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CARACTERIZACIN BIOQUMICA PARCIAL DE LA

coleccin de Elaeis oleifera de Cenipalma proveniente


de la Amazona colombiana

PARTIAL BIOCHEMICAL CHARACTERISATION OF


Cenipalma Elaeis oleifera Collection from Colombian
Amazonas

RESUMEN
Investigador Titular, Director del
Laboratorio de Caracterizacin
Molecular de Cenipalma. Lder y
ejecutor responsable del proyecto:
Caracterizacin bioqumica y molecular del banco de germoplasma
de
[H.B.K.] Corts
de Cenipalma (Colciencias,
cdigo 7262-12-13788).
: pedro.rocha@cenipalma.org
Investigador, Laboratorio de
Caracterizacin de Aceites de
Cenipalma,
fausto.prada@cenipalma.org
Director de la Divisin de
Variedades de Cenipalma.
:
leonardo.rey@cenipalma.org
Investigador, Divisin de Variedades
de Cenipalma.

HPLC, diversidad bioqumica,


vitamina E, carotenos,
palma de aceite
HPLC, chemical diversity,
vitamin E, carotenes, oil palm
Recibido: 10 octubre 2006
Aprobado: 17 octubre 2006

La palma americana o nol (Elaeis oleifera [H.B.K.] Corts) se ha constituido en un


recurso biolgico estratgico para el desarrollo de la palmicultura colombiana. Debido
al potencial que representa E. oleifera para el mejoramiento de la competitividad y
sostenibilidad del cultivo, Cenipalma ha venido realizando actividades de prospeccin
de esta especie en la Amazonia colombiana. Con el soporte presupuestal de diferentes
entidades y atendiendo a la normatividad legal colombiana para acceso a recurso
biolgico, se conform una coleccin de materiales E. oleifera, una de las colecciones
de esta especie ms grande en el mundo, con 1.700 genotipos (78 accesiones).
Recientemente, y con el apoyo de Colciencias, esta coleccin de germoplasma se ha
caracterizado parcialmente en diversos mbitos.
En le contexto bioqumico, se implementaron metodologas para la determinacin y
cuantificacin de vitamina E (Dtocoferol) y D y Ecaroteno (pro-vitamina A) en fololos
de hojas de palmas mediante cromatografa lquida de alta eficiencia (HPLC). Se
realizaron cuantificaciones en 52 materiales. Se encontraron contenidos variables de
carotenos (557 a 1.612 mg/kg) y vitamina E (56 a 359 mg/kg). Los valores aqu
presentados permiten concluir que la variabilidad metablica de los materiales presentes
en nuestra coleccin es muy alta cuando se compara con la diversidad bioqumica
reportada para materiales E. oleifera como para E. guineensis. Se determinaron
algunos materiales que pueden incorporarse al programa de mejoramiento gentico
de E. guineensis.

S UMMARY
The American oil palm (Elaeis oleifera) is a strategic resource for the development of
the Colombian oil palm sector. Due to the potential of this species for improving competitiveness and sustainability of the oil palm cultivars, Cenipalma has carried out prospecting activities of E. oleifera in the Colombian Amazonia. With the financial support
of different entities and attending the Colombian law for accessing to biological resources, an E. oleifera core collection was established. Nowadays, the bank includes
78 accessions; therefore it is the third biggest collection of this species in the world.
Recently and with the financial support of Colciencias, this germplasm collection has
been partially characterised at different levels.

PALMAS Vol. 27 No. 3, 2006

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P. Rocha; F. Prada; L. Rey; I. Ayala

At biochemical level, several methodologies were implemented for the detection and quantification of
vitamin E (Dtocopherol), D and Ecarotenes (pro-vitamin A) in leaflets from oil palm leaves. Quantification of 52 materials showed variable contents of carotenes (557 to 1,612 mg/kg) and vitamin E
(56 to 359 mg/kg). Into our knowledge, the obtained values reported here allow concluding that the
biochemical variability of the oil palm materials present in Cenipalmas germplasm collection is
higher than the diversity reported for other existing germplasm banks including E. oleifera and E.
guineensis. Some E. oleifera materials were selected in order to be incorporated into the E. guineensis
breeding program

