INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLGICAS

DEPARTAMENTO DE QUMICA ORGNICA

MANUAL DE LABORATORIO
CURSO TERICO PRCTICO DE QUMICA ORGNICA I
QUMICO FARMACUTICO INDUSTRIAL

http://www.ehu.eus/es/web/quimicaorganica2/home

Nunca consideres el estudio como una obligacin, sino como una oportunidad para penetrar

en el bello y maravilloso mundo del saber.

Albert Einstein

EDICIN 2015

EDICIN 2015

PROGRAMA DE PRCTICAS DE QUMICA ORGNICA I

NOMBRE DE LA PRCTICA
Introduccin al laboratorio de qumica orgnica
1. Separacin de una mezcla ternaria por destilacin
2. Recristalizacin
3. Extraccin lquido lquido

4. Cromatografa
5. Sntesis a microescala de cido fumrico

6. Sntesis de dibenzalacetona (Reaccin de Claisen-Schmidt)

7. Poder reductor, formacin de osazonas y sntesis de pentaacetato de -D-glucosa

8. Hidrlisis de una protena y ensayos para aminocidos

EDICIN 2015

DEPARTAMENTO DE QUMICA ORGNICA.

QUMICO FARMACUTICO INDUSTRIAL
TEMARIO DE QUMICA ORGNICA I
1.
1.1
1.2
1.2.1
1.2.2

2.
2.1
2.2
2.3
3.
3.1
3.1.1
3.1.2
3.1.3
3.2
3.3

4.
4.1
4.2
4.3
4.4
4.5
4.6
4.7
5.
5.1
5.2
5.3
5.3.1
5.3.2

Caractersticas estructurales de los compuestos orgnicos. (6 horas)

Caractersticas del tomo de carbono y su importancia en la formacin de
compuestos orgnicos.
Naturaleza del enlace en compuestos orgnicos.
Electronegatividad, polarizabilidad, momento dipolar, efecto inductivo: concepto
y factores que los afectan. Ejemplos comparativos.
Longitud, ngulo y energa de enlace: concepto y factores que los afectan.
Ejemplos comparativos.
Grupos funcionales y nomenclatura de los compuestos orgnicos. (14
horas)
Isomera estructural (isomera de posicin, de esqueleto y de grupo funcional).
Grupos funcionales: concepto e importancia en compuestos de inters
farmacolgico.
Nomenclatura trivial y sistemtica.
Propiedades fisicoqumicas de los compuestos orgnicos. (10 horas)
Interacciones moleculares: tipos y su importancia en las propiedades
fisicoqumicas de los compuestos orgnicos.
Interacciones de van der Waals.
Interacciones dipolo-dipolo.
Interacciones por puente de hidrgeno.
Relacin entre las interacciones moleculares y las propiedades fsicas de los
compuestos orgnicos.
Aplicacin de los conceptos anteriores a los mtodos de separacin y
purificacin de compuestos orgnicos.
Propiedades cido-base de los compuestos orgnicos. (14 horas)
Principales teoras cido-base.
Efectos estructurales y efectos electrnicos positivos y negativos.
Efectos mesomricos positivos y negativos.
Efectos estricos y por puente de hidrgeno.
Constantes de acidez y basicidad de compuestos orgnicos. Ejemplos
comparativos.
Ejemplos de reacciones cido-base en compuestos orgnicos.
Electrofilia y nucleofilia concepto y factores que los modifican
Estereoqumica. (14 horas)
Representacin espacial y modelos de proyeccin de los compuestos
orgnicos.
Anlisis conformacional de compuestos orgnicos lineales y cclicos.
Anlisis configuracional (estereroisomera ptica).
Simetra molecular. Elementos de simetra molecular.
Ismeros configuracionales (enantimeros, diastermeros y epmeros).
3

EDICIN 2015

5.3.3
5.3.4
5.3.5
5.4
5.4.1
5.4.2

Configuracin absoluta y relativa.

Actividad ptica. Definicin y aplicaciones.
Anlisis conformacional de ismeros configuracionales.
Isomera geomtrica.
En compuestos con enlaces mltiples.
En compuestos con enlaces sencillos (mono y biciclos).

6.
6.1
6.2
6.2.1
6.2.2
6.2.3
6.2.4
6.2.5
6.2.6
6.3

6.4.5

Cintica, termodinmica y mecanismos de reaccin. (7 horas)

Concepto de mecanismo de reaccin.
Intermediarios de las reacciones qumicas.
Carbocationes.
Carbaniones.
Radicales libres.
Carbenos.
Nitrenos.
Arinos.
Aspectos termodinmicos de las reacciones qumicas. Energa libre de Gibbs,
entalpa y entropa. Equilibrio qumico.
Aspectos cinticos de las reacciones qumicas. Velocidad de reaccin.
Cinticas de 1 y 2 orden.
Efectos del cambio de fuerza inica.
Efectos del cambio de polaridad del disolvente.
Teora del estado de transicin. Curvas de energa potencial. La coordenada de
reaccin.
Control cintico y termodinmico.

7.
7.1
7.2
7.2.1
7.2.2
7.2.3
7.3
7.3.1
7.3.2
7.4
7.4.1
7.4.2
7.5
7.5.1
7.6
7.6.1
7.6.2
7.6.3
7.7
7.7.1
7.7.2
7.7.3

Compuestos carbonlicos. (11 horas)

Tautomera ceto-enlica. Enolatos.
Adicin 1-2 reversible a carbonilos
Bisulfito.
Cianuro.
De alcoholes
Adicin 1,2 irreversible.
Hidruros.
Organometlicos.
Adicin-sustitucin.
De alcoholes (cetales y acetales).
De tioles.
Adicin-eliminacin.
Reacciones con compuestos de frmula general H2N-Y.
Reacciones irreversibles.
Wittig.
Claisen-Schmidt y procesos relacionados.
Reformatzki.
Adicin 1,4 en sistemas carbonlicos alfa- beta-insaturados.
Adicin de carbono (organocupratos).
Adicin de nitrgeno.
Adicin 1,2 vs 1,4

6.4
6.4.1
6.4.2
6.4.3
6.4.4

EDICIN 2015

7.8

Reacciones de Adicin-Eliminacin (Sustitucin) sobre derivados de cidos

carboxlicos.
7.8.1
Nuclefilos heteroatmicos.
7.8.2
Interconversin de derivados de cidos carboxlicos.
7.8.2.1 Catlisis bsica.
7.8.2.2 Catlisis cida.
7.8.3
Nuclefilos del carbono.
7.8.4
Otros nuclefilos hidruros, etc.
8.
8.1
8.1.1
8.1.2
8.1.3
8.2
8.2.1
8.2.2
8.2.3
8.2.4
8.2.5
8.3
8.4

Carbohidratos. (12 horas)

Monosacridos
Clasificacin y estereoqumica. Aldosas y cetosas.
Formas cclicas de los carbohidratos: Furanosas y piranosas.
Mutarrotacin, anmeros
Reacciones de los monosacridos.
Glicsidos.
Osazonas, oximas y cianohidrinas, extensin de la cadena carbonada.
Reacciones de oxidacin.
Reacciones de reduccin.
Acilacin y alquilacin de grupos hidroxilo.
Disacridos.
Polisacridos.

9.
9.1
9.1.1
9.1.2
9.1.3
9.1.4
9.1.5
9.1.6
9.2
9.2.1
9.2.2
9.3
9.3.1
9.3.2
9.3.3
9.3.3.1
9.3.3.2
9.3.4
9.3.4.1
9.3.4.2
9.3.4.3
9.4
9.4.1
9.4.2
9.4.2.1
9.4.2.2

Aminas y aminocidos. (14 horas)

Reacciones de aminas.
Formacin de sales.
Alquilacin.
Acilacin.
Sulfonacin.
Oxidacin.
Nitrosacin.
Preparacin de aminas.
Por reduccin.
La sntesis de Gabriel.
Aminocidos.
Clasificacin y estereoqumica.
Comportamiento cido-base.
Sntesis de aminocidos.
Sntesis de Strecker.
Con acetamidomalonato de dietilo.
Reacciones de aminocidos.
Acilacin.
Esterificacin.
Con ninhidrina.
Pptidos.
Definicin, enlace peptdico trminos relacionados.
Determinacin de la estructura de aminocidos
Anlisis de grupos terminales, el extremo N y el extremo C.
Hidrlisis de pptidos.
5

EDICIN 2015

9.4.3
9.4.3.1
9.4.3.2
9.4.3.3
9.4.3.4
9.4.3.5

Sntesis de pptidos
Concepto de grupo protector.
Proteccin y desproteccin del grupo amino.
Proteccin y desproteccin del grupo carboxilo.
Formacin del enlace peptdico.
Sntesis en fase slida.

EDICIN 2015

REGLAMENTO INTERNO PARA LOS LABORATORIOS DEL

DEPARTAMENTO DE QUMICA ORGNICA
I. GENERALIDADES.
1. Las disposiciones de este reglamento regirn todas las actividades de los laboratorios del

Departamento de Qumica Orgnica y sern obligatorias para los alumnos que cursen la
asignatura.
2. Los alumnos que deseen cursar el laboratorio, debern reunir los requisitos que marca la

E.N.C.B. as como los estipulados en el presente reglamento:

a) Presentar orden de inscripcin debidamente autorizada al profesor responsable, tan pronto
como sea expedida por la direccin de la escuela.
b) No ser permitida la estancia a los alumnos que no porten bata.
c) Los alumnos que no mantengan el comportamiento adecuado en el laboratorio no podrn
permanecer en l.
d) Para abandonar temporalmente el laboratorio durante el desarrollo de la prctica, se deber
solicitar el permiso correspondiente al profesor.
e) Al concluir la prctica, los alumnos debern dejar completamente limpio su lugar de trabajo
y las reas comunes como las campanas de extraccin.
3. No se aceptarn alumnos condicionales.
4. Los alumnos a los que se les hayan autorizado baja en el curso, debern presentar la

constancia correspondiente; de no hacerlo, el curso se considerar reprobado.

II. ORGANIZACIN.
1. La hora de entrada ser la indicada en el horario de cada grupo, dndose una tolerancia
mxima de 15 minutos, despus de los cuales se pasar lista y no se permitir la entrada al
laboratorio. No habr retardos.
2. El trabajo de laboratorio se realizar en el sitio indicado por el profesor.
3. Se formarn equipos de trabajo en el laboratorio, los cuales sern de dos o tres alumnos
segn las caractersticas del grupo, siendo permanentes durante todo el curso.
4. El total de equipos formados por grupo, sern divididos en dos o tres secciones.

5. La sesin de laboratorio iniciar con un seminario, en el cual se discutir los resultados de la

prctica anterior, as como la prctica por realizar; posteriormente se desarrollar la parte

experimental de la misma.
6. Cada equipo contar con la cantidad necesaria de reactivos para la realizacin de la prctica.
No habr reposicin de los mismos, en caso de prdida o accidente.
7. Cada equipo har un vale al almacn, por el material que se requiera en la prctica, debiendo

hacer una revisin exhaustiva del mismo en el momento de recibirlo y reportando cualquier
anomala al almacenista antes de entregar el vale.
8. En caso de ruptura o prdida del material, se dar un plazo mximo de 15 das para

reponerlo; de no hacerlo oportunamente, no se permitir la realizacin de prcticas, las

cuales sern calificadas con CERO. Si al final del semestre hay adeudo de material, la
calificacin del curso ser reprobatoria.
9. Todo asunto relacionado con el material, se deber tratar directamente con el

almacenista.
10. Cada equipo deber traer el siguiente material:

Cerillos, detergente, escobillones, franela, jerga, vaselina slida, papel absorbente, aceite,
perilla de seguridad o jeringa, papel pH, esptula, 10 frascos mbar 25 mL, perlas de
ebullicin.
11. Al final de la prctica se entregar el material limpio; de no ser as, no ser recibido por el

almacenista.
12. El material roto o restos de material quedar en poder del almacenista y ser destruido en

presencia del alumno en el momento en que ste lo reponga en el almacn.

III. EVALUACIN.
1. Para acreditar el curso terico, el alumno deber aprobar el curso prctico, para lo cual
requerir:
a) Un mnimo de 80% de asistencias.
b) Calificacin final mnima de seis.
c) No adeudar material
2. La evaluacin del curso prctico se har en la forma siguiente:
a) Se realizarn tres exmenes parciales. No habr examen final ni reposicin.
b) La calificacin promedio de los seminarios, contar como un 4 examen parcial y el
promedio de calificaciones del trabajo de laboratorio, como un 5 examen parcial.
La calificacin final del curso de laboratorio, ser el promedio de estas 5 evaluaciones:

E1 E 2 E 3 PS PTL
CF
5
CF.
E.
PS.
PTL.

Calificacin final
Examen Parcial
Promedio de calificaciones de seminarios
Promedio de calificaciones del trabajo de laboratorio

Con la finalidad de apoyar el correcto desarrollo de los elementos de valuacin que sern
considerados, se incluyen los documentos siguientes:
1) Ejemplo de un Diagrama de flujo
2) Rbrica de evaluacin del Diagrama de flujo.
3) Rbrica de evaluacin del Reporte de Laboratorio.
4) Rbrica de evaluacin de la exposicin Oral.

PRCTICA NO. 3
OBTENCIN DE ALCOHOL BENCLICO Y CIDO BENZOICO
REACCIN DE CANNIZARO

KOH 13.5 g
H2O 12.5 mL

1) Disolver
2) Enfriar a T. amb

KOH

Benzaldehdo

Agitar 1 hr.
T= 65C

Disolucin de
Benzoato de
potasio

Agregar

60 mL de H2O

Disolver
Pasar a embudo de separacin

4
1

Lavar matraz de reaccin

con 15 ml de ter

ter

Agregar a embudo de separacin

Fase acuosa
cido
clorhdrico

Agregar
Benzaldehido 14.5 mL

Fase orgnica
0
Extracto 1

2 lavados c/10 mL de ter

0
3

F. acuosa

NaOH

extractos

F. org

Si

Unin de extractos

Agregar
40 mL de HCl
40 mL de H2O
50 g de hielo

Lavar con 7 mL de
solucin sat. de
NaHSO3

Huele a
benzaldehdo??

0
3

No

F. org.

Sulfato de sodio
Filtrar

Decantar

Lavar con agua

Recristalizar de
agua

Sol

Destilacin simple

Lavar con 5
mL de NaOH
dil.

F. org.

Residuo

Desechar

F. acuosa
Desechar

Lavar con 5
mL de H2O
Destilado
ter etlico

Alcohol Benclico

F. org.

F. acuosa

0
cido
benzoico

Identificacin
Punto de fusin
Solubilidad en CCl4

Alcohol
benclico
1

Secar
cido benzoico

Secar con Na2SO4

anhidro

F. acuosa

Desechar

3
Identificacin:
Punto de ebullicin
Solubilidad en
metanol

Desechar

0
Residuos no clorados

Metanol

tarja

RBRICA PARA EVALUAR UN DIAGRAMA DE FLUJO

CRITERIO

NIVEL DE DESEMPEO
BUENO
(9 - 10)
Hay inicio, entrada de
informacin, preguntas,
actividades,
condiciones, flechas
y final

REGULAR
(7 - 8)
Falta uno de los
elementos
antes mencionados

INSUFICIENTE
(5 - 6)
Faltan 2 o ms de los
elementos antes
mencionados

PROFUNDIZACIN

La informacin es
suficiente,
adecuada y pertinente a
cualquier situacin

La informacin es
insuficiente, es menos
de la
mitad de la requerida

La informacin no es
suficiente y es
inadecuada

JERARQUIZACIN

La informacin est
bien
jerarquizada de tal
manera que
disipa toda duda del
proceso
La toma de decisiones,
las
actividades, las
condiciones y las
flechas se relacionan
perfectamente

La informacin falla en
dos o
tres jerarquizaciones,
causa
confusin

La informacin est mal

jerarquizada causa
dudas

La toma de decisiones,
las
actividades, las
condiciones y
las flechas llegan a fallar
en
tres cinco ocasiones
El planteamiento tiene
pocos
errores, ofreciendo
pocas
expectativas de trabajo
acadmico
Falta color y espacios

La toma de decisiones,
las
actividades, las
condiciones
y las flechas no estn
bien
relacionadas
El planteamiento es
inadecuado
No ofrece expectativas

CONSTRUCCIN

ANLISIS

SOLUCIN DEL
PROBLEMA

El planteamiento es
adecuado y
ofrece muchas
expectativas de
trabajo acadmico

CREATIVIDAD

Tiene colorido y la
informacin
est distribuida
adecuadamente

Es simple y todo
encimado

SIMBOLOGA

RBRICA PARA LA EVALUACIN DEL REPORTE DE LABORATORIO

Objetivo

Proponen de forma clara los alcances

que se pretende lograr con la realizacin
de la prctica

Resultados y
observaciones

Hace uso de tablas, dibujos, cuadros o

grficas
para indicar los datos u
observaciones realizados durante la
prctica

Anlisis de
Resultados

Conclusiones

Sin valor

2 puntos
El equipo justifica adecuadamente los
resultados obtenidos comparndolos con los
esperados encontrados en investigaciones
bibliogrficas, as como apoyado en la
informacin proporcionada por el profesor
4 puntos
Se establecen en funcin a los objetivos
planteados y el aprendizaje logrado basado
en el anlisis de resultados. Describe los
alcances reales logrados sean o no
compatibles con lo esperado.

Proponen de forma poco clara los

alcances que se pretende lograr con la
realizacin de la prctica.
Sin valor
No representa de forma organizada los
datos obtenidos los presenta solo de
forma parcial.

Las intenciones propuestas en el

objetivo no tienen relacin con la
temtica de la prctica.
Sin valor
Presenta solo una descripcin de los
hechos observados sin hacer resaltar
los datos importantes obtenidos.

