DETERMINACION DE LA CALIDAD DEL AGUA POR SU CONTENIDO

BACTERIAL

OBJETIVOS
Determinar la calidad del agua de determinados ambientes de la
universidad en base a su contenido bacterias.
Saber la cantidad de bacterias que se han formado en las condiciones
favorables durante 24 horas de encubacin.
Verificar si el total de bacterias presente en el agua de los ambientes
estudiados sobrepasa los lmites mximos permisibles

FUNDAMENTO TEORICO
La calidad del agua, es un estado de esta, caracterizado por su composicin fsicoqumica y biolgica. Este estado deber permitir su empleo sin causar dao, para lo cual
deber reunir dos caractersticas:
1.- Estar exenta de sustancias y microorganismos que sean peligrosos para los
consumidores.
2.- Estar exenta de sustancias que le comuniquen sensaciones sensoriales desagradables
para el consumo (color, turbiedad, olor, sabor).
El criterio de potabilidad del agua depende fundamentalmente del uso al que se
la destina (humano, industrial, agrcola, etc)
Agua potable es el agua, ya sea de superficie o subterrnea , tratada y el agua no
tratada por no estar contaminada. La definicin de agua potable se ha ido adaptando al
avance del conocimiento cientfico y a las nuevas tcnicas, en especial a las
relacionadas con el anlisis de contaminantes.
La mala calidad del agua afecta a infinidad de actividades vitales , es un bien tan
preciado que en la exposicin de la Carta Europea del Agua comienza con Sin agua no
hay comida, no hay bebida, ni luz, ni calor, ni lluvia. Sin agua no hay vida posible
Hasta hace unas decenas de aos la calidad de un agua destinada a un
abastecimiento se centraba principalmente en que el agua estuviera exenta de sabores,
olores, no fuera muy dura y no contuviera bacterias patgenas, confindose en gran
medida en que el poder autodepurador de los embalses o ros, y la proteccin de las
zonas de captacin eran suficientes para lograr una aceptable calidad que se completara
con un tratamiento simple de decantacin, filtracin y desinfeccin, as como hacer
determinadas comprobaciones generalmente bacteriolgicas del agua en la red,
ausencias de sabores y olores y presencia de ligeras concentraciones del desinfectante
empleado.
Hoy da y ms an de cara al futuro, y como consecuencia de la polucin
creciente y los mayores avances de la tcnica y la ciencia hay que considerar adems
otros caracteres que inciden de forma perjudicial en la salud del consumidor (pesticidas,

detergentes, subproductos de la desinfeccin y otras sustancias orgnicas e inorgnicas

as como protozoos, virus, bacterias, etc).
La consideracin legal sobre la potabilidad de
un agua se apoya o se
basa en fijar una serie de compuestos o sustancias y asociarlas con unos contenidos
aceptables

ANLISIS BACTERIOLGICO DE AGUAS

Entre Las ETAS (,enfermedades transmitidas por alimentos,) se encuentran las
transmitidas por el agua. Es entonces conveniente determinar la potabilidad desde el
punto de vista bacteriolgico de este medio.
Buscar grmenes como Salmonella, Shigella, trae inconvenientes, pues normalmente
aparecen en escasa cantidad. Por otra parte su supervivencia en este medio desfavorable
y la carencia de mtodos sencillos y rpidos, llevan a que su investigacin no sea
satisfactoria, mxime cuando se hallen en nmero reducido.
En vista de estos inconvenientes se ha buscado un mtodo mas seguro para establecer la
calidad higinica de las aguas, mtodo que se basa en la investigacin de bacterias
coliformes como indicadores de contaminacin fecal.
El agua que contenga bacterias de ese grupo se considera potencialmente peligrosa,
pues en cualquier momento puede llegar a vehiculizar bacterias patgenas, provenientes
de portadores sanos, individuos enfermos o animales.
Bacterias coliformes:
Son bacterias aerobias o anaerobias facultativas, Gram negativas, no esporuladas, que
fermentan la lactosa con produccin de cido y gas.
Salmonella
Es probable que los concentrados de muestras necesiten ser enriquecidos previamente
en agua de peptona amortiguada, para luego ser enriquecidos en caldo que contenga ya
sea tetrationato, selenito, cloruro de magnesio o verde de malaquita. Estos, a su vez,
pueden ser sometidos a subcultivo en medios como el verde brillante, sulfito de
bismuto, agar de desoxicolata xilosa-lisina (DXL), citrato de desoxicolata o agar de
MacConkey, examinndose luego las colonias sospechosas tanto bioqumica como
serolgicamente. Entre las pruebas de depuracin bioqumica se deber incluir: agar
triple de azcar y hierro, produccin de indol, decarbosilasa y actividad de galactosidasa. En las pruebas serolgicas se incluir la aglutinacin con sueros
polivalentes anti-o, anti-H y anti-Vi. Es imprescindible la eliminacin previa de cepas
autoaglutinables. Cuando el anlisis se realiza para detectar las S. typhi , el medio de
cultivo aconsejado es la selenita F. El procedimiento de los tubos mltiples se utilizar
para calcular el nmero de Salmonella presentes en el agua.
Shigella

