del operador o el equipo propiamente dicho hacia el medio de
prueba. La principal desventaja asociada a esto es que cualquier material particulado generado en las
unidades es transportado directamente hacia la sala y contra el personal operativo. En aquellas
situaciones en las que se opera con materiales infecciosos o en las que es necesario evitar la
contaminacin del medio ambiente se recomienda utilizar unidades de flujo de aire laminar
recirculante vertical especficamente fabricadas con esta finalidad. (6)

Tipos de cabinas de flujo laminar y bioseguridad

Tipo Diagrama (8) (3)
Flujo laminar vertical

Flujo laminar horizontal

Flujo vertical 30/70

Bioseguridad clase I A

Bioseguridad clase II A

Bioseguridad clase II B1

Bioseguridad clase II B2

Bioseguridad clase II B3 o A/B3

Bioseguridad clase III

Cabina de extraccin



Caractersticas (8) (3) (5)

Tipo Proteccin
Velocidad
aire
ingreso
Nivel de
bioseguridad
Sistema
de
filtracin
Otras
Reciclaje/
Renovacin
(extrado)
Flujo laminar
vertical
Producto
0,45 m/s
20%
- HEPA
Baja seguridad
a operador y
ambiente
-
Flujo laminar
horizontal
Producto
0,45 m/s
20%
- HEPA
No protege a
operador y
ambiente
-
Flujo vertical
30/70
Producto,
operador y
ambiente

0,45 m/s
20%
- HEPA
Alta seguridad
a operador y
ambiente
-
Bioseguridad
clase I A
Operador y
ambiente
38,1 cm/s
75 fpm
1,2 o 3
HEPA en
extraccin
Ducto con
presin
negativa.

No protege el
producto.
No
Bioseguridad
clase II A
Producto,
operador y
ambiente
38,1 cm/s
75 fpm
1,2 o 3
HEPA
sobre
superficie
de trabajo

HEPA en
extraccin
Flujo laminar
vertical.

Se recicla el
aire dentro del
laboratorio.
70/30
Bioseguridad
clase II B1
Producto,
operador y
ambiente
50,8 cm/s
100 fpm
1,2 o 3
HEPA
sobre
superficie
de trabajo

HEPA en
extraccin
Ductos
biolgicamente
contaminados
y plenum con
presin
negativa.

Permite
cantidades
mnimas de
qumicos
txicos y
30 %
reciclado
dentro de la
cabina.

30 (rejilla
delantera)
70 (rejilla
trasera)
radionucleidos.
Bioseguridad
clase II B2
Producto,
operador y
ambiente
50,8 cm/s
100 fpm
1,2 o 3
HEPA
sobre
superficie
de trabajo

HEPA en
extraccin
Ductos
biolgicamente
contaminados
con presin
negativa.

Extraccin
total, no tiene
recirculacin.

Permite
qumicos
txicos y
radionucleidos.
Sin reciclaje.
Bioseguridad
clase II B3 o
A/B3
Producto,
operador y
ambiente
50,8 cm/s
100 fpm
1,2 o 3
HEPA
sobre
superficie
de trabajo

HEPA en
extraccin
Ductos
biolgicamente
contaminados
con presin
negativa.
70% dentro
de la cabina
Bioseguridad
clase III
Producto,
operador y
ambiente
>0,5 WG 4
HEPA en
admisin

2 HEPA
en
extraccin
Cabina
totalmente
sellada.

Ingreso de
elementos por
caja de paso
de doble
puerta.
-
Cabina de
extraccin
Operador y
ambiente
Velocidad
frontal
0,40
0,60 m/s
-
Carbn
activado
- -

Calificacin y validacin

En las cabinas de flujo laminar se debe verificar peridicamente la velocidad del aire, el estado de los
filtros y debe realizarse un control microbiolgico de la esterilidad del aire. (9)


Cabinas de bioseguridad Cabinas de flujo laminar
Campanas de aspiracin de
gases
Velocidad anemomtrica del
aire (Impulsado y de barrera de
proteccin)
Velocidad anemomtrica del
aire (Impulsado y no existencia
de desviaciones mayores al
20% en ningn punto)
Ajustes anemomtricos
Integridad y eficacia de los
filtros HEPA
Integridad y eficacia de los
filtros HEPA
Validez de filtro de carbn
activo (si existe) en funcin de
tiempo se uso y vida media
Estado de prefiltros, junta de
filtro, motores y accionamientos
Estado de prefiltros, junta de
filtro, motores y accionamientos
Estado de prefiltros (si existe),
motores y accionamientos
Clase de ambiente estril Clase de ambiente estril
Estanqueidad de la cabina Estanqueidad de la cabina
Luminosidad, nivel sonoro Luminosidad, nivel sonoro Luminosidad, nivel sonoro
Comprobacin de las alarmas
Intensidad de Luz UV germicida Intensidad de Luz UV germicida

Fugas de aire no filtrado y
eficacia de barrera frontal

Pruebas de certificacin (3)

Estanqueidad de la cabina: se realiza sobre las superficies exteriores. Determina si uniones,
empaques, penetraciones y soldaduras estn libres de fuga. Test de humo (Air flow Smoke
Patterns).

Prueba de fugas de los filtros HEPA: determina la integridad de los filtros HEPA de suministro
y extraccin, sus alojamientos y marcos de montaje. Ensayo del D.O.P (Dioctilftalato
monodispersado), prueba con aceite de parafina, mtodo de contaminacin intencionada.
(EN12469), prueba de PSL (Micro Esferas de Poliestireno) para el filtro de extraccin y el filtro
interno.

