UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

Laboratorio de Microbiologa
Prctica: Antagonismo
Diana Carolina Gonzalez
1
, Juan Camilo Velsquez
2


INTRODUCCION

El antagonismo que se presenta entre los microorganismos permite conocer diferentes
interacciones en las cuales el hospedero se ve afectado bien sea por competencia de
nutrientes, espacio o bien sea por produccin de toxinas, todo con el fin de excluir al
colonizador de microhbitat. (Carolina 2014). Una vez la microflora beneficia al husped y
evita la formacin de patgenos, podemos decir que hay antagonismos, esto implica una
competencia entre los microorganismos. La microfauna puede inhibir la accin de otros
microorganismos patgenos y proteger al husped, ya que estos antimicrobios compiten
con ellos por los nutrientes disponibles en el medio y generan sustancias antibiticas que
no permiten su crecimiento afectando la disponibilidad de oxgeno y el pH del medio.
(Tortora, Gerard J., 2007)
En este laboratorio se realizaron cultivos de antagonismo como Trichoderma spp y
Botrytis, Bacilo populis y Sclerotinia, Bacilo y Rhizopus, Aceites esenciales y Aspergillus
Niger y Collectotrichum, Fusarium sp y Actinomycete; con el objeto de identificar la
reaccin e interaccin de los microorganismos observando la reaccin y el tamao, junto
con el aro de inhibicin presentado.

MARCO TEORICO

Siempre y cuando las condiciones ambientales no sean extremas que sobrevivan slo
poco organismo especializados, habr competencia entre los miembros de una
comunidad por las fuentes de nutrientes y energa que son escasas. Si los factores
abiticos y los suministros de nutrientes son favorables, entonces los microorganismos se
multiplicaran y competirn por el espacio. La cantidad total de espacio disponible por lo
general no est limitada, pero hay un nmero limitado de microhbitats apropiados que
contienen nutrientes, etc.; en tales situaciones puede haber competencia por el espacio
utilizable ms que por el espacio total. Mucha de las caractersticas que hacen a estos
microorganismos buenos competidores son:
Requerimiento de nutrientes moderado y una amplia tolerancia de condiciones
ambientales, de manera que contine creciendo y reproduciendo en una amplia
variedad de sustratos y en una variedad de condiciones.
Tasas de crecimiento rpidas y reproduccin rpida, de modo que ocupe
rpidamente cualquier microhabitat disponible, tiene etapas de latencia en casi
todos los lugares y se disemina ampliamente, por ejemplo, un alto potencial de
inculo.
La capacidad producir toxinas, por ejemplo, antibiticos, para excluir a los
competidores del microhbitat que est colonizando, y al mismo tiempo tolerancia
a las toxinas de otros organismos, de modo que pueda colonizar microhabitats
ocupados.(Campbell, 2005)

1
Facultad de Ciencias Agrarias. dcgonzalez@unal.edu.co. COD: 25051935
2
Facultad de Ciencias Agrarias. juvelasquezro@unal.edu.co. COD: 25051994
Lo que ocurra la competencia depender de la accin del organismo frente al otro. Entre
ellas se destaca la exclusin competitiva que representa el mayor crecimiento frente al
otro, cambio de factores abiticos que puede dar a una nueva especie dominante, puede
haber coexistencia si se encuentran en diferente sustrato, algunos microorganismos
pueden escapar a la competencia; hay organismos que desarrollan tolerancia ambientales
y pueden desarrollarse en ambientes que otros no pueden permitiendo evitar la
competencia o pueden usar sustratos que otros organismos no degradan.

Trichoderma: El gnero Trichoderma posee buenas cualidades para el control de
enfermedades en plantas causadas por patgenos fngicos del suelo, principalmente de
los gneros Phytophthora, Rhizoctonia, Sclerotium, Pythium y Fusarium entre otros. Las
especies de Trichoderma actan como hiperparsitos competitivos que producen
metabolitos antifngicos y enzimas hidrolticas a los que se les atribuyen los cambios
estructurales a nivel celular, tales como vacuolizacin, granulacin, desintegracin del
citoplasma y lisis celular, encontrados en los organismos con los que interacta.
Actinobacteria o Actinomycete: Aunque el orden de los Actinomycetales abarca ms de
80 gneros diferentes, se producen dos tercios de los antibiticos microbianos conocidos
hoy en da , principalmente por especies de Streptomyces. Actinobacteria tambin
producen metabolitos secundarios que exhiben otras bioactividades de los antibiticos, un
inhibidor de enzimas, tales como inmunesupresivos, fitotoxinas y pesticidas. (Amoroso,
Benimeli, & Cuozzo, 2013) Actinomicetos han ocupado un lugar destacado en la industria
farmacutica por su capacidad aparentemente ilimitada para producir metabolitos
secundarios como los antibiticos con estructura qumica diversa y actividades biolgicas.
(Shami, Bakheit, & .Saadabi, 2014)

