You are on page 1of 15

1

UNIVERSIDAD DE SONORA
DEPARTAMENTO DE INVESTIGACIN Y DESARROLLO EN ALIMENTOS




CIENCIA Y TECNOLOGIA DE ALIMENTOS

CONSERVACIN Y PROCESAMIENTO DE PRODUCTOS MARINOS




BIOQUIMICA DE ALIMENTOS


Biosntesis de cidos grasos: Complejo de cido graso sintasa en clulas
eucariotas





ROSA LINDA LOPEZ ENRQUEZ












HERMOSILLO, SONORA OCTUBRE, 2012



2

CONTENIDO

Pgina
CONTENIDO 2
RESUMEN 3
INTRODUCCIN 3
ANTECEDENTES BIBLIOGRAFICOS 5
Sntesis de cidos Grasos Saturados 5
Sntesis de Palmitato a Partir de Acetil-CoA 5
Complejo cido Graso Sintasa 7
Estructura y Organizacin del cido Sintasa Tipo I 7
Regulacin de la Actividad de cido Graso Sintasa 9
Regulacin Hormonal y Nutricional de la cido Graso Sintasa 9
Transcripcin y el Promotor de cido Graso Sintasa 10
Regulacin Post-Translacional de la cido Graso Sintasa 11
Inhibidores de cido Graso Sintasa 12
Inhibidores del Dominio Cetoacil Sintasa (CS) 12
CONCLUSIONES 13
BIBLIOGRAFIA 14












3

RESUMEN
La sntesis de cidos grasos representa un proceso central por el cual se producen
cadenas de acilo para su utilizacin en productos finales tales como las membranas
biolgicas. La sntesis de cidos grasos de cadena larga a partir de acetil-CoA, malonil-
CoA, y NADPH es un proceso complejo catalizado por la cido graso sintasa (AGS)
(Smith, 1994; Smith et al., 2003). Las cido graso sintasas (AGS) se pueden dividir en dos
clases, tipo I y II, que corresponden a eucariotas y plantas/bacterias, respectivamente. En
tejidos animales, la AGS es un complejo enzimtico multifuncional que consiste en dos
monmeros idnticos de aproximadamente 270 kDa, que tienen una conformacin
cabeza-cola en forma de x, generando dos sitios activos catalticos (Wakil, 1989; Chirala y
Wakil, 2004). Cada uno de los monmeros contiene siete actividades enzimticas que
desde el grupo amino al grupo carboxilo terminal del monmero, estn en el siguiente
orden: cetoacil sintasa, acetil CoA y malonil-Coa transacilasas, dehidratasa, enoil
reducasa, cetoacil reductasa, protena acarreadora de acilo (ACP) y tioesterasa (Wakil,
1989; Smith et al., 2003). La AGS se puede regular por hormonas, nutrientes,
trascripcionalmente y post-translacionalmente. La AGS se regula hormonal y
nutricionalmente por la insulina, glucagn, fructosa, glucosa y la grasa de la dieta. En
ratas alimentadas con una dieta en exceso de carbohidratos, induce la produccin de
insulina, la cual, promueve la expresin de AGS a travs de activacin de factores de
transcripcin, sin embargo tambin inhibe de manera extrema la actividad de la enzima
AGS heptica ya expresada. En cambio, dietas altas en grasas se suprimi la expresin
del gen de AGS a niveles muy bajos (Snchez et al., 2009). El metabolismo y la
homeostasis de la cido graso sintasa est regulado transcripcionalmente por factores
estimulantes Upstream (USF1 y USF2) y sterol regulatory element binding protein-1c
(SREBP-1c) en respuesta a la alimentacin/insulina en los animales vivos. La actividad de
AGS post translacional se disminuye considerablemente por la insulina. La fosforilacin y
la acetilacin disminuyen la actividad de AGS (Zhao et al., 2010). Enfermedades como la
obesidad, diabetes y cncer han sido atribuidas a mala regulacin de la AGS, por lo que
se piensa que la inhibicin de este complejo enzimtico puede utilizarse como tratamiento
para dichas enfermedades.

INTRODUCCIN
Los lpidos biolgicos constituyen un grupo qumicamente diverso de compuestos, cuya
caracterstica comn y definitoria es su insolubilidad en agua. Las funciones biolgicas de
los lpidos son igualmente diversas. En muchos organismos las grasas y los aceites son
las formas principales de almacenamiento energtico, mientras que los fosfolpidos y los
esteroles constituyen la mitad de la masa de las membranas biolgicas (Elliot y Elliot,
2001). Otros lpidos, aun estando presentes en cantidades relativamente pequeas,
juegan papeles cruciales como cofactores enzimticos, transportadores electrnicos,
agentes emulsionantes, hormonas y mensajeros intracelulares (Smith y Vangipuram,
2002).
4

Los lpidos de mayor importancia fisiolgica son: los cidos grasos y sus steres
(triacilgliceroles), que son la principal forma de almacenamiento de energa en tejidos
adiposos; los fosfolpidos, que conforman la membrana de las clulas; y el colesterol, que
es importante componente de las membranas y base para la formacin del resto de los
esteroides y otros esteroles (Mathews, 2010).

