PROTOCOLO DE IDENTIFICACIN DE DROGAS PURNICAS POR

CROMATOGRAFA EN CAPA FINA (CCF)

Muestra: Hojas jvenes (Rojas) y adultas (verdes) de Theobroma cacao
(Extraccin Metanlica, 1g/10ml, se agrega 30l en el sembrado)
Compuestos de referencia:
T1 cido clorognico
T2 Cafena
T3 Teobromina
Sistema de Solventes:
Etilacetato-Metanol-Agua (100 : 13.5 : 10)
Identificacin:
A UV-254 nm (sin tratamiento qumico)
B Reacitvo cido yodo hidroclorhdrico (I/HCl) y luego observar
Revelacin para derivados purnicos
Tratamiento con el reactivo de I/HCl genera una zona marrn oscura en la
cafena (Rf=0.45) (T2). Teobromina (Rf=0.4) es detectada como un gris, que
desvanece rpidamente. La cantidad de teofilina (Rf=0.6) es baja para
poder ser detectada.
* Concentrar los extractos ya que debido a la baja concentracin de teofilina
y teobromina no es suficiente para la deteccin.

Observacin supuesta

Cafena
Teobromina

Estructura Qumica de los derivados purnicos a identificar: cafena,

teobromina y teofilina

Preparacin del reactivo cido yodo hidroclorhdrico (I/HCl)

(a) 1 g de KI y 1 g de yodo se disuelven en 100 ml de etanol
(b) 25 ml de HCl al 25% se mezclan con 25 ml de etanol 96
La cromatoplaca se roca primero con 5 ml del reactivo (a) seguidamente de
5 ml del reactivo (b).
Detecta: Derivados de purina (Cafeina, teofilina, teobromina)
--->Correccin de cantidades
(a) 0.2 g de KI y 0.2 g de yodo se disuelven en 20 ml de etanol
(b) 5 ml de HCl al 25% se mezclan con 5 ml de etanol 96

Referencia Bibliogrfica
H. Wagner, S. Bladt, Plant Drug Analysis: A thin layer chromatography atlas,
Springer, 2 Edicin, New York, 2001. Captulo 1: Alkaloides, Pg. 20, 5051, 361.