Universidad Austral de Chile

Facultad de Ciencias Agrarias

Escuela de Agronoma

Efecto de azadiractina sobre polilla de la

manzana (Cydia pomonella L.) (Lepidoptera:
Tortricidae) criada en laboratorio

Memoria presentada como parte de los

requisitos para optar al ttulo de
Ingeniero Agrnomo

Fernanda de Groote Pez

Valdivia Chile
2010

PROFESOR PATROCINANTE:

____________________________________
Maritza Reyes C.
Ingeniero Agrnomo, M.Sc. Dr. Cs. Agr.
Instituto de Produccin y Sanidad Vegetal

PROFESORES INFORMANTES:

____________________________________
Laura Bhm S.
Ingeniero Agrnomo
Instituto de Produccin y Sanidad Vegetal

___________________________________
Miguel Neira C.
Ingeniero Agrnomo
Instituto de Produccin y Sanidad Vegetal

INDICE DE MATERIAS

Captulo

Pgina
RESUMEN

SUMMARY

INTRODUCCIN

REVISIN BIBLIOGRFICA

2.1

Polilla de la manzana

2.1.1

Ciclo biolgico

2.1.2

Dao

2.1.3

Importancia econmica

2.1.4

Manejo

2.1.4.1

Medidas preventivas

2.1.4.2

Control qumico

2.1.4.3

Uso de feromonas

10

2.1.4.4

Controladores biolgicos

10

2.1.4.5

Insecticidas microbiolgicos

11

2.1.4.6

Bio-insecticidas

11

2.2

Azadirachta indica A. Juss

12

2.2.1

Azadiractina

13

ii

2.2.2

Efectos insecticidas y modo de accin

14

2.2.2.1

Efecto antialimentario

14

2.2.2.2

Efectos fisiolgicos

15

2.2.3

Extractos

16

2.2.4

Efecto de la azadiractina en parasitoides

17

2.2.5

Neem-X

17

MATERIAL Y MTODO

18

3.1

Lugar del ensayo

18

3.2

Material biolgico

18

3.3

Dieta

18

3.4

Insecticida

18

3.5

Tratamientos

19

3.6

Establecimiento del ensayo

19

3.7

Evaluaciones

20

3.7.1

Comportamiento alimenticio

20

3.7.2

Anormalidades morfolgicas

21

3.7.3

Mortalidad

21

3.7.4

Estados de desarrollo

21

3.7.5

Porcentaje de pupas y adultos

22

3.7.6

Fecundidad de adultos y fertilidad de huevos

22

3.8

Diseo experimental

23

3.9

Anlisis estadstico de los datos

23

RESULTADOS Y DISCUSIN

24

iii

4.1

Efecto de la aplicacin de distintas concentraciones de azadiractina

sobre el comportamiento alimenticio de larvas de Cydia pomonella

4.2

24

Efecto de la aplicacin de distintas concentraciones de azadiractina

sobre el desarrollo C. pomonella
27

4.3

Efecto de la aplicacin de distintas concentraciones de azadiractina

sobre anormalidades morfolgicas en larvas, pupas y adultos de C.
pomonella
31

4.4

Efecto de la aplicacin de distintas concentraciones de azadiractina

sobre la mortalidad en larvas de Cydia pomonella

4.5

34

Efecto de la aplicacin de distintas concentraciones de azadiractina

en la fecundidad y fertilidad de Cydia pomonella

36

4.6

Consideraciones finales

39

CONCLUSIONES

40

BIBLIOGRAFA

41

ANEXOS

47

iv

INDICE DE CUADROS

Cuadro

Pgina

Grados das requerido para el desarrollo de Cydia pomonella

Grupos qumicos e ingredientes activos utilizados para C. pomonella

en Chile

Sensibilidad de los insectos a la azadiractina

15

Cantidad de azadiractina obtenida utilizando distintos solventes

16

Ingredientes de cada repeticin de los distintos tratamientos

19

INDICE DE FIGURAS

Figura

Pgina

Ciclo biolgico Cydia pomonella

Neem como plaguicida

12

Azadiractina

14

a: Preparacin de las soluciones insecticidas, b: Establecimiento del

ensayo

a: Desechos de Cydia pomonella sobre dieta artificial. b: Peso de

larvas (L5) de C. pomonella

a y b Cpsulas ceflicas de Cydia pomonella

a. Cilindro plstico con soporte para huevos. b y c . Huevos de C.

