INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE

BIOTECNOLOGIA
ACADEMIA DE CIENCIA Y TECNOLOGA FARMACEUTICA
MANUAL DE PRACTICAS DE LABORATORIO
BIOFISICA I
ELABORADO POR:
Mara Esther Bautista Ramrez
Yolanda Gmez y Gmez
Marcela Segura Granados
PRCTICA No. 1
MECANISMOS DE TRANSPORTE A TRAVES DE MEMBRANAS
TEMA
DIFUSIN SIMPE
DIFUSI!N F"#II$"D"
$R"SP!R$E "#$I%!

!SM!SIS

INTRODUCCIN
" tra&'s de la mem(rana la c'lula realiza un continuo intercam(io de mol'culas ) energa
entre el medio intracelular ) el e*tracelular+ 'ste recam(io se realiza ,or &arios
mecanismos-
difusi !"si#"$ f"%i&i'"d"$ '("s!o(') "%'i#o * os+osis.
a mem(rana celular es selecti&amente ,ermea(le+ ,ermite .ue algunas sustancias ,asen
a tra&'s de ella+ ,ero otras no/ os materiales se mue&en a tra&'s de las mem(ranas ,or
dos ,rocesos0 '("s!o(') !"si#o llamado com1nmente di2usi3n ) '("s!o(') "%'i#o/
Difusi si+!&).4 Es el mo&imiento cin'tico de mol'culas o iones a tra&'s de las
a(erturas de la mem(rana celular+ sin necesidad de 2i5aci3n de ,rotenas ,ortadoras/ a
magnitud de la di2usi3n de,ende de la cantidad de sustancia dis,oni(le+ la &elocidad del
mo&imiento ) el n1mero de canales de la mem(rana celular ,or los cuales ,ueden ,asar
las mol'culas o iones/
as caractersticas de la difusi si+!&) son-
a6 Siem,re ocurre a 2a&or de un gradiente de concentraci3n electro.umico/
(6 inde,endiente de la energa meta(3lica de la c'lula/
c6 Es (idireccional+ de,endiendo de la concentraci3n e*terna e interna de la c'lula/
Difusi f"%i&i'"d" es un trans,orte de,endiente de la concentraci3n e in&olucra el
trans,orte de mol'culas hidro2licas de ma)or tama7o como la glucosa ) los amino8cidos/
El ,roceso es estrictamente ,asi&o ,ero re.uiere de mol'culas trans,ortadoras las cuales
son es,eci2icas/
as caractersticas de la difusi f"%i&i'"d" son-
a6 !curre a 2a&or de un gradiente de concentraci3n/
(6 De,ende ,arcialmente de energa/
c6 De,ende de un trans,ortador de naturaleza ,roteica/
T("s!o(') "%'i#o.4 es el ,aso de iones a tra&'s de la mem(rana en com(inaci3n con una
,rotena ,ortadora+ ,ero contra un gradiente de concentraci3n/
El e5em,lo cl8sico de trans,orte acti&o es el del sodio .ue de manera continua se realiza
,or medio de la 9(om(a de sodio9/ Est' ,roceso de,ende de energa+ como el "$P o
algunos otros nucle3tidos tri2os2orilados/
T("s!o(') "%'i#o
a6 Re.uiere de la energa de la c'lula :el tras,orte cesa sin "$P del meta(olismo ) tiende
a un e.uili(rio6/
(6 !curre contra un gradiente de concentraci3n/
c6 Es unidireccional/ El 2lu5o del soluto siem,re es en la misma direcci3n/
OB,ETIVO GENERAL
Descri(ir los ,rocesos in&olucrados en el trans,orte de iones a tra&'s de las mem(ranas
celulares+ analizando las 2uerzas 2isico.umicas res,onsa(les/
OB,ETIVOS ESPECIFICOS
"nalizar ) descri(ir el 2en3meno de di2usi3n sim,le+ 2acilitada+ trans,orte acti&o ) osmosis/
METODOLOG-A
E;PERIMEN$! < = Difusi * ')+!)("'u("
Materiales
Parrillas
%aso >?@ ml
Pinzas
$erm3metro
"zul de metileno
Permanganato de ,otasio
"gua destilada
Aielo
En un &aso de ,reci,itados calentar >@@ ml de agua a ?@ B#+ en otro &aso ,oner la
misma cantidad de agua con hielo ) registrar la tem,eratura/
!(ser&ar .ue el agua tienen mo&imiento en am(os &asos+ a7adir = g/ de ,ermanganato
de ,otasio a cada &aso/ Registrar el tiem,o de di2usiCn/
Aacer lo mismo con azul de metileno/
#UES$I!N"RI! < =
#onteste con las (ases te3ricas ad.uiridas las siguientes ,reguntas-
=/ D Es uni2orme el descenso del colorante en el aguaE
>/ D Fu' sucede cuando se calienta el aguaE
G/ De2ina .u' es disoluci3n ) di2usi3n/
H/ Mencione los 2actores .ue a2ectan la di2usi3n+ en los l.uidos+ en los s3lidos ) en los
gases/
Difusi$ '"+".o d) &" +o&/%u&" * !)(+)"0i&id"d d) &" +)+0("".
as mol'culas ,ueden di2undir a tra&'s de la mem(rana celular si son su2icientemente
,e.ue7as+ mientras .ue las mol'culas grandes tienen di2icultad ,ara su ,aso/
a selecti&idad de las mol'culas ,or la mem(rana celular ,uede estudiarse
e*,erimentalmente usando una mem(rana de celulosa/ a mem(rana de celulosa tiene
,oros microsc3,icos so(re su su,er2icie ) las mol'culas ,e.ue7as ,ueden atra&esar la
mem(rana/
Usando la ,rue(a de )odo ) de Benedict ,ara determinar az1cares reducidos ,odemos
realizar el e*,erimento/
E;PERIMEN$! < > Difusi * P)so Mo&)%u&"(
Pinzas
#a5as de ,etri con agar
Granos de azul de metileno
Granos de ,ermanganato de ,otasio
Usando dos sustancias con di2erente ,eso molecular+ ,or e5em,lo azul de metileno P/M/
G>@ ) ,ermanganato de ,otasio P/M/ =?I+ estudiaremos su di2usi3n/ "m(as sustancias
son solu(les en agua ) di2unden r8,idamente en un agar con JI K de agua/
En una ca5a ,etri con agar colocar grLnulos de un mismo tama7o a una distancia de H cm
cada uno de ,ermanganato de ,otasio en la ca5a <= ) azul de metileno en la ca5a <>/
Presionar ligeramente los grLnulo dentro del agar/ Registrar el diLmetro de di2usiCn a los
=?+ G@ ) M@ min/
RESULTADOS
Sustancia
$iem,o
=? min G@ min M@ min
Permanganato de ,otasio
"zul de metileno
E;PERIMEN$! < G P)(+)"0i&id"d d) &" +)+0("".
Aumedezca una mem(rana de celulosa de a,ro*imadamente =? cm de largo ,or >/? cm de
di8metro en agua destilada+ cierre un e*tremo at8ndolo con hilo/ "7ada ? ml de glucosa al
?K ) ? ml de almid3n al =K/ #ierre el e*tremo su,erior ) sus,'ndalo en un &aso con agua
destilada/
4Determine la concentraci3n de az1cares con la ,rue(a de Benedict en el l.uido del &aso
de ,reci,itados a tiem,o cero+ =?+ G@+ M@ ) =>@ min/
4Des,u's de este tiem,o+ re,ita las dos ,rue(as con el l.uido .ue se encuentra dentro de
la mem(rana /
Reacti&o de Benedict- disol&er =@@ g de car(onato de sodio ) =NG g de citrato de sodio
:Na>#MA?!N /A>!6 en N@@ ml de agua/ Disol&er =N/G g de Sul2ato de co(re :#uS!H/?A>!6 en
=@@ ml de agua destilada ) se &ierte en la soluci3n de car(onato citrato con agitaci3n
constante a2orar a = lt de soluci3n/
Reacti&o de Oodo :ugol6 - Disol&er cristales de )odo = g +Ooduro de Potasio >g ) agua
destilada =@@ ml/
Prue(a de Benedict
$omar = ml de la muestra ) a7adir = gota del reacti&o de Benedict ) her&ir en (a7o Mara
durante ? min/ a ,rue(a es ,ositi&a cuando se desarrolla una coloraci3n ro5a o amarilla/
Prue(a de lugol
$omar un = de la muestra ) a7adir = gota del reacti&o de lugol ) o(ser&ar+ una ,rue(a
,ositi&a da una coloraci3n azul intensa/
Os+osis * !()si os+'i%"
El agua es esencial ,ara la &ida/ os organismos necesitan un medio acuoso ,ara lle&ar a
ca(o sus reacciones/ El agua es la sustancia m8s a(undante en las c'lulas+ 'sta es una
mol'cula .ue di2unde li(remente dentro ) 2uera de la c'lula/
Os+osis es sim,lemente la di2usi3n del agua a tra&'s de una mem(rana semi,ermea(le o
selecti&amente ,ermea(le/ #uando se colocan dos sustancias de di2erente concentraci3n
se,aradas ,or una mem(rana semi,ermea(le+ se lle&a a ca(o la di2usi3n del sol&ente de
la soluci3n de menor concentraci3n a la de ma)or concentraci3n/ De no e*istir una 2uerza
.ue se o,onga al ,aso del sol&ente+ se alcanzar8 el e.uili(rio de la concentraci3n ,or
diluci3n de la sustancia m8s concentrada a la m8s diluida/ a 3smosis desarrolla una
,resi3n+ la !()si os+'i%"+ .ue es una de las ,ro,iedades de ma)or im,ortancia
2isiol3gica/
Se de2ine !()si os+'i%" como la 2uerza e5ercida ,ara im,edir el ,aso del sol&ente
hacia la soluci3n concentrada/
E;PERIMEN$! <H Os+osis
Pre,arar una soluci3n de sacarosa+ cloruro de ,otasio ) cloruro de sodio al >K ) realizar las
siguientes diluciones-
No/$u(o ml Na#l >K+ P#l o
sacarosa
ml de agua
Destilada
#onc de la soluci3n :K6
= @/>? H/N? @/=
> =/>? G/N? @/?