Fusarium Sp: Fusarium es un gnero fngico incluido dentro de la Clase Hyphomycetes
(subdivisin Dteuromycotina) que produce macroconidios, microconidios y
clamidoesporas, considerndose estas ltimas como las esporas ms resistentes. Las
especies de Fusarium comprenden especies patgenas, parasitas y saprofitas y pueden
estar presentes en todas las partes vegetativas y reproductivas de las plantas. Se
encuentran prximas a todas las especies vegetales en la mayor parte del mundo.
Algunas especies causan enfermedades en humanos y animales, y muchas de ellas
producen micotoxinas. Adems se pueden aislar a partir de suelos de prcticamente de
todas las partes del mundo. (Suares, 2007)

Botrytis: El ciclo de vida generalizado de Botrytis comprende varias etapas: una somtica
(vegetativa), el sistema micelial que produce esporas asexuales o macroconidios (etapa
anamorfa), esclerocios y microconidias (espermtica). Los esclerocios normalmente
germinan para producir micelio o conidias pero despus de un perodo de
acondicionamiento adecuado y fertilizacin, stos posteriormente pueden germinar y en
las condiciones adecuadas producir apotecios (etapa teleomorfa) que contienen las
ascosporas resultantes de la meiosis (Beever and Weeds, 2007). Los gneros
microbianos que han mostrado mayor potencial para el control de enfermedades
causadas por Botrytis incluyen los hongos Trichoderma, Gliocladium y Ulocladium, las
bacterias Bacillus y Pseudomonas y las levaduras Pichia, Candida y Rhodotorula (Elad
and Stewart, 2007).

Bacilo subtilis: Bacillus subtilis es otra bacteria fungicida de origen natural , fungicidas B.
subtilis se consideran totalmente seguro para los seres humanos y animales ya que las
bacterias atacan slo hongos (Stitch, 2008) . Sclerotinia sclerotiorum , un patgeno del
suelo provoca la marchitez Sclerotinia o pudricin del tallo en soja y es un patgeno para
muchos cultivos como la lechuga y el girasol . El potencial de control biolgico de las
suspensiones de clulas o filtrados libres de clulas de dos cepas de Bacillus subtilis ( ...)
, se valor para la supresin de Sclerotinia tallo enfermedad de pudricin en condiciones
de campo. (Narayanasamy, 2013)

Sclerotinia: El moho blanco es una enfermedad causada por el hongo Sclerotinia
sclerotiorum (Lib.) de Bary. Este patgeno tiene una amplia distribucin a nivel mundial y
afecta a numerosas especies. Est especialmente presente en regiones con temperaturas
moderadas y periodos de elevada humedad, como en el norte de Espaa. En Asturias, es
frecuente encontrarlo sobre cultivos de Faba Granja, siendo el responsable de mermas
significativas en la produccin y calidad del cultivo, especialmente en veranos y otoos
hmedos. (Ana Campa Negrillo, 2009)

Bacilo: El gnero Bacillus pertenece a la familia Bacilliaceae, es un gnero que hoy en
da incluye ms de 60 especies de bacilos. Este gnero est formado por
microorganismos bacilares Gram positivos, formadores de endosporas, quimiheterotrofos
que normalmente son mviles y rodeados de flagelos periticos. a. Su capacidad de formar
endosporas les permite sobrevivir a condiciones adversas y poseen una gran
adaptabilidad fisiolgica y gentica, lo que hace a muchas especies ptimas para su uso
como agentes de control biolgico, para controlar hongos filamentosos. Son anaerobios o
aerobios facultativos son catalasa positivos. Las clulas bacterianas de este gnero tienen
un amplio tamao que varia 0,5 a 2,5 m x 1,2-10 m. Este gnero se encuentra
comnmente en suelos y plantas donde tienen un papel importante en ciclo del carbono y
el nitrgeno. Son habitantes comunes de aguas frescas y estancadas, son
particularmente activos en sedimentos. (Koneman, 2001).

