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CENTRO UNIVERSITRIO UNINOVAFAPI

CURSO: FISIOTERAPIA / 1 PERODO


PROF.: JANCINEIDE OLIVEIRA DE CARVALHO
DISCPLINA: BIOQUMICA METABLICA










QUMICA DOS CARBOIDRATOS










TERESINA, Setembro de 2013.
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REAES DE CARACTERIZAO DE CARBOIDRATOS
ngelo Lopes Dias Neto.
Antonio Tassio Carlos Pereira.
Dalthon Jorge Santos Silva Carvalho.
Gabriela dos Santos.








TERESINA, Setembro de 2013.
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SUMRIO
1. INTRODUO.........................................................................................05
2. PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL................................................ 07
2.1. MATERIAIS E REAGENTES...................................................................07
2.2. MTODO....................................................................................................08
2.2.1. PROCEDIMENTO I...................................................................................08
2.2.2. PROCEDIMENTO II..................................................................................08
2.2.3. PROCEDIMENTO III.................................................................................08
2.2.4. PROCEDIMENTO IV.................................................................................09
3. RESULTADOS E DISCUSSES.............................................................10
4. CONCLUSO.............................................................................................14
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS.................................................................15


















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RESUMO
Foram realizados reaes com carboidratos, dentre os quais a celulose, glicose,
frutose, amido, sacarose na identificao de carboidratos (teste molish), diferenciao
dos grupos funcionais (teste Seliwanoff), estudar acares redutores (teste benedict) e
hidrlise de polissacardeos, no caso o Amido (Lugol), de acordo com a cromatografia
observada. Realizaram-se os devidos procedimentos na obteno de resultados claros e
esperados de acordo com a fundamentao terica.






















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1. INTRODUO
Os carboidratos so as biomolculas mais abundantes da face da Terra. Certos
carboidratos (acar comum e amido) so a base da nutrio humana na maioria das
partes do mundo e a oxidao dos carboidratos a principal via metablica liberadora
de energia em muitas clulas no fotossintticas. Polmeros insolveis de carboidratos
funcionam tanto como elementos estruturais quanto de proteo nas paredes celulares
bacterianas e vegetais e nos tecidos conjuntivos de animais. Outros polmeros de
carboidratos agem como lubrificantes das articulaes esquelticas e participam do
reconhecimento e coeso entre as clulas. (LEHNINGER, 2002)
Os hidratos de carbono, glicdios ou acares, como tambm so chamados os
carboidratos so compostos que, em geral, apresentam frmula emprica (CH
2
O)
n
. So
biomolculas orgnicas, designados como polihidroxialdedos ou polihidroxicetonas, ou
substncias que, hidrolisadas, liberam estes compostos, devido a presena de um grupo
funcional aldedo ou cetona e dois ou mais grupos alcolicos (-OH).
Essas biomolculas so classificadas como monossacardeos (acares
fundamentais, simples), oligossacardeos e polissacardeos, sendo estes dois ltimos
polmeros dos monossacardeos.
Todos os monossacardeos apresentam o grupamento carbonila (-C=O). Quando
esse grupamento est na extremidade da cadeia caracteriza-se o grupo funcional aldedo
e o aucar passa a ser chamado aldose (ex. ribose e glicose). Se o grupamento carbonila
estiver no meio da cadeia, caracterizando uma cetona, o acar passa a ser denominado
cetose (ex. ribulose e frutose). Quando a hidroxila e a carbonila de uma mesma
molcula interagem entre si, originam o anel. Assim, temos que os monossacardeos
tambm podem apresentar-se como hemiacetais (quando a estrutura originria do anel
for uma aldose,) ou hemicetais (quando o monossacardeo de origem for uma cetose).
(Campell, 2006)
Uma ou mais molculas de monossacardeos podem ligar-se, constituindo
molculas maiores. Oligossacardeo o nome dado estrutura formada pela associao
de 2 a 10 molculas de monossacardeos encontram-se unidos formando uma s
molcula (ex. sacarose e lactose). Nela, os aucares combinam-se atravs de ligaes
covalentes, que passam a ser chamadas de ligaes glicosdicas.
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Os polissacardeos so os carboidratos complexos, macromolculas formadas por
milhares de unidades monossacardicas ligadas entre si por ligaes glicosdicas. Como
exemplos de polissacardeos importantes na natureza podemos destacar o glicognio, a
celulose e o amido. (CHAMPE, 2006)
Tendo em vista a importncia dos carboidratos, em especial na atividade
metablica das clulas animais, desenvolveu-se est prtica com o objetivo de constatar
as estruturas dos carboidratos, de identificar carboidratos redutores e no-redutores,
distinguir as aldoses de cetoses, e por fim observar o processo de hidrlise em alguns
polissacardeos atravs de reaes de caracterizao dos carboidratos, com tcnicas de
cromatografia.


