G >/>? >/N? @/J
H ?/@ @ >/@
4!(tener la sangre de un ,aciente lim,iando la )ema del dedo con alcohol etilico al N@ K )
,inchando la ,iel con una lanceta est'ril/
4En un ,ortao(5etos mezclar = gotas de sangre con = gota de soluci3n salina de cada una
de las diluciones ,re,aradas anteriormente +colocar un cu(reo(5etos ) o(ser&ar/
4!(ser&ar al microsco,io ) anotar las o(ser&aciones/
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
De Ro(ertis+ Ro(ertis/ Biologa #elular ) Molecular/
Ed/ El "teneo+ =JJ>
"l(erts+ Bra)+ eQis+ Ra22+ Ro(erts+ Ratson/ Molecular (iolog) o2 the cells/ Ger ed/ Garland
Pu(lishing Inc/ =JJ?/
PRACTICA 1 2
EFECTO DONNAN
I. TEMA
Equilibrio Gibbs-Donnan
II. OBJETIVO GENERAL
Explicar el efecto Donnan en un sistema in vitro
III. OBJETIVOS ESPECIFICOS
Observar el comportamiento de una solucin electroltica
Observar la generacin de un potencial de membrana en un sistema artificial
alcular las concentraciones de los iones al equilibrio
IV. INTRODUCCION
uando en un lado de la membrana existe un in que no puede difundir a trav!s de dic"a
membrana# la distribucin de los otros iones a los que resulta permeable la membrana es afectada
de una manera predecible$ uando la diferencia de potencial el!ctrico que se establece alcanza
un equilibrio se genera un potencial de membrana llamado potencial Donnan$
El efecto de Donan sobre la distribucin de los aniones tiene tres efectos en el cuerpo$ %rimero#
debido a las protenas en las c!lulas# existe m&s partculas osmticamente activas en la c!lula que
en el lquido intersticial y dado que las c!lulas animales tienen paredes flexibles# la smosis
podra "inc"arlas y finalmente romperlas de no ser por las bombas de 'a
(
)
(
*+%asa las cuales
bombean los iones de regreso al exterior de las c!lulas, por tanto# el volumen y la presin
celulares normales dependen de la bomba$ -egundo# debido a que en el estado de equilibrio se
presenta una distribucin asim!trica de los aniones permeables a trav!s de la membrana se
presenta una diferencia el!ctrica a trav!s de la membrana cuya magnitud puede determinarse
mediante la ecuacin de 'erst y tercero toda vez que en el plasma se presentan m&s protenas
que en el lquido intersticial# se produce un efecto de Donnan sobre el movimiento de los iones a
trav!s de la pared de los capilares$
V. Material y equipo
.alanza *naltica
%otencimetro
Esp&tula
+ermmetro
/atraz volum!trico 01#233#013 ml
%ipetas graduadas 2#1 y 23 ml
4asos de precipitados 233#013#133 ml
/embrana semipermeable
VI. Reactivos y sustacias!
-olucin .uffer p5 6 y 7
*lb8mina
loruro de sodio
5idrxido de sodio
9enolftalena
Etanol
VII. So"ucioes!
%reparar por grupo:
-olucion de alb8mina s!rica bovina ;*.-<;2mg=ml<# 'aO5 3$371 ' y 'al 3$3>3 '#233 ml$
2133 ml de loruro de sodio ;'al<#3$3>3 / solucin externa
9enolftalena#13 ml# 0? en etanol
VIII. Meto#o"o$%a!
2$@emoAar la membrana 23 min en agua destilada# $si es celof&n cortar un cuadro de 13 x 13
llenar con la solucin de alb8mina -'aO5-'al ;solucin interna<# aBadiendo una gota de la
solucin de fenolftalena$
0$/edir la temperatura de las soluciones
C$olocar el electrodo en 033 ml de solucin externa ;'al 3$3>3'< con una gota de
fenolftalena y determinar el p5 inicial al tiempo cero$ * continuacin se introduce la bolsa de
celof&n o membrana con la solucin interna ;alb8mina-'aO5-'al<y se toman las lecturas de
p5 con intervalos de 2 min los primeros 1 minutos y despu!s cada 1 min "asta completar la
"ora$$
I&. Resu"ta#os!
Elabore una gr&fica de tiempo t;min< contra p5 con los datos obtenidos$
Calcule las concentraciones de los iones al equilibrio
&. Discusi'!
Explique por qu! se gener el potencial de Donnan en su experimento
Explique el movimiento de los iones en base a sus resultados$
5aga un an&lisis de la cin!tica del movimiento de los iones en su experimento$
&I. Re(e)ecias!
Ganong# D$9$ y col$0333#9isiologa m!dica$ /anual /oderno$ /!xico D$9$
PRCTICA No. 3
FISI!!GS" #"RDI"#" :E#G6
INTRODUCCIN
El E#G es 2undamental ,ara el estudio de los ,acientes con arritmias cardacas+
trastornos de la conducci3n+ sndrome de ,ree*citaci3n ) ,acientes con cardio,ata
is.u'mica/ En general es 1til ,ara el diagn3stico ) el estudio e&oluti&o de la ma)ora de
las cardio,atas+ de otras en2ermedades ) situaciones di&ersas ) en estudios
e,idemiol3gicos/ " ,esar de su inestima(le &alor en el diagn3stico de algunas
cardio,atas+ la electrocardiogra2a ,uede ser un arma m8s ,eligrosa .ue e2icaz si nos
con2iamos en e*ceso ante un E#G a,arentemente normal o &aloramos en demasa un
E#G ,atol3gico/ Es a1n 2recuente .ue+ escud8ndose en el ,oder Tm8gicoU del E#G+ el
m'dico .ue se encuentra ante un ,aciente .ue ,resenta crisis de dolor ,recordial de
origen dudoso sentencie- TAa) .ue ,racticar un E#G ,ara salir de dudasU/ Es necesario
recordar .ue un ele&ado ,orcenta5e de ,acientes a2ectos de cardio,ata is.u'mica
,resentan un E#G normal de
re,oso e incluso de es2uerzo
)+ asimismo+ con alguna
2recuencia el E#G se
normaliza des,u's de un
in2arto de miocardio/ Es
o(ligado+ ,ues+ inter,retar el
E#G teniendo en cuenta el
conte*to clnico en el .ue se
o(tiene/ De lo dicho se in2iere
.ue un E#G normal no
constitu)e ning1n Tseguro de
&idaU )+ en realidad+ no
e*clu)e una muerte cardaca
,or causa el'ctrica :de(ida a 2i(rilaci3n &entricular o (radiarritmia6 ni si.uiera en el
mismo da de ha(er tomado el registro normal+ aun.ue+ e&identemente+ si no e*iste
cardio,ata clnica+ las ,osi(ilidades de .ue esto ocurra son mu) remotas/ Por otra ,arte+
el E#G ,uede mostrar &ariantes de la normalidad en relaci3n con el h8(ito constitucional+
mal2ormaciones tor8cicas+ raza ) se*o+ o ,resentar alteraciones 2ugaces de(idas a
m1lti,les causas :hi,er&entilaci3n+ hi,otermia+ ingesti3n de glucosa o alcohol+
alteraciones i3nicas+ acci3n de determinados 28rmacos+ etc/6/ El an8lisis de F$ es 1til en
la e&aluaci3n de sndrome largo de F$ :F$S6/ En algunos casos+ F$S ,uede ser
corregido ,or tera,ia 2armacol3gica/ El an8lisis del F$ se usa tam(i'n ,ara medir la
dis,ersi3n del F$+ la di2erencia entre los &alores m8*imo ) mnimo del F$/ a dis,ersi3n
del F$ es una medida de la homogeneidad de la des,olarizaci3n &entricular/ El monitoreo
del segmento S$ se ,iensa como una a)uda en la e&aluaci3n de is.uemia de miocardio
en ,acientes con la en2ermedad conocida o sos,echa de arteria coronaria/ El algoritmo