Rhizopus spp: Es un hongo filamentoso cosmopolita de suelo, frutas y verduras en
descomposicin, excrementos de animales, y pan viejo. Las especies de Rhizupus son
contaminantes comunes, pero son causales de infecciones oportunistas en los humanos.
Algunas especies son patgenos de las plantas. Las especies ms frecuentes son
Rhizopus oryzae, R. rizopodimorfis, R. stolonifer, R. microsporas y R. nigricans.
(Tangarife, 2011)

Aceites esenciales: Los aceites esenciales son compuestos orgnicos voltiles que no
estn hechos a base de agua. Aunque son solubles en aceite, no contienen lpidos grasos
o cidos como los que se encuentran en aceites vegetales y animales. Los aceites
esenciales son muy limpios, frescos al tacto e inmediatamente absorbidos por la piel.
Puros e inalterados, los aceites esenciales son translucidos y varan en color desde
cristalinos hasta un azul profundo. (Serrano, 2014)

Collectotrichum El hongo Collectotrichum es uno de los gneros patgenos de las
plantas masa importantes y de mayor distribucin en el mundo ya que ataca cultivos
especialmente cultivos en regiones tropicales y subtropicales. (Manners et al., 2000;
Waller and Brigde, 2000) El agente causal de antracnosis Colletotrichum sp. Ha tomado
gran importancia en cultivos a nivel mundial, intentndose desarrollar sistemas que
modelen los procesos de infeccin y mecanismos de resistencia bioqumica para tener
mayor conocimiento que sustente el manejo del patgeno. (Rodrguez y Redman, 2000)

Aspergillus Niger: En estos hongos se ha descubierto su fase de reproduccin sexual
y se ubican dentro de la divisin Ascomycota. Son organismos heterotlicos y la unin de
hifas de sexo diferente origina la formacin de ascas que contienen ascosporas, tanto las
ascas como las ascosporas estn contenidas en un cuerpo fructfero que puede ser
redondo y cerrado que se conoce como cleistotecio, o bien, puede tener forma de pera
llamado peritecio. (UNAM, 2012)



RESULTADOS
Imagen 1: Vista Macroscpica Antagonismo #1


Botrytis Vs Trichoderma
Imagen 1: Vista Macroscpica Antagonismo #2






Actinomycete vs Fusarium sp
%. . =
12
1
100
R
1
=Distancia del hongo en
direccin al antagonista.
R
2
= Distancia entre el hongo y
la bacteria (zona de
inhibicin)
%. . =
10,7
1
100
% I.A = 30%
Botrytis
Halo de inhibicion
Trichoderma
Actinomycete
Fusarium sp






Imagen 3: Vista Macroscpica Antagonismo #3


Bacillus Subtilis Vs Esclerotinia
Imagen 4: Vista Macroscpica Antagonismo #4


Aceite de Tomillo Vs Aspergillus Niger




%. . =
2,5 1,5
2,5
100
% I.A = 40%

%. . =
5,72,0
5,7
100
% I.A = 61%
Esclerotinia
Bacilos Subtilis
Halo de Inhbicion
Aceite de Tomillo
Aspergillus Niger







Imagen 5: Vista Macroscpica Antagonismo #5


Colletotrichum Vs Aceite de Romero
Imagen 6: Vista Macroscpica Antagonismo #6



Bacillus vs Rizhopus Sp
%. . =
6,50,2
6,5
100
% I.A = 97%
%. . =
2,72
2,7
100
% I.A = 35%
Aceite de Romero
Collectotrichum
Bacillus
Rizhopus Sp
Halo de Inhibicin

ANALISIS DE RESULTADOS

Antagonismos

Trichoderma Vs Botrytis: No se logra presenciar el crecimiento adecuado
de los dos hongos, por esta razn no hay antagonismo en el medio. Para
poder visualizar el antagonismo se necesita dejar crecer mas tiempo los
hongos. Sin haber antagonismo no se procedio a calcular %I.A. porque
sera infructuoso su clculo. Se logra observa que trichodermaa genera un
halo de inhibicin por una bacteria contaminante en el medio que estaba
con botritys.