INTRODUCCIN
En Colombia, el cultivo de la palma de aceite (Elaeis
guineensis Jacq.) se ha constituido en la opcin de
desarrollo de algunas reas rurales y, en consecuencia, de bienestar para sus habitantes (Fedepalma,
2004). El inters del sector palmero por aumentar su
productividad y competitividad, con respecto a otras
fuentes vegetales de aceite, ha hecho que Cenipalma
establezca un programa de mejoramiento gentico
de E. guineensis (palma de aceite o palma africana),
con los siguientes objetivos, entre otros: i) generar
variedades de alta productividad, adaptadas a las
condiciones medioambientales de cada zona palmera
colombiana, ii) generar materiales con tolerancia o
resistencia a enfermedades y iii) desarrollar materiales
con mayor calidad y cantidad de aceite. Sin embargo,
la base gentica de los materiales E. guineensis es
estrecha, debido a que los cultivos de palma en el
mundo, incluidos los de Colombia (Bastidas et al.,
2003), se derivan de slo cuatro palmas originalmente
sembradas en Bogor (Corley y Tinker, 2003). Adems,
los sistemas de seleccin disponibles son lentos. Por
tanto, se hace necesario explorar nuevas fuentes de
variabilidad gentica y aplicar sistemas de seleccin
que permitan identificar y utilizar las plantas de
inters como parentales en un programa de cruzamientos controlados.
Uno de los elementos que definen la calidad de los
aceites es la composicin relativa de los cidos grasos
y los nutrientes benficos para la salud humana. El
aceite de palma es una grasa semislida rica en
triglicridos (95%), esto es molculas de glicerol
esterificadas con tres cidos grasos y con bajas
cantidades de compuestos liposolubles. Los principales cidos grasos presentes en el aceite de palma
son 18:0 esterico (3,5-6,5%); 18:2 linoleico (6,5-

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PALMAS

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12,0%); 14:0 mirstico (0,5-2,0%); 18:1 oleico (3644%) y 16:0 palmtico (40-48%) (Firestone David,
1999). Algunos de los compuestos liposolubles incluyen G-, E, J- y Dtocotrienoles (70%) y G-, E, J- y
Dtocoferoles (30%) conocidos conjuntamente como
vitamina E, carotenos (D y Ecaroteno principalmente), fitoesteroles y trazas de metales (Choo et al.,
1998; Sundram et al., 2003).
Los tocoferoles (vitamina E) son compuestos con
propiedades antioxidantes que permiten atrapar los
nocivos radicales libres que han sido relacionados con
enfermedades cardiovasculares, el cncer y el envejecimiento prematuro (Gutteridge y Halliwell, 1994).
En el caso de los fitoesteroles, se ha demostrado que
reducen significativamente el colesterol en la sangre,
proveniente de las lipoprotenas de baja densidad
(Ostlund et al., 2002) que concentran la mayor cantidad del colesterol que se puede degradar causando
daos en el organismo.
Aparte de ser una materia prima tradicionalmente
esencial en numerosas industrias, y por encima de
las crticas infundadas de otros sectores de oleaginosas, el aceite de palma proveniente de E. guineensis ha sido reconocido como benfico para la
salud y nutricin humanas (Bayorh y Abukhalaf, 2003;
Sundram et al., 2003;). En consecuencia, el mantenimiento o mejora de la calidad del aceite de palma
se constituye en un objetivo perseguido por los
programas de mejoramiento de esta especie (Mohd
Din et al., 2002; Rey et al., 2003; Madon et al., 2006).
Aunque, E. guineensis produce aceite de calidad,
recientemente se ha reportado la excelsa calidad del
aceite extrado de la palma americana Elaeis oleifera
(Choo et al., 1998, Rey et al., 2003, Sundram et al.,
2003). Dicho aceite posee valores de ndice de yodo
entre 78 y 80. Rango alto comparado con los valores