1 puntos
El equipo justifica los resultados obtenidos
pero sin comparndolos con los datos
esperados encontrados en la bibliografa o
empleando la informacin proporcionada
por el profesor
2 puntos
Se establecen en funcin a los objetivos
planteados y el aprendizaje logrado basado
en el anlisis de resultados, pero no se
apega a los alcances reales sino que solo
se hace referencia a lo esperado.

0.5 punto
El equipo solo repite los resultados
obtenidos sin hacer comparaciones con
resultados esperados
o cotejando la
informacin proporcionada por las fuentes
bibliogrficas o su profesor
1 puntos
No establecen en funcin a los objetivos
planteados, no se basa en el anlisis de
resultados. Solo se limita a repetir los
resultados o anlisis o simplemente es
una opinin sobre lo que se obtuvo o se
esperaba.

Cuestionario
Experimental
Bibliografa

2 puntos

1 puntos

El equipo responde acertadamente todos los

cuestionamientos experimentales incluidos en el
formato de la prctica apoyado en sus resultados
y observaciones as como, en una investigacin
bibliogrfica.
1.0 puntos

El equipo responde
los cuestionamientos
experimentales incluidos en el formato de la
prctica apoyado solo en sus resultados y
observaciones.

Debe incluir referencias virtuales y dos

libros de texto

Incluye solo referencias virtuales

1 puntos

0.75 punto

0.5 puntos

0.5 puntos
El equipo responde a algunos de
los
cuestionamientos experimentales incluidos en
su manual sin apoyarse en sus resultados y
observaciones ni en la bibliografa y de forma
errnea
0.5 puntos

Incluye solo un libro de texto

0.5 punto

Nota: La ponderacin de cada rubro as como los puntos especficos a incluir en el reporte de laboratorio queda sujeta a modificacin
por parte de los profesores de laboratorio.

RUBRICA DE EVALUACIN DE LAS EXPOSICIONES ORALES

Aspecto a evaluar

E
X
P
R
E
S
I
O
N

O
R
A
L
E
N
L
A
P
R
E
S
E
N
T
A
C
I

N
P
O
W
E
R
P
O
I
N
T

Insuficiente
(0-4)

Deficiente
(5)

Satisfactorio
(6)
EXPRESIN ORAL

Bueno
(8)

Apenas perceptible,
pausado y hace largos
silencios.

Apenas perceptible y
pausado

Volumen medio y pausado

sin modulacin

Volumen apropiado pero

sin modulacin ni pausas

Utiliza ms de tres y con

mucha frecuencia
Durante la exposicin
completa ley el material
contenido en las
diapositivas

Utiliza al menos dos

muletillas con frecuencia
Lee los textos de las
diapositivas pero explica
algunos puntos importantes

Utiliza una con insistencia.

Utiliza una sola pero no es

demasiado frecuente
Lee entre lneas y
complementa la
informacin con
explicaciones adicionales

Se expresa sin formalidad

y espordicamente emplea
trminos adecuados

Su lenguaje es
medianamente apropiado

Respeto al tiempo
asignado de exposicin
(40- 60 min)

Los trminos que

emplea son coloquiales
y no reflejan manejo de
trminos apropiados
Rebasa el tiempo
asignado por ms de 15
minutos

Rebasa el tiempo
asignado por ms de 10
minutos

Rebasa el tiempo
asignado por ms de 7
minutos

Ttulo de la exposicin

No la tiene

Es inapropiado

Nombre de los alumnos, en

orden alfabtico por
apellido
Nmero de equipo
Materia

No lo tiene

Contiene solo los nombres

propios de los estudiantes

Grupo
Semestre
Citar fuentes en casos de
cuadro y grficas
Las letras no se pierdan
con el fondo de la
presentacin
Ortografa general y
escritura correcta de las
sustancias empleadas

No lo tiene
No lo tiene
No contiene citas

Estructuras y propiedades
fisicoqumicas de los
productos y reactivos
Mecanismo de reaccin

Intensidad de voz

Uso de muletillas
No leer

Uso de lenguaje tcnico

apropiado

Diagrama de Flujo de la
parte experimental
Justificacin de cada uno
de los pasos de la tcnica
aplicada

Lee algunos prrafos

importantes y complementa
con explicaciones

Es inadecuado sin
embargo da idea
apropiada de lo que se
pretende exponer
Contiene los nombres y un
solo apellido y sin orden
alfabtico

Se expresa con formalidad

pero no emplea trminos
tcnicos con la frecuencia
requerida
Rebasa el tiempo
asignado por ms de 5
minutos

Excelente
(10)
Volumen apropiado,
modulado haciendo nfasis
en ciertos puntos y sin
silencios
No emplea muletillas
Nunca lee el texto de la
diapositiva y solo hace
alusin a su contenido
como apoyo para la
audiencia
Se expresa con propiedad,
usando un lenguaje tcnico
apropiado y pulcro
Cumple con exactitud el
tiempo asignado

Es adecuado sin embargo

es susceptible de mejora
para hacerlo ms preciso

Es correcto

Contiene los nombres y un

solo apellido y en orden
alfabtico

Contiene los nombres

completos y en orden
alfabtico
Lo tiene
Lo tiene

No lo tiene
No lo tiene

Lo tiene
Lo tiene
Cita correctamente en
todos los casos
Cumple

Cita incorrectamente en
algunas ocasiones

Cita incorrectamente en
algunos casos

Cita correctamente pero no

en todos los casos

Ms de 5 errores

5 de errores

4 errores

2 errores

Sin errores

No los presenta

Los presenta incompletos

Le faltan 1 o dos

Presenta todos

Se incluye en ms de una
diapositiva y contiene todos
los pasos importantes
Lo incluye pero no es lo
suficientemente organizado
y claro

Se incluye en una sola

diapositiva y contiene todos
los pasos importantes
El diagrama es
perfectamente claro,
organizado y bien
presentado
Se explica las razones de
cada uno de los pasos
incluidos en la tcnica de
sntesis

No cumple

No se incluye o se hace
de forma incorrecta
No lo incluye y solo
menciona el
procedimiento a seguir
No se incluye o se
menciona de forma
incorrecta

Se incluye en ms de una
diapositiva y est
incompleto
No lo incluye pero utiliza
otro recurso poco claro

Se incluye la tcnica pero

no se justifica el por qu de
los pasos

Solo las estructuras y no

las propiedades o
viceversa
No se incluyen todos los
pasos importantes
Lo incluye pero su
construccin es poco clara
el incompleta
Se incluye la tcnica
aplicada pero existen
muchos errores en la
justificacin de los mismos

Se incluye una breve

explicacin de los pasos
aplicados en la sntesis

Calif.

Observaciones

INTRODUCCIN AL LABORATORIO DE QUMICA ORGNICA

TRABAJO EN EL LABORATORIO DE QUMICA ORGNICA
OBJETIVO.

Conocer las normas y la metodologa requeridas para el desempeo de las

actividades que se realizan en el laboratorio.
Desarrollar un criterio que le permita usar y comprender las operaciones y
procesos comunes de la Qumica Orgnica y conocer las limitaciones y riesgos
que conlleva dicho trabajo.
Conocer el material de laboratorio, el equipo de vidrio, el manejo de los reactivos
y el montaje de aparatos a utilizar durante la realizacin de las prcticas.
Aprender a buscar informacin y a registrar las observaciones de manera
metdica, precisa, completa y reproducible.

INTRODUCCIN.
La Qumica Orgnica es una materia experimental, por lo que se requiere de disciplina y
metodologa para la obtencin de resultados confiables, as como de la aplicacin de
las normas de seguridad apropiadas para evitar accidentes. La realizacin de este
trabajo implica el diseo experimental, la interpretacin de resultados y el registro de
stos.
NORMAS DE TRABAJO.
Procedimientos de operacin en el Laboratorio de Qumica Orgnica.
El laboratorio de Qumica Orgnica es una rea de alto riesgo, por lo cual
cualquier estudiante que sea sorprendido comportndose de manera inapropiada
y no observe las normas indicadas ser dado de baja de la materia.
Actitud y Preparacin.
El trabajo de laboratorio demanda del estudiante una actitud crtica, inquisitiva y una
cooperacin ilimitada. Para lograr lo anterior es necesaria una participacin activa en la
observacin de las normas de trabajo que se han establecido para evitar accidentes y
as lograr un alto rendimiento en el trabajo de experimental.
Antes de realizar cualquier experimento, se debern revisar los antecedentes tericos
de la reaccin a efectuar, el mecanismo de reaccin, los fundamentos fisicoqumicos as
como los problemas de seguridad involucrados en el manejo de los reactivos.
La lectura previa y la comprensin de las indicaciones del experimento, permitirn que
el curso y el desarrollo de la prctica sean claros en todos sus detalles. Al ingresar al
laboratorio se deber estar preparado fsicamente; no hacer el trabajo de laboratorio
con el estmago vaco o sin dormir. Se deber llegar puntualmente ya que slo se
2

EDICIN 2015

permiten 15 minutos de tolerancia, y se deber estar preparado mentalmente para

estudiar el experimento y planear las actividades.
Seguridad y Normas de Trabajo para el Laboratorio de Qumica Orgnica.
1)
2)
3)
4)
5)
6)

7)
8)

9)

Los reactivos usados en el laboratorio se convierten en un peligro cuando no se

manejan con cuidado, pero son inocuos cuando se manipulan precavidamente.
Se deber usar bata para el trabajo de laboratorio la cual deber estar siempre
protegiendo todo el cuerpo y deber mantenerse limpia.
Se deber usar ropa cmoda, incluyendo zapatos que sean confortables y
que permitan desplazarse rpidamente en caso de emergencia.
El cabello deber estar recogido de manera que no obstruya la visin o que
cuelgue sobre los materiales empleados.
No se permite usar calzado o ropa que dejen al descubierto el pie y las
piernas.
El uso de lentes de seguridad es obligatorio siempre que se permanezca en el
laboratorio, independientemente de manejar los reactivos o no. Los lentes
protegen de proyecciones e impactos en caso de accidente y es necesario
mantenerlos limpios y desempaados. En caso de usar lentes de contacto se
deber usar lentes de seguridad sellados con protecciones laterales.
No est permitido introducir alimentos ni comer, beber o fumar dentro del
laboratorio
Los compuestos orgnicos pueden absorberse por la piel, por lo que se deben
evitar derramamientos sobre sta y se evitar el contacto de los reactivos
directamente con las manos. No se deben succionar los lquidos con la boca, se
deber emplear una perilla de seguridad de acuerdo al procedimiento indicado
en la figura 1.
Para protegerse de la absorcin de productos qumicos por la piel se debern
usar guantes desechables de ltex de polipropileno, mantenindolos siempre
limpios.

10) En caso de requerir oler algn reactivo, se debe atraer un poco de sus vapores
pasando rpidamente la mano por la boca del frasco de acuerdo a la Figura 2.
Para evitar la inhalacin de vapores se deber calentar o evaporar la mezcla de
reaccin dentro de la campana de extraccin. No se debe oler el reactivo
directamente del frasco.

EDICIN 2015

FIGURA 1.

FIGURA 2.

EDICIN 2015

El Ambiente de trabajo.
1) Mantener la mesa de trabajo ordenada y limpia, sin productos o con agua
derramados sobre sta. En caso de derrames se deber limpiar rpidamente el
lugar utilizando papel absorbente, si el material es voltil se deber colocar en la
campana de extraccin.
2) Si se derrama un cido concentrado sobre la mesa se deber utilizar una
solucin de bicarbonato de sodio para neutralizarlo, si es una base la que se ha
derramado se deber utilizar cido actico diluido.
3) Se debern mantener limpias y ordenadas las reas comunes, las reas de
pesado de reactivos y las balanzas.
4) No contaminar los reactivos con esptulas o pipetas que tengan restos de otros
reactivos.

Material de vidrio.
1) No usar material de vidrio roto o en mal estado, revisar el material antes de
utilizarlo.
2) Utilizar material de vidrio limpio y seco. No utilizar el termmetro como agitador.
Identificar cada uno de los materiales de vidrio por su nombre (Figura 3).
3) Muchos compuestos son inflamables y pueden producir fuego a altas
temperaturas por lo cual el trabajo, con mecheros u otra flama abierta, se
realizar dentro del periodo de laboratorio y bajo la supervisin del profesor.
NO SE DEBE DEJAR EL MECHERO ENCENDIDO SIN USO ALGUNO, EL
MECHERO SE PRENDE CUANDO SE INICIA EL CALENTAMIENTO Y SE
APAGA CUANDO STE TERMINA, NO SE DEBE DEJAR EL MECHERO
ENCENDIDO SIN VIGILANCIA.
4) NO SE PERMITE NINGN EXPERIMENTO NO AUTORIZADO POR EL
MAESTRO.

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MATERIAL BSICO DE LABORATORIO

EDICIN 2015

FIGURA 3.

PRECAUCIONES
1) Est estrictamente prohibido calentar un sistema cerrado, ya que ste puede ser
causa de una proyeccin que puede convertirse en explosin.
2) En caso de producirse fuego, tener identificadas las ubicaciones de los
extinguidores, los botes de arena, y el material de auxilio, as como la salida ms
prxima.
7

EDICIN 2015

3) Al calentar con bao de aceite, revisar que el recipiente donde se encuentra el

aceite est totalmente seco ya que la presencia de agua provoca proyecciones
de aceite caliente.
4) El fuego de un tubo de ensaye o matraz puede sofocarse con un vidrio de reloj,
con el extintor o con arena.
5) En caso de fuego en la ropa en una persona, cubrirlo con una manta y evitar
correr.
6) LOS DESECHOS SE COLOCARN EN LOS LUGARES DESTINADOS A ESTE
FIN. COLOCAR EL PAPEL Y LA BASURA EN LOS RECIPIENTES
APROPIADOS, NO TIRAR NINGN REACTIVO O DESECHO QUMICO EN EL
LAVABO.

7) En casos de tener alguna condicin fsica que pueda afectar tu rendimiento o tu

salud, como alergias, embarazo, epilepsia, etc. informar al profesor; dicha
informacin ser totalmente confidencial. En caso de
accidente
informar inmediatamente al profesor.
Desarrollo de la Prctica.
El trabajo de laboratorio no empieza en el momento que se entra al laboratorio, por el
contrario, previamente se ha de realizar una investigacin bibliogrfica que cubra los
siguientes aspectos:

Datos fsicos de cada uno de los reactivos que se usen, punto de fusin, punto
de ebullicin, solubilidad, etc.

Datos toxicolgicos, precauciones relacionadas con el manejo de cada uno de

los reactivos.

Datos complementarios. Fundamentos fisicoqumicos, reacciones y mecanismos

de reaccin involucrados en el desarrollo de la prctica, ecuacin qumica
balanceada, e identificacin del reactivo limitante. Productos y subproductos
esperados y precauciones que hay que considerar para el desarrollo exitoso de
la prctica.

Seminario.
El propsito del seminario es aclarar cualquier aspecto de la prctica que no este
comprendido, por lo que se requiere de la participacin de todos los estudiantes.
Informe de resultados.
El profesor indicar las caractersticas que deber contener cada informe.

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PROPIEDADES FSICAS Y TOXICOLGICAS

1. Los alumnos debern consultar y completar las frmulas, las propiedades fsicas,
las propiedades qumicas y la toxicidad de las sustancias a emplear en las
prcticas.
1. Acetanilida.

29. Ciclohexanol.

2. Acetato de etilo.

30. Ciclohexeno.

3. Acetato cprico.

31. Cloroformo.

4. Acetona.

32. Cloruro de calcio.

5. Agua.

33. Cloruro de metileno.

6. cido actico glacial.

34. Cloruro de sodio.

7. cido benzoico.

35. Cloruro de terbutilo.

8. cido clorhdrico.

36. Dibenzalacetona.

9. cido fosfrico.

37. Etanol.

10. cido fumrico.

38. Eter etlico.

11. cido maleico.

39. Fenol.

12. cido ntrico.

40. Fenolftalena.

13. cido oxlico.

41. Glicerol.

14. cido pcrico.

42. Hexano.

15. cido saliclico.

43. Hidrxido de potasio.

16. cido sulfrico.

44. Hidrxido de sodio.

17. Alcohol isoamlico.

45. Metanol.

18. Alcohol terbutlico.

46. Nitrato de amonio.

19. Anilina.

47. o-Nitrofenol.

20. Azul de metileno.

48. p-Nitroacetanilida.

21. Benceno.

49. p-Nitrofenol.

22. Bencilo.

50. Sacarosa.

23. Benzaldehdo.

51. Sulfato de sodio anhidro.

24. Benzona.

52. Tetracloruro de carbono.

25. Bicarbonato de sodio.

53. Tolueno.

26. Bromo.

54. Yodo.

27. Carbn activado.

28. Carbonato de sodio.

9

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2. Con la lista anterior, completa la tabla siguiente:

Disolventes

Agentes Desecantes

Reactivos Orgnicos

10

Reactivos
Inorgnicos

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3. El profesor definir junto con los alumnos los siguientes trminos:

Reactivos.
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
Productos.
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
Qu indica el subndice en una reaccin qumica.
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
Qu indica el coeficiente en una reaccin qumica.
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
Peso molecular.
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
Peso atmico.
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
Reactivo en exceso.
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________

Reactivo limitante.
______________________________________________________________________
______________________________________________________________________
5. Clculos estequiomtricos: El profesor explicar cmo se calcula la eficiencia, el
rendimiento terico y prctico de reaccin para diferentes tipos de reacciones, as como
la eficiencia y el rendimiento de extraccin para diferentes mtodos de extraccin.

11

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Etiquetado de seguridad de productos qumicos.

