12.11.

2010

FAMILIILE ORTHO- I
PARAMYXOVIRIDAE
Mixovirusurile reunesc virusuri ARN- cu
afinitate pentru mucoproteine (myxo
mucus) repartizate n 2 familii:
Orthomyxoviridae
Paramyxoviridae

FAMILIA

Orthomyxoviridae

Paramyxoviridae

DIMENSIUNE

100 nm

200 nm

NUCLEOCAPSIDA
Simetrie
Diametru

Helicoidal
8 nm

Helicoidal
16 nm

ARN-, transcriptaz
asociat, 8 segmente

ARN-, transcriptaz
asociat,
nesegmentat

Separai
abseni

Asociai
prezeni

n nucleu

n citoplasm

GENOMUL

SUPERCAPSIDA
Spiculi H i N
Spiculi F
REPLICAREA
GENOMULUI

FAMILIA ORTHOMYXOVIRIDAE
Genuri: Influenzavirus A (virusul gripal A)
Influenzavirus B (virusul gripal B)
Influenzavirus C (virusul gripal C)
Thogotovirus (virusurile Dhori i Thogoto)
Agenii cauzali ai gripei infecie respiratorie acut cu
simptome sistemice importante.
Tipul A provoac pandemii periodice (1918 20 mln
decesuri, 1957, 1968, 1977)
Tipurile A i B epidemii regionale i locale. Anual 3-5 mln
cazuri grave, 300 500 mii decesuri
1933 prima cultur de virus gripal uman (Smith, Andrewes
i Laidlaw).

MORFOLOGIA, COMPOZIIA CHIMIC A

VIRUSULUI GRIPAL tipul A

Particule rotunde, 80-120 nm, sau

filamentoase, constituite din:
Genom
Compus din 8 segmente de ARN-, 6 segmente
codeaz cte o protein (P1, P2, P3, HA, NA,
NP), 2 cte 2 proteine (M1-M2 i NS1-NS2)
Capsida (NC) tubular, de simetrie
helicoidal, separat pentru fiecare segment.

SUPERCAPSIDA
Deriv din MCP a celulei-gazd
1. Dublu strat lipidic extern (origine celular)
2. Strat intern proteic (matrice, proteine
virale M1, M2) asigur legtura dintre
GP de suprafa i NC; M2-canal ionic
3. 2 tipuri de GP nserate n membran:
hemaglutinina - HA (H) i neuraminidaza NA (N), distincte morfologic i biologic
(virusul gripal C doar HA)

12.11.2010

Hemaglutinina (HA, H) H1 H16

Trimer compus din 2 polipeptide HA1 i HA2
- HA1 fixarea specific a virionilor la receptori
glicopeptidici membranari (inclusiv de pe hematii),
ce conin acid N-acetilneuraminic/acid sialic
- HA2 fuziunea supercapsidei cu membrana
celulei-gazd
Anticorpii anti-HA:
- Inhib fixarea virusului pe celula-int
- Inhib hemaglutinarea

Neuraminidaza (NA) N1 N9
Tetramer, polipeptid unic
Funcii :
1. Cliveaz legtura dintre acidul sialic i glucidul
alturat (tratarea celulelor cu neuraminidaz
impiedic infecia celulei cu virus)
2.
Asigur detaarea virionilor nmugurii prin
eliminarea acidului neuraminic/sialic din
receptorii celulari
Anticorpii anti-NA limiteaz diseminarea virionilor

STRUCTURA ANTIGENIC
Ag interne NP i M, specifice de tip (A,B,C)
2. Ag externe HA i NA, specifice de subtip i
de variant
Se cunosc 16 varieti de HA (H1-H16) i 9 de
NA (N1-N9), asociaiile lor formeaz
subtipuri de virus A.
La om N1, N2 i H1, H2, H3 (H1N1; H2N2;
H3N2)
Descrierea unei tulpini de virus gripal:
Ex.: A/Texas/1/77/(H3N2)

1.