Actinomycete vs Fusarium Sp: En este antagonismo se evidencia
claramente el antagonismo que hay entre el actinomycete y fusarium, ya
que actinomycete inhibe el crecimiento de fusarium hacia su espacio,
obligando claramente a fusarium a buscar otro espacio de crecimiento,
donde no se encuentre su antagonista, actinomycete. El porcentaje de
inhibicin del antagonista arroja un 30%, signficando que el actinmycete
tiene una capacidad inhibitoria en fusarium sp de 30%, queriendo decir que
hace reducir en este porcentaje la capacidad de crecimiento de fusarium sp

Bacillus Subtilis vs Sclerotinia: En este medio hay una prueba evidente
de que Bacillus Subtilis es un antagonista de Sclerotinia, ya que se
dispersa por todo el medio hasta que no deja crecer el patgeno,
generando un halo de inhibicin y no dejarlo crecer por ninguna parte del
medio, solamente dejndolo crecer en el punto inicial de inoculacin. El
porcentaje de inhibicin del antagonista arroja un 40%, signficando que el
Bacillus Subtilis tiene una capacidad inhibitoria en sclerotinia de 40%,
queriendo decir que hace reducir en este porcentaje la capacidad de
crecimiento de Sclerotinia.

Aceite de Tomillo vs Aspergillus Niger: El aceite dispersado por el
medio, hace que Aspergillus Niger no presente un crecimiento adecuado,
ya que una de las caractersticas de este hongo es su rpido crecimiento
en un medio desde su inoculacin. El antagonismo se demuestra
claramente, porque el hongo, solamente al igual que sclerotinia, logra
crecer en su punto de inoculacin, aunque en el medio se observa varios
puntos de crecimiento del hongo, pero esto es porque despus de la
inoculacin no se tuvo el cuidado pertinente con la caja de Petri y el inoculo
se logro mover por varios puntos de la caja. El porcentaje de inhibicin del
antagonista arroja un 61%, signficando que el aceite tiene una capacidad
inhibitoria en Aspergillus Niger de 61%, queriendo decir que hace reducir
en este porcentaje la capacidad de crecimiento de Aspergillus Niger.

Aceite de Romero vs Collectotrichum: El aceite de Romero es un claro
antagonista de collectotrichum, ya que en su dispersin en el medio, no
permite que el patgeno crezca adecuadamente. Asi mismo, el hongo al
tener inhibicion de crecimiento, intenta esparcirse pero no lo logra
satisfactoriamente, dejando solo un pequeo rastro de su crecimiento y su
punto de inoculacin. El porcentaje de inhibicin del antagonista arroja un
97%, significando que el aceite tiene una capacidad inhibitoria en
Collectotrichum de 97%, queriendo decir que hace reducir en este
porcentaje la capacidad de crecimiento de Collectotrichum, prcticamente
no dejndolo crecer en el medio.

Bacillus vs Rizhopus sp: El moho negro del cual se caracteriza Rizhopus
tiene como antagnista a Bacillus, como se presencia en el medio. Rizhopus
queriendo colonizar todo el medio, se encuentra con Bacillus, haciendo que
este antagonista le prohba crecer en sus cercanas, dejando claramente
que Bacillus tiene el control en el medio, generando un halo de inhibicin
tambien. El porcentaje de inhibicin del antagonista arroja un 35%,
signficando que el Bacillus tiene una capacidad inhibitoria en Rizhopus sp
de 35%, queriendo decir que hace reducir en este porcentaje la capacidad
de crecimiento de Rizhopus sp.

