UNIVERSIDAD NACIONAL TORIBIO RODRIGUEZ DE MENDOZA

EXTRACCION DE COLORANTE (Bixina) A PARTIR DE SEMILLAS DE

ACHIOTE (Bixa orellana L.)
INTRODUCCION
Los colorantes naturales se dividen en tintes y pigmentos. Los tintes se definen como
compuestos que interaccionan qumicamente con el sustrato coloreado (p. e. textiles) por
otro lado, los pigmentos, muy usados en la industria farmacutica, no forman enlaces
qumicos con el sustrato, y para que pueda adherirse a la superficie del sustrato se tiene que
mesclar con un adhesivo.
El cultivo de achiote ha adquirido importancia, principalmente, por la presencia de
colorante en la semilla. Este colorante natural, como otros, est desplazando a los
colorantes sintticos por los efectos que stos ocasionaran al utilizarse en la dieta humana.
Adems, la Organizacin Mundial de la Salud, considera al colorante obtenido del achiote
como uno de los pocos permitidos, por no ser txico y no alterar el sabor de los alimentos
(Hernndez, 1988). Estos aspectos han incrementado su exportacin.
Este colorante se usa en la industria alimentaria para la coloracin de mantequillas,
margarinas, quesos, yogurts, aceites, nctares, productos de panadera y confitera (SGS,
1991).
El annato puede obtenerse mediante extraccin acuosa, alcalina o con otros solventes como
aceites, propilen-glicol, alcohol etlico y tricloro-etano. El mtodo ms utilizado es el de
extraccin alcalina. Sin embargo, los principales mercados de exportacin (Estados Unidos,
Europa y Japn) desean que se eliminen los mtodos de extraccin que utilizan productos
qumicos (Liceras, 1988).
El uso de enzimas (pectinasas, celulasas, hemicelulasas) que degradan la pared celular,
facilitara la extraccin acuosa del colorante (Godfrey, 1983). Estas enzimas que actan
sobre componentes insolubles tales como celulosa, hemicelulasas y pectina permitiran
obtener un colorante (annato) de mayor pureza y calidad. Asimismo, permitira dejar de
lado las sustancias qumicas utilizadas actualmente en los mtodos de extraccin
industriales.
El presente trabajo tuvo como objetivo obtener esta extraccin acuosa, alcalina-acida en la
extraccin de colorante a partir de semillas de achiote (Bixa orellana L.).
OBJETIVOS:
Determinar el fundamento de extraccin de colorantes naturales.
Extraer el colorante crudo de achiote (bixina)
Realizar la extraccin dela Bixina mediante el mtodo alcalino
condiciones para la obtencin de un buen rendimiento