La etiqueta es, en general, la primera informacin que recibe el usuario y es la que permite
identificar el producto en el momento de su utilizacin. Todo recipiente que contenga un producto
qumico deber llevar una etiqueta visible en su envase que, contenga:
Nombre de la sustancia o del preparado.
Fecha de preparacin u obtencin.
Nombre de la persona o equipo que lo prepar, grupo y seccin.
Smbolos e indicaciones de peligro para destacar los riesgos principales.
Para manejar con seguridad las sustancias qumicas se han ideado diversos cdigos y pictogramas
dependiendo de la casa fabricante. A continuacin se muestra uno de los ms usados.
(Azul)

(Rojo)

(Blanco)

(Amarillo)
FIGURA 4.

Algunos de los pictogramas de peligro ms utilizados se muestran a continuacin en la siguiente

Tabla

TABLA 1. Pictogramas de peligrosidad.

E
Explosivo

Clasificacin:
Sustancias y preparaciones que reaccionan
exotrmicamente tambin sin oxgeno y que detonan segn condiciones
de ensayo fijadas, pueden explotar al calentar bajo inclusin parcial.
Ejemplo: Dicromato de amonio.
Precaucin: Evitar el choque, Percusin, Friccin, formacin de
chispas, fuego y accin del calor.
Clasificacin: Lquidos con un punto de inflamacin inferior a 21C,
pero que NO son altamente inflamables. Sustancias slidas y
preparaciones que por accin breve de una fuente de inflamacin
pueden inflamarse fcilmente y luego pueden continuar quemndose o
permanecer incandescentes.
Precaucin: Mantener lejos de llamas abiertas, chispas y fuentes de
calor.

F
Fcilmente
inflamable

A. Sustancias autoinflamables. Ejemplo: Alquiluros de

aluminio, fsforo.
Precaucin. Evitar contacto con el aire
B. Gases fcilmente inflamables. Ejemplo: Butano, propano.
Precaucin. Evitar la formacin de mezclas inflamables gas-aire y aislar
de fuentes de ignicin.
C. Sustancias sensibles a la humedad. Productos qumicos que
desarrollan emanaciones de gas inflamable al contacto con el agua.
Ejemplo: Litio, borohidruro de sodio.
Precauciones: evitar contacto con agua o con humedad.

Clasificacin: Lquidos con un punto de inflamacin inferior a 0C y un

F+
punto de ebullicin de mximo de 35C. Gases y mezclas de gases, que
Extremadamente a presin normal y a temperatura usual son inflamables en el aire.
inflamable
Precaucin: Mantener lejos de llamas abiertas, chispas y fuentes de
calor.

C
Corrosivo

Clasificacin: Destruccin del tejido cutneo en todo su espesor en el

caso
de
piel
sana,
intacta.
Ejemplo: bromo, cido sulfrico.
Precaucin: Mediante medidas protectoras especiales evitar el
contacto con los ojos, piel e indumentaria. NO inhalar los vapores. En
caso de accidente o malestar consultar inmediatamente al mdico.

T
Txico

Clasificacin: La inhalacin y la ingestin o absorcin cutnea en

pequea cantidad, pueden conducir a daos para la salud de magnitud
considerable, eventualmente con consecuencias mortales.
Ejemplo: Trixido de arsnico, cloruro de mercurio (II).
Precaucin: Evitar cualquier contacto con el cuerpo humano. En caso
de malestar consultar inmediatamente al mdico. En caso de
manipulacin de estas sustancias deben establecerse procedimientos
especficos.

T+
Muy Txico

Clasificacin: La inhalacin y la ingestin o absorcin cutnea en MUY

pequea cantidad, pueden conducir a daos de considerable magnitud
para la salud, posiblemente con consecuencias mortales.
Precaucin: Evitar cualquier contacto con el cuerpo humano, en caso
de malestar consultar inmediatamente al mdico.

O
Comburente

Clasificacin: (Perxidos orgnicos). Sustancias y preparados que,

en contacto con otras sustancias, en especial con sustancias
inflamables, producen reaccin fuertemente exotrmica.
Peligro de inflamacin: Pueden favorecer los incendios comenzados y
dificultar su extincin.
Ejemplo:
Permanganato
de
potasio,
perxido
de
sodio.
Precaucin: Evitar todo contacto con sustancias combustibles.

Xn
Nocivo

Clasificacin: La inhalacin, la ingestin o la absorcin cutnea

pueden provocar daos para la salud agudos o crnicos. Peligros para
la reproduccin, peligro de sensibilizacin por inhalacin.
Ejemplo: Tricloroetileno.
Precaucin: Evitar el contacto con el cuerpo humano.

Xi
Irritante

Clasificacin: Sin ser corrosivas, pueden producir inflamaciones en

caso de contacto breve, prolongado o repetido con la piel o en
mucosas. Peligro de sensibilizacin en caso de contacto con la piel.
Ejemplo: Amoniaco, cloruro de bencilo.
Precaucin: Evitar el contacto con ojos y piel; no inhalar vapores.

N
Peligro para el
medio ambiente

Clasificacin: En el caso de ser liberado en el medio acutico y no

acutico puede producirse un dao del ecosistema por cambio del
equilibrio natural, inmediatamente o con posterioridad. Ciertas
sustancias o sus productos de transformacin pueden alterar
simultneamente diversos compartimentos.
Precaucin: Segn sea el potencial de peligro, no dejar que alcancen
la canalizacin, en el suelo o el medio ambiente. Observar las
prescripciones de eliminacin de residuos especiales.

PRCTICA 1
SEPARACIN DE UNA MEZCLA TERNARIA POR DESTILACIN
OBJETIVOS
1. Utilizar los diferentes tipos de destilacin para separar los componentes de una
mezcla.
2. Aplicar las propiedades fsicas y qumicas de algunos compuestos, para su
purificacin.

INTRODUCCIN
La separacin de mezclas es una tarea frecuente en Qumica Orgnica. Los mtodos
utilizados en la prctica se basan principalmente en la naturaleza qumica de los
componentes de la mezcla a separar, considerando las
diferencias en peso molecular, polaridad, constantes fsicas, acidez y basicidad.
En esta prctica la mezcla a separar est formada por anilina, alcohol isoamlico y
glicerol en volmenes iguales. El primer paso para conseguir la separacin es una
destilacin por arrastre de vapor, aprovechando la baja volatilidad del glicerol y su alta
solubilidad en agua, as como la comparativamente baja solubilidad en agua de la
anilina y el alcohol isoamlico. En esta forma se separa el glicerol de la mezcla; la
purificacin total de ste se consigue por medio de una destilacin a presin reducida,
debido a que una destilacin a presin normal trae consigo su descomposicin (p. eb.
290o C con descomposicin).
Se tiene ahora una mezcla de alcohol isoamlico y anilina; para su separacin se
aprovecha el carcter bsico de la anilina, transformndola en su sal. La baja volatilidad
de la sal permite la separacin por destilacin del alcohol isoamlico. La purificacin de
la anilina implica el tratamiento de la sal formada, con un lcali, a fin de regenerarla.
Tanto la anilina como el alcohol isoamlico se purifican totalmente por medio de una
destilacin fraccionada o a presin reducida.

PROPIEDADES FSICAS DE LOS COMPONENTES DE LA MEZCLA

GLICEROL

ANILINA

ALCOHOL ISOAMLICO

NH 2

OH
HO

OH
OH

P.M.

92.1

93.2

88.2

p.f.

18oC

-6.2oC

-117C

184.3oC

131oC

1.26 g/ml

1.022 g/ml

0.809 g/ml

Solubilidad

agua y etanol

Insoluble en

cloroformo y tetracloruro de
carbono

Benceno, alcohol, ter y

cloroformo
Agua

alcohol, ter, benceno y

cloroformo
agua

290oC

p.eb.
Densidad

(760 mmHg)

MATERIAL Y REACTIVOS POR EQUIPO

REACTIVOS

MATERIAL

Alcohol isoamlico

5ml

Soporte

vaso de precipitados

Glicerol

5 ml

Anillo

Anilina

5 ml

Rejilla

columna de
fraccionamiento
embudo de separacin

cido sulfrico

2.5 ml

pinzas nuez

matraz baln

bao Mara

unin triple

mechero o parrilla

probeta

refrigerante

termmetro

matraz Erlenmeyer

2
portatermmetro

Sulfato de sodio
anhidro
Hidrxido de sodio al
40%
Agua

Lo que se
requiera

otros, por cualquier eventualidad

MATERIAL POR SECCIN

Bomba de vaco
Papel indicador de pH

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PARTE EXPERIMENTAL

En un matraz Erlenmeyer de 250 mL colocar 5 mL de alcohol isoamlico, 5 mL de

anilina* (vea la nota sobre la toxicidad de este compuesto al final del procedimiento) y 5
mL de glicerol; adicionar 33 mL de agua y adaptar un aparato de destilacin por
arrastre de vapor (el montaje se har como el de una destilacin simple). Destilar
hasta que el matrz de destilacin contenga aproximadamente 12 mL, el destilado
contiene anilina, alcohol isoamlico y agua; el residuo contiene glicerol impuro.
Transferir ste a un matraz y destilarlo a presin reducida, al punto de ebullicin
correspondiente a la presin del sistema (condicionado a que se cuente con manmetro
y bomba de vaco)
Agregar al destilado anterior (el que contiene anilina y alcohol isoamlico), lentamente y
con agitacin, H2SO4 hasta pH entre 3 y 5; adicionar 15 mL de agua y efectuar una
destilacin por arrastre de vapor (montaje de destilacin simple).
Reaccin

NH2

NH3

HSO4

H2SO4

Bisulfato de anilonio

El destilado contiene alcohol isoamlico y agua; transferirlo

a un embudo de

separacin, separar el alcohol, presente en la fase orgnica y que por diferencia de

densidades debe ser la fase de arriba, y secar con Na 2SO4 anhidro. (agregando la
cantidad requerida, cuando ya no se formen grumos en el lquido se encontrar ste
razonablemente seco).
Al residuo, que contiene la sal bisulfato de anilonio, agregarle una solucin de NaOH al
40 % hasta alcalinidad (pH 9); agregar 10 ml de H2O y efectuar una destilacin por
arrastre de vapor (montaje de D. simple). Separar la anilina destilada, transfirindola a
un embudo de separacin y secndola despus con Na 2SO4 anhidro, como se hizo con
el alcohol isoamlico.
* Produce anemia, irritabilidad y prdida de peso en intoxicaciones graves.

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Reaccin

NH3

HSO4

NH2

NaOH

H2O

NaHSO4

Como se menciona en la Introduccin, tanto el alcohol isoamlico como la anilina se

purifican totalmente por medio de una destilacin fraccionada o a presin reducida.
(Mismas que no se llevarn a cabo).

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DIAGRAMA DE FLUJO

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CUESTIONARIO

1. A qu se atribuye la baja volatilidad del glicerol?

2. Por qu las sales de los componentes orgnicos tienen puntos de ebullicin

elevados

3. Qu caractersticas debe tener una sustancia para purificarse por medio de

arrastre con vapor de agua?

4. Cmo se sabe cundo ha terminado una destilacin por arrastre de vapor?

5. En qu casos debe utilizarse la destilacin a presin reducida?

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6. Proponer un procedimiento para separar cada una de las siguientes mezclas:

a) cido actico-acetona-octano

b) Anilina-cloruro de sodio-acetato de sodio

7. Sugerir un procedimiento diferente al empleado en el laboratorio para separar la

misma mezcla

8. Qu tipo de fuerzas intermoleculares actan entre cada uno de los

componentes de la mezcla ternaria?

9. Qu tipo de fuerzas intermoleculares actan en cada uno de los componentes

ya separados? (Suponga una separacin ideal).

BIBLIOGRAFA:
9

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Observaciones

Resultados

Anlisis de Resultados

Conclusiones

10

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PRCTICA 2
RECRISTALIZACIN.
OBJETIVOS.
Conocer y aplicar la tcnica de recristalizacin para la purificacin de
compuestos orgnicos.
Aplicar los conceptos relacionados con la estructura y la polaridad de los
compuestos.
Realizar la seleccin del disolvente en una recristalizacin.
ANTECEDENTES.
1.- Interacciones intermoleculares.
2.- Polaridad de las molculas.
INTRODUCCIN

Los compuestos orgnicos slidos que se obtienen en una reaccin o se aslan de

alguna fuente natural suelen estar acompaados de impurezas que hay que eliminar
para poder disponer del producto deseado en el mayor grado de pureza posible. El
mtodo ms adecuado para la eliminacin de las impurezas que contaminan un slido
es mediante cristalizaciones sucesivas, bien en un disolvente puro, o bien en una
mezcla de disolventes. Al procedimiento se le da el nombre genrico de recristalizacin.
La tcnica de recristalizacin consiste en la formacin de partculas slidas en el seno
de una fase homognea, basndose en las diferencias de solubilidad del slido y sus
impurezas en diferentes disolventes. Se considera como impureza a toda sustancia
extraa cuya concentracin no exceda del 5%.
En la recristalizacin, el slido impuro se disuelve en un volumen mnimo de disolvente
a ebullicin; la mezcla caliente se filtra para eliminar todas las impurezas insolubles y la
solucin se deja enfriar; al descender la temperatura, decrece la solubilidad del soluto y
cristaliza de la solucin. En el caso ideal, la concentracin de cualquier impureza no
sobrepasa su punto de saturacin en la solucin fra y por ello permanecer disuelta en
las aguas madres. Finalmente los cristales se separan por filtracin y se dejan secar. En
la prctica, parte de las impurezas pueden cristalizarse con la sustancia deseada, por lo
que debe recristalizarse para obtener una purificacin satisfactoria.
Cuando estn presentes impurezas coloridas, stas se eliminan agregando a la
solucin una mnima cantidad de carbn activado que adsorbe las impurezas.

11

EDICIN 2015

Los pasos para efectuar una recristalizacin, de acuerdo a lo anterior, son:

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

Eleccin del disolvente

Disolucin de la sustancia en caliente
Si la solucin tiene color, adicionar carbn activado y llevar a ebullicin
Filtracin de la solucin en caliente
Enfriamiento para recristalizar
Separacin de los cristales
Secado de los cristales

1. Eleccin del Disolvente.

Una estimacin de la solubilidad de un slido en un disolvente puede realizarse
considerando la estructura del slido, la estructura del disolvente y la accin de las
fuerzas intermoleculares involucradas.
As, los hidrocarburos son insolubles en agua, sin embargo, los alcoholes, los cidos
carboxlicos y las amidas que tienen menos de 5 tomos de carbono pueden formar
puentes de hidrgeno con el agua y son solubles en sta. En la Tabla 1 se indican
algunos de los disolventes ms empleados en la recristalizacin.

PUNTO DE
EBULLICIN (C)

DISOLVENTE

FRMULA

Agua
Metanol*
Etanol*
Acetona*
Acetato de Etilo*
Cloruro de Metileno
Eter etlico*
Cloroformo**
Benceno***
Tetracloruro de carbono**
Ligrona*
Hexano*
Eter de Petrleo*
Pentano*

H2O
CH3OH
C2H5OH
CH3COCH3
CH3COOCH2CH3
CH2Cl2
(C2H5)2O
CHCl3
C6H6
CCl4
Mezcla de Hidrocarburos C7 y C8
Mezcla de Hidrocarburos C6H14
Mezcla de Hidrocarburos C5 y C6
Mezcla de Hidrocarburos C5H12

100
65
78
56
77.2
40
35
61
80
76
90-115
68
35-60
36

PUNTO DE
CONGELACIN (C)

0
-198
-117
- 95
- 84
- 97
-116
- 64
6
- 23
- 195
-130

INFLAMABILIDAD

0
++++
++++
++++
++++
0
++++
0
++++
0
++++
++++
++++
++++

Tabla 1. La polaridad de los disolventes est indicada en orden descendente.

NOTAS:
Todos los disolventes son txicos a excepcin del agua, por lo cual debern
usarse con precaucin y con buena ventilacin. Los disolventes clorocarbonados
producen daos hepticos por contacto con la piel o por inhalacin. Se ha
reportado que el CCl4 y El CH2Cl2 producen cncer en animales de laboratorio y
han sido prohibidas por la FDA para emplearlos en cosmticos y drogas.
Se debe evitar el contacto de los disolventes con la piel as como su inhalacin ya
que producen irritacin de las mucosas.

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EDICIN 2015

La eleccin del disolvente para la purificacin de un slido se basa en las

caractersticas siguientes:
1. El material que se desea purificar deber ser considerablemente ms soluble en el
disolvente caliente que en fro.
2. Las impurezas deben ser o muy solubles o insolubles en el disolvente, o bien
deben poder eliminarse fcilmente con carbn activado.
3. El disolvente debe tener un punto de ebullicin lo ms bajo posible, para facilitar la
evaporacin del mismo y el secado de los cristales.
4. El disolvente no debe reaccionar con el soluto.
5. Es tambin conveniente considerar el costo, toxicidad e inflamabilidad en la
eleccin de disolventes.
En ocasiones el disolvente ms eficaz para la recristalizacin de un compuesto es una
mezcla de dos lquidos. Tales mezclas se usan cuando un slido es soluble en un
disolvente e insoluble en el otro; en estas condiciones puede lograrse una cristalizacin
eficiente. El material a recristalizar se disuelve en el disolvente caliente en el cual es
ms soluble, luego se agrega el otro disolvente lentamente, hasta que el soluto tienda a
separarse (la solucin se volver turbia). La mezcla se calienta de nuevo para disolver
todo el material (si es necesario, se aaden pequeas cantidades del primer disolvente
para ayudar al proceso). Con la ayuda de un enfriamiento lento, se separar el producto
cristalino.
Entre los pares de disolventes ms comunes se encuentran:
Metanol- Agua
ter etlico-Metanol
Etanol - Agua
ter etlico-Acetona
Acetona-Agua
ter etlico- ter de petrleo
3. Disolucin de la sustancia en caliente.
La recristalizacin se basa en el principio de que la mayora de los slidos son ms
solubles en un disolvente en caliente que en fro. De igual manera la solubilidad de un
slido en un disolvente, est en funcin de su estructura qumica y de la temperatura.
Cuando un compuesto slido se recristaliza en un disolvente apropiado, se forma una
solucin saturada a temperatura elevada, de la cual al enfriarse se separa en forma
cristalina.
Una solucin saturada se obtiene de la forma siguiente:
El soluto finamente pulverizado, se disuelve en una mnima cantidad de disolvente en
ebullicin, calentando en un bao de vapor; a esta solucin hirviente se le agrega ms
disolvente en pequeas porciones con agitacin. Cuando el slido se disuelve
totalmente, no debe agregarse ms disolvente.