Las grasas en la digestin son emulsionadas por la bilis y las lipasas, dando como
productos finales glicerina y cidos grasos, los que una vez absorbidos sufren en el
hgado un proceso de hidrlisis, separndose los cidos biliares de los grasos, que se
unen a la glicerina formando grasas orgnicas: trigliceridos, colesterol, fosfolipidos, cidos
grasos no esterificados, todos ellos con la funcin primordial de generar energa
(Matthews, 2001). Los cidos grasos, esterificados en triacilgliceroles, representan la
principal forma de almacn de energa en animales. Una proporcin relativamente
pequea de exceso de ingesta de caloras en forma de carbohidratos es almacenada
como glucgeno, la mayora se convierte en grasa va sntesis de cidos grasos de novo.
En la mayora de los animales, el hgado y el tejido adiposo son los principales sitios de la
sntesis de cidos grasos, aunque esta va metablica es tambin de gran importancia
para otros tejidos durante ciertas etapas de desarrollo (Rangan y Smith, 2002).

Hasta 1958 se crea que la ruta metablica de la -oxidacin operaba de manera
inversa a la sntesis de cidos grasos, sin embargo, es una ruta diferente. Los cidos
grasos se sintetizan por medio de un sistema extramitocondrial, que se encarga de la
sntesis completa de palmitato a partir de acetil-CoA en el citosol. En casi todos los
mamferos, la glucosa es el sustrato primario para la lipognesis, la principal molcula
combustible producida por la dieta. El proceso de sntesis de palmitato comprende la
adicin escalonada de unidades de dos carbonos, de tal manera que cada paso tiene
lugar mediante una condensacin, reduccin, deshidratacin y una nueva reduccin
(Mathews et al., 2001).
La cido graso sintasa (AGS) es una protena multienzimtica que cataliza la
sntesis de cidos grasos. La funcin principal de esta protena es catalizar la sntesis de
cidos grasos saturados a partir de acetil-CoA y malonil-CoA, y NADPH (Wakil et al.,
1983; Wakil, 1989; Smith, 1994; Smith et al., 2003). La AGS juega un papel importante en
la homeostasis de energa, pues convierte el exceso de grasas procedente de la dieta en
lpidos de almacenamiento, que producen energa por -oxidacin cuando el organismo la
necesita (Chirala y Wakil, 2004).

En la presente revisin se discute el estado del conocimiento de la sntesis de
cidos grasos con un enfoque en la estructura, funcin y la regulacin del complejo cido
graso sintasa tipo I. As tambin se hace una pequea revisin acerca de la inhibicin de
este complejo y su importancia para el control de ciertas enfermedades.





ANTECEDENTES BIBLIOGRFICOS
Sntesis de cidos Grasos Saturados en Clulas Eucariotas
Cuando se descubri que la oxidacin de cidos grasos transcurra mediante eliminacin
oxidativa sucesiva de unidades de carbono (acetil-CoA), los bioqumicos creyeron que la
5

biosntesis de los cidos grasos podra tener lugar mediante la simple inversin de los
mismos pasos enzimticos utilizados en su oxidacin. Sin embargo, la biosntesis y la
degradacin de los cidos grasos transcurre por vas diferentes, son catalizadas por
conjuntos de enzimas distintas, y tienen lugar en partes diferentes de la clula. Adems
en la biosntesis de cidos grasos participa un intermediario de 3 carbonos, el malonil-
CoA, que no participa en la degradacin (Rangan y Smith, 2002).
El proceso global de la sntesis de los cidos grasos es similar en todos los procariotas y
eucariotas analizados hasta la fecha. Hay tres sistemas enzimticos distintos que
catalizan, respectivamente, (1) la biosntesis de palmitato a partir de la acetil-CoA, (2) la
elongacin de la cadena a partir del palmitato, y (3) la desaturacin. En las clulas
eucariotas, la primera ruta tiene lugar en el citosol, la elongacin de la cadena se produce
tanto en las mitocondrias como en el retculo endoplsmico, y la desaturacin tiene lugar
en el retculo endoplsmico (Mathews et al., 2001). Para este trabajo se har nfasis en la
descripcin de la biosntesis de palmitato a partir de acetil-CoA, pues este proceso es
catalizado por el complejo enzimtico cido graso sintasa, principal objeto de estudio del
presente trabajo.

Sntesis de Palmitato a Partir de Acetil-CoA
El proceso de sntesis de palmitato comprende la adicin escalonada de unidades de dos
carbonos. La ruta de reaccin es idntica en todos los organismos conocidos., pero la
qumica proteica que interviene en ella es sorprendentemente variable. En E. coli, en otras
bacterias y en las plantas, las reacciones las catalizan siete enzimas diferentes, que
pueden purificarse por separado. En cambio en los animales y en los eucariotas inferiores
todas las actividades estn asociadas en un complejo multienzimtico muy estructurado al
que se denomina cido graso sintasa (AGS). A continuacin se analizaran primero las
siete reacciones y se considerara luego la naturaleza del complejo cido graso sintasa
(Mathews et al., 2001).
La sntesis de cidos grasos saturados requiere a una molcula elemental, que
usualmente es cido actico en forma esterificada con coenzima A, y un alargador de
cadena, malonil-CoA. Primeramente se forma malonil-CoA a partir de acetil-CoA por la
actividad de la enzima acetil-CoA carboxilasa, la cual tiene a la biotina como grupo
prosttico. La reaccin consiste en la transferencia del dixido de carbono unido a la
fraccin de biotina (cofactor de acetil-CoA carboxilasa) al acetil-CoA para formar malonil-
CoA; dicha reaccin es dependiente de una molcula de ATP (Mathews et al., 2001).
La sntesis de cidos grasos catalizada por la cido graso sintasa (AGS) involucra
tres principales pasos generales (1) se inicia con la condensacin de malonil-CoA y acetil-
CoA catalizada por las enzimas malonil/acetil transacilasa (MAT); (2) Se procede a la
elongacin, un ciclo repetitivo de reduccin y deshidratacin para aadir 2 carbonos en
cada ciclo para alargar la cadena de cido graso, este paso es catalizado por cetoacil
sintasa (CS), deshidratasa (DH), enoil reductasa (ER) y cetoacil reductasa (CR); y (3) la
6