con mejores

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JUSTIFICACION.
Hoy en da el uso de los colorantes es vital en los productos puestos en los mercados, esto
debido a que en algunos se usa los colorantes para mejorar su apariencia y color, esto
significa el rechazo o la aceptacin de estos de parte del consumidor, esta situacin no solo
es comn, si no que se a convertido en una necesidad.
Despus de la segunda querr mundial el descubrimiento de los colorantes sintticos
(derivados de petrleo, aluminio y del carbn) sustituyo el uso de los naturales. La
importancia de los colorantes naturales como sustitutos de los artificiales (Food and Drug
Administration FDA, 2002)
Los colorantes sintticos certificables son, aprobados para su uso por la FDA, existen 8
colores certificados que son Amarillo #6, Amarillo #5 Azul #1 Azul #2 Naranja B, Rojo
Citrus, Rojo #40, Verde #3. Los aditivos colorantes exentos de certificacin incluyen los
pigmentos derivados de fuentes naturales, o animales entre ellos se se incluyen los
colorantes obtenidos de las semillas (la pepa) del aguacate y del achiote asi como extractos
vegetales (FDA 2002/ OMS, 2006)
Los industriales han vuelto los ojos nuevamente hacia los colorantes naturales dentro de
los cuales la Bixina, extrada del Achiote, tiene un gran potencial. Es una sustancia con alta
resistencia a ls agentes qumicos por lo que resulta muy apropiada para colorear todo tipo
de alimentos y bebidas (Smith y Col, 1992)
El achiote tiene una gran importancia econmica y cultural en muchos pases. Muchas son
las estrategias que se han buscado para cambiar las formas de produccin. Por su naturaleza
qumica, los colorantes pueden ser Inorgnicos y orgnicos. El cultivo de achiote no
requiere de muchos cuidados, en la actualidad no existen muchas empresas que se dediquen
a la extraccin de los colorantes.
Se sabe hasta el momento que el mejor rendimiento de la semilla de achiote se obtiene por
medios alcalinos
USOS
En la industria:
.
En Centroamrica se usa como colorante y condimento diario en las comidas
Tales como el arroz preparado de varias formas, en caldos, consoms o sopas, recaudos
y en la preparacin de carnes y embutidos.
La mayor utilizacin de los extractos del achiote es en la fabricacin de quesos;
tambin se usa como colorante de la mantequilla, principalmente por su contenido de
pro vitamina A.
La materia colorante se emplea en la tintorera para dar colorido y fuerza a otras
sustancias colorantes que adquieren as notable brillantez para teir telas de lana, seda
y algodn. Se emplea tambin para colorear alfombras.
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En confitera se usa en la fabricacin de dulces y caramelos.
En la industria de helados, sorbetes y paletas.
Colorantes: De la porcin carnosa (arilo rojo naranja) que envuelve la semilla se
extrae un colorante apreciado industrialmente para dar color a productos alimenticios
tales como el queso, la mantequilla y los aceites; Tambin las ceras, barnices, pinturas,
cosmticos y fibras textiles de seda y algodn. El aceite extrado de las semillas es la
principal fuente de los pigmentos Bixina y Norbixina u orellina, clasificados como
carotenoides.
La semilla del achiote contiene 40 a 45% de celulosa; 3.5 a 5.5% de sucrose; 0.3 a
0.9% de aceite esencial; 3% de aceite fijo; 4.5 a 5.5% de pigmentos, 13 a 16% de
protenas, tan bien conocida como alfa y beta carotenoides y otros constituyentes.
Extractos de alcohol etlico de el fruto seco y las hojas muestran que tiene una
actividad in vitro contra Escherichia coli y Staphylococcus aureus; Un extracto en
agua de la raz tiene actividad hipertensivo en ratas y una suave actividad relajante en
cerdos de guinea y un extracto de cloroformo de semillas secas muestran que tiene
actividad hipo glicmica en perros.
MARCO TEORICO.
ASPECTOS GENERALES DEL ACHIOTE
Nombre comn: Achiote
Otros Nombres Comunes: Colombia y Per: Achote, achiote, onoto, bijo, bija, urucu.,
pumacoa. Ingles: Annato-tree. Alemn: Orleans Baum.
Nombre cientfico comn: Bixa orellana
Taxonoma
Familia: Bixaceae.
Gnero: Bixa.
Especie: orellana
Fruto: Es una cpsula dehiscente de forma hemisfrica, ovoide, elipsoidal o cnica
carnosa, de 3 a 5 cm. de largo recubierto por espinas rgidas o flexibles de tamao variable
que puede llegar a 6 mm, ocasionalmente ausentes; presenta 2 valvas recubiertas
internamente por una membrana placentaria a la cual estn adheridas las semillas,
aproximadamente 50 de color rojo vivo hasta amarillo dependiendo del cultivar.

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Semillas:
Pueden ser de forma cnica o triangular, de 3 a 4 mm
de base y 3 a 4 mm de altura, las cuales estn
cubiertas por una membrana fina y blanquecina,
debajo de esta se encuentra una capa roja y carnosa en
donde se encuentran los pigmentos colorantes o tinte.
Conforme madura el fruto aparecen en la superficie
de las semillas en papilas rojas que llegan a cubrirlas
por completo. El pigmento que se encuentra en las
semillas constituye alrededor del 4-5% del peso total
de las mismas.