13

EDICIN 2015

En la Tabla 2 se aprecia el cambio de solubilidad en funcin de la temperatura.

SOLUTO

DISOLVENTE

cido succnico

Agua

Colesterol

Etanol

TEMPERATURA
(C)

SOLUBILIDAD
(g/100 ml )

20
100
17
78

7
121
11
130

Tabla 2.
En la Figura 1 se relaciona la solubilidad de una sustancia en funcin de la
temperatura.

C) Mal Disolvente

A) Buen Disolvente

Solubilidad

B) Mal Disolvente

Temperatura

FIGURA 1.
Se aprecia que en una recta con baja pendiente (B) no es apropiada la relacin
solubilidad temperatura, por lo cual el disolvente no es adecuado para efectuar una
recristalizacin. En la lnea (C) se observa que se trata de un disolvente en el cual la
sustancia es demasiado soluble a cualquier temperatura y no es apropiado para
efectuar esta tcnica, mientras que un disolvente que exhibe un comportamiento como
el indicado en (A) es ideal para efectuar una recristalizacin, ya que el slido es muy
soluble a elevadas temperaturas y poco soluble a temperatura ambiente.
3.- Filtracin de la solucin en caliente.
En esta etapa, se pretenden eliminar las impurezas insolubles; esta filtracin deber
hacerse rpidamente empleando un embudo de tallo corto, pasando a travs del papel
filtro, una pequea cantidad de disolvente caliente para evitar que cristalice el
compuesto en el embudo. Para lograr una mayor rapidez en el filtrado, ste deber
llevarse cabo doblando el papel filtro en la forma que se indica en la Figura 2.
14

EDICIN 2015

Figura 2.
Precipitacin o cristalizacin.
En esta etapa se busca obtener un sistema cristalino ordenado y de mayor pureza. Por
lo que las condiciones durante la formacin de los nuevos cristales son fundamentales
ya que generarn un cristal (slido puro con un ordenamiento geomtrico importante), o
bien un amorfo (slido desordenado). Es importante resaltar que con base en stas
caractersticas se pueden variar sus propiedades fsicas, como la solubilidad,
resistencia, volumen, etc.
El proceso se inicia con la nucleacin, que es bsicamente la precipitacin del primer
microcristal sobre el cual posteriormente se apilaran las dems molculas afines
permitiendo el crecimiento del cristal
Al enfriar la solucin caliente, se pretende que se obtenga una mxima cristalizacin
con un mnimo de impurezas. Es preferible realizar este enfriamiento en un matraz
Erlenmeyer para evitar una gran evaporacin.
Es conveniente que los cristales obtenidos sean de tamao medio, ya que cristales muy
grandes o muy pequeos, pueden incluir o absorber cantidades apreciables de
impurezas.
El tamao de los cristales se controla mediante la velocidad de cristalizacin; as una
cristalizacin rpida, favorece la formacin de cristales pequeos y una cristalizacin
muy lenta origina cristales grandes. Se puede inducir la cristalizacin de las siguientes
formas:
a) Formando pequeos fragmentos de vidrio que actan como ncleos de
cristalizacin, raspado las paredes del matraz donde se encuentre la solucin a
cristalizar. Una variante de esto es el frotamiento de las paredes de vidrio del
recipiente donde se encuentra la solucin con un agitador de vidrio.
b) Aadiendo un pequeo cristal del producto, para sembrar la solucin y provocar
la cristalizacin.
15

EDICIN 2015

c) La solucin se introduce en una mezcla frigorfica. En la Tabla 3 se indican

algunas de las ms empleadas.
MEZCLA
Hielo - agua (v/v)
CaCl2 (250 g x 100 H2O)
NH4Cl (25 g x 100g hielo)
NaCl (33 g x 100 g hielo)
CO2 Slido/CCl4
CO2/Acetona

TEMPERATURA OBTENIDA (C)

0
-8
-15
-20
-50
-70

5. Separacin de los cristales.

En esta etapa se pretende separar los cristales formados eliminando al mximo el
disolvente; esta separacin se puede llevar a cabo por filtracin al vaco empleando un
embudo Bchner unido a un matraz Kitazato (filtracin al vaco), o bien empleando un
embudo de vidrio de tallo corto (filtracin por gravedad). Los cristales as separados,
deben
lavarse
con
una
pequea
cantidad
de
disolvente

Figura 3.

16

EDICIN 2015

PARTE EXPERIMENTAL.
Esta prctica se divide en dos partes, en la primera se realizarn las pruebas de
solubilidad para elegir el disolvente adecuado para recristalizar cuatro diferentes
compuestos y en la segunda se sintetizar acetanilida y se purificar por
recristalizacin.
Propiedades de los reactivos.
PM
Solubilidad
Soluble en ter
135.17
Acetanilida
etlico. 0.56 g/ml en
g/mol
agua a 25C.
Soluble en etanol,
138.12
ter y acetona.
cido Saliclico
g/mol
Insoluble en agua
fra.
Soluble en acetona
y cloroformo.
Dibenzalacetona 234 g/mol
Insoluble en ter y
etanol.
Anilina

93.13
g/mol

Anhdrido
actico

102.09
g/mol

Insoluble en agua

Azul de Metileno ----

Reacciona con el
agua, Hidrlisis
violenta
Soluble en agua

Carbn Activado ----

Insoluble en agua

Material por equipo.

1 Soporte universal
1 Anillo de fierro
1 Rejilla de asbesto
1 Pinza de tres dedos con nuez
1 Embudo de vidrio
1 Refrigerante de agua 14/23
1 Gradilla para tubos de ensayo
1 Esptula

1
1
15
1
1
3
1

17

Densidad
1.2 g/ml

Toxicidad
Irritante por
inhalacin. Txica por
ingestin.

1.4 g/ml

Irritante a los ojos por

dispersin de polvos.

----

Txica por ingestin.

1.02 g/ml

1.08 g/ml
---0.3-0.7
g/ml

Toxica por contacto e

inhalacin.
Cancergena
Nocivo por inhalacin
y por ingestin.
Provoca quemaduras
Nocivo por ingestin
Irritante por
dispersin de polvos.

Bao Mara
Mechero Bunsen
Tubos de ensayo
Agitador de vidrio
Probeta graduada 100 mL
Vaso de precipitados 100 mL
Matraz baln 14/23 de 250 mL

EDICIN 2015

Material y equipo por seccin.

1 Aparato para determinar punto de
fusin

10 Pipetas graduadas de 10 mL

EXPERIENCIA A): Pruebas de solubilidad.

Reactivos y soluciones.
Acetanilida
cido saliclico
Dibenzalacetona
Acetato de etilo
Reactivos y soluciones.
Acetona
ter etlico
Etanol
Agua

Cantidad
0.1 g
0.1 g
0.1 g
10 gotas
Cantidad
10 gotas
10 gotas
10 gotas
10 gotas

Calidad
Q.P.
Q.P.
Q.P.
Q.P.
Calidad
Q.P.
Q.P.
Q.P.
Potable

Nota. Si no es posible medir apropiadamente los 0.1 g de los compuestos slidos, se

puede realizar el experimento de manera cualitativa agregando una mnima cantidad de
dichos compuestos a cada tubo, procurando que la cantidad de slido adicionada a
cada tubo sea similar.
Procedimiento para la experiencia A:
Colocar en 5 tubos de ensayo, 0.1 g de acetanilida (compuesto A). Etiquetar cada tubo
como A1, A2, A3, A4 y A5, agregar 10 gotas de los siguientes disolventes, con agitacin
y de la forma siguiente: Tubo A1, agua; tubo A2, acetona; tubo A3, etanol; tubo A4,
acetato de etilo; tubo A5, ter etlico.
Observar en qu tubos se obtiene solubilidad parcial o total. A los tubos en los que la
disolucin no sea total, calentar en un bao de agua hirviendo, previamente preparado,
y agregar, si es necesario, ms disolvente para determinar si el compuesto A es
insoluble en alguno de estos disolventes (cuidar que no existan mecheros prendidos).
Si la acetanilida se disolvi en caliente en algn disolvente, coloque ste en un vaso de
precipitados con hielo y observe si el compuesto cristaliza una vez enfriado el
disolvente.
Con base en sus resultados, concluya cul es el disolvente adecuado para la
recristalizacin del compuesto A.
Proceder de la misma forma con el cido saliclico (compuestos B) y dibenzalacetona
(compuesto C).

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Complete la siguiente tabla con los resultados obtenidos en las pruebas de solubilidad.
Utilice las siguientes claves: IF = Insoluble en fro, SF = Soluble en fro, SC = Soluble en
caliente y P = Precipita al enfriar la solucin.
agua

acetona

acetato de
etilo

etanol

ter etlico

Acetanilida
c. Saliclico
dibenzalacetona
EXPERIENCIA
B): Purificacin de un compuesto orgnico slido obtenido por sntesis.
SNTESIS DE ACETANILIDA.
La sntesis de acetanilida es la reaccin que servir de ejemplo para la obtencin y
posterior purificacin de un producto de sntesis, la cual consiste en la acetilacin de
anilina con anhdrido actico. Esta es una reaccin de adicin nucleoflica, en la que el
grupo bsico (-NH2), efecta un ataque nucleoflico sobre el tomo de carbono
carbonlico del anhdrido, que es un centro electroflico. De manera general, la reaccin
transcurre muy rpidamente con cloruros de cido, ms lentamente con anhdridos de
cido y muy lentamente con los cidos carboxlicos, que en este ltimo caso, para que
se produzca la reaccin se requiere una temperatura elevada. Por ejemplo, la
fabricacin industrial de la acetanilida se realiza calentando una mezcla de anilina y
cido actico durante unas seis u ocho horas; en tanto que mediante el uso de
anhdrido actico, reacciona con las aminas a una velocidad tal, que es adecuada para
su realizacin en el laboratorio.
Reaccin.
H

NH2
O

H+

N
+

+
O

OH

Procedimiento para la experiencia B:

En un matraz baln de fondo plano colocar 2.5 mL de anilina, 0.5 ml de cido actico
glacial y despus de una ligera agitacin adicionar 4 ml de anhdrido actico (al agregar
el anhdrido actico puede observarse desprendimiento de calor). El anhdrido actico
es un irritante fuerte, por lo que esta operacin debe llevarse a cabo en la campana.
Adaptar al matraz un refrigerante de agua en posicin de reflujo y calentar la solucin a
ebullicin durante 10 min (Opcional: Llevar a cabo el calentamiento en bao de aceite).
Enfriar un poco el matraz y verter el contenido en un vaso que contenga 15 mL de agua
y aproximadamente 15 g de hielo. Agitar bien la mezcla, filtrar la acetanilida y lavar los
19

EDICIN 2015

cristales con pequeas porciones de agua fra. Tomar una pequea muestra para
determinar punto de fusin de la acetanilida sin recristalizar.
Purificacin de la acetanilida por recristalizacin.
En este punto se har adicionalmente una demostracin del uso del carbn activado
para eliminar impurezas coloridas. En un vaso de precipitados colocar toda la
acetanilida sintetizada en el experimento anterior. Agregar una gota de azul de metileno
como contaminante colorido y disolver en la mnima cantidad de agua calentando a
ebullicin. Es importante recordar que se debe preparar una solucin saturada, por lo
que todo el slido se debe disolver en la mnima cantidad de agua a ebullicin. Cuando
se haya disuelto totalmente la acetanilida, retirar brevemente el mechero y adicionar
una pequea cantidad de carbn activado; reanudar el calentamiento hasta ebullicin y
filtrar en caliente. Posteriormente dejar enfriar el filtrado hasta 40C aproximadamente
(temperatura a la cual se puede tomar el vaso de precipitados con las manos), y
sumergir en bao de hielo hasta la precipitacin total de la acetanilida. Pesar el papel
filtro en donde se recuperar la acetanilida para facilitar su cuantificacin. Separar por
filtracin y secar. Determinar el rendimiento del producto obtenido y el punto de fusin
de la acetanilida recristalizada. Es importante recordar que este producto deber ser
entregado en un frasco debidamente rotulado al profesor, ya que ser empleado como
materia prima en prcticas subsecuentes.
Punto de fusin de:
Acetanilida cruda _________

Acetanilida recristalizada: _________

Clculo de rendimiento de producto obtenido:

Rendimiento Terico: _________

Rendimiento Experimental: _______
Tratamiento de residuos.
Las aguas madres resultantes de la recristalizacin pueden ser vertidas en la tarja con
agua corriente, puesto que el exceso de anhdrido se hidroliza a cido actico y este se
encuentra diluido en agua.

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EDICIN 2015

DIAGRAMA DE FLUJO

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EDICIN 2015

CUESTIONARIO EXPERIMENTAL
1. Hacer un esquema general de la tcnica de recristalizacin.

2. En qu casos y con qu finalidad se lleva a cabo una recristalizacin?

3. Explicar para qu sirve el carbn activado

4. Por qu es importante reducir al mnimo la evaporacin durante la filtracin de una solucin

caliente?

5. En la purificacin de un slido por recristalizacin en un disolvente, explicar si es aconsejable

enfriar la solucin rpida o lentamente.

6. Si los puntos de fusin determinados a los compuestos purificados, no coinciden con los
reportados. Indica qu interpretacin se dara a este hecho y proponga qu procedimiento
seguira con base en su interpretacin.

7. Por qu aumenta la solubilidad de un compuesto en un disolvente al aumentar la

temperatura?

22

EDICIN 2015

8. Qu condiciona que una sustancia (soluto) se solubiliza en otra (disolvente).

9. En una recristalizacin qu ventajas tendr el agua sobre el ter y el benceno.

10. Qu ventajas tendr el tetracloruro de carbono sobre el ter y el benceno en una

recristalizacin?

11. Por qu en condiciones de saturacin ya no es posible disolver ms cantidad de soluto?

12. Para qu se calienta a reflujo durante 10 minutos la mezcla de anilina, anhdrido actico y
agua?

13. En la sntesis de acetanilida, explicar con qu fin se enfra la mezcla de reaccin.

23

EDICIN 2015

Observaciones

Resultados

Anlisis de Resultados

Conclusiones

24

EDICIN 2015

PRCTICA 3
EXTRACCIN LQUIDO-LQUIDO
Objetivos:
General:
Conocer la tcnica como mtodo de separacin y purificacin de
sustancias integrantes de una mezcla
Particulares:
Aplicar la tcnica en la purificacin de compuestos orgnicos, tanto
neutros como ionizables.
Elegir los disolventes adecuados para un proceso de extraccin.
Realizar diferentes tipos de extraccin: mltiple y selectiva.
Introduccin.
Extraccin con disolventes orgnicos.
La extraccin es una tcnica de transferencia de un soluto de un disolvente a otro. El
soluto se extrae por un proceso de distribucin.
Cuando una disolucin (soluto A en un disolvente 1) se agita con un segundo disolvente
(Disolvente 2) con el cual es inmiscible, el soluto se distribuye entre las dos fases hasta
lograr una situacin de equilibrio.

Donde [A]o es la concentracin del analito en la fase orgnica y [A] aq es la

concentracin del analito en la fase acuosa.
Al separarse las dos capas de los disolventes inmiscibles se determina la concentracin
del soluto en cada capa, la relacin de las concentraciones en cada fase es una
constante. Esta constante, es llamada coeficiente de distribucin (o particin), K, la cual
es definida por:

Donde C1 y C2 son las concentraciones en equilibrio, en g/L, del soluto en el disolvente

1 y en el disolvente 2 a una temperatura determinada.
Esta relacin es independiente de la concentracin total y de los volmenes de los
disolventes. El coeficiente de distribucin tiene un valor constante para cada soluto y es
dependiente de la naturaleza del disolvente utilizado en cada caso.
Con base en el coeficiente de distribucin, no todo el soluto se transfiere al disolvente 2
en una sola extraccin a menos que el valor de K sea muy alto. Generalmente se
requieren varias extracciones para eliminar el soluto del disolvente 1. Los disolventes
orgnicos utilizados en extraccin deben tener baja solubilidad en agua, alta capacidad
de solvatacin hacia la sustancia que se va a extraer y bajo punto de ebullicin para
facilitar su eliminacin posterior. La extraccin tiene amplia aplicacin en Qumica
Orgnica. Se utiliza para extraer productos y eliminar impurezas de las mezclas de
25

EDICIN 2015

reaccin, se emplea tambin para extraer productos de tejidos animales o de plantas.