terminacin para liberar el palmitato de ACP catalizado por tioesterasa (TE) (Liu et al.,
2010; Figura 1).

Figura 1. Pasos generales de la sntesis de palmitato catalizada por la cido graso sintasa
(AGS). DH=Deshidrogenasa; ER=Enoil reductasa; CR: Cetoacil reductasa;
ACP=Protena acarreadora de acilo; TE: Tioesterasa.
Fuente: Liu et al. (2010)

En el primer paso de la sntesis, una molcula preparadora de acetil-CoA se
combina con un grupo SH de cistena, lo cual es catalizado por la acetil transacilasa. La
malonil-CoA se combina con el SH adyacente en la 4fosfopantetena de la ACP del otro
monmero (de AGS), lo cual es catalizado por la malonil transacilasa, para formar la
enzima acetil (acil)-malonil (malonil-ACP) (Mathews, 2001; Murray et al., 2010).
Se da la condensacin de los grupos malonilo y acetilo, donde el grupo acetilo
ataca al grupo metileno del residuo malonilo, lo cual es catalizado por la 3-cetoacil
sintasa, y libera CO
2
; esto forma el tioster -cetoacil-ACP y libera el grupo SH de la
cistena (Mathews, 2001; Murray et al., 2010). Despus se da una reduccin del tioster
-cetoacil-ACP) para formar 3-Hidroxiacil-ACP, reaccin catalizada por la enzima -
cetoacil reductasa. El compuesto anterior es deshidratado para formar trans-2-enoil-
ACP, esta reaccin es catalizada por la enzima 3-hidroxiacil-ACP deshidrasa.
En el ltimo paso, se da una reduccin de trans-2-enoil-ACP para formar butiril-
ACP, reaccin catalizada por enoil-ACP-reductasa (Mathews, 2001; Murray et al., 2010).
Aqu termina el primer ciclo de sntesis, y para iniciar el segundo ciclo, una nueva
molcula de malonil-CoA se combina con el SH de la 4-fosfopantetena, lo que desplaza
el residuo acilo saturado (butiril) sobre el grupo SH de cistena libre. La secuencia de
reacciones se repite seis veces ms hasta que se ha montado un radical acilo de 16
carbonos saturado (palmitil). Se libera del complejo enzimtico mediante la actividad de
una sptima enzima en el complejo, la tioesterasa (Murray et al., 2010).
Al igual que en la mayor parte de las rutas de biosntesis, sta requiere tanto
energa (en forma de ATP) como equivalentes reductores (en forma de NADPH). La
ecuacin para la sntesis general de palmitato a partir de acetil-CoA y malonil-CoA es:
Acetil-CoA + 7 malonil-CoA + 14 NADPH + 14 H
+
Palmitato + 7CO2 + 14NADP
+
+ 8 CoA-SH + 6H2O
7


Complejo de cido Graso Sintasa
La sntesis de cidos grasos de cadena larga a partir de acetil-CoA, malonil-CoA, y
NACPH es un proceso complejo catalizado por la cido graso sintasa (AGS). La ruta de
reaccin para la sntesis de cidos grasos es idntica en todos los organismos conocidos,
pero la qumica proteica del AGS que interviene en ella es sorprendentemente variable
(Mathews, 2001).
La cido graso sintasa (AGS) es un complejo proteico multienzimtico que
consiste en siete dominios proteicos conservados, los cuales catalizan ms de 50
reacciones en la produccin de cidos grasos (Maier et al., 2006). Es notable que casi
cada tejido del cuerpo humano tiene cierto nivel de expresin de AGS, pero AGS es
altamente expresada en tejidos como los del hgado, tejidos adiposos, y glndulas
mamarias lactantes (Jayakumar et al., 1995).
La mayora de los progresos iniciales para identificar las enzimas individuales
involucradas en la ruta de la biosntesis de cidos grasos fue hecho utilizando el sistema
celular de Escherichia coli y no fue hasta mediados de 1970 que qued claro que en
eucariotas, las enzimas son ligadas covalentemente en un polipptido multifuncional. En
procariotas, por ejemplo E. coli, ms de 10 protenas individuales estn involucaradas en
la biosntesis de cidos grasos saturados de cadena larga a partir de acetil-CoA. Este
sistema, en el cual cada enzima se presenta en un polipptido sencillo, es conocido como
el sistema AGS del tipo II y el sistema polipeptdico multifuncional, por ejemplo de
levaduras y animales, es conocido como el sistema AGS tipo I. En los animales, los
componentes catalticos necesarios para todo el camino biosinttico de cidos grasos
estn integrados en dos polipptidos multifuncionales, acetil-CoA carboxilasa (ACC) y la
cido graso sintasa (AGS) (Ragan y Smith, 2002).
Estructura y Organizacin de cido Graso Sintasa Tipo I
Inicialmente, se crea que AGS era un complejo multienzimtico de enzimas como
la AGS de E. coli debido a la presencia de muchas bandas de protenas en geles de SDS-
PAGE. Pero controlando la protelisis durante el aislado y la desnaturalizacin inmediata
antes de la corrida de electroforesis, se determin que la AGS de animales contiene un
polipptido simple de aproximadamente 270 kDa. El anlisis por centrifugacin de la
enzima activa revel que era un homodmero, es decir la unin cadenas polipeptdicas
iguales (Stoops et al., 1975). La AGS se someti a disociacin en soluciones
amortiguadores de baja fuerza inica y bajas temperaturas, y se encontr que los
monmeros disociados de AGS eran inactivos para la sntesis de cidos grasos (Wakil,
1989).
Incluso antes de ADNc, estaban disponibles las secuencias derivadas de
aminocidos, el orden de las actividades de los componentes en el monmero se
establecieron por protelisis parcial usando varias proteasas, aislamiento de varias
fracciones componentes, y por determinacin de las actividades contenidas en AGS.
8