VARIAII ANTIGENICE ALE VIRUSURILOR

GRIPALE TIP A
1. Variaii Ag minore drift (mutaii
punctiforme, modific civa AA din HA
sau/i NA cu aparitia unor varieti de
serotipuri) provoac epidemii fiecare 3-4
ani, caracteristic pentru tipurile A i B
2. Variaii Ag majore shift (recombinaii
genetice, schimbarea complet a unui sau
ctorva segmente genomice HA, NA, P, M,
etc. Determina mutaii importante, aparitia
serotipurilor noi) - provoac pandemii

12.11.2010

PANDEMICS CAUSED BY INFLUENZA A

Major antigenic shifts associated with influenza A pandemics
Year

Sub type

Prototype strain

1947

H1N1

A/FM1/47

1957

H2N2 (Asian)

A/Singapore/57 (1 mln)

1968

H3N2 (Hong-Kong)

A/Hong Kong/68 (1 mln)

1977

H1N1

A/USSR/77

1987

H3N2

No pandemic
Various strains
circulated worldwide

12.11.2010

1.
2.

3.

Cultivarea virusului gripal

Ou embrionat de gin (cavitatea
amniotic i alantoic)
Culturi de celule (fibroblati de pui,
culturi primare de rinichi de maimu,
linii celulare de rinichi de cine
MDCK, linii Vero)
Reproducerea infeciei la maimue,
dihori

MULTIPLICAREA

1.
2.
3.

ATAAREA (adsorbia) HA1+acid neuraminic

PENETRAREA prin endocitoz
DECAPSIDAREA prin fuziunea supercapsidei i
membranei vacuolei de endocitoz, NC penetreaz
n nucleu prin porii membranei nucleare
BIOSINTEZA (eclipsa)
Transcrierea ARNm (transcriptaze P1, P2, P3)
Translaia ARNm i sinteza proteinelor virale (citopl)
Replicarea genomului (ARNv....ARNc....ARNv)

ASAMBLAREA
n citoplasm: HA i NA se inser n MCP, iar
M1 i M2 o cptuesc din interior
n nucleu: NP se asociaz cu ARN-, formnd
NC, apoi migreaz spre zonele modificate
ale MCP (via aparatul Golgi)
ELIBERAREA: prin nmugurire
NA ajut la desprinderea virionilor de MCP i
evit formarea agregatelor. Celula rmne
aparent viabil, dar epuizat i moare.
Citoliza este determinat de rspunsul imun
citotoxic (NK, LTC).

PATOGENEZA GRIPEI
Virusul gripal A se ntlnete la om i animale:
porc, cal, psri, foci, balene, etc.
Virusul gripal B om (foci)
Virusul gripal C om (cine, porc)
Sursa de infecie omul bolnav (animale?
Cazuri sporadice de grip aviar la om (H7N1,
H9N2, H5N1) 2003/04 n Vietnam, 1997
Hong Kong).
Virusul este prezent n rinofaringe n primele 2
zile de la debutul bolii

12.11.2010

Mecanismul de transmitere aerogen, prin

picturi Flugge (tuse, strnut).
Virusul se propag n cile respiratorii superioare
i inferioare, inducnd o inflamaie a mucoasei
i edem al laringelui, traheii i bronhilor.
Celulele epiteliale ciliate sunt distruse (fr a
afecta celulele bazale). Procesul regenerativ
ncepe cu ziua a 5 i repararea complet a
epiteliului are loc n 1 lun.
Contingent de risc - persoane n vrst, copii,
imunodeprimai, bolnavi cu maladii cronice
cardiovasculare, respiratorii, insuficien
renal, diabet.

Forme clinice
1. Gripa inaparent, asimptomatic
2. Gripa comun (benign, durata 4-7 zile).
Incubaia cteva ore - 2 zile. Debut brutal, cu
frison, febr, cefalee, rinoree, tuse, mialgii,
artralgii, anorexie, astenie (IFN?).

