SERVICIO NACIONAL DE APRENDIZAJE

CENTRO NACIONAL DE HOTELERIA, TURISMO Y ALIMENTOS

LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
RECUENTO DE CLOSTRIDIUM SULFITO REDUCTORES
MONITORIA: CATTERIINE CUTIVA REINA
DIANA CASTELLANOS
1. INTRODUCCION
Algunas de las especies del gnero Clost!"!#$ tienen la propiedad de reducir el
ion sulfito a sulfuro que en presencia de citrato frrico o cualquier otra sal (metales
pesados) forman colonias de color negro.
El recuento de esporas es considerado como el indicador ms importante de las
bacterias anaerobias capaces de formar esporas. Estas estructuras de
supervivencia suelen presentarse en alimentos enlatados que no han sido
producidos bajo condiciones de calidad en cada proceso y malas condiciones de
almacenamiento.
%. OBJETIVOS
Adquirir destreza en el recuento de esporas de Clostridium sulfito reductor.
Analizar los resultados obtenidos por la muestra analizada conforme a la
normatividad.
&. MATERIALES
ubos con !m" de agua peptonada.
Erlenmeyer con !#m" de agua peptonada.
$ipetas
%icropipeta
$untas azules
ubos de &#m" estriles
'radillas
(arra de anaerobiosis
)a*o de %ar+a
Agar ,ulfito $olimi-ina ,ulfadiazina (,$,)
.ncubadora
/uchillos0 tenedores y cuchara
)alanza
$apeles de pesado
'. METODOLOGIA
P()**+!,- "( l* $#(st*
1ealizar diluciones seriadas hasta &#
23
bajo cabina de flujo laminar.
Po+("!$!(-to
&. $ipetear &m" de cada una de las diluciones en tubos estriles.
4. /olocar los tubos en ba*o de %ar+a a 5#6/ durante &#min.
3. 7ejar enfriar rpidamente en agua corriente.
8. 9erter ! m" del Agar ,$, en los tubos mediante siembra en profundidad.
:. Agitar y dejar solidificar.
;. /olocar las cajas en c<mara de anaerobioses e incubar a 3:6/=>24 durante
?4 horas.
.. LECTURA DE RESULTADOS
,e recomienda observar los tubos a las 480 85 y ?4 horas debido a que los
microorganismos pueden producir a las 48 horas @
4
, tornando el medio de
cultivo de color negro0 impidiendo su lectura.
,e deben seleccionar las cajas que presenten recuentos entre &:2&:#
colonias.
1mL de la
dilucin
Bao de Mara a
80C durante
10min
Adicionar 9mL del Agar SPS
agitar y dejar olidi!car e
"ncu#ar $%C&'() durante
*) +ora
,eali-ar el
recuento entre %(
%0 colonia negra
/. E0PRESION DE LOS RESULTADOS
,e calcula el nAmero N de Clostridium sulfito reductores presentes en & ml
B & g del producto0 usando la siguiente ecuaciBnC
7ondeC
Da es la suma de las colonias de Clostridium sulfito reductores contadas en
todas las cajas de dos diluciones sucesivas0 una de las cuales contiene al
menos &: colonias.
n& es el nAmero de cajas guardadas en la primera diluciBn.
n4 es el nAmero de cajas retenidas en la segunda diluciBn.
d es el factor de diluciBn correspondiente a la primera diluciBn retenida.
"os resultados se redondean a dos cifras significativas.
,e toma como resultado el nAmero de Clostridium sulfito reductores por mililitro
o por gramo de producto0 e-presado como un nAmero entre &0# y !0!0
multiplicado por la potencia de &# apropiada.
1. BIBILOGRAFIA
./EFE/. 4###. Forma cnica /olombiana F/ 8538. %icrobiolog+a de
alimentos y alimentos para animales. %todo horizontal para el recuento de
Clostridium sulfito reductores e identificaciBn de Clostridium perfringens. tcnica
de recuento de colonias.
./EFE/. 4##!. Forma cnica /olombiana F/ 8#!4. %icrobiolog+a de alimentos
y productos para alimentaciBn animal. 1equisitos generales y directrices para anlisis
microbiolBgicos.
.F9.%A. &!!5. %anual de tcnicas de anlisis para control de calidad
microbiolBgico de alimentos para consumo humano.