Estos anlisis revelaron que el monmero de AGS contena todas las actividades de los
componentes en el siguiente orden: Cetoacil sintasa, acetil-CoA y malonil-CoA
transacilasas, deshidratasa, enoil reductasa, cetoacil reductasa, proteica acarreadora de
acilo (ACP) y tioesterasa (Wakil et al., 1983; Wakil, 1989; Tsukamoto y Wakil, 1988; Smith
et al., 2004; Figura 2).

Figura 2. Organizacin de los dominios enzimticos del complejo cido graso sintasa tipo I.
CS=cetoacil sintasa; MAT= Malonil/acetil transferasa; DH=Deshidrogenasa; ER=Enoil
reductasa; CR= Cetoacil reductasa; ACP=Protena acarreadora de acilo; TE=Tioesterasa.
Fuente: Liu et al. (2010).

Se han determinado las secuencias de cADN de la AGS de pollo, rata, humano, y
ratn (Smith et al., 2004). La comparacin de la secuencia aminoacdica de AGS de
animales y humanos mostr que eran altamente homlogos.
Anlisis proteolticos en la AGS de animales, como se describi anteriormente,
sugiri que las distintas actividades del complejo estn organizadas en 3 dominios. El
dominio I contiene cetoacil sintasa, acetil y malonil transacilasas y dehidratasa. El dominio
II contiene enol reductasa, cetoacil reductasa y la protena acarreadora de acilo (ACP) y el
dominio II contiene tioesterasa (Wakil et al., 1983; Wakil, 1989; Tsukamoto y Wakil, 1988).
Adems, se demostr que el sitio activo de cetoacil sintasa (cistena-SH) y la
fospanteteina (Pan-SH) de ACP estaban enlazadas y el dmero tena un tamao
aproximado de 500 kDa en geles de SDS-PAGE. Por lo tanto, en el homodmero de AGS,
los dos monmeros estn con una conformacin de cabeza-cola, teniendo como amino
terminal a cetoacil sintasa-Cys-S de uno de los monmeros a una distancia de 2 del
grupo carboxilo terminal localizado en la ACP-fosfopantetena-SH del otro monmero
(Asturias et al., 2005). Este arreglo gener dos sitios activos, donde se da la sntesis de
cidos grasos de manera simultnea (Stoops et al., 1987; Smith et al., 2004). Aunque
estas investigaciones indicaron inicialmente que los monmeros de AGS estaban
orientados en forma de cabeza-cola, estudios estructurales recientes han demostrado que
la orientacin cabeza-cola de los monmeros est entrelazada en su centro para dar
forma de X (Asturias et al., 2005; Maier et al., 2006; Figura 3).
9


Figura 3. Estructura y conformacin de la enzima cido graso sintasa (AGS)

La AGS es una protena soluble y se piensa que se localiza en el citoplasma,
aunque los detalles de su localizacin subcelular estn, en gran parte, sin explorar. Su
distribucin es amplia tejido con los ms altos niveles en el hgado, el tejido adiposo y los
pulmones (Jayakumar et al., 1995; Semenkovich et al., 1995).

Regulacin de la Actividad de cido Graso Sintasa
La regulacin transcripcional de AGS se ha caracterizado bien, pero se conoce poco
acerca de la regulacin post-traslacional de la actividad AGS. Similarmente, los efectos a
largo plazo de las hormonas y nutrientes en la expresin de AGS son claras pero sus
efectos inmediatos no son bien comprendidos.
Regulacin Hormonal y Nutricional de la cido Graso Sintasa. La AGS
heptica se regula por la insulina, cAMP (adelinato ciclasa activa), fructosa, glucosa, y la
grasa de la dieta.
La sobrealimentacin de ratones o ratas con una dieta alta en carbohidratos
despus de un ayuno prolongado produce una induccin de una fuerte expresin de AGS
en comparacin con el ayuno o la dieta restringida (Horton et al., 1998; Snchez et al.,
2009). El efecto de la sobrealimentacin con hidratos de carbono est mediada tanto por
la insulina y la glucosa. La insulina regula la AGS a travs de los mecanismos de
transcripcin y los no-transcripcionales. Bajo condiciones de exceso de nutrientes, la
sntesis de lpidos de novo puede promover el almacenamiento del exceso de energa en
forma de triglicridos hepticos. La insulina promueve la expresin de AGS a travs de la
la activacin de factores de transcripcin del elemento regulador de esteroles protena de
unin-1c (SREBP-1c) y los factores estimuladores 1 y 2 (USF1 y USF2) (Foretz et al.,

