HASIL DAN PEMBAHASAN

Isolasi DNA kromosom, pada praktikum ini menggunakan sel bakteri Gram negatif. Bakteri Gram
negatif yang digunakan adalah Escherchia coli. Bakteri Gram negatif digunakan dalam percobaan
isolasi DNA ini karena sel bakteri Gram negatif memiliki struktur dinding sel yang lebih tipis
dibandingkan dengan sel bakteri Grams positif sehingga akan lebih mudah untuk dipecahkan. Bakteri
Gram negatif lebih tipis karena susunan peptidoglikan yang dimilikinya tidak sebanyak dan setebal
sel bakteri Gram positif. DNA yang akan diisolasi dari E. Coli ini adalah DNA kromosom. DNA
kromosom memiliki bentuk yang linear sedangkan DNA plasmid memiliki bentuk yang sirkular.
Plasmid merupakan molekul utama DNA sirkular dengan ukuran yang jauh lebih kecil dibanding
dengan kromosom. DNA kromosom membawa informasi essential bagi keberlangsungan biologis sel
tersebut dengan sifat herediter. DNA plasmid adalah asesoris, dengan adanya plasmid, maka DNA
lebih sulit untuk ditembus atau dipecahkan.
Isolasi DNA kromosom yang dilakukan dengan GeneJET Genomic DNA Purification Kit. Prinsip dari
isolasi ini adalah dengan memisahkan DNA kromosam atau DNA genom dari komponen-komponen
sel lain. DNA genom adalah DNA mentah yang masih memiliki komponen lengkap seperti promotor
gen, bagian exon (mRNA yang akan dikirim ke luar nukleus untuk ditranslasikan), dan bagian intron (
mRNA yang akan tetap berada di dalam nukleus karena kemungkinan mRNA tersebut akan
membentuk protein yang tidak fungsional jika ditranslasikan).
Bakteri E. Coli ditumbuhkan atau diinokulasikan ke dalam media Luria-Bertani (LB). Luria-Bertani
merupakan media yang optimal untuk pertumbuhan bakteri. Media ini salah satu media yang paling
sering digunakan untuk memelihara dan menumbuhkan strain rekombinan dari Escherchia coli.
Media LB memiliki komposisi dari tryptone, NaC, ekstrak ragi, dan aquabidest. Ke dalam media ini
juga ditambahkan antibiotik ampisilin. Antibiotik ampisilin ditambahkan agar bakteri yang sudah
terdapat plasmid yang resisten terhadap antibiotik teteap stabil dan berkembang