Caracterizacin bioqumica parcial de la coleccin de Elaeis oleifera de Cenipalma

de 49 a 55 reportados para el aceite proveniente de


E. guineensis. Los valores mencionados para E.
oleifera representan contenidos elevados de cidos
oleico y linoleico y un bajo contenido de cido
palmtico y otros cidos grasos saturados (Sundram
et al., 2003).
E. guineensis es de origen africano y la palma
americana o nol (Elaeis oleifera [H.B.K.] Corts) es
un pariente cercano, el cual se ha reconocido como
una posible fuente de variabilidad de caractersticas
morfoagronmicas y bioqumicas que podran ser
introducidas a E. guineensis (Amblard et al., 2004;
Corley y Castro, 2003; Corley, 1993; Meunier, 1995,
1993, 1991). La importancia de E. oleifera est en
que puede cruzarse con E. guineensis y producir
hbridos (OxG). As, algunos materiales E. oleifera de
origen brasilero (Coari) y colombiano (Sin) se han
empleado como madres en cruces con E. guineensis
y se han generado hbridos interespecficos OxG
(Torres et al., 2003; Herrera y Colmenares, 2002)
con caractersticas de inters agronmico mejoradas,
como lento crecimiento del tallo y aceite con mayores
contenidos de vitamina E y provitamina A (carotenos),
entre otras (Mora, 2002; Rey et al., 2003 y 2004), y la
tolerancia (si no resistencia) a algunas de las
enfermedades ms devastadoras del cultivo en Colombia como es el Complejo de Pudricin del Cogollo
(PC) (Zambrano, 2003; Torres et al., 2003).
Debido al potencial que representa esta especie para
el mejoramiento de la competitividad y sostenibilidad
del cultivo, desde hace algunos aos, Cenipalma, el
centro de investigacin del sector palmicultor colombiano, ha venido realizando actividades de prospeccin y recoleccin de E. oleifera en la Amazonia
colombiana (Rey et al., 2003 y 2004). El objetivo de
tal actividad fue recolectar la mayor diversidad
gentica representativa de esta especie y as generar,
en un futuro cercano, materiales que incorporaran
caractersticas de inters, incrementando as el valor
y la sostenibilidad del cultivo de la palma de aceite en
Colombia. Como resultado de estas actividades y con
el soporte presupuestal de diferentes entidades
(Fontagro, Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural, Fondo de Fomento Palmero y Colciencias), que
han dado continuidad a la experimentacin, se
conform una coleccin de germoplasma de E.
oleifera en el Campo Experimental Palmar de La

Vizcana (Barrancabermeja, Santander). Este banco


cuenta, a la fecha, con 78 accesiones, convirtindose
as en la tercera coleccin de germoplasma ms
grande de esta especie en el mundo.
Recientemente, Colciencias apoy el desarrollo del
proyecto Caracterizacin bioqumica y molecular del
banco de germoplasma de E. oleifera de Cenipalma
(cdigo 7262-12-13788). Como resultado de la experimentacin llevada a cabo en este proyecto, en este
artculo se presenta la informacin relacionada con
la caracterizacin bioqumica que permiti la deteccin de compuestos importantes tales como vitamina
E y carotenos, presentes en fololos de materiales E.
oleifera. Los resultados de este proyecto se constituyen en un ejemplo de las estrategias de investigacin
multidisciplinarias y de la utilizacin racional de la
biodiversidad colombiana para apoyar el incremento
de competitividad y la bsqueda de la sostenibilidad
de uno de los sectores productivos de mayor dinamismo en Colombia.

METODOLOGA
Los genotipos que conforman el banco de germoplasma fueron recolectados en la Amazonia colombiana previa autorizacin de acceso a recurso biolgico otorgada por resolucin de Corpoamazona (Colombia). Los materiales recolectados fueron llevados
y mantenidos en el Campo Experimental Palmar de
La Vizcana ubicado en Barrancabermeja (Santander).
Los anlisis se hicieron en el Laboratorio de Caracterizacin de Aceites (LCA) de Cenipalma.

Muestreo de los fololos para el anlisis de


vitamina E
Los fololos para la implementacin de la metodologa
se recolectaron en el Campo Experimental Palmar
de La Vizcana en horas de la maana con temperatura
media de 28,4C y humedad relativa de 81% (estacin
La Lizama, Ideam). Se tomaron fololos de las hojas
1, 3, 7 y 9; se muestrearon tres zonas de cada hoja
(apical, media y basal) y se tomaron tres fololos por
cada zona. Los fololos fueron almacenados en hielo
seco hasta su correspondiente anlisis. Para la evaluacin de los materiales del banco de germoplasma
que se encontraban en campo, se muestrearon
fololos frescos de la hoja 7 y para palmas de vivero

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P. Rocha; F. Prada; L. Rey; I. Ayala

se tomaron fololos de la hoja 3. Los fololos recolectados se almacenaron a 4C hasta su correspondiente anlisis. La recoleccin de las muestras se
realiz de forma aleatoria y en las mismas condiciones
para disminuir efectos climticos, de acuerdo con la
agrupacin por accesiones establecida para los experimentos del banco de germoplasma.