pomonella

20

20
21

22

Porcentaje de larvas de C. pomonella tratadas con concentraciones

crecientes de azadiractina (T0 = 0 ppm; T1 = 5 ppm; T2 = 10 ppm; T3
= 15 ppm; T4 = 20 ppm; T5 = 25 ppm) que se alimentaron durante los
primeros cinco das de establecido el ensayo.

24

Larvas de Cydia pomonella tratadas con concentraciones crecientes de

azadiractina que se encontraron fuera de la dieta, a (T3 = 15 ppm) y b
(T5 = 25 ppm) en la segunda semana del ensayo y c (T5 = 25 ppm) en
la tercera semana.

25

vi

10

Peso (mg) de larvas de C. pomonella de quinto estado tratadas con

concentraciones crecientes de azadiractina (T0 = 0 ppm, T1 = 5 ppm;
T2 = 10 ppm; T3 = 15 ppm; T4 = 20 ppm; T5 = 25 ppm)
26

11

Proporcin de larvas (L5) y pupas de C. pomonella luego de tres

semanas alimentndose en dieta con concentraciones crecientes de
azadiractina (T0 = 0 ppm, T1 = 5 ppm; T2 = 10 ppm; T3 = 15 ppm; T4
28

= 20 ppm; T5 = 25 ppm)
12

Estado de desarrollo de larvas de C. pomonella

tratadas con

concentraciones crecientes de azadiractina (T0 = 0 ppm; T1 = 5 ppm;

T2 = 10 ppm; T3 = 15 ppm; T4 = 20 ppm; T5 = 25 ppm) en la cuarta
semana de establecido el ensayo

13

29

Porcentaje de larvas de C. pomonella tratadas con concentraciones

crecientes de azadiractina (T0 = 0 ppm; T1 =5 ppm; T2 = 10 ppm; T3 =
15 ppm) que alcanzaron el estado adulto
30

14

Larvas de C. pomonella
azadiractina.

tratadas con distintas concentraciones de

a: control (T0 = 0 ppm), b: T3 (15ppm), c y d: T5

31

(25ppm)
15

Pupas de C. pomonella tratadas con concentraciones crecientes de

azadiractina, a: control (T0 = 0 ppm), b: T5 (25 ppm), c: T4( 20 ppm),
d: T3 (15 ppm)
32

16

Porcentaje de adultos anormales de C. pomonella provenientes de

larvas alimentadas en dieta con concentraciones crecientes de
azadiractina (T0 = 0 ppm; T1 =5 ppm; T2 = 10 ppm; T3 = 15 ppm)
33

vii

17

Mortalidad acumulada corregida de larvas C. pomonella tratadas con

concentraciones crecientes de azadiractina (T1 =5 ppm; T2 = 10 ppm;
T3 = 15 ppm; T4 = 20 ppm; T5 = 25 ppm) durante las primeras cuatro
34

semanas del ensayo

18

Mortalidad semanal corregida de larvas C. pomonella tratadas con

concentraciones crecientes de azadiractina (T1 =5 ppm; T2 = 10 ppm;
T3 = 15 ppm; T4 = 20 ppm; T5 = 25 ppm) durante las primeras cuatro
36

semanas del ensayo

19

Fertilidad (%) de polillas de C. pomonella

tratadas con

concentraciones crecientes de azadiractina (T0 = 0 ppm; T1 = 5 ppm;