DISCUSION DE RESULTADOS

El antagonismo entre microorganismos es una forma natural de control en cultivos
agronmicamente importantes, donde especies de patgenos pueden arruinar estos
cultivos, Para el control de estos patgenos, se habla tambin de un control biolgico que
refiere a antagonismo, siendo una forma alternativa sana en comparacin al uso de
fungicidas para el control de patgenos. Como dice Campbell 2005, los microorganismos
en condiciones favorables siempre competirn por nutrientes, espacio utilizable, etc. En la
competencia solo ganara uno de ellos por diferentes factores como tolerancia a
condiciones, velocidad de reproduccin para ocupar el microhabitat disponible y
capacidad de producir compuestos qumicos para que excluir al otro competidor por el
microhabitat o la tolerancia a estos compuestos y poder colonizar los microhabitats ya
colonizados.
Botritys, actuando como patgeno, tiene como antagonista a Trichoderma, que es un
hiperparsito que es capaz de degradar la pared celular del hongo, con sus diferentes
metabolitos antifungicos y enzimas hidroliticas. Beever y Weeds, 2007, exponen
claramente y dejando en razn que Trichoderma es uno de los hongos ms potentes para
controlar enfermedades causadas por Botrytis.
Para el caso Fusarium, un patgeno que es capaz de crecer en cualquier parte de la
planta y proliferarse por gran variedad de cultivos, inclusive hasta afectar a los humanos y
los animales, puede ser controlado por su antagonista en este caso un actinobacteria, que
es un inhibidor voraz que su caracterstica principal es ser un antibitico que puede actuar
como inmunesupresivo, atacar al patgeno con sus fitotoxinas obligndolo a buscar otro
sitio de crecimiento, su actividad biolgica lo cataloga como un antagonista de fusarium
haciendo caso a Shami, Bakheit, & .Saadabi, 2014
Sclerotinia, un hongo patgeno que produce el moho blanco, afectando numerosas
especies alrededor del mundo como lo especifica Ana Campa Negrillo, 2009, posee un
antagonista que es Bacillus subtilis que puede suprimir el crecimiento de este patgeno
por ser un fungicida natural que ataca al patgeno. B. Subtilis es inofensivo para el ser
humano y animales ya que ataca solamente al hongo, segn Stitch, 2008
Los aceites esenciales actan como antagonistas para Collectotrichum y Aspergillus
Niger, al primero correspondindole aceite de tomillo y al segundo aceita de Romero.
Tanto Collectotrichum y Aspergillus Niger son patgenos que atacan gran variedad de
cultivos. En los resultados se logra notar que los aceites esenciales por sus componentes
orgnicos voltiles, pueden inhibir el crecimiento de Aspergillus y Collectotrichum,
solamente dejando el crecimiento del inoculo.
En el caso de Richopus sp, es un contaminante comn que afecta cualquier cosa que
este expuesta al aire, ya que este patgeno se encuentra en las partculas de aire y al
pegarse a cualquier sustrato puede tener un crecimiento acelerado. Para este patgeno
se experiment con un antagonista para inhibir su crecimiento que ser Bacillus sp,
mostrando que este antagonista puede inhibir el crecimiento del patgeno, ya que compite
con hongos filamentosos como son Rizhopus sp, y tiene una gran capacidad de crecer en
condiciones adversas como lo especifican Tangarife, 2011 y Koneman, 2001.
En los diferentes mtodos de antagonismo podemos clasificar segn Campbell 2005 que
en los antagonismos entre Actinomycete vs Fusarium sp y los aceites esenciales vs
Collectotrichum y Aspergillus Niger, se da un antagonismo por capacidad de producir
toxinas, como antibiticos para excluir a los competidores en el medio. En cuanto a
Trichoderma vs Botrytis por requerimiento de nutrientes, usando Trichoderma el
hiperparasitismo. Y por ltimo a Bacillus vs Rizhopus y Sclerotinia por su rpido
crecimiento ocupando casi todo el espacio fsico disponible en el medio y tambin en el
caso de Bacillus por tener una amplia tolerancia a condiciones ambientales.

CONCLUSIONES
Se conocio la potencia de antagonismo entre los microorganismos enfrentados,
presentando cada uno variacin entre sus antagonistas, por sus diferentes
mtodos de antagonismo.
Los mtodos ms comunes de antagonismo que se presentaron fue por medio
antibitico o biosidas, en el caso de Actinomycete vs Fusarium sp y los aceites
esenciales vs Collectotrichum y Aspergillus Niger; por hiperparasitismo en
competencia por nutrientes en el caso Trichoderma vs Botrytis; dejando de ultimo
a Bacillus vs Rizhopus y Sclerotinia, dando una competencia por el espacio fsico.