Fatty Acid Synthase PDB 2VZ8
10

1999). A la inversa, el glucagn y AMP cclico inhiben el aumento en la actividad de AGS
inducida por la sobrealimentacin con carbohidratos en ratas.
Mientras que la insulina promueve la expresin de AGS, la insulina inhibe de
manera extrema la actividad enzimtica de AGS heptica, causando una disminucin en
la actividad de AGS dentro de minutos. Esta inhibicin es dependiente de la presencia del
antgeno carcinoembrionario relacionados con la molcula de adhesin celular 1
(CEACAM1), que se fosforila en respuesta a la insulina y, posteriormente, se asocia con
la AGS (Najjar et al., 2005).
Los carbohidratos promueven directamente la expresin de AGS heptica en el
hgado, adems de tener un efecto indirecto al estimular la secrecin de insulina. La
alimentacin de los ratones con una dieta alta en glucosa o fructosa-alto por 1 semana
conduce a incrementos de 3 y 8 veces, respectivamente, en la concentracin de en
protena de AGS (Miyazaki et al., 2004).
Cuando las grasas son ya muy abundantes, las grasas de la dieta inhiben la
expresin de AGS para disminuir la sntesis de lpidos de novo. Los cidos grasos
poliinsaturados pueden reducir la expresin de la AGS a travs de la inhibicin de la
actividad de SREBP-1c y ChREBP (Moon et al.2002; Dentin et al., 2005). Las dietas que
consisten en 10% de aceite inhiben la actividad heptica de AGS cuando se alimentan
ratas en el transcurso de 4 semanas, con la mayor reduccin en los ratones alimentados
con aceite de pescado [60]. La sobrealimentacin de ratas con una dieta libre de
carbohidratos y alta en grasas suprimi la expresin del gen AGS a niveles tan bajos
como los observados en ratas en ayunas durante 24 horas (Snchez et al., 2009).

Transcripcin y el Promotor de cido Graso Sintasa. Gran parte del trabajo en
la regulacin transcripcional de AGS se ha hecho en ratas, pero el promotor de AGS est
altamente conservado entre especies, lo que sugiere que los estudios del promotor AGS
en ratas es probable que sean relevantes para ratones y seres humanos.
Como se seal anteriormente, SREBP-1c se activa por la insulina y en
condiciones apropiadas promueve la expresin de genes lipognicos, incluyendo AGS. El
promotor AGS contiene un elemento regulador de esteroles (SRE) a -150 as como
tndem SRE
s
en las posiciones -72 y -62 que se requieren para una ptima activacin de
la expresin de AGS en ratas mediada por SREBP-1c- (Latasa et al., 2003).
Adems, como se seal anteriormente, ChREBP desempea un papel central en
la regulacin transcripcional inducida por glucosa de AGS as como otros genes
lipognicos y glicolticos en el hgado (Ishii et al., 2004) .
Receptor X del hgado (LXR), es un factor de transcripcin activado por
oxiesteroles, regula la alza de la expresin de AGS a travs de mecanismos directos e
indirectos. Indirectamente, LXR puede promover la expresin de AGS mediante la unin a
elementos del receptor Xdel hgado (LXREs) en los promotores de los genes SREBP y
11

ChREBP para promover su transcripcin. SREBP y ChREBP a su vez activan la
transcripcin AGS. La activacin de LXR mediada de SREBP-1c es el mecanismo
principal de la insulina inducida por la activacin SREBP (Cha et al., 2007).


Figura 4. El promotor de ratn AG proximal. Los elementos reguladores nucleares y
factores de unin de nucleotidos se resaltan en amarillo. IRE=elemento de respuesta de
la insulina; LXRE= elemento receptor X del hgado; NF-Y, el factor nuclear Y el sitio de
unin; Sp1= factor de especificidad del sitio 1 de unin; SER=elemento regulador de
esteroles.


Regulacin Post-Translacional de la cido Graso Sintasa. La regulacin
transcripcional de la AGS puede requerir horas para afectar los niveles de la protena
hasta que tanto mRNA y la protena de la AGS estn bastante estables, amortiguando los
cambios bruscos debido al aumento de la transcripcin y traduccin posterior.
Hay varios informes de protena AGS donde es activada o inhibida en plazos ms
cortos de tiempo, as como los informes de cambios en la actividad de AGS que no se
correlacionan con los cambios en los niveles de protena AGS. La insulina disminuye
extremadamente la actividad enzimtica de AGS. En las clulas del hepatoma, la
actividad de AGS disminuye linealmente desde 2 hasta 15 min despus de un tratamiento
con insulina, seguido por un aumento en la actividad de FAS durante 75 minutos (Najjar et
al., 2005). El peroxinitrato inhibe la actividad de AGS en adipocitos dentro de 10 min, sin
ningn efecto sobre los niveles de la protena AGS (An et al., 2007). La activacin y la
inhibicin de la AGS sin los correspondientes cambios en los niveles de protena FAS se
han reportado en una variedad de lneas celulares de cncer (Sabbisetti et al., 2009; Jin et
al., 2010). Estos datos sugieren la presencia regulacin post-translacional de AGS.
La fosforilacin se ha propuesto como un mecanismo de regulacin de AGS en las
clulas cancerosas, adipocitos, y el hgado. En hgados de palomas que se mantuvieron
en ayunas y despus de ser sobrealimentadas, se incorpor fosfato radiomarcado en
AGS en la fraccin citoslica. El evento de fosforilacin se asocia con la baja actividad
12