Extraccin de a-tocoferol, - y -caroteno


La extraccin se bas en la metodologa descrita por
Pascal et al., (2004) y Rodrguez (1999) con modificaciones hechas en el laboratorio. Despus de realizar
la toma en campo y mantener el material vegetal
refrigerado (4C), los fololos frescos (FF) se analizaron
individualmente. Se tom la parte central del fololo
fresco y se cort en trozos pequeos. El material vegetal se homogeniz y se tom una muestra representativa de 150 50 mg, la cual se adicion a un
mortero que contena 150 5 mg de arena blanca.
Previamente lavada con una solucin de hidrxido
de sodio (Merck, Darmstadt, Alemania) al 1%, purgada
con agua destilada y secada en horno a 105 5C
durante 12 horas. El material se macer en el mortero
con la arena hasta pulverizacin. Para extraer los
analitos, se adicionaron 2 mL de cloroformo (grado
analtico, Merck, Darmstadt, Alemania). El contenido
se trasvas cuantitativamente a un tubo de 15 mL
(Falcon) y se realizaron sucesivas extracciones con 2
mL hasta completar un volumen final de 10 mL. La
mezcla se agit en vortex a 2.400 rpm durante 30
segundos y se centrifug a 4.000 rpm durante 2
minutos, a temperatura ambiente. Una alcuota de 1
mL de la solucin se filtr en membrana de 0,45 Pm
y 20 PL de la solucin filtrada se inyectaron al
cromatgrafo para su respectivo anlisis.

Anlisis cromatogrfico de -tocoferol, - y


-caroteno
La determinacin de los contenidos de vitamina E y
carotenos se realiz de manera simultnea colocando
los detectores en lnea. El anlisis se realiz en un
cromatgrafo lquido de alta eficiencia (MerckHitachi
serie LaChrom), software D7000 v.4.0, equipado con
degasificador (L7612), bomba (L7100), inyector
automtico (L7200), horno (L7300), detectores en
lnea de fluorescencia (FL, L-7485) programando la
emisin a 330 nm y la excitacin a 290 nm para

38

PALMAS

Vol. 27 No. 3, 2006

vitamina E y UVVis (L7400, 450 nm) para los


carotenos. La separacin de los compuestos se realiz
en una columna Chromolith Performance RP18e 2
mm, 50 x 4.6 mm D.I. (Merck Darmstadt, Alemania).
La temperatura de trabajo fue de 30C. La elucin de
los compuestos se realiz usando metanolagua en
una proporcin 80:20% v/v en modo gradiente a 1,6
mL/min hasta 100% de metanol a los 7,5 min. Se
dej constante hasta los 14 min y posteriormente se
regres a la mezcla 80:20 % v/v inicial de metanolagua. El metanol fue grado HPLC (Merck Darmstadt,
Alemania) y el agua tipo HPLC se obtuvo usando un
sistema purificador MilliQ Academic (Millipore, So
Paulo, Brasil).

Cuantificacin de -tocoferol, - y -caroteno


Para la cuantificacin de Dtocoferol y D y Ecaroteno se emple el mtodo de estndar externo. La
cuantificacin del D y Ecaroteno se realiz usando
el factor de respuesta del Ecaroteno. Los estndares
de Dtocoferol (99%) y Ecaroteno (99%) se obtuvieron de SigmaAldrich (Steinheim, Alemania).

RESULTADOS Y DISCUSIN
Uno de los pilares de cualquier programa de fitomejoramiento es contar con una fuente de genes o caractersticas. Por tal razn, los bancos de germoplasma
se constituyen en una herramienta valiosa que concentran la mayor representacin de la variabilidad
gentica disponible. Para que sea til al mejorador,
un banco de germoplasma tiene que estar caracterizado en detalle. Adems, el fitomejorador debe contar
con sistemas eficientes y rpidos de seleccin de
materiales que permitan incorporarlos en programas
de mejoramiento que lleven a la produccin de nuevas
variedades. En los experimentos aqu descritos se
reportan los resultados de la caracterizacin bioqumica parcial de la coleccin de germoplasma de E.
oleifera de Cenipalma.
En el contexto bioqumico, con el presente proyecto
se implementaron metodologas para la determinacin y cuantificacin de vitamina E (D tocoferol) y
carotenos (D y E) en fololos de hojas de palmas
(Figura 1). Dentro del desarrollo metodolgico se
usaron columnas cromatogrficas monolticas que
han mostrado mayor eficiencia en la separacin y