Test DOP para cabinas (9)


El test de contaminacin intencionada consiste, en pocas
palabras, en someter al filtro absoluto a una carga de
contaminacin conocida (aerosol) y medir de forma precisa
lo que retiene y lo que no, comparando las concentraciones
antes y despus del filtro. Con ello podemos determinar la
eficacia del filtro porque estamos comprobando y midiendo
su capacidad de retencin ante una contaminacin dada.

A su vez provocamos una ligera colmatacin del filtro que
recibe partculas que debe retener.


Prueba de aumento de temperatura: determina cul es el aumento mximo de temperatura en
la cabina, cuando en la misma se encuentran en operacin el ventilador y las luces.

Prueba de ruido: determina cul es el nivel de ruido producido por la cabina.

Prueba de intensidad luminosa: determina cul es la intensidad luminosa en la superficie de
trabajo de la cabina.

Prueba de vibraciones: determina la cantidad de vibracin presente en la cabina, cuando la
misma se encuentra funcionando.

Prueba de proteccin al personal: al producto y ensayos biolgicos de contaminacin cruzada.
La prueba determina si los aerosoles son contenidos por la cabina, si los contaminantes
externos alcanzan la zona de la mesa de trabajo y si los aerosoles son reducidos por la
cabina.

Prueba de estabilidad: determina si la cabina tiene estabilidad estructural. Analiza la
resistencia al volcamiento, a la distorsin por el efecto de fuerzas aplicadas, a la deflexin de
la superficie de trabajo sometida a condiciones de carga y la resistencia al ladeo de la
superficie de trabajo bajo condiciones de carga.

Prueba de velocidad del flujo vertical: Determina la velocidad del aire que se desplaza
verticalmente hacia la superficie de trabajo.

Prueba de velocidad del flujo de ingreso: determina la velocidad a la que ingresa el flujo a la
cabina, a travs de la abertura frontal, y el volumen de extraccin de la cabina.

Prueba de patrones de humo: determina si el flujo del aire, a lo largo de todo el permetro de la
abertura frontal, va hacia la cabina y si el flujo vertical va hacia abajo, no presenta puntos
muertos o reflujos sobre la superficie de trabajo.

Prueba de fugas del drenaje: define la capacidad de contencin de derrames bajo la superficie
de trabajo.

Prueba de funcionamiento del sistema motor/ventilador: determina si el sistema brinda la
presin esttica requerida.

Prueba del sistema elctrico: determina si existen riesgos potenciales de descargas elctricas.
Mide las corrientes de fuga, la polaridad, el funcionamiento del sistema de proteccin de fallas
de tierra y la resistencia del circuito a tierra.

Clase de ambiente estril: medicin de las concentraciones de los diferentes tamaos de
partculas microscpicas en volmenes de aire de la cabina (nivel de proteccin de la
muestra) y del aire expulsado (nivel de proteccin del ambiente).

Bibliografa

1. Verificaciones y mantenimiento en cabinas de flujo laminar. M., Cantero. Espaa : Spin Cero,
2004, Vol. 8.
2. Campanas de flujo laminar - Gabinetes de seguridad biolgica. L., Rossi Devivo. Caracas :
Universidad Central de Venezuela - Laboratorio de Microbiologia.
3. S.A.S., Equipos y Laboratorio de Colombia. Captulo 6. Cabina de seguridad biolgica. [En
lnea] [Citado el: 25 de 03 de 2014.] http://www.equiposylaboratorio.com/wenv/file_data.php?id=697.
4. M.T., Valenzuela. Instituto de Salud Pblica de Chile. Evaluacin de cabinas de seguridad
biolgicas utilizadas en reas biolimpias para el manejo de agentes neoplasicos. [En lnea] [Citado el:
01 de 04 de 2014.]
http://www.ispch.cl/sites/default/files/documento_tecnico/2011/01/Cabinas%20de%20Seguridad%20Bi
ol%C3%B3gicas.pdf.
5. Salud, Organizacin Panamericana de la. Cabinas de seguridad biologica: uso, desinfeccin y
mantenimiento. [En lnea] 2002. [Citado el: 20 de 03 de 2014.] http://www.ins.gob.pe/CBS/PDF/lab-
cabinas_bioseguridad.pdf.
6. A.R., Gennaro. Remington Farmacia. Argentina : Medica Panamericana, 2003. pgs. 900-901.
950-06-1866-4.
7. J.L., Jimenez. Tecnologas Crticas para la Industria, S.L.L. Criterios de clculo y diseo de flujos
laminares. [En lnea] [Citado el: 01 de 04 de 2014.] http://www.ingenieriatci.es/wp-
content/uploads/2013/03/Criterios-de-c%C3%A1lculo-y-dise%C3%B1o-de-flujos-laminares.pdf.
8. Ibrica, Quality Technical. Cualificacin de Sistemas de Climatizacin y Tratamiento de Aire. [En
lnea] [Citado el: 25 de Marzo de 2014.] http://www.qti.es/actualidad/wp-
content/uploads/2010/04/04.pdf.
9. Cultek. Servicios. [En lnea] [Citado el: 20 de Marzo de 2014.]
http://www.cultek.com/index.asp?p=SERVICIO-TECNICO-Servicios&id=144.