Para extraer un soluto de una disolucin es ms efectivo realizar varias extracciones
empleando volmenes pequeos (extraccin mltiple), que realizar una sola extraccin
(extraccin simple) mediante el empleo de un volumen grande de disolvente.
Matemticamente esto se comprueba con la siguiente expresin:
V1

Wn W0

KV2 V1

Donde:
Wn = g de soluto remanentes en la fase acuosa despus de n extracciones.
Wo = g de soluto en fase acuosa.
K = coeficiente de particin
V1 = volumen total de la solucin de la solucin a extraer
V2 = volumen del disolvente de c/u extraccin
n = No. De extracciones
Extraccin selectiva
La extraccin selectiva se emplea para separar mezclas de compuestos orgnicos, en
funcin de la acidez, de la basicidad o de la neutralidad de stos. Para realizar estas
separaciones, es necesario utilizar sustancias activas, stas pueden ser cidos o
bsicos. Las sustancias activas cidas que ms se utilizan son el HCl y el H2SO4 en
disolucin acuosa del 5 al 10 %.
Las sustancias activas bsicas pueden ser fuertes como NaOH, KOH o moderados
como NaHCO3 y Na2CO3 en disolucin acuosa al 5 10 %.
La extraccin selectiva se basa en una reaccin cido-base entre el producto a separar
y el disolvente activo adecuado. Los compuestos inicos son ms solubles en agua que
los compuestos covalentes y stos son ms solubles en disolventes orgnicos que
aqullos.
Los compuestos bsicos como aminas, se extraen con disolventes activos cidos (HCl
al 5 10%); la reaccin que ocurre es la siguiente:
RNH2 + HCl

RNH3+ - Cl

Unin covalente
Menos polar
Soluble en disolventes orgnicos

Unin inica
Ms polar
Soluble en agua

Los cidos carboxlicos reaccionan con bases como NaOH, Na2CO3 o NaHCO3 al 5
10%.
Las reacciones cido-base que se efectan son las siguientes:
RCOOH + NaOH

RCOO-+Na + H2O

Unin covalente
Menos polar
Soluble en disolventes orgnicos

Unin inica
Ms polar
Soluble en agua

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EDICIN 2015

Los fenoles son compuestos menos cidos que los cidos carboxlicos. Por esta
caracterstica, reaccionan nicamente con bases fuertes como NaOH a las mismas
concentraciones ya mencionadas, lo anterior constituye la base para separar cidos de
fenoles.
ArOH + NaOH
ArO-+Na + H2O
Fenol

Fenxido de sodio sal soluble en agua

La extraccin selectiva tambin se utiliza para eliminar impurezas cidas o bsicas a un

producto aislado de una mezcla de reaccin. Los compuestos que no tienen
caractersticas cidas o bsicas los consideramos neutros. Los compuestos extrados
pueden recuperarse por neutralizacin de la sustancia activa para extraer.
Si un compuesto est disuelto en fase acuosa bsica ste puede recuperarse
acidificando la disolucin. Por el contrario, si el compuesto est disuelto en fase acuosa
cida, puede recuperarse al agregar una base y modificar el pH hasta lo bsico. Los
compuestos neutros disueltos en un disolvente orgnico, se recuperan al eliminar el
disolvente por destilacin.
El embudo de separacin
El embudo de separacin es la pieza que se utiliza en la extraccin. El tapn y la llave,
que deben estar bien ajustados, se lubrican con una grasa adecuada antes de usarlos.
El embudo debe agitarse moderadamente y purgarlo (aliviar la presin) con frecuencia,
para evitar la presin en su interior. La forma correcta de agitar el embudo se muestra
en la Figura 1.

Figura 1.
Mtodo sugerido para la realizacin de la extraccin lquido-lquido.
Despus de agitar el embudo se deja reposar para la formacin de una interfase que da
la pauta para la separacin de las fases, Figura 2. En la identificacin de fases es
importante conocer las densidades de los disolventes orgnicos para ubicar su posicin
en el embudo con respecto a la fase acuosa. El nmero de extracciones en cada caso
depende del coeficiente de distribucin del disolvente.

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EDICIN 2015

Figura 2.
Separacin de fases.
Emulsiones
Con frecuencia se forman emulsiones durante el proceso de extraccin. stas pueden
romperse mediante:
Un movimiento de giro suave al lquido del embudo.
Agitacin vigorosa de la capa emulsionada.
Agitar la fase acuosa con una disolucin saturada de cloruro de sodio.
Centrifugacin.
Agentes desecantes qumicos.
Un desecante debe reunir ciertas condiciones:
No reaccionar con la sustancia que se va a secar.
Ser eficaz, o sea, tener alto poder desecante; esto es, eliminar el agua
completamente o casi completamente cuando se alcanza el equilibrio.
Tener gran capacidad de desecacin, es decir, eliminar una gran cantidad de
agua por unidad de peso de desecante.
Secar rpidamente (alcanzar rpido el equilibrio).
Separarse fcilmente de la sustancia una vez seca.
Los desecantes qumicos pueden dividirse en dos grupos:
a) Aquellos que reaccionan qumicamente con el agua en un proceso no reversible,
lo cual da lugar a un nuevo compuesto libre de agua.
b) Los que se combinan reversiblemente con el agua para formar un hidrato.
Parte Experimental
Propiedades Fsicas de los Reactivos
Peso Molecular
Punto de fusin
Punto de ebullicin
pKa
Solubilidad

Sacarosa
342.3 g/mol
160-186 C
------------------------------------------------s. en agua y etanol
l. s. en ter

cido
122.1
122.4
249.0

Benzico
g/mol
C
C

4.20
s. en etanol, ter y benceno
l. s. en agua, tetracloruro de carbono

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EDICIN 2015

Reactivos

Material

Sacarosa R.A.
cido benzoico R.A.
ter etlico R.A.

1.0 g
1.0 g
30 mL

1
1
1

Vaso de precipitados de 50 mL
Vaso de precipitados de 100 mL
Embudo de separacin con tapn esmerilado.

HCl al 10%

10 mL

Probeta de 50 mL

NaOH al 10%

10 mL

Pipeta graduada de 10 mL

Etanol

10 mL

1 Matraz baln de 250 mL 14/23

Hexano

10 mL

Refrigerante recto

Benceno

10 mL

Metanol

10 mL

Mangueras de ltex

Cloruro de metileno

10 mL

Mechero de Bunsen

Disoln. de NaCl saturada

Tapn adaptador

Sulfato de sodio anhidro

Bao Mara

Soporte universal y pinzas de tres dedos con nuez

Anillo y rejilla de asbesto

Papel indicador de pH 0-14

Desarrollo Experimental
EXPERIENCIA A: Extraccin
1. En un vaso de precipitados colocar 0.5 g de sacarosa y 0.5 g de cido benzoico.
y solubilizarlos con 35 mL de agua.
2. Verter la disolucin en un embudo de separacin y agregar 10 mL de ter etlico.
3. Mezclar cuidadosamente, de acuerdo al procedimiento descrito en la figura,
dejando aliviar la presin interna del embudo de separacin.
4. Dejar reposar el embudo con la disolucin y observar cmo se separan las dos
capas. Drenar la fase acuosa en un matraz Erlenmeyer y la fase etrea en un
vaso de precipitados. Cubra el vaso con un trozo de papel aluminio.
5. Secar la fase orgnica con sulfato de sodio anhidro.
6. Decantar y evaporar el ter en un bao de agua caliente sin llegar a sequedad.
(PRECAUCIN: Los vapores de ter son inflmables, es recomendable recuperar
el ter mediante una destilacin simple). Pesar el residuo slido y comparar con
la mezcla original.
7. Calcule el rendimiento.
EXPERIENCIA B: Variacin del pH
1.
En un vaso de precipitados disolver una mezcla de 0.5 g de sacarosa y 0.5 g de
cido benzoico y solubilizarlos con 25 mL de solucin de NaOH al 10% a pH = 12.
2.
Verter la disolucin en un embudo de separacin y agregar 10 mL de ter etlico.
3.
Mezclar cuidadosamente, dejando aliviar la presin interna del embudo.
4.
Dejar reposar el embudo con la disolucin y observar cmo se separan las dos
capas.
5.
Drenar la fase acuosa en un matraz erlenmeyer y la fase etrea en un vaso de
precipitados, posteriormente evaporar la fase etrea.
6.
Observar y concluir.
7.
Escribir la reaccin entre el cido benzoico y el NaOH.
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EDICIN 2015

EXPERIENCIA C:
Extraccin de Licopenos.
1.
En un matraz baln 14/23 de 250mL colocar 20 g de jitomate previamente
macerado en un mortero y agregar 10 mL de etanol al 95%.
2.
Adaptar un refrigerante 14/23 en posicin de reflujo y calentar en un bao de agua
a ebullicin durante 5 minutos.
3.
Filtrar la mezcla en caliente y presionar el slido suavemente, recogiendo el
filtrado amarillo en un matraz erlenmeyer.
4.
Transferir el residuo slido de la filtracin al matraz baln 14/23 de 250 mL y
agregarle 10 mL de cloruro de metileno.
5.
Calentar la mezcla a reflujo en bao mara durante 3-4 min. (CH2Cl2 p.eb. 41 C,
es un lquido altamente txico; EVITAR INHALAR LOS VAPORES).
6.
Filtar el extracto y adicionar al residuo slido en el papel 2 3 porciones de 10 mL
de CH2Cl2.
7.
Reunir los extractos de CH2Cl2 con el primer extracto etanlico.
8.
Pasar la solucin a un embudo de separacin, agitar y agregar 20 mL de una
disolucin saturada de NaCl.
9.
Separar la capa inferior colorida en un vaso de precipitados y secar la con Na2SO4
anhidro.
10. El licopeno obtenido es inestable a la luz y al aire, guardar el extracto para la
prctica de cromatografa en un frasco mbar con tapa.
EXPERIENCIA D: Extraccin de Carotenos.
Los carotenos son tetraterpenos. Estn presentes en la mayora de las plantas
verdes. Los carotenos sirven como precursores de la vitamina A, ya que pueden ser
convertidores a sta por enzimas del hgado.
1.
Hacer un extracto de hojas de espinacas, macerndolas con 30 mL de una mezcla
benceno-hexano-metanol en partes iguales.
2.
Verter la mezcla en un embudo de separacin y lavar 2 veces la capa orgnica,
utilizando porciones de 30 mL de agua.
3.
Separar la capa orgnica y secarla con sulfato de sodio anhidro.
4.
Decantar y destilar hasta obtener un residuo de 5 mL.
5.
Guardar el extracto para la siguiente prctica en un frasco mbar tapado.

30

EDICIN 2015

DIAGRAMA DE FLUJO

31

EDICIN 2015

CUESTIONARIO EXPERIMENTAL
1. Escriba las ecuaciones involucradas en el proceso de extraccin selectiva.

2. En un proceso de extraccin, investigue que es ms eficiente, hacer cuatro

extracciones con 50 mL de ter dos extracciones con 100 mL del mismo.

3. Investigue como se determina el coeficiente de particin K de manera prctica.

4. Cuales seran los factores que pudieran intervenir en la eficiencia de la extraccin

que usted realiz en el laboratorio.

5. Investigue la estructura de los carotenos y de los licopenos extraidos en la prctica,

as como su coeficiente de extincin molar.

32

EDICIN 2015

Observaciones

Resultados

Anlisis de Resultados

Conclusiones

33

EDICIN 2015

PRCTICA 4
CROMATOGRAFA
OBJETIVOS
1. Conocer la tcnica de cromatografa y los factores experimentales que la afectan.
2. Aplicar y comparar los mtodos cromatogrficos de capa fina y columna, para
separar, identificar y purificar compuestos orgnicos.
3. Observar el efecto de diferentes fases mviles y estacionarias en la separacin.
4. Determinar los valores de Rf, como un parmetro en la identificacin de los
compuestos separados.
ANTECEDENTES
Segn la definicin dada por Keulemans, la cromatografa es un mtodo en el que los
componentes a separar se distribuyen entre dos fases, una de las cuales constituye un
lecho estacionario de amplio desarrollo superficial y la otra es un fluido que pasa a
travs o a lo largo del lecho estacionario.
INTRODUCCIN
La cromatografa consiste en una serie de mtodos que sirven para la separacin de
una mezcla de solutos. Se basa en la diferente velocidad con que se mueve cada uno
de los solutos a travs de un medio poroso, arrastrados por un disolvente en
movimiento.
El fundamento de la cromatografa consiste en el reparto o distribucin diferencial de
dos o ms compuestos (llamados solutos) entre dos fases, una de las cuales
permanece fija, por lo que se le denomina fase fija o estacionaria y otra que fluye a
travs de ella, por lo que se le denomina fase mvil o eluyente. Como la fase
estacionaria debe permanecer fija, su estado fsico se limita a slidos y lquidos, en
tanto que la fase mvil requiere ser un lquido o un gas para poder fluir. Tomando en
consideracin el estado fsico de las fases, la cromatografa se clasifica en dos grandes
categoras y dos subcategoras cada una:
1) CROMATOGRAFA DE GASES.
En sta, la fase mvil es un gas y la estacionaria puede ser un lquido o un
slido, por lo que existen dos variantes:
a) Cromatografa slido-gas (CSG)
b) Cromatografa lquido-gas (CLG)

34

EDICIN 2015

2) CROMATOGRAFA DE LQUIDOS.
En sta, la fase mvil es un lquido y la estacionaria puede ser un slido o un
lquido, por lo que existen dos variantes:
a) Cromatografa slido-lquido (CSL)
b) Cromatografa lquido-lquido (CLL)
Cuando la fase estacionaria es slida, la cromatografa puede ser en columna y en
placa (tambin llamada cromatografa de capa fina).
Las separaciones por cromatografa de reparto, son particularmente interesantes para
los compuestos solubles en agua. Asimismo, de acuerdo con el mecanismo
predominante en el reparto diferencial de solutos, las tcnicas cromatogrficas se
clasifican de la siguiente forma:
a) Adsorcin

Fenmeno de adhesin superficial cuyo mecanismo consiste

en interacciones bipolares.

b) Particin

Fenmeno de reparto entre las dos fases debido a su

solubilidad. La solubilidad es una medida de la polaridad y
de otro tipo de interacciones moleculares.

c) Intercambio inico

Fenmeno superficial debido a interacciones entre iones de

diferente carga.

d) Ultra filtracin

Como su nombre lo indica, se debe a un fenmeno de

tamizado molecular.

Debido a su distribucin diferencial entre las fases mvil y estacionaria, dos solutos
aplicados en un extremo del sistema cromatogrfico recorrern el mismo camino a
diferentes velocidades, arrastrados por la fase mvil, con su consecuente elucin en
diferentes tiempos o volmenes, lo cual permite diferenciar a cada analito por sus
propiedades cromatogrficas
Los sistemas cromatogrficos pueden ser:
a)

Cromatografa en columna.

El sistema cromatogrfico en columna ms sencillo consta de un reservorio para

el eluyente (fase mvil); una columna que debe empacarse homogneamente, la fase
estacionaria en cuyo extremo superior se aplica la muestra por separar (solutos); un
sistema de control de flujo (llave de paso o pinzas) y los recipientes para recibir los
volmenes eluidos, como se observa en la siguiente figura.
35

EDICIN 2015

1. Adicin de eluyente
2. Mezcla de A y B

3. Posicin de A despus de una elucin parcial

4. Posicin de B despus de una elucin parcial

5. Eluato

b) Cromatografa en placa fina.

Este sistema consta de un recipiente o cmara del tamao adecuado para contener una
placa de vidrio o aluminio adsorbida con slica gel. En la cmara se coloca una muestra
del o los disolventes que servirn de fase mvil.
En la placa cromatogrfica, que puede ser de tamao variable, se coloca una muestra
de la mezcla de solutos, aproximadamente a 0.5 cm del extremo inferior de la placa.
Una vez que el eluyente (fase mvil) ha ascendido, por capilaridad hasta 0.5 cm antes
del extremo superior de la placa, se saca de la cmara, se le evapora el disolvente y se
revela con luz ultravioleta (UV) si se han usado placas de slica gel adsorbidas con
fluorescena, en ste caso, el revelador ser una lmpara de luz ultravioleta que opera
a una longitud de onda de 254 nm. Tambin se puede revelar la placa cromatogrfica
en una cmara de yodo o por aspersin de un reactivo revelador como KMnO4 o H2SO4
y calor:

36

EDICIN 2015

Esquema grfico que muestra la preparacin de capilares para la aplicacin de

las muestras en la placa cromatogrfica.

Representacin esquemtica sobre la aplicacin, elucin y determinacin de los

Rf de los componentes de una muestra.

Parmetros cromatogrficos.
a) En el caso de la cromatografa en columna automatizada (HPLC), stos son:
i.

Tiempo muerto (to). Tiempo que tarda un soluto idealmente no retenido, en

salir del sistema cromatogrfico.

ii. Tiempo de retencin (tr). Tiempo que tarda el 50 % de un soluto en eluir y

corresponde a la posicin de mxima concentracin en un cromatograma.
iii. Velocidad de flujo del disolvente (F).
iv. Volumen de retencin (Vr): Volumen en el que eluye el 50 % de un soluto.
Se calcula con la ecuacin:
Vr = t r F

37

EDICIN 2015

Para procesos sistematizados (como son la Cromatografa de gases y la Cromatografa

de Lquidos a Alta Presin) encontramos que adems de los incisos i a iv, dos
parmetros de gran importancia son:
v. Factor de selectividad (): Medida relativa del grado de separacin de dos
solutos. Se calcula mediante la ecuacin:

t r (b ) t o
t r (a) to

vi. Resolucin (Rs): Medida absoluta de separacin. Se calcula mediante la

ecuacin:

Rs

2(t r ( a ) t r (b ) )
(Wa Wb ) 2

vii. Donde W a y W b corresponden a los tiempos del ancho de un pico en su base.

b) En el caso de la cromatografa en capa fina, los parmetros ms usuales son:
i.

Frente del disolvente (fd).

ii.

Centro del soluto (fs).

iii.

Relacin de frentes (Rf): Cociente de la divisin fs/fd. Se utiliza con fines de

identificacin de compuestos cuando se tienen patrones de referencia.

iv. Diferencia de Rfs. Medida cuantitativa del grado de separacin.