del segmento S$ se ha ,ro(ado ,ara la certeza de datos del segmento S$+ ) una (ase de
datos se ha usado como herramienta ,ara ,ro(ar el desem,e7o en algunos modernos
e.ui,os/ Un medico de(e determinar el signi2icado de los cam(ios del segmento S$/ Es
necesario+ ,ues+ no ,erder de &ista el gran &alor .ue tiene la clnica+ )a .ue en 2unci3n
de 'sta se han de inter,retar los E#G/ as caractersticas del E#G normal :2igura incluida
en el te*to6/ "nte un E#G ha) .ue estudiar sistem8ticamente di2erentes ,ar8metros+
,ara lo cual se de(en conocer los lmites normales de cada uno de ellos/
OBJETIVO GENERAL
#onocer las di2erentes lneas de trazo de un E#G/
OBJETIVOS ESPECIFICOS
4 #om,arar las lneas de trazo ,ara las deri&aciones (i,olares+ aumentadas )
mono,olares en el E#G/
4 !(tener la 2recuencia cardiaca en un trazo de E#G/
4 #onocer la metodologa ,ara utilizar el ,olgra2o como herramienta de medici3n )
an8lisis del E#G/
MATERIAL Y EQUIPO
Instrumental ) e.ui,o
a6 Polgra2o transductor ,ara "m,li2icaci3n de se7ales (iol3gicas/
(6 Estuche de #iruga/
c6 Ao5as de (istur del no/ =>/
d6 Disector de &idrio/
e6 #am,ana de desecaci3n/
26 $a(la ,ara rana/
g6 "lgod3n/
h6 Veringas de ? o =@ ml/
i6 Ailo de algod3n/
56 Goteros/
W6 Franela/
l6 Guantes/
Material (iologico
a6 Rata+ rana o sa,o de m8s de ?@@g/
Soluciones ) reacti&os
a6 Soluci3n Ringer sin #alcio ,ara rana- Na#l G/@ g+ P#l @/@GN? g+ NaA#!G @/@? g+
a2orar a @/? con agua destilada/
(6 Soluci3n Ringer con #alcio ,ara rana- Na#l G/@ g+ P#l @/@GN? g+ #a#l> @/@? g+
NaA#!G @/@? g+ a2orar a @/? con agua destilada/ De esta soluci3n ,oner en
re2rigeraci3n =@@ ml+ ,or G horas mnimo ) al utilizarla tomar la tem,eratura/
c6 Soluci3n de E,ine2rina o "drenalina- Reconstituir con = m de soluci3n reguladora
de 2os2atos el contenido de un 2rasco &ial ,ara o(tener la soluci3n al @/= mmolX/
a soluci3n reguladora de 2os2atos a ,A Y N se ,re,ara con ?@@ mg de 2os2ato
di(8sico de ,otasio anhidro ) G@= mg de 2os2ato mono(8sico de ,otasio+ a2orar a
=/ "5ustar el ,A a N con 8cido 2os23rico o hidr3*ido de ,otasio/ Pre,arar =@@ m/
Realizar c8lculos/
d6 Soluci3n de #lorhidrato de E2edrina- #olocar =/@@Jg de clorhidrato de e2edrina en
un matraz a2orado de ?@ m ) a2orar con agua destilada ,ara o(tener una
soluci3n @/= M/
e6 Soluci3n de #loruro de "cetilcolina- #olocar @/J@J g de cloruro de acetilcolina en
un matraz a2orado de ?@ m ) a2orar con agua destilada ,ara o(tener una
soluci3n de @/=M/
METODOLOGA
PRIMER" P"R$E/
a6 "nestesiara el animal con 'ter dentro de una cam,ana de desecaci3n+ cuidando
.ue el animal no de5e de res,irar/
(6 "marrar con hilo de algod3n a la ta(la//
c6 e&antar la ,iel del ,echo cuidando .ue la ,arte e*terna no to.ue el interior del
organismo+ ,ues a.u'l contiene to*inas :,articularmente el sa,o6/
d6 Recortar las costillas del lado iz.uierdo ,ara de5ar descu(ierto el coraz3n/
e6 #olocar los electrodos de a cuerdo con la deri&aci3n a%R+ registrar en el ,olgra2o el
E#G/
26 Se a,licar8n cada una de las soluciones de la T(U a la TeU+ registrando los cam(ios .ue
suceden manteniendo la estimulaci3n/ Para la soluci3n T(U se a,licar8 ,rimero a.uella
a tem,eratura am(iente ) ,osteriormente la re2rigerada+ anotando la tem,eratura/
g6 Registre el trazo del E#G ,ara las di2erentes condiciones+ im,rimiendo a un tiem,o de
im,resi3n de >? mmXsec/
h6 "notar todas las o(ser&aciones ) realizar la e*,erimentaci3n con el orden dado de las
soluciones/
SEGUND" P"R$E
a6 Desengrase la ,iel con una torunda em(e(ida con 'ter o alcohol so(re la ,iel del
com,a7ero al .ue se le tomara el E#G/ as u(icaciones son de acuerdo a la
siguiente lista-
Electrodo del (razo derecho- lnea a*ilar in2erior a la altura de la ,unta cardiaca/
Electrodo del (razo iz.uierdo- lnea a*ilar in2erior a la altura de la ,unta cardiaca/
Electrodo de la ,ierna- lnea a*ilar a ni&el de las ultimas costillas/
(6 #olo.ue los electrodos en las ,osiciones antes indicadas
c c6 #on los caimanes del ,olgra2o haga un (uen contacto con los electrodos
d d6 Registre con el ,olgra2o con las siguientes condiciones-
#onstante de tiem,o @/@G segundos/
Aicut =@@/
Sensi(ilidad @/> %Xdi&/
c6 !(tenga las deri&aciones aumentadas :a%R+ a% ) a%F6/ Im,rimi'ndolas a un
tiem,o de im,resi3n de >? mmXsec/
RESULTADOS
=/ #alcule la 2recuencia cardiaca del su5eto de estudio/
>/ #om,are los &alores de am,litud ) direcci3n de los trazos aumentados o(tenidos en la
,ractica con los re,ortados en la (i(liogra2a/
"ne*ar co,ias de los E#G o(tenido en la ,r8ctica/
ANLISIS Y DISCUSIN DE RESULTADOS
=/ Discuta los e2ectos de las sustancias a,licadas al coraz3n durante la ,rimera ,arte de
la e*,erimentaci3n/
>/ Discuta las di2erencias entre las distintas deri&aciones o(tenidas en la segunda ,arte
de la e*,erimentaci3n/
CUESTIONARIO
=/4 DFu' es el tri8ngulo de Ne(hE
>/4 DFu' es el tri8ngulo de Eintho&enE
G/4 D#u8les son las ,rinci,ales ondas ,resentes en el trazo del E#GE
H/4 De2ina- 2recuencia cardiaca+ ritmo sinusal+ ritmo ect3,ico+ inter&alo RR+ inter&alo PR+
inter&alo F$+ onda P+ #om,le5o FRS+ onda $+ onda U+ inclinaci3n S$+ e5e el'ctrico del
coraz3n/
?/4 D#u8les son las deri&aciones mono,olares en el registro del E#G est8ndar+ ) en .ue
lugar se colocan los electrodos ,ara o(tenerlasE
M/4 D#u8les son las deri&aciones aumentadas en el registro del E#G est8ndar+ ) en .ue
lugar se colocan los electrodos ,ara o(tenerlasE
N/4 D#u8les son las deri&aciones ,recordiales en el registro del E#G est8ndar+ ) en .ue
lugar se colocan los electrodos ,ara o(tenerlasE
I/4 DFu' es el circulo cardiacoE
J/4 DFu' signi2ican los siguientes t'rminos- in2arto del miocardio+ is.uemia miocardica+
crecimiento auricular+ so(recargas &entricularesE
=@/4 D#omo a2ectan los trastornos meta(3licos en el registro del E#GE
==/4 D#3mo a2ectan los e2ectos 2armacol3gicos en el registro del E#GE
=>/4 D#3mo se calcula la 2recuencia cardiaca en el registro im,reso del res,ecto a la
&elocidad del E#GE/ E*,li.ue la t'cnica de mm a tiem,o o de =@ segundos en el com,le5o
R4R :,8g/ >N del li(ro TIntroducci3n a la electrocardiogra2aU6/
=G/4 Realice un cuadro en el .ue se indi.ue el c3digo de colores de acuerdo con las
normas euro,eas ) americanas ,ara las terminales de los ca(les del ,aciente/
CONCLUSIONES
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1. Dubin D. B. Linder U.K.; In!r"du##i$n % &% e&e#!r"#%rdi"'r%()%. M*!"d" %u!"did%#!i#"
de in!er+re!%#i$n de& ECG,; Ed. -+rin'er./er&%' Ib*ri#%.