AGS, y la desfosforilacin de la AGS por incubacin con fosfatasas caus un aumento de
20-veces en la actividad AGS (Qureshi et al., 1975).
Adems de la fosforilacin, la AGS fue una del gran nmero de enzimas
metablicas hepticas que recientemente se ha encontrado que es una lisina acetilada.
La acetilacin estaba relacionada con diversos efectos sobre las enzimas metablicas,
incluyendo la desestabilizacin de protenas, la activacin y la inhibicin, lo que sugiere
que la acetilacin puede jugar un papel importante en la regulacin metablica. La
acetilacin de AGS podra representar un nuevo mecanismo para controlar su actividad
(Zhao et al., 2010).

Inhibidores de cido Graso Sintasa
Inhibidores del Dominio Cetoacil Sintasa (CS)
El desarrollo de inhibidores de cido graso sintasa (AGS) han incrementado ha atrado
cada vez ms atencin en los ltimos aos debido a su potencial uso teraputico en
obesidad y cncer.
Durante mucho se ha considerado que la desregulacin de la cido graso sintasa
(AGS) puede estar implicado en la obesidad y la diabetes (Kuhajda, 2000). Estudios
recientes tambin han demostrado que hay una sobreexpresin de AGS en muchos tipos
de cncer humano, incluyendo los cnceres de mama, colon, y prstata. Adems, la
sobreexpresin de AGS est asociada con mal pronstico en los pacientes con cnceres
de mama y de prstata. As, se ha pensado que la AGS pueda ser un blanco potencial, no
slo para el tratamiento de la obesidad y la diabetes, sino tambin para la terapia del
cncer (Kim et al., 2002).
La AGS de los mamferos consiste en siete dominios, incluyendo tres dominios N-
terminales (cetoacil sintasa (CS), malonil/acetil transacilasa (MAT) y deshidratasa (DH)), y
cuatro dominios de C-terminales (enoil reductasa (ER), cetoacil reductasa (CR), protena
acarreadora de acilo (ACP) y tioesterasa (TE)) (Smith et al., 2004). En la cual, CS es el
dominio de la N-terminal y es uno de los dominios catalticos ms importantes, desde que
la reaccin catalizada por CS, llamada unin covalente acetato malonato, es la primera
reaccin y es un paso clave en el proceso de sntesis de cidos grasos. Hasta ahora, se
han reportado solo unos cuantos inhibidores en direccin al dominio KS (Kuhajda et al.,
2000); los cuales, el ms representativo es la cerulenina, C75, olistato, polifenole,
flavonoides y triclosan (Liu et al., 2010).
Hasta el 2006, fue reportada la primera estructura del dominio CS en mamferos
(cerdo) (Maier et al., 2006). Y en el 2010, se report la estructura del dominio de CS del
humano, la cual ayudo para el estudio y desarrollo de la base estructural del frmaco
dirigido al dominio de KS de AGS; una comparacin de las estructuras cristalinas de los
dominios CS del humano y el cerdo muestran grandes diferencias en el sitio activo. Zeng
et al. (2011) descubrieron un nuevo compuesto que tuvo una buena potencia de inhibicin
13

contra clulas tumorales con sobreexpresin de AGS con IC
50
= 12.7 M. Este compuesto
ha sido sometido a modificacin qumica adicional, por lo que se informarn los resultados
en un futuro prximo.


CONCLUSIONES
La cido graso sintasa (AGS) juega un papel importante en la homeostasis de energa,
pues convierte el exceso de grasas procedente de la dieta en lpidos de almacenamiento,
que producen energa por -oxidacin cuando el organismo la necesita. La AGS presente
en animales es el tipo I y es un complejo multienzimatico compuesto de dos poliptidos de
aproximadamente 270 kDa. Cada polipptido tiene siete actividades enzimticas que son
las que catalizan las reacciones de conversin de acetil y malonil-CoA a palmitato. Los
dos monmeros se orientan cabeza-cola y se entrelazan en su centro para dar la forma
de x.
Generalmente, se piensa que la AGS heptica es una protena de la limpieza,
pues sintetiza cidos grasos para la separacin y el almacenamiento del exceso de
energa. La AGS est regulada en parte a travs de efectos sobre la expresin gnica. Sin
embargo, los rpidos cambios en la actividad enzimtica asociada con alteraciones en el
estado nutricional sugieren que los mecanismos post-translacionales subyacen en las
respuestas enzimticas a los estmulos externos. La insulina, la fosforilacin y la
acetilacin disminuyen la actividad de AGS (Zhao et al., 2010).
Dado que las reservas almacenadas de hidratos de carbono estn estrictamente limitadas
(solo en hgado), la sntesis o generacin de cidos grasos a partir de glucosa para
producir triacilgliceroles (almacen de energa en tejido adiposo), ha tomado gran
importancia. Lo anterior debido a que en los ltimos aos, los hidratos de carbono han
constituido gran parte del consumo calrico de los seres humanos, por lo que han
aumentado los problemas relacionados con el sobrepeso y obesidad. Enfermedades
como la obesidad, diabetes y cncer han sido frecuentemente atribuidas a una mala
regulacin de la AGS, por lo que se ha considerado que la utilizacin de inhibidores para
de este complejo enzimtico puede ser un tratamiento para estas enfermedades.