REACTIVOS
Slica-gel para columna

4g

Hexano: Acetato de Etilo 1:1

Acetato de Etilo: metanol 1:1
Acetato de Etilo: metanol 7:3
Acetato de Etilo: metanol 1:1
Mezcla de colorantes anaranjado de metilo-azul de metileno 1:1
MATERIAL

30 mL
30 mL
10 mL
10 mL
10 mL

1
1
1
2

Soporte universal
Columna para cromatografa
Pinzas para bureta
Pipeta graduada de 5 Ml

1
1

Pinzas universales
Vaso de precipitados de 100 mL

1
10
1
1
1
1
1
1

Matrz Erlenmeyer de 200 mL

Tubos de ensayo
Cmara cromatografca
Capilares sin heparina
Cromato placa de slica gel F254 de 5x2 cm
Agitador de vidrio
Probeta graduada de 100 mL
Gradilla para tubos de ensaye

38

EDICIN 2015

PARTE EXPERIMENTAL
EXPERIENCIA 1. SEPARACIN DE CAROTENOS
HACER EL SIGUIENTE PROCEDIMIENTO CON LA AYUDA DEL PROFESOR DE LA
SECCIN:
Colocar la columna para cromatografa con una pinza universal o con una pinza para
bureta e introducirle por medio de un agitador, un trozo de algodn hasta la base de la
misma.
Empacar la columna con slica-gel adicionando por la parte superior una suspensin de
4 g de slica-gel en una mezcla de Hexano: Acetato de etilo (1:1) manteniendo un goteo
uniforme en la llave de salida del disolvente durante todo el procedimiento.
Introducir un crculo de papel filtro de dimetro ligeramente inferior al del interior de la
columna y asentarlo en la superficie de la slice y llenar en su totalidad la columna
cromatogrfica con el disolvente.
Dejar gotear el disolvente y esperar hasta que el disolvente quede ligeramente arriba de
la fase estacionaria, depositar sobre el papel filtro 10 gotas del concentrado de
espinacas con ayuda de una pipeta graduada, cuidando de no derramarlo por las
paredes de la columna, nunca permitir que el nivel del disolvente baje ms all de
la superficie de la slice, ya que sta se agrietara y no permitira un desarrollo
homogneo).
Mantener el goteo hasta que los pigmentos penetren en la slice y llenar lentamente la
columna con la mezcla de Hexano-Acetato de Etilo (1:1). Volver a abrir la llave para
permitir el desarrollo del cromatograma, manteniendo constante el volumen del
eluyente.
Recoger la primera fraccin colorida en tubos de ensayo numerados y cubiertos con
papel aluminio. Cuando termine de eluir esta primera fraccin, cambiar el eluyente a
Acetato de Etilo: Metanol (1:1) y recoger la siguiente fraccin en tubos de ensayo
numerados y cubiertos con papel aluminio.
EXPERIENCIA 2. SEPARACIN DE LICOPENOS.
Hacer la cromatografa en columna del extracto de jitomate para la separacin de
licopenos, en la misma forma en que se efectu para el extracto de espinaca.
EXPERIENCIA 3. SEPARACIN POR CROMATOGRAFA EN PLACA FINA DE UNA
MEZCLA DE COLORANTES.
En una cromatoplaca de 5 2 cm dibujar con un lpiz de punta suave una lnea a 0.5
cm de distancia del borde inferior; aplicar sobre sta en dos puntos equidistantes, por
39

EDICIN 2015

medio de una micropipeta previamente elaborada con un capilar, una mezcla de

colorantes. Dejar secar y desarrollar el cromatograma en una mezcla Acetato de Etilo:
Etanol (7:3), teniendo cuidado de que ste no rebase los puntos de aplicacin y de que
eluya hasta 0.5 cm antes del borde superior de la placa. Secar, observar y calcular los
valores de Rf. para cada componente.
RESULTADOS Y CONCLUSIONES.
El alumno deber analizar y concluir cada una de las experiencias realizadas.

40

EDICIN 2015

DIAGRAMA DE FLUJO

41

EDICIN 2015

CUESTIONARIO EXPERIMENTAL
1. Qu precauciones se deben tener al empacar una columna de cromatografa.

2. Qu fracciones se separaron por cromatografa en columna, de los extractos de

espinaca, jitomate y cmo se identificaron.

3. Escriba qu conclusiones se obtienen de la cromatografa en capa fina y de la

cromatografa en columna?

4. Definir los siguientes trminos: Adsorcin, particin, eluyente, eluato, disolvente,

fase mvil, fase estacionaria, Rf.

42

EDICIN 2015

5. Especificar en qu parte de la prctica tienen aplicacin los trminos anteriores.

6. Hacer una comparacin entre la cristalizacin, extraccin, destilaciones y

cromatografa, en cuanto a la eficiencia como mtodos de separacin y purificacin.

7. Establecer una distincin clara entre cromatografa en columna y capa fina e indicar
en qu casos es preferible alguno de los dos mtodos.

43

EDICIN 2015

Observaciones

Resultados

Anlisis de Resultados

Conclusiones

44

EDICIN 2015

PRCTICA 5
SNTESIS A MICROESCALA DE
CIDO FUMRICO
OBJETIVOS.
1.- Convertir un ismero cis en un ismero trans.
2.- Diferenciar los ismeros geomtricos del cido 2-butenodioico.
INTRODUCCIN.
El trmino estereoismeros se utiliza para designar los compuestos que poseen igual
frmula molecular e igual conectividad, pero que se distinguen entre s por la relacin
espacial de los tomos o grupos dentro de la molcula.
Esto origina dos tipos de estereoismeros:
a) Los que guardan entre s una relacin objeto-imagen especular.
b) Aquellos en los que esta relacin no existe.
Los primeros se denominan enantimeros y los segundos diasteremeros. Un tipo de
diasteremeros es el de los ismeros geomtricos, que deben su existencia a la
imposibilidad de rotacin a travs de un doble enlace o de un anillo. Al bisectar un doble
enlace con un plano que pase por el ncleo de los dos tomos de ste, dos grupos
diferentes entre si pueden ubicarse de dos maneras con relacin al doble enlace.
1. Ambos del mismo lado del plano.
2. Uno a cada lado del plano.
El primer arreglo da lugar a la isomera cis- (del latn: a este lado) o tambin (Z), en
tanto que el segundo origina la isomera trans- (del latn: al otro lado) o (E).
De acuerdo con esto, existen 2 cidos 2-butenodioicos: el cis-2-butenodioico y el trans2-butenodioico

O
H
H

O
H

OH
OH

HO

O
Ac. cis-2-butenodioico

OH
H

O
Ac. trans-2-butenodioico
45

EDICIN 2010

REACCIN.
Los cidos butenodioicos se pueden interconvertir, siempre y cuando desaparezca el
doble enlace, ya que se requiere de un giro a travs del eje de ste.

O
H

OH

HO

OH

OH
H

O
MECANISMO.

El mecanismo se inicia con una reaccin cido-base entre un carbonilo del cido
maleico y el HCl para dar (B). Esto facilita la deslocalizacin de los electrones que
conduce a la desaparicin del doble enlace entre C2 y C3 originndose un carbocatin
(C) con hibridacin sp3 y el enlace simple, que permite el giro entre estos 2 carbonos
para dar (D). A continuacin, por otra deslocalizacin electrnica, se regenera el doble
enlace (E) y finalmente por una reaccin de desprotonacin, se obtiene el cido
fumrico (F).

O
H

H
OH
+ H
OH

OH

O+

OH
OH

H
O

OH
OH

H
O

Ac. cis-2-butenodioico
cido Maleico

O
H

+
H +
HO

H
O

OH

F
Ac. trans-2-butenodioico
cido Fumrico

OH
OH

HO

H
O

H
HO

OH
H

O
E

46

EDICIN 2010

PROPIEDADES FSICAS

PROPIEDAD
P.M. g/ mol
pf ( C )
Solubilidad en agua a 25C(g/100
ml)
pka1
pka2

1
1
1
1
1
3
1

MATERIAL
Juego de destilacin a microescala
Soporte
Anillo
Mechero parrilla
Matrz Erlenmeyer de 125 mL
Matrz Erlenmeyer de 250 mL
Embudo de vidrio
Vasos de precipitados de 150 mL
Probeta de 100 mL

CIDO
MALEICO
116
131-139 (desc.)
79

CIDO.
FUMRICO
116
286
0.7

1.9
6.5

3.0
4.0

REACTIVOS
Acido Maleico
2.5 g
Acido Clorhdrico
5 mL

PARTE EXPERIMENTAL
Preparar por seccin una solucin al 40% de cido maleico en agua, se puede calentar
para favorecer la solucin. El volumen ser determinado de acuerdo al nmero de
equipos por seccin. El volumen que ocupar cada equipo ser de 1ml.
1.- En el matraz de reaccin vertir 1 mL de la solucin al 40% de cido malico, medido
con pipeta graduada.
2.- Adicionar lentamente 2 mL de cido clorhdrico concentrado por las paredes del
matraz de reaccin (lquido irritante, evitar inhalacin y el contacto con la piel).
3.- Adaptar el refrigerante en posicin de reflujo
4.- Calentar la mezcla durante 30 minutos a reflujo moderado.
5.- Enfriar a temperatura ambiente y separar por filtracin los cristales de cido
fumrico.
6.- Recristalizar de agua y secar.
7.- Identificar el producto por su punto de fusin.

47

EDICIN 2010

DIAGRAMA DE FLUJO

48

EDICIN 2010

CUESTIONARIO EXPERIMENTAL.
1. Escribe tus observaciones del proceso de interconversin de ismeros.

2. Anota las caractersticas del producto crudo y el producto recristalizado incluyendo

el punto de fusin de ste ltimo.

3.En la sntesis de cido fumrico, indicar qu papel desempea el cido clorhdrico.

4. Explicar cmo se pueden justificar:

La diferencia en los puntos de fusin de los ismeros estudiados.
a) La diferencia de solubilidad en agua.

b) La diferencia en la primera y segunda constantes de acidez.

49

EDICIN 2010

c) Explicar a qu se debe que en el reflujo se observe formacin y separacin de

cristales.

5. Por qu, de los ismeros cis y trans de esta prctica es la forma trans la que
predomina.

6. Qu pruebas qumicas se pueden llevar a cabo para evidenciar la presencia del

grupo funcional carboxilo y la insaturacin en el cido fumrico.

50

EDICIN 2010

Observaciones

Resultados

Anlisis de Resultados

Conclusiones

51

EDICIN 2015

PRCTICA 6
SNTESIS DE DIBENZALACETONA
(Condensacin de Claisen-Schmidt)
OBJETIVOS.
Aplicar la condensacin de Claisen-Schmidt para obtener cetona alfa-betainsaturada (di-benzalacetona), por condensacin de un aldehdo aromtico con una
cetona aliftica.
Purificar e identificar la dibenzalacetona por medio de una reaccin qumica y por la
determinacin de su punto de fusin.
INTRODUCCIN.
Las reacciones de condensacin entre aniones enolato y compuestos carbonlicos, se
pueden considerar entre las ms tiles en qumica orgnica. La condensacin implica el
ataque nucleoflico del enolato sobre el centro electroflico del carbonilo. De manera
general, cuando sta reaccin ocurre entre un enolato derivado de un aldehdo cetona
y otra molcula de aldehdo o cetona, se le denomina condensacin aldlica. El
primer producto obtenido en una condensacin aldlica es un aldol (beta-hidroxicetona
beta-hidroxialdehdo), el cual puede deshidratarse bajo condiciones apropiadas para dar
como producto final un aldehdo o cetona alfa-beta-insaturada. En muchas ocasiones es
posible aislar el aldol si as se desea, aunque en otros casos el producto deseado es el
compuesto alfa-beta-insaturado. A continuacin se muestra una reaccin tpica de
condensacin aldlica seguida de deshidratacin.
O
O

O -

O
H

-OH

H
aldol

enolato

OH

O
-H2O

cetona
insaturada

Un problema que se presenta en la condensacin aldlica entre dos molculas

diferentes, es la posibilidad de obtener varios productos de reaccin. Esto se debe a
que generalmente las dos molculas participantes, tienen hidrgenos enolizables y por
lo tanto se pueden formar enolatos de ambas. Tambin se debe tomar en cuenta, que
las dos molculas pueden actuar como electrfilo en un momento dado. El problema se
minimiza, si es posible utilizar como electrfilo, un aldehdo que no contenga hidrgenos
enolizables, como un aldehdo aromtico. Cuando el enolato de una cetona se

52

EDICIN 2015

condensa con un aldehdo aromtico, la reaccin de deshidratacin para dar la cetona

alfa-beta-insaturada, ocurre de manera espontnea. Este tipo particular de
condensacin aldlica, es conocida como Condensacin de Claisen-Schmidt.. La
deshidratacin espontnea ocurre porque el producto final contiene un sistema
insaturado altamente conjugado (carbonilo-doble enlace-anillo aromtico), que
proporciona estabilidad a la molcula.

REACCIN.
En esta prctica se llevar a cabo la sntesis de dibenzalacetona (tambin conocida
como estirilcetona, dibencilidenacetona 1,5-difenil-1,4-pentadien-3-ona), la cual se
obtiene a travs de una doble Condensacin de Claisen-Schmidt, entre benzaldehdo y
acetona, como se muestra en el esquema siguiente:

O
O

B-

H+

-2H2O
Benzaldehido

Dibenzalacetona

Acetona

Las propiedades fsicas de las materias primas y del producto, se resumen en la

siguiente tabla.

P.M.(g/mol)
p.eb.(C)
p.f.(C)
Densidad (g/mL)

Solubilidad

BENZALDEHIDO
106.1
179
-26
1.04

ACETONA
58.1
56
-94.9
0.79

soluble en alcohol y
soluble en agua,
ter
etanol y ter
poco soluble en agua

53

DIBENZALACETONA
234.3
-----110-111
-----soluble en acetona y
cloroformo
poco soluble en alcohol y
ter
insoluble en agua.

EDICIN 2015

MECANISMO.
El esquema general del mecanismo de reaccin, se muestra a continuacin. A primera
vista puede parecer muy largo y complicado, sin embargo la sntesis de la
dibenzalacetona involucra dos reacciones consecutivas de condensacin de ClaisenSchmidt catalizadas por base. El mecanismo se divide en diez etapas, cada una de las
cuales se analizan a continuacin.
El primer paso (1) es la generacin del enolato de la acetona, el cual ataca al carbonilo
del benzaldehdo (2) para generar el alcxido correspondiente, que captura un protn
del disolvente, produciendo un aldol (3). En la etapa (4) muestra la formacin de un
nuevo enolato que conduce a la deshidratacin del aldol (5), para producir la cetona
alfa-beta-insaturada. En la etapa (6) se forma nuevamente un enolato, ahora en el otro
extremo de lo que era la acetona. El enolato ataca a otra molcula de benzaldehdo (7)
para formar un nuevo alcxido, el cual captura otro protn del disolvente para dar un
segundo aldol (8). Las etapas (9) y (10) muestran nuevamente la formacin de otro
enolato, que conduce a la deshidratacin del aldol y consecuentemente a la formacin
del producto final.
O

EtO

CH2

(1)

(3)

EtOH

OH

H
(2)

OH

OH

(4)

(5)

EtO

(6)

EtO
O

(8)

EtOH

H
(7)

OH

OH

(9)
H

EtO
(10)

OH

54

EDICIN 2015

Acetona

REACTIVOS
0.5 mL

MATERIAL
Vasos de precipitados de 100 mL

Benzaldehdo

1.3 mL

Matrz Erlenmeyer de 125 mL

Etanol
Hidrxido de sodio

20 mL
1.25 g

1
2

Embudo de vidrio
Tubos de ensayo

Soln. de NaOH al 10%

12.5 mL

Termmetro

Soln. de Br2 / CCl4

gotas

Mechero Bunsen

Rejilla

Soporte

Anillo metlico

1
1

Tapn de hule
Probeta de 50 Ml

Bao mara

1
1

Varilla de vidrio
Papel filtro

Carbn activado

PARTE EXPERIMENTAL
En un matraz Erlenmeyer de 125 mL disolver 1.25 g de NaOH en 12.5 mL de agua,
controlando que la temperatura de la solucin resultante sea menor de 25C (enfriar con
agua de la llave si es necesario). El paso anterior no se requiere si la solucin al 10%
de hidrxido de sodio ya se tiene preparada. En otro matraz de 125 mL mezclar 1.3 mL
de benzaldehdo, 0.5 mL de acetona y 6 mL de etanol, agregar poco a poco y con
agitacin, la solucin de NaOH al 10% preparada anteriormente. Tapar el matraz con el
tapn de hule y continuar con agitacin suave por un perodo de 15 minutos. Observar y
tomar nota de todos los cambios observados, a continuacin filtrar la mezcla que se
obtuvo. Lavar el residuo que queda en el papel (la dibenzalacetona cruda) con dos
porciones de 4 mL de agua.
Purificar la dibenzalacetona por recristalizacin con etanol. Para esto transferir el slido
(crudo de reaccin) a un vaso de precipitados y adicionar 8 ml de etanol. Calentar el
vaso suavemente (casi hasta ebullicin), adicionar otra porcin de 2 ml de etanol si el
slido no se disuelve completamente y volver a calentar. Repetir este proceso hasta
que todo el slido se disuelva, filtrar en caliente, dejar reposar para que el etanol se
enfre y el slido recristalice. Filtrar el slido nuevamente y dejarlo secar al aire por unos
minutos.
IDENTIFICACIN.
1. Para la identificacin del producto colocar una mnima cantidad del producto en
un tubo de ensayo y disolverlo en 1 mL de acetona.
2. Simultneamente tomar otro tubo de ensaye y rotularlo como testigo con 1 mL de
etanol.
55

EDICIN 2015

3. A continuacin adicionar unas gotas de solucin de bromo en tetracloruro de

carbono y observar si hay algn cambio en el color de la solucin de bromo.
4. Determinar el punto de fusin del producto seco (de preferencia dejarlo secar hasta
la siguiente sesin) y compararlo con el punto de fusin de la dibenzalacetona pura
110-111 C.
PRECAUCIONES E INDICACIONES.

