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ESCUELA ACADEMICA PROFESIONAL DE INGENIERIA AMBIENTAL

MICROBIOLOGA AMBIENTAL
PRACTICA N2
INSTRUMENTACION DEL LABORATORIO. ESTERILIZACION. METODOS
FISICOS Y QUIMICOS
OBJETIVOS
-Entrenar al alumno en el reconocimiento de los diferentes equipos y
materiales de laboratorio, as como en el uso de los mismos y que sern
utilizados en la realizacin de los ejercicios de laboratorio.
-Adiestrar al alumno en la limpieza y preparacin del material para su
esterilizacin
I.-MATERIAL DE VIDRIO Y OTROS
Aparte del instrumental y variado equipo que se requiere en todo laboratorio
de Microbiologa, el material de vidrio constituye una de las principales
herramientas de esta disciplina
-Matraces y balones (graduados)
-Kitasatos
-Probetas graduadas
-Pipetas: serolgicas: terminales y subterminales, volumtricas, Pasteur,
automticas y Micro pipetas
-Tubos de ensayo: 16x150, 15x125, 13x100, 10x75
-Cpsulas o placas Petri
-Esptulas de Drigalsky
-Fiolas
-Varillas de Vidrio
-Beaker o vasos de precipitacin
-Jeringas y agujas hipodrmicas
-Frascos viales para Hemocultivos, vacunas, cultivos de tejidos
-Perlas de vidrio
II. MATERIAL DE OTRA NATURALEZA
-Trpodes
-Estuches cilndricos
-Canastillas o cestos de metal
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-Soportes universales
III.-EQUIPOS DE LABORATORIO
-Estufa - Incubadora
-Horno Esterilizador
-Autoclave
-Bao Mara
-Mechero de Bunsen (gas)
-Mechero de alcohol
-Asa de siembra
-Microscopios Binocular y Monocular
-Campanas de Anaerobiosis
-Centrfugas
-Potencimetro
-Refrigeradoras y congeladoras
IV.-ESTERILIZACION
Es el procedimiento por el cual se destruyen los microorganismos y sus formas
resistentes, mediante el uso de agentes fsicos y qumicos
METODOS DE ESTERILIZACION
A.-ESTERILIZACION POR AGENTES FISICOS
-Esterilizacin por medio del calor
1.- Esterilizacin por accin del flameado:
El material se somete a la accin directa de la llama de un mechero, sin que se
altere ni sufra deterioro. Ejemplos: Asas de siembra, material de diseccin
2.- Esterilizacin por el calor seco:
Se hace actuar el aire caliente sobre el material a esterilizar, por ejemplo el
vidrio seco y protegido se coloca en un horno a 180 C por 30 a 45 minutos
3.- Esterilizacin por el calor hmedo:
Actan coagulando las protenas del protoplasma microbiano en tiempo menor
a la esterilizacin por aire caliente ejemplo, la esterilizacin de los medios de
cultivo o soluciones en Autoclave a 121 C por 15 libras de presin por 15
minutos
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-Esterilizacin en frio
1.- Esterilizacin en frio por filtracin
Por este mtodo se esterilizan los medios de cultivo lquidos o sustancias
orgnicas que sufren alteraciones de sus propiedades fsicas y qumicas por
accin del calor. Ejemplo: solucin de antibiticos
2.- Esterilizacin por centrifugacin
Mediante la fuerza centrfuga es posible conseguir esterilizacin de algunas
sustancias y productos a grandes revoluciones por minuto, por un tiempo
prolongado
3.-Esterilizacin por accin de la luz UV
Corresponde al tiempo de radiacin de la luz solar en la que su corta longitud
de onda se emplea para esterilizar medios de cultivo a base de minerales,
ambientes para siembras bacterianas, salas de ciruga
4.-Flujo laminar
El sistema de flujo laminar evita las turbulencias, regulando la velocidad de
circulacin de aire. En el sistema horizontal, el aire estril es impulsado desde
el fondo hacia el manipulador.
B.-ESTERILIZACION POR AGENTES QUIMICOS
Sustancias germicidas que actan por efectos qumicos, inactivando protenas.
El proceso en s puede ser de poder bactericida, antisptico o bacteriosttico
en algunos casos
-Sustancias qumicas aldehdos: ejemplo: -formol acuoso al 4 % en 24 horas de
inmersin. Irrita los tejidos, tiene baja penetrabilidad, desagradable olor y deja
un residuo blanco sobre los materiales tratados
-Fenol y sus derivados: actan a nivel de las membranas celulares, inactivando
enzimas y desnaturalizando protenas; es irritante y tiene mal olor, se usa para
desinfectar mesas de trabajo. Los derivados como el cresol y hexaclorofeno
mantienen su actividad en presencia de compuestos orgnicos, son estables y
persistentes, tiles en presencia de saliva, pus y heces.
Ejemplos: Halgenos, Alcoholes, Metales pesados, Agentes tensoactivos,
Compuestos de amonio cuaternario, cidos orgnicos
Cuestionario
1.-Realizar dibujos sobre el material de vidrio presentado para qu sirven?
2.-Realizar dibujos de los equipos de laboratorio para qu se utilizan?
3.- Explique el fundamento de la esterilizacin por agentes fsicos y qumicos.
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REFERENCIAS
1. OMS. 2005. Manual de Bioseguridad en el Laboratorio. Tercera Edicin. OMS.
Malta
2. U.S. Departament of Health and Human Services, CDC, NIH. 2009. Biosafety in
Microbiological and Biomedical Laboratories. 5th Edition. HHS Publication
3. MINSA, INS. 2005. Bioseguridad en Laboratorios de Ensayo, Biomdicos y
Clnicos. 3era Edicin. Lima
4. OPS, OMS. 2005. Manual de Mantenimiento para Equipo de Laboratorio.
Washington.

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