Caracterizacin bioqumica parcial de la coleccin de Elaeis oleifera de Cenipalma

1.500

D- tocoferol

Intensidad (mV)

2.000

1.000
500
0

6 7 8 9 10 11
Tiempo de retencin, tR (min)

12

13

0,25
0,20
D- caroteno
E- caroteno

Intensidad (UA)

0,30

0,15
0,10
0,05
0,00

4
6
8
10
12
Tiempo de retencin, tR (min)

14

16

. Cromatogramas obtenidos en las determinaciones de


(A) Dtocoferol y (B) D y Ecaroteno en
fololos de
mediante HPLC. Condiciones
cromatogrficas en la seccin de metodologa.
tiempos ms cortos de anlisis (Urbnek et al., 2006).
La caracterstica especial de los poros permite trabajar
a flujos de fase mvil desde 1 hasta 9 mL/min o usar
columnas ms cortas como el caso de esta investigacin (50 x 4,6 mm) lo cual permiti hacer los
anlisis en perodos mximos de 15 min, teniendo
en cuenta que las muestras de material vegetal son
susceptibles a la oxidacin. Los resultados de la
implementacin en la determinacin de Dtocoferol
y D y Ecarotenos se muestran en la Tabla 1.

hizo que la preparacin de la muestra se


viera facilitada y no se realizaran etapas
tediosas de purificacin, conllevando a
prdida del analito y disminucin de la
precisin del mtodo. La selectividad del
detector permiti la determinacin rpida
y confiable del Dtocoferol en la mezcla
compleja (Figura 1). Los detectores mostraron respuesta lineal en los rangos
evaluados, 0,5-10 y 5,0-200 mg/L para D
tocoferol y Ecaroteno, respectivamente.
El nivel mnimo de deteccin (NMD), que
es la concentracin mnima detectable en
el mtodo, para el Dtocoferol fue de 0,08
mg/L a una relacin seal/ruido (S/R) de 3
y de 0,1 mg/L para el Ecaroteno (S/R =
2). Los niveles mnimos de cuantificacin
(NMC), que es la concentracin mnima
cuantificable en el mtodo, se us dos
veces el NMD en los dos detectores, lo que
corresponde a 0,16 y 0,20 mg/L para el Dtocoferol y el E-caroteno, respectivamente.

Tradicionalmente, el contenido de aceite


y su calidad se determina en los frutos.
Sin embargo, debido a que i) se desconoce
el manejo de estos materiales silvestres
que estn en un ambiente completamente diferente
a su entorno original, ii) estos materiales no se
comportan igual que los hbridos OxG o sus parientes
E. guineensis, en cuanto a tiempos de germinacin,
floracin y fructificacin y iii) se encuentran pocos
reportes previos del anlisis de vitamina E y carotenos
en fololos de palma de aceite, se hizo necesario
cuantificar algunos de los componentes de inters
an en ausencia de frutos, es decir, en los fololos de
las palmas que se encontraban en edades tempranas
de siembra en campo e incluso en etapa de vivero.

La configuracin del equipo cromatogrfico, con los


detectores de UV-Vis y
. Parmetros obtenidos en la implementacin de la metodologa para
FL en lnea, permiti
determinar Dtocoferol y D y Ecarotenos en fololos de palma
hacer las determina

ciones de Dtocoferoles
Detector
Fl
u
orescenci
a
UltravioletDvisibl
e
y D y Ecarotenos en
Rango
de
cal
i
b
raci

n
(mg/L)
0,5-10
5,0-200
una misma separacin
Ecuacin(y=concentracin; x=rea)
y = 1,24E-6x 0,019
y = 1,20E-5x 0,25
cromatogrfica. El uso
Coeficiente de correlacin (r2)a
0,999
0,999
de un detector de FL NMD (mg/L)
0,08b
0,1c
para la determinacin de NMC (mg/L)
0,16
0,2
b
c
vitamina E (Dtocoferol) aLas curvas se realizaron con cinco puntos
S/R = 3
S/R = 2

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PALMAS

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P. Rocha; F. Prada; L. Rey; I. Ayala