ZONAS DE PRODUCCION: El Per ofrece condiciones ecolgicas ptimas para su

cultivo en la costa, valles interandinos y en la selva. En la costa: en huertos familiares desde
Tumbes hasta Moquegua. En la Ceja de Selva: Tingo Mara, Satipo, Apurimac, Cusco y
Cajamarca, tambin en huertos pequeos incluso en Selva Baja.
A nivel mundial se cultiva en Kenia, India, Ecuador, Brasil, Repblica Dominicana,
Colombia, Bolivia, Blice, Costa de Marfil, Costa Rica, Guatemala, Guyana, Hait,
Jamaica, Mxico, Sri Lanka, Surinam, Angola, Nigeria, Tanzania, Filipinas, Hawai
FUNDAMETO SOBRE LA EXTRACCION DEL COLORANTE
Los colorantes son sustancias de color intenso que puede usarse para producir un alto grado
de coloracin cuando se dispersan en otros materiales o se hacen reaccionar con los mismos
mediante un proceso que, cuando menos temporalmente, destruye la estructura cristalina de
la sustancia. Este ltimo punto es la caracterstica que distingue a los colorantes de los
pigmentos, que casi siempre se aplican en forma de agregados a cristales insolubles.
La mayora de los colorantes naturales son de origen vegetal; pueden ser compuestos puros
o productos de extraccin. Estos ltimos son obtenidos de materia primas alimentarias y
pueden ser asociadas en otras molculas. Entre los ms importantes encontramos a los
carotenoides, que son un grupo de compuestos solubles en lpidos, ampliamente
distribuidos en el reino vegetal. Tienen dos funciones, principales en las plantas durante la
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fotosntesis y como materia colorante en flores y frutos, aparecen como flores amarillas,
mientras que en los frutos son tambin de color rojo o naranja.
La bixina es el principal pigmento de achiote, es un carotenoide natural soluble en aceite
que se forma naturalmente en la superficie de la semilla de Bixa orellana L.
Este pigmento natural se puede obtener mediante separacin por mtodos de
cromatografa. Su punto de ebullicin es de 198 C. Es soluble en acetona, cloroformo y
soluciones acuosas alcalinas, es soluble en agua, ligeramente soluble en alcohol etlico
propilenglicol, etc.
La bixina es muy estable entre 60-80 C e inestable por encima de 80 C el colorante
crudo es de color rojo anaranjado y posee un color amargo. Existen preparaciones de
Bixina, los extractos solubles en agua, la norbixina es muy soluble en agua, la elaboracin
de soluciones (0.5 4% de norbixina) por hidrolisis alcalina es una prctica comercial
usual y es frecuente mente llamado annato de simple poder.
El mtodo de extraccin del pigmento denominado solucin de Hidrxido de Sodio, se
realiza a travs de una reaccin qumica, donde un tomo de hidrogeno del grupo carboxilo
del compuesto de bixina es remplazado por un tomo de sodio de Hidrxido de Sodio
formndose una sal llamada bixinato de sodio, luego se acidifica la solucin de bixina de
sodio con cido clorhdrico al 1.5N para poder lograr precipitar un colorante constituido por
bixina.
La norbixina es un pigmento carotenoide soluble en agua (Hidrosoluble) formado de Bixina
mediante hidrolisis alcalina
COLORANTES (Bixina y Norbixina).
Hay dos productos principales de achiote, la Bixina y la Norbixina, el pigmento se
encuentra en la superficie de la porcin carnosa (arilo Rojo- Naranja) que envuelve a la
semilla de achiote. Son compuestos algo diferente qumicamente entre ellos, siendo la
Bixina soluble en las grasa e insoluble en el agua, y Norbixina en la inversa, el aceite
extrado de semilla es la principal fuente de los pigmentos Bixina y Norbixina, clasificados
como carotenoides.
Como el resto de los carotenoides, los extractos de achiote son susceptibles a la
degradacin oxidativa. La prdida del color tambin ocurre por la exposicin prolongada a
la luz, temperatura elevada y la presencia de dixido de sulfuro (Preston y Richard, 1980);
desde que se conoce la Bixina en la naturaleza, su estereoqumica a sido objeto de
investigacin.
La Bixina es insoluble en agua ligeramente soluble en etanol y fcilmente soluble en ter y
en los aceites. Su espectrometra mxima en Cloroformo es de 502 Nm, y de la Norbixina
en solucin diluida de KOH es de 482 Nm (Norma oficial Mexicana NOM 119-ssa1
1994)

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Bixina

qumica y
cis- Bixina C24H30O4

Formula
estructura:

Norbixina

Formula
qumica y estructura: cis- Norbixina C24H28O4

MATERIALES Y METODOS.

50 g. de semilla de achiote
Balanza analtica
Estufa
Centrifuga
Cocina
Olla
NaOH al 1% (100mL)
HCl 1.5 N (20mL)
Agua destilada

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DIAGRAMA DE FLUJO PARA LA EXTRACCION DE LA BIXINA

(Mtodo de solucin alcalina)
SEMILLAS DE
ACHIOTE

SELECCION

NaOH 1% 20mL

EXTRACCION 1

EXTRACTO 1

EXTRACCION 2

EXTRACTO 2

NaOH 1% 20mL

EXTRACCION 3

EXTRACTO 3

HCl 1.5N 9mL

PRECIPITACION
CIDA

NaOH 1% 20mL

SEPARACION

LAVADO

CENTRIFUGACIO
N
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SECADO Y
MOLIENDA
NORBIXINA

Descripcin de diagrama de flujo para la extraccin de la Bixina.