Tener mucho cuidado al utilizar el mechero. Tanto la acetona como el

benzaldehdo y el etanol son sustancias altamente inflamables.
El benzaldehdo y el tretracloruro de carbono son txicos por inhalacin y por
contacto. Trabajar en un rea ventilada y tratar de exponerse a los vapores lo
menos posible. Evitar tener contacto directo de estas sustancias con la piel.
Se puede acelerar la cristalizacin frotando suavemente las paredes internas del
vaso con una varilla de vidrio o bien, si se coloca el vaso de precipitados en el
bao de agua fra, aunque los cristales que se obtienen de esta manera no son tan
buenos como los que se obtienen por precipitacin espontnea.

56

EDICIN 2015

DIAGRAMA DE FLUJO
SNTESIS DE DIBENZALACETONA

57

EDICIN 2015

CUESTIONARIO EXPERIMENTAL
1. Cul es la funcin del etanol en la sntesis de la dibenzalacetona?

2. Por qu es necesario mantener la temperatura de la reaccin entre 20 y 25C.

3. Poco tiempo despus del inicio de la reaccin aparece un precipitado. De qu

compuesto se trata?

4. En el transcurso de la reaccin para obtener dibenzalacetona se forman dos

carbaniones:
(a) Escribir la estructura de cada uno de ellos.

(b) Cul de los dos sera el ms estable.

5. Escribir las reacciones que se llevan a cabo en la parte de la identificacin.

58

EDICIN 2015

6. Razonando el proceso como una condensacin de Claisen-Schmidt, escribir:

(a) Las reacciones necesarias para la obtencin de benzalacetofenona (chalcona)

(b) la estructura del carbanin principal que se formara en el transcurso de la reaccin.

7. Explicar por qu en la condensacin de Claisen-Schmidt ocurre una deshidratacin

espontnea, mientras que en la condensacin aldlica se tiene que inducir.

8. A qu se debe que la dibenzalacetona presente color, siendo las materias primas

incoloras?

59

EDICIN 2015

Observaciones:

Resultados:

Anlisis de resultados:

Conclusiones:

60

EDICIN 2015

PRCTICA 7
PODER REDUCTOR, FORMACIN DE OSAZONAS Y SNTESIS DE
PENTAACETATO DE -D-GLUCOSA
OBJETIVOS.
1. Evidenciar el poder reductor de algunos carbohidratos.
2. Destacar la importancia de la formacin de osazonas, para la identificacin de
azcares.
3. Aplicar la reaccin de acetilacin sobre los grupos hidroxilo de un monosacrido
INTRODUCCIN.
a) PODER REDUCTOR Y FORMACIN DE OSAZONAS.
Los azcares reductores son aquellos que presentan un grupo carbonilo libre o
potencialmente libre, susceptible de oxidarse en presencia de complejos cpricoalcalinos, lo cual se pone de manifiesto efectuando las pruebas de Benedict o de
Fehling. En la prueba de Fehling, se utiliza un complejo oxidante de tartrato de cobre
divalente, que reacciona con el azcar, oxidndose ste y dando una mezcla de
productos complejos; el oxidante se reduce a xido de cobre (I) que es un slido de
color rojo. En tales oxidaciones se basan varios mtodos de anlisis cuantitativos de
azcares.
Los azcares reductores reaccionan con fenilhidrazina para formar derivados cristalinos
llamados osazonas. Los azcares que difieren en la configuracin del carbono 2
(epmeros) dan la misma osazona, igual que las dos formas anomricas cclicas de un
carbohidrato (que difieren en la configuracin del carbono 1). Esta reaccin es
importante porque permite comparar las configuraciones relativas de los centros
asimtricos que siguen al carbono C2, en aldosas y cetosas. Es importante observar
que la velocidad de formacin de las osazonas, vara dependiendo del azcar que la
origina, aunque la osazona sea la misma; por ejemplo, la osazona de la fructosa se
forma ms rpidamente que la osazona de la glucosa. En esta prctica se pone de
manifiesto la velocidad de formacin de osazonas de diferentes azcares; la formacin
de osazonas de mono y disacridos reductores, as como la formacin de osazonas de
los productos de hidrlisis de disacridos no reductores y de un polisacrido.

61

EDICIN 2015

REACCIONES.
PODER REDUCTOR AZCARES
O

CHO
H
OH
H
OH +
H
OH
OH

H
O2C

O H
O
Cu

O H
O

2Na
O

CO2

NaOH
H2O

CO2 Na
H
OH
H
OH +
H
OH
CH2OH

Cu2O

ribosa

producto de oxidacin
de la ribosa

Una posible representacin del

complejo de tartrato de cobre
(el cobre est en un estado de
oxidacin Cu 2+, considerar que
el Cu(II) puede tener dos enlaces
covalentes y ms de coordinacin)

FORMACIN DE OSAZONAS
H
H

C
PhNHNH2
H C OH
(H C OH)n
NaHSO3 acuoso
H2C OH (genera el medio cido)

N
N

Ph

C
H
C N N Ph +
(H C OH)n
H2C OH

NH3

PhNH2 + H2O

Osazona, observe que

el segundo carbono sufre
oxidacin y que hay epmeros
que dan el mismo producto.

b) SNTESIS DE PENTAACETATO DE -D-GLUCOSA.

La sntesis de pentaacetato de - y -D-glucosa, es slo un ejemplo de una reaccin
general para aldosas y cetosas. Los azcares son compuestos polihidroxilados y es
posible acetilarlos por reaccin con anhdrido actico, obtenindose los acetatos
correspondientes. Si la acetilacin es de un monosacrido tipo aldopentosa, se obtiene
un tetraacetato y si se acetila un disacrido con anillos piransidos, se obtiene un
octaacetato. Los acetatos producidos, se derivan por lo general de la forma cclica
piranosa; en consecuencia los acetatos existen como pares de anmeros, por ejemplo:
la -D-glucopiranosa, da el -D-pentaacetato y la -D-glucopiranosa, da el -Dpentaacetato. Los acetatos son derivados importantes de los azcares porque:
1. Por lo general son cristalinos y resultan tiles en la purificacin y caracterizacin
de los azcares.

62

EDICIN 2015

2. Se convierten con facilidad en los azcares libres, mediante una hidrlisis

alcalina suave.
3. Constituyen importantes compuestos de partida para transformaciones sintticas
de azcares.
REACCIN.
OH

OAc
O

O
HO
HO

OH
OH

D-glucosa

CH3CO2Na

5
H3C

O
AcO
AcO

CH3

OAc
OAc

anhdrido actico

pentaacetato de
D-glucosa

PROPIEDADES FSICAS Y FISICOQUMICAS

-D-glucosa
P.M.:
180.16
p.f.:
150.0C
Tipo de slido y apariencia:
Slido blanco amorfo
Solubilidad: Agua, alcohol
etlico

Anhdrido actico
P.M.:102.1
p.eb.:
139C
Densidad:
1.08
g/mL
Solubilidad: Disolv. No
polares, reacciona con
el agua

MATERIAL.
1 Agitador
16 Tubos de ensayo
3 Vasos de precipitados
1 Gradilla
4 Portaobjetos
Papel filtro
1 Mortero con pistilo
1 Embudo de filtracin
REACTIVOS.
Almidn (solucin al 2% y 10%)
Fructosa (solucin al 10% y 2%)
Glucosa (solucin al 10% y 2%)
Lactosa (solucin al 10% y 2%)
Sacarosa (solucin al 10% y 2%)
*Reactivo de Fenilhidrazina
Solucin saturada de bisulfito de sodio
cido clorhdrico concentrado
*Solucin A de Fehling

1
1
1
1
2
2
12

Pentaacetato de -D-glucosa
P.M.:
390.34
p.f. 130-132C
Tipo de slido y apariencia:
Slido blanco, cristales finos.
Solubilidad: Muy poco soluble
en agua.

Matrz Erlenmeyer de 125 mL

Matrz Erlenmeyer de 500 mL
Refrigerante
Probeta
Vasos de precipitados de 150 mL
Vasos de precipitados de 200 mL
Pipetas de 5 mL por seccin.

Acetato de sodio anhidro

Anhdrido actico
Glucosa anhidra
Carbn activado
Hielo

63

EDICIN 2015

*Solucin B de Fehling
*Recin preparada
PARTE EXPERIMENTAL.
PODER REDUCTOR.
Colocar 6 tubos de ensayo en una gradilla; a cada tubo agregar 2 mL de solucin de
Fehling recientemente preparada (1 mL de solucin A y 1 mL de solucin B) y 5 mL
de solucin al 10% de cada uno de los azcares a ensayar. Agitar cada tubo y
colocarlos en un bao mara con agua hirviendo durante dos minutos. Observar y
anotar los resultados. (Tabla 8.1)
FORMACION DE OSAZONAS.
1. Osazonas de monosacridos (glucosa y fructosa).
Colocar en un tubo de ensayo 5 mL de solucin al 2% del azcar a ensayar, agregar
3 mL del reactivo de fenilhidrazina recientemente preparada * y 0.2 mL de solucin
saturada de bisulfito de sodio; mezclar, calentar en un bao mara y anotar el tiempo
en que se forman las osazonas. Continuar el calentamiento por 15 minutos ms y
enfriar lentamente; filtrar y lavar el precipitado con agua fra, tomar con un agitador
una pequea muestra y colocarla sobre un portaobjetos; observar al microscopio y
dibujar los cristales de las osazonas.
*Disolver 50g de clorhidrato de fenilhidrazina y 75g de acetato de sodio trihidratado
en 500 ml de agua.
2. Formacin de osazonas de disacridos (sacarosa, maltosa y lactosa).
Preparar las osazonas de los disacridos, siguiendo la tcnica empleada para
monosacridos; anotar el tiempo en que se colocan los tubos en el bao mara y
tomar muestras de las mezclas de reaccin a los 15, 20 y 30 minutos. Enfriar las
muestras as como la mezcla de reaccin, filtrar, lavar con agua fra y observar al
microscopio las osazonas formadas.
3. Formacin de osazonas de polisacridos.
Colocar en un tubo de ensayo 5 mL de solucin de almidn al 2% y proceder como
en la tcnica para monosacridos.
1. Formacin de osazonas de disacridos y polisacridos hidrolizados (sacarosa,
maltosa y almidn).
a) Preparacin de hidrolizados. Para el hidrolizado de disacridos, colocar en un
matraz Erlenmeyer de 125 mL, 2 g del disacrido, agregar 60 mL de agua y 5 mL
de cido clorhdrico concentrado; calentar a bao mara durante 1 hora y enfriar.
Para el hidrolizado de polisacridos, colocar 1 mL de cido clorhdrico y 10 mL
de solucin de almidn; calentar a bao mara durante 1 hora y enfriar.

64

EDICIN 2015

b) Formacin de osazonas de los productos de hidrlisis. Colocar 5 mL de los

hidrolizados en tubos de ensayo y proceder como en la tcnica para
monosacridos.
(Pentaacetato de -D-glucosa) En un mortero mezclar 2.0 g (0.01 moles) de glucosa
anhidra y 1g (0.01 moles) de acetato de sodio anhidro; pasar la mezcla a un matraz
bola de 50 mL; agregar por el refrigerante 10 mL (0.1 moles) de anhdrido actico
*(lquido altamente irritante), adaptar un refrigerante en posicin de reflujo y calentar en
bao de aceite hasta disolucin. Continuar el calentamiento por una hora ms.

SEPARACIN Y PURIFICACIN
Enfriar un poco la mezcla de reaccin y verterla sobre 200 mL de una mezcla aguahielo agitando vigorosamente. Continuar la agitacin hasta que el slido formado
quede finamente dividido y dejar reposar durante 30 minutos agitando ocasionalmente.
Filtrar el slido, lavar con agua fra y recristalizar de agua caliente, utilizando carbn
activado para decolorar.
IDENTIFICACIN. Determinar el punto de fusin del pentaacetato de -D-glucosa.

65

EDICIN 2015

DIAGRAMA DE FLUJO
PODER REDUCTOR

66

EDICIN 2015

DIAGRAMA DE FLUJO
Sntesis de Pentaacetato de -D-glucosa

67

EDICIN 2015

TABLA DE RESULTADOS DE LAS PRUEBAS

AZCAR

PRUEBA DE FEHLING

FORMACIN DE OSAZONAS
SI
NO
TIEMPO

Fructosa
Glucosa
Manosa
Maltosa
Lactosa
Sacarosa
Almidn

CUESTIONARIO EXPERIMENTAL
1. Cul es la razn de utilizar clorhidrato de fenilhidrazina como reactivo, en lugar de
fenilhidrazina base, en esta reaccin?

2. Si se utilizara clorhidrato de fenilhidrazina en la reaccin de obtencin de osazonas

cmo se obtendra la fenilhidrazina base?

3. Por qu se emplea la solucin de bisulfito de sodio, en la formacin de osazonas?

68

EDICIN 2015

4. Explicar las diferencias en la formacin de osazonas entre monosacridos y

disacridos.

5. Indicar, por medio de reacciones, cules azcares dan positiva la prueba de Fehling;
dar el nombre de los productos.

6. Explicar por qu se utiliza el cobre como tartrato y no como sulfato.

7. Dar tres ejemplos de carbohidratos que den positiva la prueba de Fehling y tres que
no la den.

8. Indicar qu tipo de grupos funcionales reacciona con la fenilhidrazina.

9. Cuntos moles de fenilhidrazina base se necesitan en la formacin de osazonas.?

Explicar.

69

EDICIN 2015

10. Por qu las osazonas se forman nicamente en los carbonos 1 y 2 de los

carbohidratos?

11. En la sntesis de pentaacetato de -D-glucosa:

a) Cul es el papel del acetato de sodio anhidro?

b) Por qu se vierte la mezcla de reaccin

calentamiento a reflujo?

en agua helada despus del

c) Por qu es importante que el slido formado se agite hasta que quede

finamente dividido?

12. Escribir las estructuras de Haworth de los pentaacetatos de y -D-glucosa.

13. Dibujar las frmulas de Haworth para los acetatos de maltosa, sacarosa y lactosa.

14. Indicar por medio de reacciones, que conclusin se desprende acerca del tamao
del anillo de un azcar cuyo glicsido es metilado y el producto resultante tratado
con cido clorhdrico diluido, formando 2,3,4,6-tetra-O-metil-D-glucosa; cuando sta
es sometida a una oxidacin con cido ntrico concentrado, produce un cido
trimetoxiglutrico y un cido dimetoxisuccnico.

15. La hidrlisis de sacarosa produce lo que se conoce como azcar invertido; investigar
qu significa dicho trmino.

70

EDICIN 2015

Observaciones:

Resultados:

Anlisis de resultados:

Conclusiones:

71

EDICIN 2015

Bibliografa

PRCTICA 8
HIDRLISIS DE UNA PROTENA Y ENSAYOS PARA PROTENAS Y
AMINOCIDOS.
OBJETIVOS:
1. Efectuar la hidrlisis total de una protena.
2. Identificar algunos aminocidos presentes en un hidrolizado e protena, por
medio de sus propiedades fsico-qumicas.
3. Identificar por cromatografa en placa fina algunos de los aminocidos presentes
en un hidrolizado de protena.
INTRODUCCIN:
Las protenas son polmeros biolgicos, componentes principales de clulas vegetales y
animales; qumicamente son poliamidas, cuyos monmeros son -aminocidos.
Las protenas se pueden clasificar segn el tipo de funcin que desempean:
Los -aminocidos que forman las protenas, pertenecen a la serie L y su frmula
general es la siguiente:
H

Estos aminocidos se unen entre s formando enlaces peptdicos; la unin de dos

aminocidos origina un dipptido; de tres un tripptido, etc., hasta la formacin de
polipptidos; cuando el nmero de aminocidos es mayor de 80, se considera protena.
La estructura de cualquier protena, presenta varios niveles de complejidad:
1. La estructura primaria es la secuencia especfica de los aminocidos en la cadena
polipeptdica y estn est determinada por los (implicados) enlaces peptdicos.
2. La estructura secundaria es la forma en que se acomoda la cadena por
interacciones por puente de hidrgeno, dando una determinada conformacin a las
protenas. Frecuentemente es en forma de hlice o bien hoja plegada-.
3. La estructura terciaria es la forma en que las cadenas enrolladas se doblan por
diversas interacciones por puentes de hidrgeno, puentes de disulfuro, fuerzas
electrostticas, etc. dando tambin determinadas conformaciones a las protenas.
4. La estructura cuaternaria es el resultado de la agrupacin de dos o ms unidades
plegadas.

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EDICIN 2015

Las protenas se pueden clasificar segn el tipo de funcin que desempean:

1) Protenas fibrosas o estructurales.- Se caracterizan por ser insolubles en agua,
de gran resistencia y en forma de fibras. Constituyen la piel, msculos, cabellos,
etc.
2) Protenas globulares.- Se caracterizan por ser protenas pequeas que se asocian
formando unidades compactas y son solubles en agua.
Desempean diferentes funciones en el organismo, como transportadores de
oxgeno (hemoglobina); catalizadores biolgicos (enzimas); mediadores qumicos
(hormonas); en el sistema inmunolgico (anticuerpos, gama globulina), etc.
3) Protenas conjugadas.- Estn asociadas a una parte no proteica, como las
nucleoprotenas, glicoprotenas, lipoprotenas, etc.
La determinacin de la estructura de una protena, es un proceso complejo que
comprende el empleo de mtodos instrumentales y qumicos.
Las protenas se pueden hidrolizar con soluciones diluidas de cidos minerales a
ebullicin suave. Dependiendo de las condiciones (de hidrlisis) se pueden realizar
hidrlisis parciales, en las cuales se obtienen fragmentos peptdicos, as como
aminocidos aislados; o hidrlisis totales, donde se obtienen mezclas de aminocidos.
El tipo de aminocidos que contenga una protena determina la clase de anlisis que se
pueden realizar (dependiendo del tipo de aminocidos que contenga una protena, se
pueden realizar diferentes anlisis) como por ejemplo una tcnica cromatogrfica, o
reacciones qumicas, que pongan de manifiesto la presencia de determinados
aminocidos. Algunas de estas reacciones son coloridas, como la reaccin
xantoprotica y la reaccin con ninhidrina.
La presencia del grupo amino de aminocidos o grupos amino libres en una protena,
se pone de manifiesto cuando se efecta una reaccin con cido nitroso,
desprendindose 1 mol de nitrgeno molecular, por cada grupo amino primario.
Los aminocidos son anfolitos que en solucin acuosa existen en forma de in bipolar o
zwitterion, por lo cual pueden reaccionar con cidos y con bases.
La presencia de enlaces disulfuro en algunas protenas, se pone de manifiesto por una
reaccin de precipitacin en medio bsico y la presencia de enlaces peptdicos, se
detecta por la reaccin de Biuret.
En esta prctica se realizarn los ensayos anteriormente indicados y las reacciones que
se llevan a cabo se describen en la parte experimental.