Por esta razn, se realizaron experimentos para


determinar la hoja y la seccin a muestrear dentro de
la misma (Tabla 2).

mismas condiciones de una palma de E. oleifera del


banco de germoplasma. Se cuantificaron los contenidos de Dtocoferol y D y Ecaroteno (Figura 2).
Se observaron mayores contenidos de Dtocoferol
Se emplearon cuatro hojas en palmas jvenes (palmas
en las hojas maduras para esta edad de la palma (hoja
de tres aos) para la determinacin de la zona (basal,
7 y 9), las cuales, metablica y fisiolgicamente son
media o apical) representativa para el muestreo en
ms activas. Adems, se observ un gradiente en las
las palmas de inters (Tabla 2). Los fololos frescos
concentraciones de este analito con mayor contenido
de las hojas se tomaron simultneamente y bajo las
en la zona apical, lo cual concuerda
con reportes previos realizados en
. Contenido de carotenos y vitamina E en fololos frescos
otras especies, en donde hojas
(FF) de distintas zonas (apical, media y basal) de
diferentes hojas de
. Experimento de
expuestas a mayores tasas de radiaestandarizacin de condiciones
cin incrementan los niveles de
vitamina E (Munn-Bosch y Alegre,
2002). Dentro de las de los resulta1
1
Apical
1
18
497
dos se sugiri determinar los conte2
1
Apical
2
21
649
nidos de vitamina E y carotenos en
3
1
Apical
3
27
680
fololos frescos de la seccin me4
1
Media
1
11
569
dia de la hoja 7 9 para palmas
5
1
Media
2
20
494
6
1
Media
3
12
428
sembradas en campo y en fololos
7
1
Basal
1
21
579
de la hoja 3 para palmas de vivero.
8
1
Basal
2
19
582
Con base en la implementacin de
9
1
Basal
3
21
556
la metodologa y con los resultados
10
3
Apical
1
88
894
11
3
Apical
2
75
899
obtenidos anteriormente, se deter12
3
Apical
3
59
775
min mediante HPLC la concentra13
3
Media
1
64
865
cin de carotenos y vitamina E en
14
3
Media
2
63
841
51 palmas, que correspondan a 20
15
3
Media
3
60
823
accesiones en las que se incluy un
16
3
Basal
1
56
800
testigo (Tabla 3). Se registraron
17
3
Basal
2
50
756
contenidos variables de carotenos
18
3
Basal
3
57
837
(557 a 1.612 mg/kg) y de vitamina
19
7
Apical
1
178
739
20
7
Apical
2
162
769
E (56 a 359 mg/kg) entre los dife21
7
Apical
3
205
707
rentes materiales analizados (Tabla
22
7
Media
1
137
827
3, Figura 1).
23
7
Media
2
153
910
Los valores encontrados para estos
24
7
Media
3
129
825
25
7
Basal
1
107
922
compuestos fueron levemente su26
7
Basal
2
90
916
periores (Tabla 3) a las muestras
27
7
Basal
3
83
918
empleadas para la implementacin
28
9
Apical
1
N.D.
N.D.
(Tabla 2). Sin embargo, estas dife29
9
Apical
2
235
744
rencias se esperaban, pues tanto la
30
9
Apical
3
297
740
vitamina E como los carotenos se
31
9
Media
1
169
957
han reportado como metabolitos
32
9
Media
2
76
976
cuya sntesis est ampliamente
33
9
Media
3
87
981
34
9
Basal
1
66
1.007
regulada por la planta durante sus
35
9
Basal
2
53
989
procesos de crecimiento y desa36
9
Basal
3
56
980
rrollo, por ejemplo, procesos como
ND. No determinado
senescencia foliar acompaada de

40

PALMAS

Vol. 27 No. 3, 2006

350
300
250
b
200
150
ef
100
ef fg
50 gh h h
0

a
cd

c
de

A M B A M B A M B A M B
1
3
7
9
Hojas por zonas

Carotenos (mg/kg)

Vitamina E (mg/kg)