>/ Ganong+ R/0 TFisiologa M'dicaU0 Ed/ El manual moderno/
G/ Gu)ton+ "/0 T$ratado de Fisiologa M'dicaU0 Ed/ Interamericana/
H/ $ortora+ G/V/ ) "nastaWos+ N/P/0 TPrinci,ios de "natoma ) FisiologaU0 Ed/ Aarla/
?/ Rilson+ V/ 0 TFisiologa "nimalU0 Ed/ Interamericana/
M/ Farreras+ Rozman0 TMedicina InternaU0
N/ AarrisonZs0 TPrinci,ios de medicina internaU0

PRCTICA No. 4
FISI!!GS" MUS#U"R :EMG6
INTRODUCCIN
Dentro del estudio electro2isiol3gico neuromuscular se encuentra la electromiogra2a+
tam(i'n conocida (a5o el nom(re de electromiograma/ Mediante el electromiograma
:EMG6 es ,osi(le de2inir dos ,atrones+ mio,8tico ) neuro,8tico+ cu)as ,rinci,ales
caractersticas se detallan en la siguiente ta(la/
C"("%')(is'i%"s
)&)%'(ofisio&5i%"s
N)u(o!6'i%o Mio!6'i%os
Re,oso Fi(rilaci3n+ o
,resencia de ondas
lentas
Silencio el'ctrico o
alg1n elemento de
2i(rilaci3n
"cti&idad aislada de
unidades motoras
:PUM6
Duraci3n
"m,litud
Politasia
"umentada
"umentada
"umentada
"cortada
Disminuida
"umentada
Patr3n de m8*imo
es2uerzo
Inter2erencia
"m,litud media
Disminuida
Normal o aumentada
"umentada
Disminuida
Neurogra2a %elocidad de conducci3n Normal o disminuida Normal
Neurogra2a motora "m,litud del ,otencial
e&ocado
Normal o disminuida Normal o
disminuida
P(i%i!"&)s %"("%')(7s'i%"s )&)%'(ofisio&5i%"s d) &os !"'(o)s +io!6'i%o * )u(o!6'i%o
PUM- Potencial de Unidad Motora/
En caso de dener&aci3n+ cuando el m1sculo se halla en re,oso se
,ueden o(ser&ar ,otenciales es,ont8neos anormales+ como las 2i(rilaciones
) las 2asciculaciones/ as 2i(rilaciones re,resentan contracciones de 2i(ras
musculares desner&adas ) .ue se e*citan al contacto con sustancias
colin'rgicas circulantes a las .ue se han hecho e*tremadamente sensi(les/
as Fasciculaciones re,resentan contracciones es,ont8neas de los m1sculos
corres,ondientes a una unidad motora+ gru,o de 2i(ras musculares
iner&adas ,or una misma 2i(ra ner&iosa/ Estas contracciones ,ueden llegar a
&erse como ser,enteos (a5o la ,iel/ En el EMG+ las 2asciculaciones a,arecen
como ondas de am,litud ) duraci3n su,erior a las de las 2i(rilaciones/
Generalmente se de(en a irritaci3n o dener&aci3n de las unidades motoras
,or lesi3n de la motoneurona del asta anterior medular+ como se o(ser&a en
la esclerosis lateral amiotr32ica ) la atro2ia muscular es,inal ,rogresi&a/ En
las en2ermedades musculares como las distro2ias+ la destrucci3n de algunas
2i(ras reduce el n1mero de 2i(ras de la unidad motora+ ,or lo .ue los
,otenciales de unidad motora :PUM6 ,resentan una duraci3n acortada ) una
am,litud disminuida 5unto a gran ,oli2asia :PUM con m8s de cuatro 2ases6/
En los casos de dener&aci3n ) ,osterior reiner&aci3n+ el n1mero de 2i(ras
musculares iner&adas ,or una misma 2i(ra ner&iosa est8 mu) aumentado+
,or lo .ue en el EMG se a,recian PUM de ma)or duraci3n ) am,litud+ )
tam(i'n gran ,oli2asia/ a ,r8ctica del EMG es o(ligada en el estudio de
,acientes a2ectos de una ostenta(le mio,ata ) ,ara la &aloraci3n de los
tem(lores+ )a .ue ,ueden ,recisar su recurrencia ) caractersticas/
El estudio neurogr82ico resulta de gran utilidad ,ara analizar las
alteraciones del ner&io ,eri2'rico ) ,oder discernir si la lesi3n es
,rinci,almente a*onal o mielnica/ os ner&ios .ue se han de estudiar
de,enden de la sintomatologa clnica ,ero las 8reas m8s com1nmente
estudiadas son el %II ,ar craneal+ las 2i(ras del ,le*o (ra.uial+ ) los ner&ios
mediano+ cu(ital+ radial+ ci8tico+ ,o,lteo e*terno o ,eroneo+ ci8tico ,o,lteo
interno+ ti(ial ,ostrior ) sural/
En la ,agina siguiente se muestran algunos de los distintos e&entos registrados
con la t'cnica electromiogra2ica :EMG6/ "/ Potenciales ,or 2i(rilaciones es,ontaneas )
ondas ,ositi&as (ruscas/ B/ Descargas com,le5as re,etiti&as registradas en un m1sculo
,arcialmente dener&ado/ #/ Potencial de acci3n normal de una unidad motora tri2asica/ D/
Potencial de acci3n ,e.ue7o ) de corta duraci3n de una unidad motora ,oli28sica .ue es
com1nmente encontrado en desordenes mio,aticos/ E/ Potencial de acci3n de larga
duraci3n de una unidad motora ,oli28sica .ue se muestra generalmente en trastornos
neuro,8ticos/
OBJETIVO
GENERAL
"nalizar el trazo de un EMG (a5o di2erentes
condiciones/
OBJETIVO E!ECI"ICO
[ #om,arar los e2ectos de la estimulaci3n sim,8tica ) ,arasim,8tica/
[ E*,licar los e2ectos .ue tienen los neurotransmisores+ iones ) tem,eratura so(re la
2isiologa muscular/
[ Utilizar como herramienta de medici3n ) an8lisis el EMG/
#ATERIAL $ E%UI!O
Instrumental ) E.ui,o
m6 Polgra2o transductor ,ara "m,li2icaci3n de se7ales (iol3gicas/
n6 Batera de J &olts de corriente directa/
o6 Base ,ara (atera de J &olts de corriente directa/
d6 Estuche de #iruga/
e6 Ao5as de (istur del no/ =>/
26 Disector de &idrio/
g6 $a(la ,ara rana/
h6 "lgod3n/
i6 Veringas de ? o =@ ml/
56 Ailo de algod3n/
W6 Goteros/
l6 Franela/
m6 Guantes ,ara ciru5ano/
Material Biol3gico
a6 Rata+ rana o sa,o de m8s de ?@@g/
Soluciones ) reacti&os-
26 Soluci3n Ringer sin #alcio ,ara rana- Na#l G/@ g+ P#l @/@GN? g+ NaA#!G @/@? g+ a2orar
a @/? con agua destilada/
g6 Soluci3n Ringer con #alcio ,ara rana- Na#l G/@ g+ P#l @/@GN? g+ #a#l> @/@? g+ NaA#!G
@/@? g+ a2orar a @/? con agua destilada/ De esta soluci3n ,oner en re2rigeraci3n =@@
ml+ ,or G horas mnimo ) al utilizarla tomar la tem,eratura/
h6 Soluci3n de E,ine2rina o "drenalina- Reconstituir con = m de soluci3n reguladora de
2os2atos el contenido de un 2rasco &ial ,ara o(tener la soluci3n al @/= mmolX/ a
soluci3n reguladora de 2os2atos a ,A Y N se ,re,ara con ?@@ mg de 2os2ato di(8sico
de ,otasio anhidro ) G@= mg de 2os2ato mono(8sico de ,otasio+ a2orar a =/ "5ustar el
,A a N con 8cido 2os23rico o hidr3*ido de ,otasio/ Pre,arar =@@ m/ Realizar c8lculos/
i6 Soluci3n de #lorhidrato de E2edrina- #olocar =/@@Jg de clorhidrato de e2edrina en un
matraz a2orado de ?@ m ) a2orar con agua destilada ,ara o(tener una soluci3n @/=
M/
56 Soluci3n de #loruro de "cetilcolina- #olocar @/J@J g de cloruro de acetilcolina en un
matraz a2orado de ?@ m ) a2orar con agua destilada ,ara o(tener una soluci3n de
@/=M/
METODOLOG-A
PRIMER" P"R$E/
i6 Descere(rar el animal mediante ,unci3n o corte con ti5era/
56 "marrar con hilo de algod3n a la ta(la//
W6 e&antar la ,iel del muslo cuidando .ue la ,arte e*terna no to.ue el interior del
organismo+ ,ues a.u'l contiene to*inas :,articularmente el sa,o6/
l6 Recortar en las ,orciones distal ) ,ro*imal del 2'mur cuidando .ue la mem(rana .ue
recu(re estos no su2ra da7os/
m6 #olocar los electrodos en las inserciones de los m1sculos ) registrar en el ,olgra2o el
EMG/
n6 #onectar las terminales de la (atera de J &olts en las inserciones del m1sculo m8s
grande con el 2in de estimular+ el estimulo no de(e de ser constante+ )a .ue esto
,odra ocasionar la tetanizaci3n del m1sculo/ Registrar el EMG/
o6 Se a,licar8n cada una de las soluciones de la T(U a la TeU+ registrando los cam(ios .ue
suceden manteniendo la estimulaci3n/ Para la soluci3n T(U se a,licar8 ,rimero a.uella
a tem,eratura am(iente ) ,osteriormente la re2rigerada+ anotando la tem,eratura/
,6 "notar todas las o(ser&aciones ) realizar la e*,erimentaci3n con el orden dado de las
soluciones/
SEGUND" P"R$E/
d6 #olo.ue dos electrodos con adhesi&o en un m1sculo de 28cil control como el (ice,s
(ra.uial o trce,s (ra.uial/
e6 #on los caimanes del ,olgra2o haga un (uen contacto con los electrodos/
26 Registre con el ,olgra2o las contracciones controladas como d'(il+ media ) 2uerte
,ara el su5eto de estudio/
REULTADO
=/4 Realice un cuadro .ue contenga- soluci3n+ e2ecto en el EMG ) o(ser&aciones+ seg1n
sus o(ser&aciones en la ,rimera ,arte de la e*,erimentaci3n/
>/4 #om,are los distintos ti,os de contracci3n en la segunda ,arte de la e*,erimentaci3n/
AN&LII $ DICUIN DE REULTADO
CUESTIONARIO
=/4 D#u8ntas ) cu8les son los di2erentes ti,os de contraccionesE/
>/4 D#u8l es el &alor diagn3stico del electromiogramaE/
G/4 De2ina los siguientes t'rminos- mio,8tico+ neuro,8tico+ tetania+ miastenia gra&is+ tono
muscular+ distro2ia muscular+ atro2ia e hi,ertro2ia muscular+ 2recuencia de una onda+
longitud de onda/
H/4 DFu' es la estimulaci3n sim,8tica ) ,arasim,8ticaE
?/4 In&estigar los ,otenciales de re,oso+ acci3n ) um(ral del m1sculo es.uel'tico en rana
) humano/ #orro(orar con los medidos en el EMG de la ,r8ctica/
M/4 Formar un cuadro en el .ue se mencionen todos los ti,os de rece,tores adren'rgicos
) colin'rgicos+ su(ti,os+ u(icaci3n en el sistema cardio&ascular ) 2unci3n4e2ecto/
Nota- ane*ar co,ias del EMG o(tenido en la ,r8ctica ) ,osi(le inter,retaci3n/
N/4 realice un cuadro en el .ue se indi.uen los ,rinci,ales m1sculos del miem(ro su,erior+
inclu)endo el nom(re+ su origen e inserci3n+ acci3n e inner&aci3n/
I/4 realice un cuadro en el .ue se indi.uen los ,rinci,ales m1sculos del miem(ro in2erior+
inclu)endo el nom(re+ su origen e inserci3n+ acci3n e iner&aci3n/
CONCLUIONE
REFERENCIAS RECOMENDADAS
Ganong+ R/0 TFisiologa M'dicaU0 Ed/ El manual moderno/
Gu)ton+ "/0 T$ratado de Fisiologa M'dicaU0 Ed/ Interamericana/
$ortora+ G/V/ ) "nastaWos+ N/P/0 TPrinci,ios de "natoma ) FisiologaU0 Ed/ Aarla/
Rilson+ V/ 0 TFisiologa "nimalU0 Ed/ Interamericana/

PR"#$I#" No/ ?