14

BIBLIOGRAFA
An Z, Wang H, Song P, Zhang M, Geng X, Zou MH- 2007. Nicotine-induced activation of AMP-
activated protein kinase inhibits fatty acid synthase in 3T3L1 adipocytes: a role for oxidant
stress, J. Biol. Chem. 282:2679326801.
Asturias FJ, Chadick JZ, Cheung IK, Stark H, Witkowski A, Joshi AK, Smith S. 2005. Structure and
molecular organization of mammalian fatty acid synthase. Nat. Struct. Mol. Biol. 12 (3), 225-
232.
Cha JY, Repa JJ. The liver X receptor (LXR) and hepatic lipogenesis. 2007. The carbohydrate-
response element-binding protein is a target gene of LXR, J. Biol. Chem. 282: 743751.
Chirala SS, Wakil SJ. 2004. Structure and Function of Animal Fatty Acid Synthase. Lipids 39, 1045-
1053.
Dentin R, Benhamed F, Pegorier JP, Foufelle F, Viollet B, Vaulont S, Girard J, Postic C. 2005.
Polyunsaturated fatty acids suppress glycolytic and lipogenic genes through the inhibition of
ChREBP nuclear protein translocation, J. Clin. Invest. 115: 28432854.
Elliot WH, Elliot DC. 2001. Biochemistry and Molecular Biology. 2
nd
edition. Oxford University
Press. 586 p.
Foretz M, Guichard C, Ferre P, Foufelle F. 1999.Sterol regulatory element binding protein-1c is a
major mediator of insulin action on the hepatic expression of glucokinase and lipogenesis-
related genes, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 9:1273712742.
Horton JD, Bashmakov Y, Shimomura I, Shimano H. 1998. Regulation of sterol regulatory element
binding proteins in livers of fasted and refed mice, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 95: 5987
5992.
Ishii S, Iizuka K, Miller BC, Uyeda K. 2004. Carbohydrate response element binding protein directly
promotes lipogenic enzyme gene transcription, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 101:15597
15602.
Jayakumar A, Tai MH, Huang WY, Al-feel W, Hsu M, Abu-Elheiga L, Chirala SS, Wakil SJ. 1995.
Human fatty acid synthase: Properties and molecular cloning. Proc. Natl. Acad. Sci. USA Vol.
92, pp. 8695-8699.
Jensen-Urstad APL, Semenkovich CF. 2012. Fatty acid synthase and liver triglyceride metabolism:
Housekeeper or messenger? Biochimica et Biophysica Acta 1821:747753.
Jin Q, Yuan LX, Boulbes D, Baek JM, Wang YN, Gomez-Cabello D, Hawke DH, Yeung SC, Lee
MH, Hortobagyi GN, Hung MC, Esteva FJ. 2010. Fatty acid synthase phosphorylation: a
novel therapeutic target in HER2-overexpressing breast cancer cells, Breast Cancer Res. 12:
R96.
Kim K, Miller I, Landree LE, Borisy-Rudin FF, Brown P, Tihan, T, Townsend CA, Witters L A, Moran
TH, Kuhajda FP, Ronnet GV. 2002. Expression of FAS within hypothalamic neurons: a model
for decreased food intake after C75 treatment. Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab., 283,
E867.
Kuhajda FP, Li JN, Frehywot GL. 2000. Synthesis and antitumor activity of an inhibitor of fatty acid
synthase. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2000, 97, 3450.
Kuhajda FP. 2000. Fatty-acid synthase and human cancer: new perspectives on its role in tumor
biology. Nutrition 16, 202.
Latasa MJ, Griffin MJ, Moon YS, Kang C, Sul HS. 2003. Occupancy and function of the -150 sterol
regulatory element and -65 E-box in nutritional regulation of the fatty acid synthase gene in
living animals. Mol. Cell. Biol. 23 (16): 5896907.
Liu Y, Liu JY, Wu X, Zhang JT. 2010. Biochemistry, molecular biology, and pharmacology of fatty
acid synthase, an emerging therapeutic target and diagnosis/prognosis marker. Int J
Biochem. Mol. Biol. 1(1):69-89.
Maier T, Jenni S, Ban N. 2006. Architecture of mammalian fatty acid synthase at 4.5 A resolution.
Science 311(5765), 1258-1262.
Mathews CK, Van Holde KE, Ahern KG. Bioqumica. 2002. 3
a
edicin. Editorial Pearson Addison
Wesley. 1333 p.
Miyazaki M, Dobrzyn A, Man WC, Chu K, Sampath H, Kim HJ, Ntambi JM. 2004 Stearoyl-CoA
desaturase 1 gene expression is necessary for fructose-mediated induction of lipogenic gene
15

