*CITOTOXICIDAD

Maripaz Lemus Montero

* Ensayos de citotoxicidad
Evaluacin de extractos vegetales.
Metodologa establecida en microplacas
de 96 pozos en la evaluacin de
diferentes agentes qumicos.
Para cada ensayo es indispensable
realizarlo mnimo por triplicado.
Sirve para determinar la concentracin
del extracto optima que mata mayor
clulas en un menor tiempo.

* Cultivos de celulas in vitro

Sistema formado por clulas provenientes de un rgano o un tejido, normal o
tumoral, mantenidas en medios de cultivo de composicin qumica definida y en
condiciones de temperatura, pH, aireacin y humedad controladas.

Con dichas condiciones se aseguran su supervivencia y multiplicacin,

manteniendo todas sus funciones metablicas de una manera semejante a las

que tenan en el husped.
Ensayos de toxicidad in vitro, con clulas y sistemas alternativos al uso de
animales de laboratorio.

* Metodos para medir la supervivenvia

y proliferacion de celular

*ENSAYO DE MTT
Es el quizs el ms empleado y es realizado
El MTT es un ensayo colorimtrico basado en la reduccin del Bromuro
Este proceso se basa en la reduccin metablica del Bromuro de 3-(4,5dimetiltiazol-2-ilo)2,5-difeniltetrazol (MTT) que es realizada por la enzima mitocondrial succinatodeshidrogenasa que es metabolicamente activa.

Dicha enzima transforma al MTT de un compuesto hidroflico de color amarillo a un

compuesto azul, hidrofbico (formazn).

La cantidad de clulas vivas es proporcional a la cantidad de formazn producido.

Permite determinar la funcionabilidad

mitocondrial de las clulas tratadas.

La lectura de densidad ptica (DO) se realiza en un espectrofotmetro.