DETERMINACIN DE LA PRESIN ARTERIAL
OB,ETIVOS
E*,licar el conce,to de Presi3n Sangunea
Medir la Presi3n Sangunea utilizando un Bauman3metro/
Identi2icar la ,resi3n sist3lica ) diast3lica
"nalizar algunos 2actores .ue a2ectan la Presi3n Sangunea
INTRODUCCIN
L% +re0i$n 0%n'u)ne% e0 un% 1edid% de &% (uer2% 3ue 0e %+&i#% 0"bre &%0 +%rede0 de
&%0 %r!eri%0 % 1edid% 3ue e& #"r%2$n b"1be% 0%n're % !r%4*0 de& #uer+". L% +re0i$n
e0!5 de!er1in%d% +"r &% (uer2% 6 e& 4"&u1en de 0%n're b"1be%d%7 %0) #"1" +"r e&
!%1%8" 6 &% (&e9ibi&id%d de &%0 %r!eri%0.
os &alores de re2erencia de la ,resi3n arterial son-
Presi3n "rterial
=I4>@ a7os =@?4=H@ X M>4II
??4M? a7os ==?4=N@ X N@4=@@
as lecturas de la ,resi3n sangunea se dan usualmente en dos n1meros- ,or e5em,lo
==@ so(re N@ :escrito ==@XN@/ El ,rimer n1mero se denomina lectura de la T,resi3n
sangunea sist3licaU ) re,resenta la ,resi3n m8*ima e5ercida cuando el coraz3n se
contrae/ El segundo n1mero :el m8s (a5o6 se llama lectura de T,resi3n sangunea
diast3licaU ) re,resenta la ,resi3n en las arterias cuando el coraz3n se encuentra en
re,oso/
"lgunos 2actores .ue a2ectan la ,resi3n sangunea son-
"cti&idad Fsica+ la ,resi3n sangunea es generalmente m8s alta durante el
e5ercicio e inmediatamente des,u's de 2inalizado el mismo ) m8s (a5a cuando el
cuer,o est8 en re,oso/
Aora del da+ la ,resi3n sangunea 2luct1a cuando estamos des,iertos ) es m8s
(a5a cuando dormimos/
Estados de "nimo+ las emociones :miedo+ eno5o o 2elicidad6 ,ueden a2ectar la
,resi3n sangunea/
Estr's+ 2sico o emocional ,uede ele&ar la ,resi3n sangunea/
a edad+ la altura+ el ,eso+ el se*o ) la dieta/
En2ermedades+ renal o cardio,ata/
MATERIAL Y EQUIPO
Bauman3metro
Estetosco,io
METODOLOGA
1.. De0#ubrir &% +%r!e 0u+eri"r de& br%2" de& %&u1n" :1%n'%0 de &% #%1i0% d"b&%d%7
+er" 0in %+re!%r ni in#"1"d%r;
>/4 El alumno de(e sentarse con el (razo a,o)ado so(re la mesa ) un ,oco
do(lado de manera .ue est' al mismo ni&el del coraz3n/
G/4 #olocar el (razalete ) a5ustarlo en la ,arte su,erior del (razo+ de tal manera .ue el
(orde in2erior del (razalete est' a >/? cm ,or encima del ,liegue del codo/
H/4 El dis,ositi&o de audici3n del estetosco,io se coloca en los odos de .uien &a a tomar
la ,resi3n ) el otro e*tremo del instrumento so(re la arteria+ de(a5o del (razalete/ :la
u(icaci3n correcta del estetosco,io es im,ortante ,ara o(tener un registro e*acto ) no
de(e rozar el (razalete o cual.uier ,renda de &estir/
?/4 #errar la &8l&ula en el mango in2lador de caucho e in2lar el (razalete hasta .ue el
medidor o columna de mercurio mar.ue >@@ mm Ag/
M/4 "(rir la &8l&ula lentamente+ de5ando .ue la ,resi3n disminu)a en 2orma gradual :> a
G mm Ag6 " medida .ue la ,resi3n disminu)e+ se registra el ni&el en el medidor o tu(o
de mercurio en el cual se escucha el ,rimer ,ulso .ue corres,onde a la ,resi3n sist3lica/
" medida .ue el aire contin1a saliendo+ los sonidos desa,arecen+ se registra el ,unto en
el cual el sonido desa,arece+ lo cual corres,onde a la ,resi3n diast3lica :la cantidad m8s
(a5a de ,resi3n en las arterias cuando el coraz3n est8 en re,oso6
N/4 a Presi3n se tomara en condiciones normales ) des,u's de 2umar )Xo hacer e5ercicio/
RESULTADOS
SE;! PES! ED"D
F M :Pg6
SE;! FUM"R A"#ER EVER#I#I!
F M Normal Res,uesta Normal Res,uesta
ANALISIS Y DISUSI!N DE RESULTADOS
Determinar como a2ectan los 2actores estudiados en la determinaci3n de la Presi3n
Sangunea
UESTIONARIO
=/ DDescri(a la di2erencia entre Sstole ) Di8stoleE
>/ DFue es la Presi3n Sangunea "ltaE
G/ DFue es la Presi3n Sangunea Ba5aE
H/ DSe o(tu&o la misma Presi3n Sangunea en todos los casosE
?/ DFu' otros m'todos e*isten ,ara medir la Presi3n SanguneaE
M/ DEn .ue otros sitios anat3micos se ,uede tomar la Presi3n Sanguinea
N/ DDescri(a el 2undamento del (auman3metro utilizado ,ara determinar la Presi3n
SanguneaE
ONLUSIONES
Realice sus conclusiones con (ase en sus resultados o(tenidos/
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
G"N!NG F+ Rilliam+ Fisiologa Mdica+ Ed/ El Manual Moderno+ M'*ico+ =JII/
$!R$!R"+ V Gerard+ Principios de Anatoma y Fisiologa+ Ed/ Aarla+ M'*ico+ =JIJ/
PR"#$I#" No/ M
-E%*@*EF' Y G*'+E9E*EF' DE %@O+EH'*- %I*-/J+E*-
OB,ETIVOS
=/ Se,arar las di2erentes 2racciones ,roteicas de una muestra de sangre/
>/ #uanti2icar el contenido de ,rotena total ) 2raccionada/
G/ #om,arar con las concentraciones re,ortadas en la (i(liogra2a/
INTRODUI!N
as ,rotenas ,lasm8ticas de di&iden en tres gru,os- las al(1minas :seroal(1minas6+
glo(ulinas;# # < ) 2i(rin3geno/ Se encuentran normalmente en el ,lasma sanguneo
humano a una concentraci3n como ,rotenas totales de ?/I a I/@ g X =@@ ml de ,lasma/
Estas ,rotenas interaccionan con te5idos ) c'lulas del organismo ) desarrollan di&ersas
2unciones/ as seroal(1munas son im,ortantes en la regulaci3n osm3tica ) el trans,orte
de 8cidos grasos ,rinci,almente / as -glo(ulinas inter&ienen en el trans,orte de #u )
coagulaci3n sangunea0 las 4glo(ulinas en el trans,orte de l,idos ) Fe0 las -glo(ulinas
2uncionan como anticuer,os ) el 2i(rin3geno como 2actor de coagulaci3n sangunea/
Ias protenas totales y la fraccin de alb8mina se determinar&n en la pr&ctica despu!s de la precipitacin de las globulinas ;con sulfato de
sodio al 0C?<# por medio de la reaccin colorim!trica de .iuret$ Ia diferencia en protenas totales y alb8minas corresponde a globulinas$
MATERIAL Y EQUIPO
a6 Soluci3n de sul2ato de sodio al >GK
(6 Eter etlico
c6 Soluci3n est8ndar de ,rotenas :M/M mgXml6 / Pre,arar =@@ ml/
d6 Reacti&o de Biuret :J/@ g de tartrato do(le de sodio ) ,otasio+ G/@ g de sul2ato de
co(re ,entahidratado ) ?/@ g de )oduro de ,otasio6/ Disol&er ,or se,arado en
a,ro*imadamente =@@ ml de agua destilada/ Si no se disuel&e ) ha) .ue calentar+ se de5a
en2riar antes de realizar el siguiente ,aso/ En un matraz &olum'trico de = lt se ,onen >@@
ml de hidr3*ido de sodio =N ) se a7aden las soluciones de los otros reacti&os/ "l 1ltimo
a7adir la de sul2ato de co(re/ Mezclar (ien durante cada adici3n/ "2orar con agua
destilada ) mezclar cuidadosamente/ En&asar en 2rasco 8m(ar+ )a .ue el reacti&o de
Biuret es susce,ti(le a la luz/
METODOLOGA
#olocar @/? ml de ,lasma en un tu(o de ensa)e/ "dicionar J/? ml de sul2ato de sodio al
>GK/ $a,ar con ,ara2ilm ) mezclar ,or in&ersi3n =@ &eces:sin agitar6/ $omar > ml de la
sus,ensi3n ) colocarlos en un tu(o de ensa)e/ Eti.uetar como ,rotenas totales :tu(o =6/
"gregar G ml de 'ter al resto de la sus,ensi3n/ $a,ar ) mezclar ,or in&ersi3n/ #entri2ugar
a >@@@ r,m durante =@ min/
Des,u's de centri2ugar se de(e o(ser&ar la 2ormaci3n de tres ca,as- la su,erior es la de
'ter+ la intermedia es la de las glo(ulinas ,reci,itadas ) la in2erior .ue de(er8 ser
trans,arente contendr8 a las al(1minas en soluci3n :tu(o >6/ De la ca,a de al(1minas
tomar > ml colocarlos en un tu(o de ensa)e ) eti.uetarlos como al(1minas/
Realizar la siguiente serie de tu(os-