Caracterizacin bioqumica parcial de la coleccin de Elaeis oleifera de Cenipalma

1.200
1.000
800 e
600
400
200
0

bc bc cd
f

ef

c ab

A M B A M B A M B A M B
1
3
7
9
Hojas por zonas

. Comparacin de los resultados de la determinacin de vitamina E (Dtocoferol) (2a) y


carotenos (D y E) (2b) en las hojas 1, 3, 7 y 9 de palma de aceite por zonas de
muestreo. A: Apical; M: media y B: Basal. Media desviacin estndar (n = 3).
degradacin de clorofilas y dao oxidativo de las
membranas. Las funciones de los tocoferoles en las
hojas de las plantas son complejas. Por ejemplo,
sirven como un antioxidante que, mediante interaccin con otras molculas, protege contra distintos
tipos de estrs abitico, entre los cuales se han
reportado condiciones de alta irradiancia, radiacin
UV-B, dficit hdrico, bajas temperaturas, sequa,
estrs por sales y ozono, etctera (Munn-Bosch y
Alegre, 2002; Collakova y DellaPenna, 2003).
Es de anotar que el hecho de que las determinaciones
de vitamina E realizadas sobre la misma palma y hoja,
pero en diferentes fechas, hayan presentado algunas
diferencias, dificulta el desarrollo de un modelo que
permita predecir el comportamiento de produccin
y calidad de aceite en los frutos de palmas en fases
adultas. Sin embargo, el hecho de detectar la presencia de carotenos (D y E) y de Dtocoferol en hojas
de palma de aceite confirma los resultados reportados
por Sundram y Gapor (1992) y hace pensar que es
cuestin de tiempo y de seguimiento, para determinar
los distintos puntos de informacin necesarios hacia
el desarrollo de un modelo que sea aplicable tanto
para actividades de seleccin de materiales como en
el contexto comercial.
El anlisis bioqumico de algunos genotipos de la
coleccin de germoplasma permiti definir tres
grupos de palmas con contenidos superiores de carotenos y de vitamina E (Figura 3). El grupo con ms
alto contenido de vitamina E est conformado por
nueve individuos cuyos contenidos son superiores a
250 mg/kg en la hoja analizada. El grupo con conte-

nidos medios est representado por 31 individuos con


valores entre 100 y 200 mg/kg y el grupo de materiales
con contenidos menores a 100 mg/kg integrado por
11 materiales. Con respecto al contenido de carotenos, un genotipo present cantidades menores a 600
mg/kg, y dos individuos exhibieron contenidos mayores a 1.200 mg/kg. La gran mayora de los materiales
analizados presentaron contenidos de carotenos
mayores a 600 y menores a 1.200 (Figura 3).
Particular inters se genera sobre un genotipo
(identificado como 8 en la Figura 3) que ocupa el
segundo lugar, entre los 51 individuos analizados, con
respecto al contenido de las dos molculas de manera
simultnea. Los materiales E. oleifera con altos
contenidos de vitamina E o carotenos sern seleccionados para ser empleados como progenitores en
los programas de mejoramiento orientados a obtener
palmas promisorias para la produccin de metabolitos
con fines farmacuticos, nutraceticos, etc. y con
caractersticas fisiolgicas deseables tales como mejor
adaptacin de los genotipos a condiciones biticas
adversas debida a los contenidos de vitamina E y carotenos (antioxidantes). La utilizacin de estos materiales solos o en cruces especficos con E. guineensis
permitirn generar material con valor agregado y de
importancia para la competitividad del sector.

CONCLUSIONES Y CONSIDERACIONES
FINALES
Si bien se ha reportado la extraccin de vitamina E
de fololos de E. guineensis con el objeto de emplear

Vol. 27 No. 3, 2006

PALMAS

41

P. Rocha; F. Prada; L. Rey; I. Ayala

los subproductos derivados del


cultivo (Sundram y Gapor, 1992),
el presente es el primer reporte con
respecto a la deteccin y cuantificacin de carotenos y vitamina E
en fololos de E. oleifera con el fin
de desarrollar un posible sistema de
seleccin temprana que pueda servir para acelerar el programa de
mejoramiento de palma de aceite.
La cuantificacin de carotenos en
hojas tambin permitir apoyar investigaciones enfocada a la identificacin de materiales tolerantes a
condiciones abiticas como los son
el estrs hdrico, estrs por alta radiacin y estrs por radiacin UV-B.
Es posible detectar carotenos y
vitamina E en fololos de palma
americana. Para el objetivo de este
proyecto, la metodologa de cuantificar estos compuestos en hojas
result en extremo valiosa y muestra su utilidad para el programa de
mejoramiento. Ciertamente la variabilidad de cantidades de vitaminas en los fololos de palma de
aceite es favorable para el proceso
de seleccin de materiales con
caractersticas mejoradas. Si bien
los contenidos de estas molculas
son altos, an es necesario esperar
a que dichas plantas produzcan
frutos. En un futuro (dependiente
de los ciclos propios de cada
palma) se espera poder realizar as
los anlisis de composicin de
aceite respectivos y con la cuantificacin de estas molculas en
frutos, determinar si existe o no
correlacin entre los contenidos
determinados en hojas y los registrados en frutos de las mismas palmas. En caso de que dicha correlacin sea positiva se estara abriendo
la posibilidad de hacer seleccin
temprana para calidad de aceite.