Complicaii (infecii secundare bacteriene): otite,

sinusite, bronite, bronhopneumonii, etc.
Complicaii rare: sindromul Reye (encefalit acut cu
degenerescena ficatului); sindromul Guillain-Barre
(poliradiculonevrit)

3.

Gripa malign (pneumonie viral primitiv cu

edem pulmonar i IRA)

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL GRIPEI

Prelevate: lavaje/aspiraii nazale, traheale, expectoraii
bronice (n primele 48 ore)
1.
Examenul virusoscopic microscopia electronica, RIF
2.
Examenul virusologic
- Izolarea n oul embrionat de gin de 10-11 zile sau
culturi de celule (MDCK).
- Indicarea virusului activitate hemaglutinant fa de
eritrocite de cobai, gin, curcan a lichidului amniotic i
alantoic, hemadsorbia lor pe cultura de celule.
- Identificarea RIF, RIHA, RIHAds, RN
3.
Detectarea Ag virale n sedimentul celular (RIF, ELISA)
4.
Detectarea genomului viral

5. Serodiagnosticul gripei
Retrospectiv, de confirmare. Se examineaz
seruri perechi. Se determin creterea
titrului de Ac de 4 ori, sau prezena Ac Ig M.
Reacii:
- RFC cu Ag NP (determinarea tipului)
- RIHA cu sua viral circulant
- ELISA
- RN
Imunitatea: celular (LTC, NK), umoral (Ig G,
Ig A), specific de subtip.

12.11.2010

TRATAMENTUL GRIPEI
- Amantadin, rimantadin. mpiedic ptrunderea
NC n citoplasma celulei infectate cu virus A.
Tulpini rezistente au fost izolate
- Zanamivir, oseltamivir. Au structura similar
acidului neuraminic. Inhib activitatea NA,
mpiedicnd eliberarea virusurilor A i B i
diseminarea lor prin mucus, determin agregarea
virionilor.
- Interferon, unguent oxolinic
- Tratament simptomatic (antipiretice, antibiotice,
etc)

PROFILAXIA SPECIFIC A GRIPEI

Vaccinuri inactivate: conin 2 tulpini de virus A
(H1N1 i H3N2) i o tulpin B, cultivate in ovo i
inactivate cu beta-propiolacton. Inoculare i/m, s/c;
Ig G persist 5-6 luni.
Vaccinuri vii atenuate. Tulpinile sunt cultivate in ovo
la 25 C, atenuate prin pasaje multiple.
Administrare intranazal prin aerozol, imunitate
local (Ig A).
Vaccinuri subunitare, constituite din HA i NA
n curs de cercetare vaccinuri vii/subunitare
recombinante, vaccinuri polinucleotidice.

pidmie de grippe A (H1N1) de 2009.

confirmes.

Noir : morts confirmes.

Situaia curent a infeciei prin

virusul gripal nou A(H1N1)

La 18 octombrie OMS raporteaz 414

945 de cazuri confirmate de grip de tip
nou A(H1N1) i 4999 de decese.
Evenimentele derulate prin apariia
brusc, rspndirea rapid i transmiterea
de la om la om a gripei noi A(H1N1), au
impus OMS s ridice faza pandemic la
nivelul 6.

Rouge : infections

Orange : cas suspects.

S-a stabilit c virusul gripal nou A(H1N1)

conine gene ale virusului gripal de origine
porcin (tulpini americane i euroasiatice), gene de origine aviar i uman.
Oamenii de tiin l-au mai numit
reasortant cvadruplu. Sub aspect
antigenic virusul gripal de tip nou A(H1N1)
mult difer de acel gripal sezonier uman
A(H1N1), de aceea vaccinurile antigripale
umane sezoniere nu pot acorda protecie
contra gripei de tip nou A(H1N1).

12.11.2010

Epidemiologie

Particularitile tabloului clinic

Particularitile tabloului clinic.