Blanco = > G H ? M
Soluci3n ,atr3n de
,rotenas
; ; ; @/? ml =/@ ml =/? ml >/@ ml
"gua destilada > ml ; ; =/? ml =/@ ml @/? ml @/@ ml
Soluci3n ,rotenas
totales
>/@ ml ; ; ; ; ;
Soluci3n al(1mina ; ; >/@ ml ; ; ; ;
Reacti&o de Biuret H/@ ml H/@ ml H/@ ml H/@ ml H/@ ml H/@ ml H/@ ml
El re&elado de los tu(os se har8 a (a7o Mara a G@4G?\# durante =@ min/ os tu(os se
de5ar8n a tem,eratura am(iente durante ? min ) ,osteriormente se determinar8 la
a(sor(ancia de cada uno de los tu(os a ?H@ nm/
RESULTADOS
Realizar los #ur&a est8ndar con los tu(os del G al M :soluci3n de ,rotena est8ndar6/ #alcular
,or inter,olaci3n la concentraci3n de los tu(os ,ro(lema := ) >6/
#ur&a est8ndar
$u(o #oncentraci3n de ,rotena
est8ndar mgXml
"(s ?H@ nm
Blanco @/@ @/@
G
H
?
M
Pro(lema :tu(o6 A0s 849 + Co%)'("%i: +5;+&
=
>
ANALISIS Y DISUSI!N DE RESULTADOS
CUESTIONARIO
=/4 DPor .u' las glo(ulinas ,reci,itan con sul2ato de sodioE
>/4 Indi.ue detalladamente las 2unciones de las ,rotenas ,lasm8ticas ) la hemoglo(ina/
G/4 Indi.ue el 2undamento de la t'cnica de Biuret/
ONLUSIONES
RE"ERENIAS #I#LIOGRA"IAS
enhinger + "/ Bio.umica/
PR"#$I#" No/ N
HEMOSTASIA
OB,ETIVOS
=6 Realizar algunas ,rue(as cl]nicas en sangre in&olucradas en el ,roceso de la
hemostasia/
>6 #om,arar los resultados o(tenidos con los &alores de re2erencia/
G6 E*,licar la relaciCn e*istente entre cada una de las ,rue(as ) el ,roceso hemostLsico/
INTRODUCCI<N
a hemostasia es un con5unto de 2enCmenos .ue com(aten ) detienen el
sangrado de un &aso sangu]neo lesionado/ #om,rende cam(ios 2]sicos )
(io.u]micos .ue normalmente son desencadenados ,or la lesiCn de los
te5idos ) &asos sangu]neos/ El ,roceso hemostLsico culmina en la
trans2ormaciCn de la sangre l].uida en un trom(o o coLgulo sClido .ue ta,a
e2icazmente los &asos rotos/
os mecanismos ,or los cuales se lle&a a ca(o el ,roceso hemostLsico com,renden la &]a
intr]nseca ) la e*tr]nseca0 am(os mecanismos in&olucran 2actores de coagulaciCn
es,ec]2ico/ Inde,endientemente del mecanismo ,or el cual se lle&e a ca(o la coagulaciCn
sangu]nea este mecanismo ,uede resumirse en tres eta,as generales-
=6 InducciCn de la acti&idad de trom(o,lastina
>6 $rans2ormaciCn de ,rotrom(ina en trom(ina
G6 ProducciCn de 2i(rina a ,artir de 2i(rinCgeno
METODOLOGA
=6 Muestreo de sangre/4 El anticoagulante a utilizar serL citrato de sodio al G/IK :@/=G
M6/ Se agregarLn nue&e &ol^menes de sangre a un &ol^men de citrato/ a sangre se
e*traerL con una 5eringa ) citratada se centri2ugarL de G@@@ a H@@@ r,m durante =@
minutos/ !(tener una muestra de sangre sin anticoagulante ,ara tiem,o de
coagulaciCn/
>6 $iem,o de sangrado/4 #olocar el es2ingomanCmetro en el (razo ) mantener una
,resiCn de H@ mmAg/ #on una lanceta en la su,er2icie ,ul,ar de los dedos e2ectuar
una incisiCn de = mm de ,ro2undidad/ #ada G@ segs secar con ,a,el 2iltro el e*ceso
de sangre ,rocurando no tocar los (ordes de la herida/ Se considera terminada la
,rue(a cuando la sangre )a no mancha el ,a,el 2iltro/
G6 $iem,o de trom(o,lastina ,arcial acti&ada/4 @/= m de ,lasma ) @/= m de
2os2ol],ido4caol]n son ,reincu(adoa a GN_# ,or M minutos/ "gregar @/= m de cloruro
de calcio ) registrar el tiem,o de coagulaciCn/
H6 $iem,o de ,rotrom(ina/4 @/= m de ,lasma ) @/= m de cere(ro humano se
incu(an a GN_# durante G minutos/ Posteriormente agregar @/= m de cloruro de calcio
) registrar el tiem,o de coagulaciCn/
?6 $iem,o de coagulaciCn /4 #olocar G m de sangre sin anticoagulante en un tu(o de
ensa)e/ $omar el tiem,o al cual se 2orma el coLgulo/ Esta misma muestra se de5a a
GN_# durante = h ,ara o(ser&ar la retracciCn del coLgulo/
M6 RetracciCn del coLgulo/4 Se colocan G m de sangre en un tu(o de ensa)e ) se
mide la altura de la sangre en mm/ Se coloca el tu(o en un (a7o de agua a GN_# ) se
toma el tiem,o/ Des,u`s de =@ min se a2lo5a el coLgulo con una ,unta de &idrio/
Des,^es de una hora se saca el coLgulo ) se mide la altura del suero : si tiene
eritrocitos ha) .ue centri2ugar6/ #alcular la cantidad de suero e*,resada en K-
:"ltura de la columna del sueroX "ltura de la columna de sangre6 ; =@@
N6 Solu(ilidad del coLgulo en urea/4 #olocar @/? m de ,lasma ) @/= m de trom(ina/
Retirar el coLgulo con una &arilla de &idrio ) la&arlo con soluciCn salina 2r]a / #olocarlo
en un tu(o con = m de urea ?M ) se de5a re,osar a tem,eratura am(iente toda la
noche/ a ,rue(a se considera negati&a si el coLgulo no se disuel&e en => horas/
ANALISIS = DISCUSIN DE RESULTADOS
CUESTIONARIO
=6 Descri(a las &]as intr]nseca ) e*tr]nseca del ,roceso hemostLsico/
>6 D Fu` indican los &alores o(tenidos 2uera de los &alores de re2erencia E
G6 D Por .u` el coLgulo se disuel&e en urea E
H6
CONCLUSIONES
REFERENCIAS BIBLIOGRAF>CAS
=6 Pru,,+ M/+ Manual de DiagnCstico cl]nico ) de la(oratorio+ Ed/ Manual Moderno/
>6 )nch+ R/+ M`todos de la(oratorio+ %ol =/+ Ed/ Interamericana/
PR"#$I#" No/ I
DEG@E-E-
OBJETIVOS
=/ "nalizar los 2actores ,rinci,ales .ue modi2ican la eliminaci3n de agua ,or el ri73n/
>/ Determinar los cam(ios so(re el &olumen ) las caractersticas de la orina 2ormada/
INTRODUCCIN
El ri73n tiene un im,ortante ,a,el homeost8tico en el mantenimiento del &olumen ) la
com,osici3n de los l.uidos cor,orales/ a ma)ora de los ,roductos de e*creci3n+
a,arecen en el 2iltrado glomerular ) se rea(sor(en incom,letamente en los t1(ulos
renales/ !tras sustancias ,ueden tam(i'n ser secretadas ,or las c'lulas tu(ulares
renales a la orina tu(ular ) de esta 2orma eliminarse del organismo/ #iertas sustancias
e*,erimentan rea(sorci3n ) tam(i'n secreci3n/ Por lo tanto los 2actores im,ortantes ,ara
la determinaci3n del &olumen ) la com,osici3n de la orina son- =6 2iltraci3n glomerular +
>6rea(sorci3n tu(ular ) G6 secreci3n tu(ular/
"lgunas sustancias ,ueden aumentar la &elocidad de 2ormaci3n de la orina+ t'rmino .ue
se conoce como diuresis/ Este t'rmino im,lica ,or un lado el aumento del &ol1men de la
orina per se ) ,or otro la ,'rdida neta de soluto ) agua/
as 2unciones renales inclu)en- la eliminaci3n en soluci3n de sustancias s3lidas de
desecho : ,or e5em,lo ,roductos 2inales del meta(olismo ,roteico6 ) sustancias e*tra7as
:colorantes60 regulaci3n del e.uili(rio hdrico ) regulaci3n del e.uili(rio 8cido4(8sico ) de
la e*creci3n de electrolitos/
MATERIAL Y REACTIVOS
"gua ,ota(le
"gua destilada
Disoluci3n de (icar(onato de sodio al @/HK
"z1car
Pa.uete de cigarrillos
Be(ida alcoh3lica :cer&eza6
%asos ,ara (e(er
%asos de ,reci,itados ,ara recolectar la orina
Pro(etas graduadas de =@ m
$iras reacti&as ,ara el diagn3stico de orina
B8scula
METODOLOGA
Es recomenda(le .ue los alumnos .ue &an a tomar alguna de las sustancias a ,ro(ar no
ingieran alimentos o (e(idas > horas antes de iniciar el e*,erimento/ os alumnos .ue
,resenten alg1n ,ro(lema circulatorio o renal o lle&en alg1n tratamiento m'dico no
de(en ,artici,ar en los e*,erimentos/
Se di&idir8n los e.ui,os en seis gru,os-
$R"$"MIEN$!