Seleccin.- se eliminaron las semillas negras hmedas y fermentadas y con rasgos de
enfermedad
Extraccin 1: Se realiza la primera extraccin del pigmento utilizando 40mL y 1mL de
NaOH al 1% para solubilizar fcilmente el principio colorante del achiote, agitar
constantemente a temperatura ambiente durante 10 min. Hasta agotar la semilla.
Extraccin 2: A los slidos insolubles (semillas desgastadas) se le realiza la segunda
extraccin del pigmento utilizando 30mL de agua y 20mL de NaOH para solubilizar la otra
parte de colorante del achiote. Agitando constantemente a temperatura ambiente durante
10min hasta agotar la semilla.
Extraccin 3 A los slidos insolubles (semillas desgastadas) se le realiza la tercera
extraccin del pigmento utilizando 30mL y 20mL de NaOH para ultima extracciones
colorante, agitando constante mente a temperatura ambiente durante 15 min.
Separacin: luego se procede a separar la solucin del extracto llamado solucin de
Bixinato de Sodio de las semillas agotadas y se lav con 50mL de agua destilada (4 veces),
con la finalidad de arrastrar los restos de colorante adheridos a la semilla.
Filtrado: Se filtr al vaco, se lav con agua destilada y se clarifico para eliminar los restos
de sales que contuvo la Bixina por el NaOH.
Centrifugacin. Se procedi a centrifugar despus de haber agregado el HCl y reducido el
PH hasta 2.9 la cual es su punto isoelctrico, con la finalidad de poder precipitar la Bixina
durante la centrifugacin a 4000Rpm durante 15min.
Secado: Se sec el slido precipitado a temperatura de 70C por 30 min.
Molido: luego de todas estas operaciones se procede a moler la Bixina con la finalidad de
obtener una granulometra ms fina y de fcil solubilizaran como colorante.
RESULTADOS:
PESO
COLOR

Rojo - Anaranjado

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PH INICIAL
PH FINAL
GASTO
RENDIMIENTO

8.7
2.9
9mL
4.4%

Resultados de las muestras colocadas a la estufa a 70C x 30 min

Placa
Peso Placa + Muestra Peso Placa
Peso Muestra
Placa N1
Placa N 2
Placa N 3
Placa N 4

Rendimiento

DISCUSIONES.
Se pudo determinar que es un carotenoide acido, y que su punto isoelctrico es de
2.9 pH, que permite su extraccin (A cubero, 2002) el cual tambin puede ser
afectado por los excesos de calor y luz.
En el presente trabajo se realiz la extraccin del colorante de achiote (Bixina y
Norbixina) mediante el mtodo de Solucin Alcalina, Sin embargo, los principales
mercados de exportacin (Estados Unidos, Europa y Japn) desean que se eliminen
los mtodos de extraccin que utilizan productos qumicos (Liceras, 1988). Se
estn optando por el uso de enzimas (pectinasas, celulasas, hemicelulasas) que
degradan la pared celular, facilitara la extraccin acuosa del colorante (Godfrey,
1983). Estas enzimas que actan sobre componentes insolubles tales como
celulosa, hemicelulasas y pectina permitiran obtener un colorante (annato) de
mayor pureza y calidad. Asimismo, permitira dejar de lado las sustancias qumicas
utilizadas actualmente en los mtodos de extraccin industriales.
Segn otras investigaciones lic. Olga Murillo. El procedimiento de extraccin
normalmente utilizada por los productores rurales consta de las siguientes etapas:
Extraccin: las semillas se cocinan en agua caliente por un periodo hasta de 24
horas
Filtracin: los tejidos vegetales se separan de la solucin acuosa coloreada
mediante filtracin mecnica. Los residuos se lavan con abundante agua, para
separar la mayor cantidad posible de colorante de las semillas.
Concentracin: se lleva a cabo con la finalidad de reducir el contenido de
humedad y concentrar el del colorante.