42

PALMAS

Vol. 27 No. 3, 2006

. Contenido de vitamina E (Dtocoferol) y carotenos (D y


E) en fololos frescos (FF) de hojas de diferentes
materiales
del banco de germoplasma

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51

E-16
E-16
E-16
E-16
E-16
E-16
S-12
S-12
S-12
S-12
S-12
S-12
S-17
S-17
S-17
S-17
S-17
S-17
S-24
S-24
S-24
S-24
S-24
S-24
SP-1
SP-1
S-16
S-16
T13 R4
T13 R4
T13 R4
T13 R4
T20 R4
T20 R4
T20 R4
T20 R4
LB
LB
BR5
BR5
TA67
TA67
CO3
CO4
Z
AR
ER5
C1-2
CCHI
ER81
CC5

7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
7
3
3
3
3
3
3
7
7
7
7
3
3
3
3
3

1
2
1
2
3
4
1
2
1
2
3
4
1
2
1
2
3
4
1
2
1
2
3
4
1
2
1
2
2
3
5
6
2
3
5
6
1
2
1
2
1
2
1
1
1
1
1
1
1
1
1

180
145
67
173
105
138
169
298
127
120
257
141
131
260
139
159
149
149
167
262
183
191
95
184
127
192
114
292
103
287
268
253
138
130
106
113
166
120
85
73
77
173
113
359
93
73
56
171
69
67
91

903
557
734
768
825
812
1.037
1612
910
967
998
965
1.029
1.252
977
973
930
970
887
1.201
901
918
861
843
1.013
1.061
1.105
895
885
1.037
852
1.203
885
880
1.029
832
641
750
1.149
1.163
1.135
959
999
1.011
944
917
1.084
704
892
818
908

Vitamina E (mg/kg)

Caracterizacin bioqumica parcial de la coleccin de Elaeis oleifera de Cenipalma

400
350
300
250
200
150
100
50
0

Vitamina E

44 8 28 30 31 20 14 11 32 26 22 24 21 1 4 42 48 7 19 37 16 18 17 2 12 15 6 33 13 34 25 9 38 10 27 36 43 25 5 29 23 45 51 39 41 40 46 49 50 3 47

Carotenos totales(mg/kg)

ID Muestra

1.800
1.600
1.400
1.200
1.000
800
600
400
200
0

Carotenos

8 14 32 20 40 39 41 27 47 26 30 7 13 35 25 44 43 11 15 16 18 10 12 42 45 17 22 46 9 51 1 21 28 49 19 28 33 34 23 31 24 36 5 50 6 4 38 3 48 37 2

ID Muestra

. Contenido de vitamina E (Dtocoferol, panel superior, A) y carotenos totales (panel inferior, B)


determinado mediante HPLC, en fololos de hojas de materiales de la coleccin de germoplasma
de
de Cenipalma provenientes de la Amazonia colombiana.
De manera adicional, el hecho de haber encontrado
tales metabolitos en las hojas, abre un campo de particular importancia para la utilizacin de subproductos.

AGRADECIMIENTOS
Los autores agradecen a Diana C. Buitrago por su
apoyo en el LCA e Ingrid Patricia Gonzlez por su
ayuda en campo. A Pedro Len Gmez Cuervo

(Cenipalma) y al Comit de Publicaciones de Cenipalma por la crtica de este manuscrito. Se agradecen


los valiosos comentarios de los evaluadores
externos. Esta publicacin ha sido posible gracias
al apoyo financiero de Colciencias (proyecto 726212-13788) y Fontagro (proyecto FTG/RF-99-02-RG).
La investigacin de Cenipalma es auspiciada por el
Fondo de Fomento Palmero administrado por
Fedepalma.

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44

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