Gru,o = =@ m de agua ,ota(le ,or Pg de ,eso
Gru,o > ? m de (icar(onato de sodio ,or Pg
de ,eso
Gru,o G ?@@ m de (e(ida alcohClica :cer&eza6
Gru,o H Fumar un cigarrillo cada media hora
durante el ,eriodo .ue dure la ,rue(a
des,u`s de ha(er ingerido =@ m de
agua ,or Pg de ,eso
Gru,o ? Realizar e5ercicio intenso durante ?
minutos
Gru,o M =@ m de agua ,ota(le ,or Pg de ,eso
con G@@ g de azucar
Gru,o N #ontrol
"ntes de iniciar la e*,erimentaci3n es im,ortante la recolecci3n de las muestras de orina/
Se &aciar8n las &e5igas ) 'sta orina ser8 el control/
Se iniciar8 la e*,erimentaci3n de acuerdo a las indicaciones anteriormente mencionadas
,ara cada gru,o/ Se tomar8 el tiem,o ) a ,artir de ese momento se recolectar8n
muestras de orina cada G@ minutos durante > horas G@ minutos/ Se determinar8 el ,eso
es,ec2ico de la orina con las tiras reacti&as/
RESULTADOS
Medir el &ol1men de orina en una ,ro(eta ) e*,resar los resultados en m de orina X
min ) en relaci3n con el &olumen acumulado/
$iem,o de la ,rue(a
:min6
!rina mXmin %olumen de orina
acumulada :m6
@
G@
M@
J@
=>@
=?@
a cantidad de soluto se determinar8 a ,artir del ,eso es,ec2ico de la orina em,leando el
coe2iciente de ong/ os gramos de soluto e*cretado ,or litro de orina se calculan
multi,licando las dos 1ltimas ci2ras decimales del ,eso es,ec2ico ,or el 2actor >/MM/
Determinar el ,A de cada una de las muestras ) anotar los resultados/ #om,ararlo con
res,ecto al tratamiento de cada gru,o/
Finalmente se determinar8 el tiem,o re.uerido ,ara eliminar la sustancia ingerida
considerando .ue en condiciones normales la &elocidad de la 2ormaci3n de la orina es de
a,ro*imadamente = mXPgXh/
Presentar los siguientes datos- :"NE;! =6/
ANALISIS Y DISCUSIN DE RESULTADOS
CUESTIONARIO
=6 De2ina la estructuras 2uncionales del ri73n/
>6 E*,li.ue cual es el e2ecto de cada uno de los tratamientos e*,erimentados/
G6 In&estigue .ue hormonas est8n in&olucradas en la diuresis+ .u' 2actores estimulan su
li(eraci3n ) cual es su sitio de acci3n/
CONCLUSIONES
REFERENCIAS BIBLIOGRAF-CAS
=6 Goodman ) Gilman+ as (ases 2armacol3gicas de la tera,e1tica+ se*ta edici3n+ Ed/
Panamericana+ =JI>/
>6 Pru,,/+ et+ al/ + Diagn3stico clnico ) de la(oratorio+ octa&a edici3n+ Ed/ El Manual
Moderno+ =JIM/
ANE?O 1
Nom(re-
Aora de la 1ltima micci3n antes del inicio de la ,rue(a-
Disoluci3n ingerida - %olumen-
Peso cor,oral-
Muestra Aora m de
orina
Flu5o de
orina
m X
min
Peso
es,ec]2ic
o
#antida
d de
soluto
,A "s,ecto
%olumen total de orina e*cretada -
PRCTICA. No. @
GRUPOS SANGU-NEOS
OB,ETIVOSA
- #onocer el sistema de gru,os sanguneos "B! ) Rh/
- Determinar la 2recuencia de a,arici3n en la ,o(laci3n estudiada/
INTRODUCCIN
En la mem(rana de los gl3(ulos ro5os ) de otras c'lulas se encuentran sustancias
antig'nicas0 ciertos indi&iduos TsecretoresU las e*,ulsan como sustancias solu(les en la
sali&a ) otros l.uidos cor,orales/ Se trata de mol'culas grandes con un ,eso &ecino de =
@@@ @@@+ com,uestas de ,olisac8ridos ) ,oli,',tidos/
En =JJ@+ andsteiner descri(i3 la aglutinaci3n .ue se ,roduca al mezclara los gl3(ulos
ro5os de un su5eto con los de otro/ Este descu(rimiento lle&3 a andsteiner a ace,tar la
e*istencia de tres gru,os sanguneos distintos/ Se descu(ri3 un cuarto gru,o en =J@>/
Estas cuatro clasi2icaciones mencionadas reci(en en la actualidad el nom(re de sistema
de gru,os sanguneos "B!/
andsteiner &i3 tam(i'n .ue solamente se necesita(an dos antgenos ,ara e*,licar los
cuatro gru,os- el ,rimero tena aun antgeno :"6+ el segundo tena el otro :B6+ el tercero
tena los dos :"B6 ) el cuarto no tena ning1n antgeno :!6/
$am(i'n reconoci3 la relaci3n rec,roca en una muestra de sangre entre los anticuer,os
del suero ) los antgenos de los gl3(ulos ro5os/ En cada caso+ con mu) ,ocas
e*ce,ciones+ solamente se encuentran anticuer,os anti4 "+ anti4B+ o am(os en el suero
cuando los gl3(ulos ro5os carecen del antgeno corres,ondiente/ Estas relaciones
a,arecen en el siguiente cuadro-
Gru,o
"ntgeno del gl3(ulo
ro5o
"nticuer,o del
suero
!
"
B
"B
!