73

EDICIN 2015

MATERIAL

1
1
1
4
1
10
1
2
1
1
1
1
1
1

Refrigerante.

REACTIVOS
Acetato de plomo al 10%

Matraz Baln de 200 mL

Vaso de precipitados de 600 mL
Vasos de precipitados de 150mL
Embudo de vidrio.
Tubos de ensayo.

cido clorhdrico conc.

cido clorhdrico 0.1N
cido ntrico conc.
Hidrxido de sodio al 20%
Hidrxido de sodio 0.1 N

19 mL.
1 mL.
10 mL.
22 mL.
2 mL.

Agitador de vidrio.
Pinzas de 3 dedos.
Pinzas para tubo de ensayo.
Rejilla.
Bao Mara.
Mechero.
Soporte universal.
Trozo de Manta de cielo.
Papel pH.
Papel filtro

Fenolftalena al 10%.
Ninhidrina al 3%
Nitrito de sodio al 5%
Rojo Congo al 0.1%
Sulfato de cobre al 2%
Grenetina
Valina
Glicina
Alanina
Fenilalanina
Carbn Activado

1 mL.
2.5 mL.

3 mL.

1 mL.
12 mL.
1.5 g.

Alcohol terbutlico
Clara de huevo
Hidrxido de sodio al 10%

20 mL

PARTE EXPERIMENTAL:
PREPARACIN DE SOLUCIONES:
I. Hidrlisis de Grenetina (Solucin A).
REACCIN DE HIDRLISIS DE UNA PROTENA DENOMINADA GRENETINA:
O

H
N

N
H

REACTIVOS:

COOH
+ HCl

H
R

-AMINOACIDO

PROTEINA

Cantidad:

Reactivo:

1 g
10 mL
10 mL

Grenetina.
cido Clorhdrico concentrado.
Agua Destilada.

0.5 g

NH2

Carbn Activado.

74

EDICIN 2015

PROCEDIMIENTO:
1. Colocar en un matraz Baln de fondo plano de 200 mL, 1 g de grenetina, 10 mL de
cido clorhdrico concentrado (lquido altamente corrosivo) y 10 mL de agua
destilada.
2. Adaptar un refrigerante en posicin de reflujo y calentar suavemente por 35 minutos.
3. Despus de este tiempo agregar 0.5 g de carbn activado, continuar calentando por
2 minutos y filtrar.
NOTA: Es importante que esto se haga previo al seminario para agilizar el desarrollo de
la parte experimental
II. Solucin neutralizada de hidrolizado de grenetina (Solucin B).

REACTIVOS:
Cantidad:
5.0 mL.
La necesaria

Reactivo:
Solucin A.
Hidrxido de Sodio al 20%.

El necesario

Papel pH.

Tomar 5 mL de solucin. A y neutralizarla con hidrxido de sodio al 20% determinar el

punto de neutralizacin empleando papel pH. (se debe ponerse atencin a la
neutralizacin ya que el pH cambia drsticamente cuando se acerca el punto deseado);
filtrar
NOTA: Utilizar sta solucin de grenetina hidrolizada a pH neutro (solucin B), para
efectuar la cromatografa, la prueba de ninhidrina y la accin reguladora de
aminocidos.
III. Solucin de Grenetina sin hidrolizar (Solucin C).
REACTIVOS:
Cantidad:
0.5 g.
20 mL.

Reactivo:
Grenetina.
Agua destilada.

Colocar en un vaso de 100 mL 0.5 g de grenetina, agregar 20 mL de agua destilada

y agitar.
IV. Solucin de Albmina (Solucin D).
REACTIVOS:
Cantidad:
1 huevo
100 mL.

Reactivo:
La clara.
Agua destilada.
75

EDICIN 2015

Un trozo.

Manta de cielo.

1. Preparar una solucin de albmina, agitando clara de huevo por 10 segundos.

2. Agregar 100 mL de agua, agitar y filtrar a travs de un trozo de manta de cielo.
3. Utilizar el filtrado (solucin D) para efectuar las siguientes pruebas:
REACCIONES DE IDENTIFICACIN:

1)

Reaccin Xantoprotica:
NO2
R

OH + HNO 3

OH

REACTIVOS:
Cantidad:
2.0 mL.
2.0 mL
10 mL.
El necesario.

Reactivo:
Solucin A.
Solucin D.
cido Ntrico concentrado (lquido altamente corrosivo).
Hidrxido de sodio al 20%.

PROCEDIMIENTO:
a) Colocar en un tubo de ensayo 2 mL de solucin de grenetina hidrolizada (solucin
A) y en otro, 2 mL de solucin de albmina (solucin D).
b) Agregar a cada tubo 5 mL de cido ntrico concentrado (lquido altamente corrosivo).
c) Calentar suavemente a bao Mara y observar la coloracin.
d) Enfriar cada tubo de ensayo y agregar a cada uno, gota a gota, una solucin de
hidrxido de sodio al 20% hasta pH bsico.
e) Observar el cambio de color.
Realice las anotaciones correspondientes:
Sustrato:
OBSERVACIONES:
Solucin A.
Solucin D.

2)

Reaccin de Precipitacin:
R-S-S-R + NaOH

R-SH
76

(CH3-COO)2Pb

PbS
EDICIN 2015

REACTIVOS:
Cantidad
2.0 mL.
2.0 mL.
2.0 mL.
15 mL.
1.0 mL.

Reactivo:
Solucin A.
Solucin D.
Agua destilada.
Hidrxido de sodio al 10%.
Acetato de Plomo al 10%.

PROCEDIMIENTO:
a) Colocar en un tubo de ensayo 2 mL de grenetina hidrolizada (Solucin A), en otro
2 mL de solucin de albmina (Solucin D); y en un tercer tubo de ensayo, colocar
2 mL de agua destilada.
b) Agregar a cada uno 5 mL de solucin de hidrxido de sodio al 10% y 1.0 mL de
solucin de acetato de plomo al 10%.
c) Calentar a ebullicin con agitacin, por cinco minutos.
d) Observar los resultados.
Realice las anotaciones correspondientes:
Sustrato:
OBSERVACIONES:
Solucin A.
Solucin D.
3)

Reaccin de Biuret:
O

H
N

N
H

+ CuSO4 + NaOH

COMPLEJO
DE COBRE

PROTEINA

REACTIVOS:
Cantidad
0.5 mL.
1.0 mL.
0.5 mL.
1.0 mL.
2.0 mL.

Reactivo:
Agua destilada.
Solucin A.
Solucin C.
Solucin D.
Hidrxido de sodio al 10%.

PROCEDIMIENTO:
En seis tubos de ensayo, colocar las siguientes soluciones:
TUBO No:
1. 0.5 mL de agua destilada + 0.5 mL de sol. de hidrxido de sodio al 10% (tubo
testigo).
2. 0.5 mL de solucin de grenetina sin hidrolizar (Solucin C) + 0.5 mL de
hidrxido de sodio al 10%
77

EDICIN 2015

3.
4.
5.
6.

0.5 mL de solucin de albmina (solucin D).

0.5 mL de solucin de grenetina hidrolizada sin neutralizar (solucin A) +
0.5 mL de solucin de hidrxido de sodio al 10%.
0.5 mL de solucin de albmina + 0.5 mL de solucin de hidrxido de sodio al
10%.
0.5 mL de grenetina hidrolizada sin neutralizar (solucin A)

A cada tubo, agregar 2 mL. de solucin de sulfato de cobre al 2 %.

Agitar, observar y concluir.
Realice las anotaciones correspondientes:
Sustrato:
OBSERVACIONES:
Agua destilada.
Solucin A.
Solucin C.
Solucin D.
4)

Reaccin con Ninhidrina:

O
R

O
OH NaOH

OH +

+ R-CHO + CO2

OH

NH2

REACTIVOS:
Cantidad:
0.5 mL.
0.5 mL.
0.5 mL.
0.5 mL.
0.5 mL.
2.5 mL.

Reactivo:
Agua destilada.
Solucin B.
Solucin C.
Solucin D.
Aminocido patrn al 1%.
Ninhidrina al 3%.

PROCEDIMIENTO:
En cinco tubos de ensayo, colocar las siguientes soluciones:
TUBO No:
1. 0.5 mL de agua destilada.
2. 0.5 mL de solucin de grenetina hidrolizada a pH neutro (solucin B)
3. 0.5 mL de solucin de grenetina sin hidrolizar (solucin C)
4. 0.5 mL de solucin de albmina (solucin D)
5. 0.5 mL de solucin al 1% de un aminocido patrn.

78

EDICIN 2015

 Agregar a cada tubo 0.5 mL de solucin de ninhidrina al 3% y calentar a bao Mara

por cinco minutos
Observar y concluir.
Realice las anotaciones correspondientes:
Sustrato:
OBSERVACIONES:
Agua destilada.
Solucin B.
Solucin C.
Solucin D.
Sol.Aminocido
Patrn.

5)

Reaccin con cido Nitroso:

O
R

OH + HNO 2

0-5 C

N2 + MEZCLA DE PRODUCTOS

NH2

REACTIVOS:
Cantidad:
3.0 mL.
2.0 mL.
2.0 mL.
2.0 mL.
2.0 mL.
4.0 mL.

Reactivo:
cido Clorhdrico concentrado (lquido altamente corrosivo).
Solucin A.
Solucin C.
Solucin D.
Agua destilada.
Nitrito de sodio al 5%.

PROCEDIMIENTO:
En cuatro tubos de ensayo, colocar 3 mL de HCl concentrado (lquido altamente
corrosivo) y enseguida agregar:
TUBO No:
1. 2 mL de hidrolizado de grenetina (solucin A)
2. 2 mL de grenetina sin hidrolizar (solucin. C)
3. 2 mL de solucin de albmina (solucin. D)
4. Tubo testigo sin protena.
Enfriar y agregar a los cuatro tubos de ensayo, 1 mL de solucin acuosa de nitrito de
sodio al 5%.
Observar y concluir

79

EDICIN 2015

Realice las anotaciones correspondientes:

Sustrato:
OBSERVACIONES:
Agua destilada.
Solucin A.
Solucin C.
Solucin D.
5) Accin reguladora de aminocidos:
REACTIVOS:
Cantidad:

Reactivo:

4.0 mL
4.0 mL
0.6 mL
0.6 mL
El necesario.

Agua destilada.
Solucin B.
Solucin indicadora Rojo Congo.
Fenolftalena al 0.1%.
HCl al 0.1N.

El necesario.

NaOH al 0.1N.

PROCEDIMIENTO:
a) En tubo de ensayo colocar 2 mL de hidrolizado de grenetina a pH neutro (solucin
B) y en otro 2 mL de agua destilada.
b) Agregar a cada tubo 0.3 mL (6 gotas) de solucin indicadora de rojo congo; y
c) Agregar a cada tubo, gota a gota HCl 0.1N, hasta un cambio de coloracin.
d) Observar y concluir.
e) Efectuar el mismo ensayo empleando fenolftalena al 0.1% como indicador, y
agregando solucin de hidrxido de sodio 0.1N de igual forma, hasta cambio de
coloracin.
f) Observar y concluir.
Realice las anotaciones correspondientes:
Solucin:
Indicador:
Color inicial.
Agua destilada. Rojo Congo
Solucin B.
Rojo Congo

mL. HCl 0.1N

Color final.

mL .NaOH 0.1N
Agua destilada. Fenolftaleina 0.1%
Solucin B.
Fenolftaleina 0.1%
OBSERVACIONES:

80

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6) Cromatografa en placa fina:

REACTIVOS:
Cantidad:
0.1 mL.
0.1 mL.
0.1 mL.
3.0 mL.
La necesaria.

Reactivo:
Solucion B.
Solucin Patrn de Aminocido 1, al 1%.
Solucin Patrn de Aminocido 2, al 1%.
Solucin Alcohol Terbutlico-Agua 3:1.
Solucin de ninhidrina para revelar.

PROCEDIMIENTO:
a) En una cromatoplaca, aplicar una pequea muestra del hidrolizado de grenetina
neutra (solucin B).
b) Enseguida hacer aplicaciones de aminocidos patrn.
c) Dejar secar el cromatograma e introducirlo en una cmara de cromatografa que
contenga una mezcla de alcohol terbutilico-agua 3:1.(Una o dos gotas de NH4OH
facilitan el revelado de la placa).
d) Eluir el cromatograma.
e) Secar en la estufa y revelar con un atomizador que contenga una solucin de
ninhidrina.
f) Identificar los aminocidos presentes en el hidrolizado de grenetina, determinando
valores de Rf.
Realice las anotaciones correspondientes.
Solucin B.
Frente del
Disolvente.
Mancha No.1
Mancha No.2
Mancha No.3
Mancha No.4
Aminocido patrn
1. Nombre:

Frente de la
mancha.

Relacin de
frentes Rf.

Aminocido patrn
2.Nombre:

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EDICIN 2015

DIAGRAMAS DE FLUJO
(plantear cada una de las secciones de la parte experimental)

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DIAGRAMAS DE FLUJO
(plantear cada una de las secciones de la parte experimental)

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CUESTIONARIO EXPERIMENTAL

En la hidrlisis de grenetina, indicar:

1.

Cmo sabra si la hidrlisis fue parcial o total?

2.

Investiga y descibe tres tipos de hidrlisis de protenas.

3.

Qu tipo de aminocidos protenas dan positiva la reaccin xantoprotica?

4.

Escribe el mecanismo que se lleva a cabo en la reaccin xantoproteica.

5.

Cul es la razn de agregar hidrxido de sodio en la reaccin xantoprotica?

6.

Qu tipo de aminocidos debe contener una protena, para dar positiva la

reaccin de precipitacin con acetato de plomo?

84

EDICIN 2015

7.

Resumir las conclusiones obtenidas en la reaccin con acetato de plomo.

8.

Indicar por medio de reacciones, el efecto regulador de aminocidos.

9.

Explicar los resultados obtenidos en la prueba del efecto regulador de los

aminocidos.

10. En qu consiste la prueba de Van Slyke?

11. Escribe la frmula de los aminocidos que identific por cromatografa.

12. Explicar el fundamento de la cromatografa en capa fina y mencionar cul es la

fase mvil y cul la estacionaria en el sistema utilizado en esta prctica.

85

EDICIN 2015

13. A qu tipo de protenas pertenecen las que se emplearon en la prctica?

14. Investigar algunos de los aminocidos que se encuentran presentes en grenetina y

albmina.

15. Investigar de qu protena se obtiene la grenetina.

86

EDICIN 2015

Observaciones

Resultados

Anlisis de Resultados

Conclusiones

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EDICIN 2015

BIBLIOGRAFA.

McMurry, John. Qumica Orgnica. 6 Edicin, 2005. Editorial Thomson.

Fessenden, Ralph. Fessenden, Johan S. Qumica Orgnica. 1 Edicin. 1983.

Grupo Editorial Iberoamrica.

Rendina G. Tcnicas de Bioqumica aplicada. Edicin, 1974. Editorial

Interamericana.

Litwack G. Bioqumica Experimental. Edicin, 1967. Barcelona.Editorial Omega,

S.A.

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FICHA DE EVALUACIN FINAL DE LABORATORIO

DE QUMICA ORGNICA I

DEPARTAMENTO DE QUMICA ORGNICA

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLGICAS
INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

NOMBRE DEL ALUMNO_____________________________________

GRUPO___________________________________________________
TURNO___________________________________________________
SEMESTRE MARZO-JULIO (

AGOSTO-DICIEMBRE (

AO______________________

CALIFICACIN FINAL DE LABORATORIO*

_________________________________
LETRA
NMERO
FIRMA DE ENTERADO DEL ALUMNO____________________________

NOMBRE Y FIRMA DEL PROFESOR______________________________

* Si la calificacin es reprobatoria, anotar si es por inasistencias o por examen.

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CALENDARIO DE PRCTICAS DE QUMICA ORGNICA I

QUMICO FARMECUTICO INDUSTRIAL
MARZO JULIO 2015
NO.
1
2
3
4
5
6
7
8

NOMBRE DE LA PRCTICA
Introduccin
Separacin de una mezcla ternaria por destilacin
Recristalizacin
Extraccin lquido - lquido
Examen
Cromatografa
Sntesis a microescala de cido fumrico
Sntesis de dibenzalacetona
Examen
Poder reductor, formacin de osazonas y sntesis de
pentaacetado de -D-glucosa
Hidrlisis de una protenas y ensayos para
aminocidos
Examen
Entrega y captura de calificaciones

90

FECHA
27-31 de Marzo
20-24 Abril
11 15 Mayo
18 22 de Mayo
1 5 de Mayo
1 -5 de Junio
15 19 de junio
15 19 de junio
22 26 de junio
22 26 de junio
29 junio 3 de
julio
6 10 de julio
16 20 de julio

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