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2. PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL
2.1. MATERIAIS E REAGENTES
REAGENTES E SOLUES
- Sol. Glicose 1%
- Sol. Sacarose 1%
- Sol. Amido 1%
- Sol. Celulose 1%
- Sol. Frutose
- gua destilada
- Reagente de Molish (Soluo de alfa
naftol a 5% em lcool)
- Reativo de Seliwanoff
- Reativo de Benedict
- Lugol
- cido sulfrico concentrado (H2SO4)
- cido Clordrico 2M
MATERIAIS E VIDRARIAS
- Tubos de ensaio;
- Bquer;
- Pipetas de 2mL, 1mL, 5mL e 10mL;
- Estante para tubos de ensaio.
- Bico de bunsen;
- Piceta;
- Termmetro;
- Proveta;












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2.2. MTODO
2.2.1. PROCEDIMENTO I (IDENTIFICAO DE CARBOIDRATOS)

- Pipetou-se 1mL de cada amostra (glicose, amido, sacarose e gua destilada) aos tubos
de ensaio;
- Adicionou-se 2 gotas do reagente de Molish em cada amostra contida nos tubos de
ensaio e agitou-se;
- Em seguida com os tubos de ensaio na estante, levou-se para a capela onde foi
adicionado cuidadosamente, em cada tubo, 1mL de cido sulfrico concentrado,
inclinando-o e deixando o cido escorrer lentamente pelas paredes do tubo;
- Aps deixar os tubos de ensaio em repouso e observar a formao de anel violeta,
foram interpretados os resultados.

2.2.2. PROCEDIMENTO II (DIFERENCIAO ENTRE ALDOSES E
CETOSES)

- Pipetou-se 3mL de Seliwanoff mais 5 gotas de cada amostra (glicose, amido, frutose,
sacarose e gua destilada) aos tubos de ensaio;
- Colocou-se em banho-maria fervente em um bquer (75C), todos os tubos com as
solues formadas.
- Observou-se de trs em trs minutos, durante aproximadamente 10 minutos, e foram
interpretados os resultados.

2.2.3. PROCEDIMENTO III (ACARES REDUTORES)

- Pipetou-se 1mL de cada amostra (glicose, frutose, sacarose, amido e gua destilada)
em seus respectivos tubos de ensaio;
- Colocaram-se os tubos contendo as amostras em banho-maria fervente em um bquer
(75C) durante trs minutos;
- Em seguida pipetou-se em cada tubo de ensaio 3mL do reativo de Benedict, e agitou-
se;
- Os tubos de ensaio foram recolocados em banho-maria durante trs minutos;
- Observou-se os resultados.

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2.2.4. PROCEDIMENTO IV (HIDRLISE DOS POLISSACARDEOS)

- Mediu-se 30mL de amido em uma proveta, e o transferiu para o erlenmeyer;
- Pipetou-se 3mL de cido clordrico ao erlemeyer;
- Logo aps foram colocados 3mL da mistura em cada um dos 7 tubos de ensaio;
- Ao tubo n1 juntou-se uma gota de lugol observando a cor que se desenvolveu;
- Os tubos restantes foram colocados em banho-maria fervente 75C e retirou-se cada
tubo de acordo com o tempo de reao indicado na Tabela 4.;
- Ao retirar os tubos, foram resfriados e adicionado uma gota de Lugol, com exceo do
tubo -7;
- Ao tubo 7 adicionou-se 3mL de reativo de Benedict e retornou ao banho-maria
fervente durante +5minutos.





