BIBLIOGRAFIA

Amoroso, M. J., Benimeli, S. C., & Cuozzo, S. A. (2013). Actinobacteria, Aplicattion
in Bioremediation and Production of Industrial Enzymes. NW: CRS Press.
Ana Campa Negrillo, Aida Pascual Gonzlez, Juan Jos Ferreira Fernndez.
(2009). El moho blanco: una enfermedad comn en el cultivo de Faba Granja
Asturiana. Tecnologa Agroalimentaria, 7-9.
Beever, R.E. and Weeds, P.L. taxonomy anciond genetic variation of Botrytis and
Botryotinia. In:
Campbell, R. (2005). Ecologa Microbiana. Mexico D.F: Limusa S.A.
Carolina Corredor. 2014. Cruso de microbiloga, Universidad Nacional de
Colombia, Facultad de agronoma.
Elad, Y.; Williamson, B.; Tudzynski, P. and Delen, N. Botrytis: Biology, Pathology
and Control,
ISBN 978-1-4020-2626-3 (e-book), Pases Bajos, 2007, p. 29-47Elad, Y. and
Stewart, A. Microbial control of Botrytis spp. In: Elad, Y.; Williamson, B.; Tudzynski,
P. and Delen, N. Botrytis: Biology, Pathology and Control, ISBN 978-1-4020-2626-
3 (e-book), Pases Bajos, 2007, p. 223-234
Koneman. E.W 2001.Diagnostico microbiolgico: Texto y atlas de color. Quinta
Edicion. Editorial Mdica Panamericana. Buenos Aires.
Narayanasamy, P. (2013). Biological Management of Diseases of Crops. New
York: Springer Science & Business Media.
Serrano, M. L (2014) Bioqumica bsica, Universidad Nacional de Colombia.
Luis J. Mndez Tovar. 2012,Aspergillus, Universidad Nacional Autnoma de
Mxico
Manners, S., Stephenson, S., Chaozu, H., Maclean. 2000. Gene transfer and
expression in Collectotrichum gloesporialescausing Anthracnose on Stylosanthes
En: Colletotrichum host specifity, pathology and host pathogen interaction eds. Dov
Prusky, Stanley Freeman and Martin B. Dickman St Paul, Minessota Ed. APS
Press the American Phytopathological Society.
Rodrguez, R. and Redman, R. 2000. Colletotrichum as a model system defining
the genetic basis of fungal symbiotic lifestyles. En: Colletotrichum host specifity,
pathology and host pathogen interaction eds. Dov Prusky, Stanley Freeman and
Martin B. Dickman St Paul, Minessota Ed. APS Press the American
Phytopathological Society.
Shami, E. A., Bakheit, A., & .Saadabi, M. (2014). Antagonistic affects of
Actinomycetes isolated from Tuti island farms (Central Sudan) against Fusarium
oxysporum f.sp.vasinfectum a phytopathogenic fungus. International Journal of
Advanced Research, dos , 114-120. Recuperado el 13 de 10 de 2014, de
https://www.academia.edu/6435817/Antagonistic_affects_of_Actinomycetes_isolat
ed_from_Tuti_island_farms_Central_Sudan_against_Fusarium_oxysporum_f.sp.va
sinfectum_a_phytopathogenic_fungus
Stitch, J. C. (2008). Marijuana Garden Saver: Handbook for Healthy Plants.
california : Ed Rosenthal.
Suares, F. (2007). Persistencia y capacidad infectiva del hongo fitopatgeno
fusarium oxysporum, f. Sp. Melonis en residuos vegetales de meln. Almeria:
Universidad de Almeria.
Tortora, Gerard J.(2007), Introduccin A La Microbiologa, 9
na
Edicin, Editorial
Medica Panamericana, Buenos Aires, Argentina.
Vernica Tangarife C. 2011. SSO Docente Escuela de Microbiologa Universidad
de Antioquia










Con las manos aun temblorosas luego de leer la carta, la ltima posiblemente. Se limpi las lgrimas que
haban cado por sus mejillas y la arrugo, la volvi pedazos, la oli, la llevo a su corazn y con las manos
alrededor de sus pechos intento entender si en esas letras estaba l. Si realmente era su deseo o
simplemente era un grito de auxilio para que ella lo salvara de su miserable existencia De cuantas formas se
puede reaccionar frente a una situacin como esta? La vida generalmente nos ofrece una dualidad de
respuestas s, no, fro, caliente, blanco, negro, correr, detenerse, abrazar o dejar ir... Pero como espera el otro
que reaccionemos Hasta dnde va mi libertad?..."