"
B
"B
"nti4" ) anti4B
"nti4B
"nti4"
Ninguno
METODOLOG-A
=4 #olocar una gota de sangre so(re un ,ortao(5etos/
>4 "7adir una gota del antgeno "+ B+ "B o Rh seg1n sea el caso/
G4 Mezclar sua&emente con un ,alillo ) o(ser&ar la aglutinaci3n/
H4 Re,ortar ,ositi&o en donde se encuentre aglutinaci3n+ ,or e5em,lo+ si aglutina con
el anticuer,o " ser8 gru,o sanguneo "/
?4 Realizar la ,rue(a a todo el gru,o ) re,ortar/
RESULTADOS
"lumno Edad Se*o Gru,o sanguneo Rh
=/ Determinar la 2recuencia de cada gru,o sanguneo "+ B+ "B+ ! ) Rh/
>/ Determinar el gru,o m8s com1n en mu5eres ) hom(res/
G/ In&estigar las le)es Mendelianas .ue go(iernan la transmisi3n del sistema "B! de
los gru,os sanguneos/
H/ Descri(ir el sistema Rh/
?/ Fu' otros sistemas de gru,os sanguneos se conocenE/ Descri(elos/
CONCLUSIONES
BIBLIOGRAF-A
- M/ V/ )nch+ S/ S/ Ra,hael+ / D/ Mellor+ Mtodos de Laboratorio %ol/ >+ Ed/
Interamericana+ Segunda Edici3n+ =JNN+ M'*ico+ ,8g/ IHM+ I?= ) I?>/
PR"#$I#" N!/ =@
EFE#$! AIP!GU#EMI"N$E DE " INSUIN" EN
R"$"S DI"BE$I#"S E;PERIMEN$"MEN$E #!N "!;"N
I TEMA
AIPERGI#EMI"
AIP!GU#EMI"
DI"BE$ES MEI$US
INSUIN"

II OB,ETIVO GENERAL
Determinar el e2ecto hi,oglucemiante de la insulina+ en ratas macho Ristar con dia(etes
,ro&ocada e*,erimentalmente+ mediante la administraci3n intra,eritoneal de allo*8n :=>@
mgXWg de ,eso6/

III OBJETIVOS ESPECIFICOS
- Inducir de manera e*,erimental un estado hi,ergluc'mico :dia(etes6 al modelo animal
,ro,uesto ,ara la realizaci3n de esta ,ractica/
- E&aluar e*,erimentalmente el e2ecto hi,oglucemiante de la insulina a tra&'s de la
cuanti2icaci3n de glucosa en sangre/
IV INTRODUCCION
a dia(etes mellitus se caracteriza ,or hi,erglucemia ) alteraciones en el meta(olismo de
car(ohidratos+ grasas ) ,rotenas0 dichas anormalidades est8n relacionadas con la
de2iciencia a(soluta o relati&a de la acci3n o de la secreci3n de la insulina+ lo .ue trae como
consecuencia un alto riesgo de contraer com,licaciones &asculares+ renales ) retinianas/
En el meta(olismo de car(ohidratos del dia('tico se reduce la 2ormaci3n de gluc3geno en
el hgado ) aumenta la trans2ormaci3n del gluc3geno he,8tico en glucosa
:glucogen3lisis60 igualmente se disminu)e la o*idaci3n de la glucosa ,or los te5idos+
m1sculo ) te5ido adi,oso/ "dem8s+ la con&ersi3n de glucosa en grasa :8cidos grasos )
glicerol6 se reduce en 2orma mani2iesta o total+ ,ues ,ara la 2ormaci3n de las grasas
:li,og'nesis6 son necesarios acetilcoenzima "+ glicerol+ N"DA ) "$P+ .ue ,ro&ienen de la
gluc3lisis+ la cual es de2iciente ,or la dia(etes/
#omo consecuencia de estos trastornos meta(3licos+ el dia('tico ,uede entrar en coma+
,recedido generalmente ,or ce2alea+ &3mitos ) dolor a(dominal+ acidosis+ aliento acet3nico+
cetouria+ ,oli2agia+ ,ilidi,sia+ ,oliuria+ cada de ,resi3n arterial+ aumento de la osmolaridad
del ,lasma e insu2iciencia renal/ Esto trae com,licaciones a largo ,lazo como-
hi,erglucemia+ aterosclerosis+ microangio,ata+ neuro,ata ,eri2'rica+ etc/
a dia(etes mellitus tiene como com1n denominador la hi,erglucemia ) el trastorno
meta(3lico+ ocasionado+ como se mencion3 anteriormente+ ,or la de2iciencia a(soluta o
relati&a de insulina/ Esta de2iciencia ,uede de(erse a la ,o(re o nula secreci3n de dicha
hormona ,or el ,8ncreas+ a la e*istencia de antagonistas a la misma+ o a una disminuci3n
de la reacti&idad de los te5idos a la insulina :resistencia6/
E;PERIMEN$! < = Idu%%i )B!)(i+)'"& d) di"0)')s ) )& +od)&o "i+"&
MATERIALES = METODOSA
4 M ratas Ristar macho de >?@ [ G@@ g de ,eso de a,ro*imadamente =H semanas de
edad/
4 "llo*8n :?+M4 Dio*)uracil monohidratado6/
4 M Veringas de insulina
4 algod3n
4 alcohol
4 soluci3n salina al @/JK a ,h 2isiol3gico
PROCEDIMIENTO DOS DIAS ANTES DEL EXPERIMENTO
=/ Registrar el ,eso cor,oral de las unidades e*,erimentales+ marcandolas de la
siguiente manera- a6 Rata control sin dia(etizar0 (6 Rata control dia('tica0 c6 Ratas
dia('ticas/
>/ Determinar la concentraci3n de glucosa (asal :H@ a =@@ mgXdl en ratas Qistar6 en
a)unas :mnimo I hrs6 a tra&'s del m'todo de Du(oQsWi0 la o(tenci3n de la muestra
se lle&ar8 aca(o a tra&'s de la &ena caudal de la rata/
G/ Pre,arar la soluci3n de allo*8n a una dosis de =>@ mgXWg de ,eso en 2orma de una
diluci3n de I@ mgXml en soluci3n salina/
H/ "dministrar la soluci3n de allo*8n ,or &a intra,eritoneal ) de5ar a los animales en
re,oso durante HI hrs ,ara o(tener el estado hi,ergluc'mico/
ANLISIS DE GLUCOSA POR EL MTODO DE DUBOCSDI.
Fundamento/ a !rto4toluidina en un medio ligeramente 8cido+ 2orma con la glucosa una
glucosilamina+ de color &erde .ue se determina ,or es,ectro2otometra &isi(le/ a
concentraci3n de glucosilamina es directamente ,ro,orcional a la concentraci3n de
glucosa/
P()!"("%i d) ()"%'i#osA
4"cido tricloroac'tico- Disol&er G g de 8cido tricloroac'tico ,uro en =@@ m de agua/
4Reacti&o de !rto4toluidina- Disol&er =/? g de tiourea ,ura en >@ m de 8cido ac'tico
glacial+ trans2erir a un matraz &olum'trico de =@@ m+ la&ando el &aso con otra ,orci3n
de 8cido ac'tico+ agregar M/@ m de !rto4toluidina+ a2orar ) mezclar + $rans2erir a un
2rasco 8m(ar/
4Soluci3n ,atr3n concentrada de glucosa- Disol&er ?@@ mg de glucosa anhidra en 8cido
(enzoico+ a2orar a ?@ m :=@mgX m6/
4Soluci3n ,atr3n diluda de glucosa- Realizar una diluci3n =-=@@ de la soluci3n ,atr3n
concentrada de glucosa+ con 8cido (enzoico/ Esta soluci3n dura una semana en
re2rigeraci3n/
DETERMINACIN DE LA CONCENTRACIN DE GLUCOSA
=/ $rans2erir =@@ microlitros de sangre a un tu(o de ensa)e de =G ; =@@ .ue
contiene =/J m de 8cido tricloroac'tico+ mezclar ) de5ar re,osar durante ? min/
#entri2ugar durante =@ min a >?@@ r,m/
>/ Eti.uetar G tu(os+ uno como ,ro(lema :P6+ otro como (lanco :B6 ) otro como
,atr3n :Pa6/ $rans2erir al tu(o ,ro(lema+ = m de so(renadante claro+ medido con
,i,eta &olum'trica al tu(o eti.uetado como ,ro(lema0 = m de agua al eti.uetado
como (lanco ) = m de soluci3n ,atr3n diluda /
G/ " los tres tu(os se les agregan ?/@ m de reacti&o de ortotoluidina/ Mezclar+ ta,ar
con ,a,el aluminio ) calentar en agua hir&iendo durante =@ min/ En2riar (a5o el
agua del gri2o ) leer las a(sor(ancias del ,ro(lema ) del ,atr3n a MG@ nm+
a5ustando a cero con el (lanco/
H/ #8lculos-
A0so(0"%i" d)& !(o0&)+" ? 299 E +5 d) 5&u%os" ;199 +L.
"(sor(ancia del ,atr3n
E;PERIMEN$! < > E#"&u"%i d)& )f)%'o Fi!o5&u%)+i"') d) &" isu&i" ) ("'"s
di"0/'i%"s )B!)(i+)'"&+)') %o "&&oB"
MATERIALES = METODOSA
4 M ratas Ristar macho- = rata control0 = rata control dia('tica ) H ratas dia('ticas/
4 Insulina de acci3n intermedia :DN" recom(inante humana6
4 M Veringas de insulina
4 algod3n
4 alcohol
4 soluci3n salina al @/JK a ,h 2isiol3gico
PROCEDIMIENTO EL DIA DEL EXPERIMENTO
=/ Registrar el ,eso cor,oral de las unidades e*,erimentales/
>/ Determinar la concentraci3n de glucosa (asal :>?@ [ G@@ mgXdl ratas dia('ticas6 en
a)unas :mnimo I hrs6 a tra&'s del m'todo de Du(oQsWi0 la o(tenci3n de la muestra
se lle&ar8 aca(o a tra&'s de la &ena caudal de la rata/
G/ "dministrar insulina humana :origen DN" recom(inante6 de acci3n intermedia en una
dosis de =/@ [ H/? UI :rango esta(lecido con (ase a la concentraci3n s'rica de
glucosa6 ,or &a su(cut8nea so&"+)') " &"s 4 ("'"s di"0/'i%"s/
H/ Determinar el e2ecto hi,oglucemiante de la insulina a las @/?+ =+ >+ G+ H+ ? hrs
des,u's de su administraci3n+ mediante la determinaci3n de glucosa en sangre/
CUESTIONARIO
=/ De2ina los siguientes t'rminos- cetouria+ ,oli2agia+ ,ilidi,sia ) ,oliuria/
>/ Descri(a el mecanismo de acci3n del allo*an como inductor de dia(etes/
G/ " tra&'s de un es.uema+ descri(a cuales son las rutas meta(3licas in&olucradas en el
,roceso de dia(etes/
H/ #on sus resultados ela(ore la gr82ica de concentraci3n de glucosa vs tiem,o+ as como
su cur&a ti,o ) los c8lculos realizados ,ara la construcci3n de las mismas/
?/ Discusi3n/
M/ #onclusiones/
N/ Bi(liogra2a/