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3. RESULTADOS E DISCUSSES
Tabela 1. Caracterizao de Carboidratos.
AMOSTRA MOLISH COLORAO
Glicose + Violeta
Amido + Violeta
Sacarose + Violeta
gua Destilada Incolor
FONTE: DADOS OBTIDOS LAB. BIOQUMICA UNINOVAFAPI / FISIOTERAPIA, 2013.2.
Na reao de Molisch, os monossacardeos presentes em soluo so desidratados
por ao de cidos fortes concentrados, como o cido sulfrico (H
2
SO
4
). O cido rompe
facilmente as ligaes glicosdicas presentes em molculas de polissacardeos,
quebrando-os e fornecendo seus monossacardeos. Esses, por sua vez, so desidratados
e assim pode-se ter como produto: o furfural, quando o monossacardeo desidratado for
uma pentose, e o hidroximetilfurfural (HMF), quando for uma hexose. Os compostos
furfricos resultantes reagem com o naftol presente no reativo de Molisch formando um
produto de condensao colorido.
A presena do anel violeta caracterstico da condensao dos compostos furfricos
com o naftol foi observado em todos os tubos de ensaio que continham soluo de
carboidratos (Glicose, Amido e Sacarose), conforme mostra a Tabela 1. Portanto revela
a presena de hidratos de carbono nas amostras. A soluo preparada com gua
destilada no apresentou tal colorao, pois ela no possui nenhuma das propriedades
dos carboidratos.
Tabela 2. Diferenciao entre Aldoses e Cetoses.
AMOSTRA SELIWANOFH COR REAO T (C) G.F.
Glicose Incolor Aldedo
Amido Incolor Aldedo
Frutose + Laranja 8 min 84C Cetona
Sacarose + Laranja 9 min 85C Cetona
gua Incolor
FONTE: DADOS OBTIDOS LAB. BIOQUMICA UNINOVAFAPI / FISIOTERAPIA, 2013.2.

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Na reao de Seliwanoff, a presena de cido clordrico em soluo quebra as
ligaes glicosdicas, transformando os poli e oligossacardeos em monossacardeos. As
cetoses originadas, ento, sofrem forte desidratao pelo cido clordrico originando
compostos similares ao furfural. Estes compostos furfricos formam um complexo
colorido pela reao de complexao com o Resorcinol presente em soluo. Este teste
permite diferenciar aldoses de cetoses, onde a reao com a cetose mais rpida e mais
intensa. Isso porque a formao do furfural mais fcil que a formao do
hidroximetilfurfural.
Os tubos de ensaio que apresentavam cetoses em soluo foram, a frutose e a
sacarose, conforme a Tabela 2, ambas apresentando uma colorao laranja,
caracterstica da complexao dos compostos furfricos com o resorcinol. Percebe-se na
Tabela 2, que o tempo de reao das cetoses foi muito demorado, isso se deu a fatores
externos, que influenciaram nas condies bsicas para que a reao ocorresse. Logo a
reao para cetoses mais rpida e mais intensa do que para aldoses.
As solues de glicose, amido permaneceram incolor, portanto so aldoses. A gua
destilada permaneceu inalterada, pois nem ao menos carboidrato.
Para outro tipo de acares, um aquecimento prolongado pode dar uma cor
alaranjada. Esse o caso da Glicose que considerada uma falsa aldose.
Tabela 3. Acares Redutores.
AMOSTRA BENEDICT COLORAO
Glicose + Vermelho-tijolo
Frutose + Vermelho-tijolo
Sacarose Incolor
Amido Incolor
gua Incolor
FONTE: DADOS OBTIDOS LAB. BIOQUMICA UNINOVAFAPI / FISIOTERAPIA