Gripa cu virusul nou A(H1N1), spre deosibire de

cea sezonier, se manifest clinic preponderent
la persoane tinere, anterior sntoase.
Manifestrile clinice sunt asemntoare cu cele
din gripa sezonier. Pacienii prezint semne
clinice caracteristice, ce includ cel puin dou din
urmtoarele simptome: febr, tuse, dureri n
faringe, mialgii generale, cefalee (mai des
frontal), frisoane, posibil diaree i vom.
Frecvena atestrii sindromului dispeptic (1138%) este mai mare dect n gripa sezonier.
Durata bolii n majoritatea cazurilor este de 4-6
zile, cu o maxim de 13 zile. Este posibil
dezvoltarea pneumoniilor, care pot evolua cu
sfrit letal.

Virusul nou A(H1N1) se transmite de la om la

om prin aceleai mecanisme ca i virusurile
gripale sezoniere. Ele n mod obinuit se
transmit de la om la om prin tuse i strnut de la
persoanele bolnave cu grip. Uneori oamenii se
pot mbolnvi indirect prin atingerea
suprafeelor, obiectelor infectate cu virusuri
gripale i ulterior atingnd mucoasele oculare,
bucale i nazale.
Oamenii pot fi contagioi cu o zi naintea
apariiei simptomelor gripale i 7 zile de la
debutul maladiei. Copiii, n special cei mici, pot fi
contagioi mai multe zile.

Pe lng semnele gripale clasice, frecvent

nregistrate, se numr i angina.
Totodat, mai muli pacieni, care n-au
necesitat spitalizare, n-au avut febr. n
cazurile soldate cu deces tabloul clinic s-a
prezentat prin febr, slbiciune
pronunat, tahicardie, tahipnee, scderea
nivelului de saturaie pulmonar cu oxigen,
hipotensiune i cianoz tegumentar.

12.11.2010

Particularitile tabloului clinic

n Mexic evoluia clinic s-a remarcat prin

pneumonii severe, cu multiple infiltrate i mai rar
- cu opaciti bazilare la examinarea
radiografic, dup care a urmat sindromul
detresei respiratorii acute (SDRA), nsoit de
insuficien renal. Miocardita acut a fost
suspectat la civa bolnavi. Muli pacieni au
fcut stop cardiac peste puin timp dup
spitalizare. Durata median ntre apariia
primelor semne clinice i deces a fost de 10 zile
(ntre 2 i 33 zile)

FAMILIA PARAMYXOVIRIDAE

1.
2.

FAMILIA PARAMYXOVIRIDAE
SUBFAMILII :
PARAMYXOVIRINAE (genurile
Paramyxovirus, Rubulavirus, Morbillivirus)
PNEUMOVIRINAE (genurile Pneumovirus,
Metapneumovirus)

Situaia n RM
Din 126 cazuri de suspecie la gripa nou
A(H1N1) au fost confirmate 17 (un deces).
De sex feminin 8 De sex masculin 8
n vrst de la 1,5 pn la 50 ani cu o
medie a vrstei de 19 ani
Au sosit din Spania, Portugalia, Italia,
Bulgaria, Polonia i Elveia.

GENUL

SPECII

GLICOPROTEINE

Paramyxovirus

Virusul paragripal 1
Virusul paragripal 3

HN, F

Rubulavirus

Virusul paragripal 2
Virusul paragripal 4
Virusul parotiditei epidemice

HN, F

Morbillivirus

Virusul rujeolei

H, F

Pneumovirus

Virusul respirator sinciial

G, F

CARACTERISTICA GENERAL A
PARAMYXOVIRUSURILOR
Virusuri nvelite, sferice, uneori filamentoase, 150-400 nm.
Genomul ARN- nesegmentat (transcriptaza asociat)
Capsida de simetrie helicoidal, constituit din proteina
NP. n asociaie cu ARN formeaz NC tubular de 18 nm
diametru
Supercapsida dublu strat lipidic, proteina intern matrice
M, spiculi glicoproteici nserai n membran:
- HN asigur adeziunea la celula-int
- F asigur fuziunea supercapsidei cu membrana
celular n timpul penetrrii virusului n celul (provoac
formarea de sinciii n culturi de celule)
Reproducerea are loc n citoplasm

12.11.2010