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  • Aislamiento Del Virus de La Fiebre Aftosa en Animales de Laboratorio

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    ” AISLAMIENTO DEL VIRUS DE LA FIEBRE AFTOSA EN ANIMALES DE LABORATORIO ll, SUSCEPTIBILIDAD COMPARATIVA DE SEIS ESPECIES (0. DEGREGORIO’, V.M. VARELA-DIAZ*, M.S, SONDAHL?, H.S. PAIM? ‘Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad de Buenos Aires ‘Avda. Chorroarin 280, Buenos Aires 1427, Argentina *Centro Panamericano de Fiebre Aftosa (OPS/OMS) ‘Caixa Postal 589, 20001-970 Rio de Janeiro, RJ, Brasil Resumen. Los hallazgos del presente estudio demuestran que el hamster es mas susceptible alla infeccién por el virus de la fiebre aftosa que el ratén lactante, habitualmente empleado para efectuaraislamientos deeste agentecon fines diagnésticos. Elhamster mostréuna susceptibilidad superior a la inoculacién de Aphthovirus obtenidos de bovinos infectados naturalmente. La comparacién se basé en las manifestaciones clinicas, el tiempo medio de supervivencia, el porcentajedemortalidad, la relacién entre titulo y mortalidad, y el comportamiento dela infeccién en animales destetados. Le siguieron en orden descendente de susceptibilidad los meriones, conejos y cobayos lactantes, mientras que las ratas resistieron a la infeccion. Los resultados se analizan en términos desu implicancia diagnéstica para estudios epidemiolégicos y el control de la enfermedad. ‘Una revisién analitica de ta bibliografia sobre el uso de animales de laboratorio para el aislamicnto del virus dela fiebre affosa revel6 las limitaciones de lainformacién disponible (7). Sobre cestabase se planta a necesidad de realizar estudios sobre susceptibilidad comparativa delasdstintas especies de animales de laboratoro bajo idénticas condiciones fisiol6gicas, inoculados con el mismo agente, por la misma via, con igual dosis, con el mismo volumen y, patiendo de un agente que no haya sufrido adaptacién a ningin sistema de laboratorio. Elpresente trabajo trata sobrelos resultados de un estudio para determinar las ventajas y Timitaciones relativas del empleo de rtones,ratas, cobayos, conejos, hamsters y meriones para el Soler paratas a Centro Panamericane de Fis ARs (OPS'OMS) aislamicnto del virus de la ficbre aftosa, a partir de -muestras epiteliales obtenidas de ganado infectado naturalmente. MATERIALES Y METODOS Material proveniente del campo Se emplearon como inéculo epitelios linguales debovinos infectados naturalmenteconel virus de afiebre aftosa. Las muestras de epitelio se colocaron en frascos, sumergidas en tampén de ‘licerina fosfatada. Una de las muestras (N° 1) provenia de la localidad de Pehuajé, provincia de Buenos Aires, y las otras (N's 2 y 3) de la zona de CChapaleufi, provincia dea Pampa, Repiblica Ar- gentina, Unadilucién al $0%en medio de Valléede cada virus se dstribuy6arazén de 1.4 mlen frascos tipo Vial de 2 mi de volumen, que habjan sido esterilizadoscon huzultravioletadurante 15 minutos. ol, Centr. Panam, Fibre flor, $8, 1992 98 Obtencién de antigeno delasmuestrasey Una alicuota (1,4 ml) de cada una de las ‘muestras de epitelio se inoculé en un frasco roller decultivo decélulas linea BHK,, clon 13.con medio cde mantenimiento Eagle y se incub por 24 horasa 37°C. Ante adeteccién de un efecto citopatico en a ‘monocapa celular, el frasco se congelé a -20°C por 24 horas. Posteriormente, se descongeld en baiio Maria a 37°C, se centrifug6 a 4°C durante 10 ‘minutos a 2000 rpm, y se recogié el sobrenadante. Las muestras se conservaron en la heladera a 4°C hasta su utilizacién como antigen, Titulacién de virus El titulo viral en microplacas con camadas preformadas decélulasIBRS-2clon 17 sedefiniéen base a la reciproca de la dilucién de dicho virus, cexpresado en el logaritmo de base 10 (10° a 10°), que producia efecto citopatico en el 50% de las camadas de oélulas (DI, (3). El titulo obtenido en la muestra n° 1 fue 10° DI, /ml, en la muestra n? 2 fue 10 D1,/iml y en la muestra 3 fue 10° DI, ml Especies de animales Lasespecies utilizadas fueron: ratones (Mus musculus) CF VBr, rats (Rattus norvegicus) Wistar CrwiBr; conejos (Oryctolagus cuniculus) New Zealand; hamsters (Mesocricetus auratus) Cp2:Syt, ccobayos (Caviaporcellus) Hartley Hart, y meriones (Meriones unguiculatus) Cpz:Mon. Cada grupo estaba constituido por diez animales Inctantes de cuatro dias de vida, la mitad de cada sexo, Se inocularon tres grupos de cada especie a fin de caracterizar la distribucién de signos y de mortalidad, asi como para estudiar la presentacién de mortandad (expresada en horas postinoculacién) por especie y sexo. En todo ‘momento, los lactantesse mantuvieronen compafia de su madre, Losestudios realizadosenanimalestactantes se repitieron, a fin de obtener mayor informacién, con animales destetados. A talefecto, seemplearon ratones (Mus musculus) CFL/Br; hamsters (Mesocricetus auratus) Cpz:Syt y meriones Degreporo et. (Meriones unguiculatus) Cp2:Mon. Cada grupo estaba compuesto por ocho machos de una edad ‘equivalentealtercer diade destetados. Seinocularon tues grupos de cada especie. Inoculacién de animales Losanimalesseinocularonconel correspon diente titulo de virus, en un volumen de 0,05 ml por -via intraperitoneal. En todos loscasosse incluyeron ‘como control grupos de animales inoculados solo con diluyentey, otrosque no recibieron tratamiento alguno. Los datos sobre la presentacién de signos clinicos y mortalidad se registraron durante un periodo de cinco dias. Obtencién de antigenos de animales muertos. Los individuos que murieron después de la inoculacién experimental seevisceraron,sedescartaron la piel, pelos y cabezas, y se procesaron segiin la técnica deserita para ratones (2). Se utili una parte

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