Segundo Lenhinger os monossacardeos podem ser oxidados por agentes oxidantes
relativamente suaves tais como ons frrico (

e cprico (

. O carbono do
grupo carbonila oxidado a cido carboxlico. Logo aucares capazes de reduzir os ons
frricos ou cpricos so chamados aucares redutores. J os dissacardios consistem de
dois monossacardeos unidos covalentemente entre si por uma ligao glicosdica, a
qual formada quando um grupo hidroxila de um acar reage com o tomo de carbono
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anomrico de outra molcula de acar. Quando um tomo de carbono anomrico
envolvido em uma ligao glicosdica ele no pode mais ser oxidado por um on cprico
ou frrico. O acar contendo o tomo de carbono anomrico no mais age como um
acar redutor.
Com o seguinte experimento entende-se que como a glicose e a frutose
compreendem grupos que apresentam a hidroxila livre no C-1(carbono anomrico) so,
portanto agentes redutores, evidenciando a capacidade desses compostos de reduzir ons
frrico ou cprico em solues alcalinas. O aparecimento de um precipitado de
colorao vermelho-tijolo indica que os ons Cu
2+
do reagente de Benedict foram
reduzidos a Cu
+
, indicando presena de acar redutor. A sacarose e o amido como so
compostos de dissacardeo e polissacardeo respectivamente no apresentam a hidroxila
livre e, portanto no reagiram com o reativo de Benedict permanecendo incolores, logo
so acares no-redutores.
Em alguns casos a sacarose pode obter uma colorao vermelho-tijolo. Isso ocorre
pelo aumento do aquecimento, que pode quebrar a ligao e liberar os dois
monossacardeos que formam a sacarose.
Tabela 4. Hidrlise de Polissacardeos.
TUBO TEMPO DE
REAO (min)
PRODUTO
IDENTIFICADO
COR
1 0 Amido Azul
2 5 Amido Azul
3 10 Amilodextrina Roxa
4 15 Eritrodextrina Vermelho
5 20 Acrodextrina Incolor
6 25 Acrodextrina Incolor
7 30 Glicose Vermelho-tijolo
FONTE: DADOS OBTIDOS LAB. BIOQUMICA UNINOVAFAPI / FISIOTERAPIA

Na experincia com o reagente Lugol, foi observado que no primeiro tubo (1) e no
segundo (2) houve colorao azul, ou seja, ainda h presena de amido, no tubo (3)
ocorreu uma colorao fraca de roxo (presena de amilodextrina), no tubo 4 houve a
colorao vermelho (eritrodextrina) e nos ltimos tubos (5 e 6) foi incolor
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(acrodextrina) apresentando a colorao do lugol, notando-se pouca diferena entre o
tom desses dois ltimos tubos.
O amido (homopolisacardeo no-redutor) ao ser tratado com cido clordrico
quente, sofreu uma sucesso de hidrlises at se converter totalmente em molculas de
glicose. Durante esse processo foram encontrados como produtos intermedirios
dextrinas, as quais foram caracterizadas na tabela acima.
O ltimo tubo (7) serviu para a comprovao da hidrlise cida do amido, que se
deu pela positividade da reao de Benedict realizada (colorao vermelho-tijolo), j
que a glicose originada da hidrolise um acar redutor, pois possui uma nica
hidroxila livre.
































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4. CONCLUSO
A partir dos experimentos realizados, pode-se constatar a organizao dos
carboidratos e como se identifica a estrutura de um, as etapas do processo de hidrlise
em polissacardeo, detectou como distinguir uma Aldose de uma Cetose, como se
comporta um carboidrato redutor e no redutor. Constatando-se assim, que as prticas
realizadas tiveram grande importncia para a assimilao e complemento dos assuntos
aprendidos nas aulas tericas.
























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REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

1. LENHINGER, Albert L.. Princpios de bioqumica. 3ed. So Paulo: Sarvier,
2002.
2. CAMPBELL, M.K. Bioqumica. 3 ed. Porto Alegre: Artmed, 2006.
3. CHAMPE, P.C; HARVEY, R.A. Bioqumica ilustrada. 3 ed. Porto Alegre:
Artmed, 2006.
4. REMIO, Jose Oscar R. et al. Bioqumica: guia de aulas prticas. Verso
online, Porto Alegre, EDI-PUCRS, 2003.