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Considerando los procedimientos realizados en este trabajo, podemos apreciar, que
nuestro procedimiento es ms complejo que el mtodo emprico encontrado, es por
ello que la obtencin de Norbixina de manera emprica no es tan recomendable,
porque los rendimientos de extraccin son bajos, ya que se utiliza el agua como
disolvente en el cual la Norbixina es poco soluble, esta a su vez se degrada por
efectos de las altas temperaturas aplicadas durante la extraccin, lo que no sucede
con nuestro mtodo al mantener controlada la temperatura. La calidad del colorante
se encuentra estandarizada.
Observamos que luego de haberle secado tiene un alto poder colorante del mismo
modo una buena estabilidad, propiedades de alta resonancia que se deben al grupo
carbonilo y sus dobles enlaces conjugados (Guy Linden y Denis Lorient).
Caractersticas fisicoqumicas de la semilla de achiote.
La composicin tanto qumica como nutricional de la semilla de achiote es muy
variada, como puede observarse en la siguiente tabla
Tabla 1 Composicin qumica, nutricional de la semilla y del colorante de achiote
Composicin qumica (%)
Composicin (mg/100g) composicin
Humedad
8.0 13.0
Calcio
7
Protenas
12.3 13.2
Protena
13 -14.24
Fosforo
10
Pectina
0.23
Celulosa
13.8
Hierro
1.4
Carbohidratos 39.91 47.9
Fibra Cruda
18.48
Vitamina A
45 mg
Cenizas
5.44 6.92
Almidones
11.45
Riboflavina 0.2
Taninos
0.33 0.91
Carbohidratos 39.91
cido
12.5
Pentosanos
11.35 14.97
totales
Ascrbico
Energa (kcal)
54
Tiamina
0.39
Carotenoides
1.21 2.30
Ceniza
4.50 7.97 Niacina
1.46
Beta-Caroteno 6.811.30 mg
Fuente Jaramillo.M C. A. y Muoz. M. O. A. (1992) Medellin. Universidad. Facultad
Nacional de Minas.
Mediante este cuadro se puede ver todo el valor nutricional que pose esta semilla
del cual no solo se puede extraer colorantes si no que tambin se puede aprovechar
en la extraccin de otro de sus componentes, ejemplo en su concentracin de
protenas, etc.
CONCLUSIONES.
Se pudo lograr la extraccin del colorante de achiote denominada Bixina
mediante el mtodo de solucin alcalina.

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De las semillas de achiote (Bixa Orellana) se obtuvo un compuesto qumico
llamado Nor-Bixina la cual es materia prima de colorantes ampliamente
utilizados en la industria alimenticia.
Se pudo lograr extraer cantidades de 0.8g, 0.3g, 0.5g, y 0.6g de Bixina en
cuatro muestras respectivamente obteniendo un rendimiento total de 4.4
respecto a la materia prima inicial de 50g.
El color rojo del achiote o annatto se debe a varios compuestos
carotenoides, principalmente apocrtenos, que se encuentran en la semilla.
La Bixina es el ms cotizado e importante de stos. La Bixina es una
sustancia cristalina de color rojo oscuro, soluble en alcohol, aceites y grasas
e insoluble en agua. Tambin se encuentran pequeas cantidades de isobixina y norbixina; esta ltima, de color amarillo y soluble en agua e
insoluble en grasas, tambin es un colorante con valor comercial.
Es posible aumentar la pureza del annato obtenido por extraccin alcalina,
realizando una hidrlisis previa del extracto.

BIBLIOGRAFIA
Cubero, A; Monferrer, A y Villalta, J. 2002 aditivos alimentarios .Tecnologa de
Alimentos. Espaa, Editorial Mundi Prensa. Madrid.
Lic. Olga Marta Murillo G. Tecnologa de Alimentos Direccin de Mercadeo.
Agroindustria rea de Desarrollo de Producto. Disponible en la web:
http://www.mercanet.cnp.go.cr/Desarrollo_Agroid/documentospdf/Achiote_FTP.pdf
Guy Linden y Denis Lorient, BIOQUIMICA AGROINDUSTRIAL, Acriba S:A
ZARAGOZA
Hernndez, G. Tirado, G. Juan, M. y otros (2002) Obtencin del colorante de la
semilla de achiote (Bixa Orellana) utilizando microorganismos celulticos.
Universidad Autnoma Agraria Antonio Narro. Universidad Autnoma de
Coahuila

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ANEXOS
PROCEDIMIENTO
PESADO DE LA MATERIA PRIMA

BATIDO CON AGUA CON NaOH X

10MIN

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MEDIANTE EL BATIDO SE LOGR EL DESPRENDIMIENTO DEL COLORANTE (BIXINA)

EQUIPO DE FILTRACION AL VACIO Y EXTRACTO OBTENIDO

SOLUCIONES
BIXINATO
DE
GRANOS DE ACHIOTE
DESPUES DEDE
LAS
3
EXTRACCIONES CON
NaOH
GRANOS
SODIO
DE LAS TRES
EXTRACCIONES

PREPARANDO LAS MUESTRAS PARA LA

CENTRIFUGACION
MUESTRAS
MUESTRAS
CENTRIFUGADAS
PUESTAS A SECAR
A 4000
EN