expression by sterol regulatory element-binding protein-1c-dependent and -independent
mechanisms, J. Biol. Chem. 279: 2516425171.
Moon YS, Latasa MJ, Griffin MJ, Sul HS. 2002. Suppression of fatty acid synthase promoter by
polyunsaturated fatty acids, J. Lipid Res. 43: 691698.
Murray RK, Bender DA, Botham KM, Rodwell VW, Weil PA. 2010. Bioqumica Ilustrada de Harper.
Editorial McGraw-Hill. 704 p.
Najjar SM, Yang Y, Fernstrom MA, Lee SJ, Deangelis AM, Rjaily GA, Al-Share QY, Dai T, Miller
TA, Ratnam S, Ruch RJ, Smith S, Lin SH, Beauchemin N, Oyarce AM. 2005. Insulin acutely
decreases hepatic fatty acid synthase activity, Cell Metab. 2: 4353.
Paulauskis JD, Sul HS.1989. Hormonal regulation of mouse fatty acid synthase gene transcription
in liver. J. Biol. Chem. 264 (1): 5747. PMID 2535847.
Qureshi AA, Jenik RA, Kim M, Lornitzo FA, Porter JW. 1975. Separation of two active forms (holo-a
and holo-b) of pigeon liver fatty acid synthetase and their interconversion by phosphorylation
and dephosphorylation, Biochem. Biophys. Res. Commun. 66:344351
Rangan VS, Smith S. 2002. Fatty acid synthesis in eukaryotes. In: Biochemistry of Lipids. 4
th
Edn.
Vance DE, Vance JE (Eds).
Repa JJ, Liang G, Ou J, Bashmakov Y, Lobaccaro JM, Shimomura I, Shan B, Brown MS, Goldstein
JL, Mangelsdorf DJ. 2000. Regulation of mouse sterol regulatory element-binding protein-1c
gene (SREBP-1c) by oxysterol receptors, LXRalpha and LXRbeta. Genes Dev. 14 (22):
281930.
Sabbisetti V, Di Napoli A, Seeley A, Amato AM, O'Regan E, Ghebremichael M, Loda M, Signoretti
S. 2009. p63 promotes cell survival through fatty acid synthase, PLoS One 4 e5877.
Sanchez J, Palou A, Pico C. 2009. Response to carbohydrate and fat refeeding in the expression of
genes involved in nutrient partitioning and metabolism: striking effects on fibroblast growth
factor-21 induction, Endocrinology 150: 53415350.
Semenkovich CF, Coleman T, Fiedorek FT. 1995. Human fatty acid synthase mRNA: tissue
distribution, genetic mapping, and kinetics of decay after glucose deprivation, J. Lipid Res.
36:15071521.
Smith S, Witkowski A, Joshi AK. 2004. Structural and functional organization of animal fatty acid
synthase, Prog Lipid Res. 42, 289-317.
Smith S. 1994. The animal fatty acid synthase: One gene, one polypeptide, seven enzymes.
FASEB J. 8, 1248-1259.
Stoops JK, Arslanian AW, Oh YH, Aune KC, Vanaman TC, Wakil, SJ. 1975. Presence of two
polypeptide chains comprising fatty acid synthetase, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 75, 1940--
1944.
Stoops JK, Wakil SJ, Uberbacher EC, Bunick GJ. 1987. Small-angle neutron-scattering and
electron microscopic studies of the chicken liver fatty acid synthase, J. Bio. Chern. 262,
10246--10251.
Tsukamoto Y, Wakil SJ. 1988. Isolation and mapping of the beta-hydroxyacyl dehydratase activity
of chicken liver fatty acid synthase, J. BioI. Chern. 263, 16225-16229.
Wakil SJ, Stoops JK, Joshi AC.1983. Fatty acid synthesis and its regulation, Annu. Rev. Biochem.
52, 537-579.
Wakil SJ. 1989. The fatty acid synthase: A proficient multifunctional enzyme. Biochemistry 28,
4523-4530.
Yoshikawa T, Shimano H, Amemiya-Kudo M, Yahagi N, Hasty AH, Matsuzaka T, Okazaki H,
Tamura Y, Iizuka Y, Ohashi K, Osuga J, Harada K, Gotoda T, Kimura S, Ishibashi S, Yamada
N. 2001. Identification of liver X receptor-retinoid X receptor as an activator of the sterol
regulatory element-binding protein 1c gene promoter. Mol. Cell. Biol. 21 (9): 29913000.
doi:10.1128/MCB.21.9.2991-3000.2001. PMC 86928. PMID 11287605.
Zeng XF, Li WW, Fan HJ, Wang XY, Ji P, Wang ZR, Ma S, Li LL , Ma XF, Yang SY. 2011.
Discovery of novel fatty acid synthase (FAS) inhibitors based on the structure of ketoaceyl
synthase (KS) domain. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 21 -47424744.
Zhao S, Xu W, Jiang W, Yu W, Lin Y, Zhang T, Yao J, Zhou L, Zeng Y, Li H, Li Y, Shi J, An W,
Hancock SM, He F, Qin L, Chin J, Yang P, Chen X, Lei Q, Xiong Y, Guan KL. 2010.
Regulation of cellular metabolism by protein lysine acetylation, Scienc 327: 10001004.