Debido a que las bacterias coliformes y la mayora de cepas de Proteus vulgaris son
antagnicas a la Shigella, es aconsejable elegir medios enriquecidos selectivos que
reduzcan al mnimo las acumulaciones de compuestos voltiles y de los subproductos
obtenidos a partir de estos microorganismos antagnicos. Se puede usar caldo nutriente
con un pH ajustado de 8,0 (es el nivel de pH que menos favorece el crecimiento de
bacterias coliformes). Tambin es posible obtener un buen enriquecimiento de Shigella
con un medio de cultivo autocitotxico con base en caldo de tripticasa de soja
conteniendo 1 mmol/litro de 4-cloro- 2-ciclopentilfenil -D-galactopiranosida, 2,5
g/litro de lactosa y sustancia amortiguadora de citrato a un pH de 6,2. La incubacin
debe hacerse durante 6-18 horas, a una temperatura de 35C. Estrense las culturas en
agar DXL cuando hayan transcurrido 6 y 18 horas. Somtanse las colonias sospechosas
a pruebas de seleccin bioqumica y confrmese las colonias sospechosas con antisueros
de Shigella (sueros polivalentes y de tipo especfico).
Vibriones del clera y de otro tipo
Como forma de enriquecimiento primario se utiliza principalmente el agua alcalina de
peptona y el agua de taurocolato telurita de peptona, los subcultivos se harn utilizando
como medios selectivos un agar de tiosulfato, citrato, bilis, sal y sucrosa o un agar de
gelatina de taurocolato y telurito. Los cultivos que sean sospechosos se inocularn en
agar de hierro Kligler. Despus de 18 horas de incubacin, los V. cholerae producen un
caracterstico color amarillo, sin ninguna produccin de gas. Estos cultivos se depurarn
despus para determinar la actividad de ureasa y oxidasa; las cepas que demuestren ser
negativas respecto a rea y positivas en cuanto a oxidasa debern ser remitidas a un
laboratorio de referencia para que se realicen otras pruebas bioqumicas y de
agrupamiento serolgico.
Coli enteropatgenos
En este caso se utilizan las tcnicas para la deteccin de bacterias coliformes fecales en
el agua. Las colonias se confirmarn como E. coli y si la evidencia epidemiolgica as
lo garantiza, los subcultivos pueden ser remitidos a un laboratorio de referencia para
agrupamiento serolgico y, en caso necesario, para realizar las pruebas que determinan
la enterotoxigenicidad.
Yersinia enterocolitica
Se ha encontrado que el agar M-Endo es el medio de cultivo ms conveniente y de
mltiple utilidad debido a las distintas caractersticas morfolgicas de las colonias
cuando se incuban tanto a 25 como a 35C. Despus de transcurridas 72 horas de
incubacin, las colonias aparecern bien definidas y con una coloracin roja oscura.
Tambin da buenos resultados para el desarrollo bacteriano utilizar agar de MacConkey,
siempre que la incubacin se haga a 25C. Todos los grupos aislados que resulten
sospechosos debern ser depurados bioqumicamente a 25C y 35C utilizando
ramnosa, rafinosa y melibiosa. Si existe evidencia epidemiolgica que lo garantice,
debern enviarse los subcultivos a un laboratorio de referencia para formar los grupos
serolgicos y efectuar las pruebas de susceptibilidad a los antibiticos.

Procedimiento Experimental:

1.- Preparar placas con medio agar:

Vaciar el Agar
preparado a tres
tubos de ensayo
cada uno con 15
ml.

Llevar a autoclave

Preparar
muestras de 99 ml
de Peptona

Tomamos las muestras

GRUPO 1
Estanque de Arquuictectura

GRUPO 3
Bao del gimnasio

GPO 5
Bao de la Fia

Echar el agar al Petri

esterilizadoo

Echar la muestra de
agua.

Echar 1 ml de muestra de
agua a la solucin de
Peptona para la muestra de
10^-2.

La primera 1ml de agua de

muestra con 1ml de agar
La segunda es 0.1ml de
muestra con 10^(-1) de
agar.
La tercera 1ml de la
dilucion con 10^(-2) de
agar y Agua peptonada.

