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Travaux dirigés
Exercice 1 :
1. Un rotor d’ultracentrifugeuse tourne à 40 000 tours par minute.
Calculer l’accélération γ (m s-2) existant à 10 cm de l’axe du rotor.
2. A combien de fois la pesanteur (g = 9,81 m s-2) cette accélération est-elle égale ?
Exercice 2 :
Une solution diluée de tubuline de cerveau de veau (ύ = 0,727 cm 3 g -1 ) est soumise à une ultracentrifugation
(21 300 tours min-1) ,à 20 °C.Une fois atteint l’équilibre de sédimentation, on mesure c pour différentes valeurs
de r.
r(cm) c(gl –1)
7 0,162
7,02 0,251
7,04 0,382
7,06 0,588
7,08 0,912
7,10 1,377
Après avoir porté log c en fonction de r2 et déterminé la pente de la droite obtenue,
Déterminer le poids moléculaire de la tubuline de cerveau de veau.
Exercice :3
Une solution diluée de la protéine«0,62» de la laine ( ύ=0.705 cm3 g-1) est soumise à ultracentrifugation (28 000
tours min-1), à 20°C.Une fois atteint l’équilibre de sédimentation , On mesure l’absorbance A290, à 290 nm, pour
différentes valeurs de r :
r(cm) A290
6,93 0,204
6,95 0,225
6,97 0,248
6,99 0,273
7,01 0,302
7,03 0,333
Exercice 4 :
A l’aide des données du tableau ci –dessus ,indiquez quel principe d’ultracentrifugation vous choisiriez pour
séparer d’une part les ribosomes et des polyribosomes , d’autre part de l’ADN et de l’ARN d’un extrait d’acide
nucléiques ?