2.- Incubar las placas, por 48 horas a 20C o a 37C por 24 horas, y contar el numero de
colonias en una placa dada, multiplicando por la recproca de la fraccin sembrada da el
numero de bacterias por ml. Solamente las placas que contienen de 30 a 300 colonias
deben considerarse como satisfactorias para el recuento de bacterias. En el caso que
ninguna placa est dentro de estos lmites, se contar la placa que se aproxime ms al
numero 30 o 300.

Seleccionar dos placas correspondientes a una dilucin que contenga entre 30 y 300
colonias.

Tomar la media aritmtica de los 2 recuentos y multiplicar por el factor de

dilucin (recproco de la dilucin utilizada). Informar segn el caso, el resultado como
nmero de microorganismos aerobios mesfilos por ml gramo .
En la evaluacin de la potabilidad del agua ubicada en reservorios de almacenamiento
domiciliario deber incluirse entre los parmetros microbiolgicos a controlar el
recuento de bacterias mesfilas en agar (APC 24 hs. a 37 C); en el caso de que el
recuento supere las 500 UFC/ml y se cumplan el resto de los parmetros indicados, slo
se deber exigir la higienizacin del reservorio y un nuevo recuento.

RESULTADOS:
GRUPO 1 ESTANQUE DE ARQUICTECTURA
1 ml
604
COLONIAS

UFC/MT

OBSERVACIONES:

169*1/101 = 1690
27*1/102=2700

Fecha 07 de abril 2015

Incubadora: 24 horas
Tamao colonias:

10^-1
ml
169 COLONIAS

MUESTRAS

1 mm 1era.
2 mm 2da.

10^-2
ml

4 a 5 mm 3era.
27 COLONIAS

GRUPO 1 ESTANQUE DE ARQUICTECTURA

GRUPO 3- BAO DE GIMNASIO

Fecha: 07 de abril 2015
1 ml

4 COLONIAS

Incubadora: 50 Hrs
Tamao colonias:

MUESTRAS

10^-1
ml

65 COLONIAS

GRUPO 3 BAO DEL GIMNASIO

0.5 , 0.1, 0.2 mm

1ero

0.5, 0.1, 0.2 mm

2do

GRUPO 5- BAO DE LA FIA

1 ml

89 COLONIAS

UFC/MT

OBSERVACIONES:

89*1 = 89
20*1/101 =200
9*1/102=900

13/04 Tiempo de conteo: 48 horas

Tamao colonias:
1 a 10 mm

MUESTRAS

10 ^-1

20 COLONIAS

10^-2

9 COLONIA

UFC = Unidad formadora de colonias

GRUPO 5 BAO DE LA FIA

CONCLUSIONES:
Al agua natural, potable o de desecho; se le debe determinar:

El agua de los servicios higienicos de la FIA y Gimnasio contienes menos

bacterias ya sea por el filtro que contiene los tanques de agua, lo cual el
Estanque de Arquictectura se encunetra al aire libre, expuesto a bacterias del
medio ambiente.
El pH del agua, el cual indica la intensidad de acidez que pueda presentar.
La alcalinidad, la cual va a depender del pH del punto final utilizado en la
determinacin.
Se observo que el Grupo 1 realizo un adecuado sembrado en las placas Petri
obtuviendo un resultado favorable, lo cual no se obtuvo con los grupos 3 y 5.

RECOMENDACIONES:
Hacer un anlisis ms frecuente a los tanques de agua de la Fia para saber la
calidad del agua y poderla tratar, asi mismo en los diferentes ambientes de la
UNI donde cuenten con tanques.
Realizar la limpieza los estanques como el de Arquitectura, peridicamente ya
que se encuentra expuesto a bacterias del medio ambiente.
Realizar el laboratorio de forma ordenada y seguir los pasos para no tener datos
incorrectos.
Tener cuidado al momento de realizar la preparacin del cultivo ya que si no
realizan un esterilizado correcto no se va tener un resultado conforme.
Tener cuidado en el momento de tener en la incubadora las placas mas de 24
horas, lo cual en el grupo 3 y 5 se olvidaron y pasaron 50 horas no obteniendo
los resultado requeridos.

ANEXOS

BIBLIOGRAFIA
http://html.rincondelvago.com/control-microbiologico-de-calidad.html
http://www.slideshare.net/guest6e00ca1/microbiologa-del-agua#
http://www.fortunecity.es/felices/andorra/51/calidad_del_agua.htm
http://www.monografias.com/trabajos/mmbiologia/mmbiologia.shtml