37

T2 = 10 ppm)
20

Porcentaje de

larvas eclosadas de C. pomonella

tratadas con

concentraciones crecientes de azadiractina (T0 = 0 ppm; T1 = 5 ppm;

T2 = 10 ppm)
38

viii

INDICE DE ANEXOS

Anexo
1

Pgina
Mortalidad acumulada corregida de larvas C. pomonella tratadas con
azadiractina (T1 =5 ppm; T2 = 10 ppm; T3 = 15 ppm; T4 = 20 ppm; T5
= 25 ppm) durante las primeras cuatro semanas del ensayo

57

RESUMEN

La polilla de la manzana, Cydia pomonella es la principal plaga que afecta a pomceas

a nivel mundial. Tradicionalmente se han utilizado insecticidas qumicos para su
control; sin embargo, debido a las reiteradas aplicaciones de stos se ha generado
resistencia en diferentes poblaciones de la polilla de la manzana en el mundo.
Actualmente, existe una tendencia global, en la cual, se intenta utilizar la menor
cantidad de qumicos, que los alimentos sean inocuos para el ser humano y que el
impacto ambiental sea el menor posible. Debido a esto, es importante recurrir a
alternativas de control, como es el uso de bio-insecticidas. Entre estos, se encuentra el
insecticida Neem-X cuyo ingrediente activo es la azadiractina. Esta sustancia ha
mostrado accin antialimentaria, reguladora del crecimiento, inhibidora de la
oviposicin y esterilizante en insectos de varios rdenes. Con el objetivo de probar los
efectos que provoca la azadiractina, en Cydia pomonella se alimentaron larvas desde
primer estado en dieta artificial (Stonefly Industries Ltd) con distintas concentraciones
del ingrediente activo (5 ppm, 10 ppm, 15 ppm, 20 ppm y 25 ppm) durante seis
semanas a una temperatura de 25 2 C, con una humedad relativa de 55 5% y un
fotoperodo de 16 horas luz y 8 de oscuridad. Al concluir el experimento se determin
que la azadiractina present un efecto disuasivo de la alimentacin, observndose una
disminucin en el peso de las larvas, a medida aument la concentracin utilizada. En
insectos alimentados en dieta con azadiractina, se observ un retraso del ciclo de
desarrollo, especialmente en las concentraciones mayores, en las cuales no se alcanz
el estado adulto. Se presentaron anormalidades en los estados de larva, pupa y adulto;
sin embargo, stas fueron estadsticamente significativas slo para los adultos.
Tambin se observaron algunas diferencias en la mortalidad, la cual alcanz cerca del
50% en las concentraciones mayores a la cuarta semana. Finalmente, se observ una
diferencia significativa en la fertilidad y fecundidad de los insectos alimentados con
azadiractina, con respecto al control. Considerando lo sealado, se puede concluir, que
la azadiractina afecta negativamente a Cydia pomonella en condiciones de laboratorio.

SUMMARY

The Codling moth, Cydia pomonella is the main pest affecting the pome fruit production
worldwide. Traditionally chemical insecticides have been used for its control. However,
the repeated applications of these products have generated insecticide resistance in
different codling moth populations around the world. In addition, currently there is a
global tendency, in which people try to use the least amount of chemicals, to obtain
safe food for humans and an environmental impact as low as possible. Because of that
is important to use control alternatives, such as the use of bio-insecticides. Among
these, we found the Neem-X insecticide, whose active ingredient is azadirachtin. This
substance has shown feeding deterrence, growth regulation, oviposition inhibition and
sterilizing in insects of several orders. With the aim to test the effects of azadirachtin, in
Cydia pomonella, larvae from first instars were feed on artificial diet (Stonefly Industries
Ltd.) with different concentrations of the active ingredient (5 ppm, 10 ppm, 15 ppm, 20
ppm and 25 ppm) for six weeks at a temperature of 25 2 C, relative humidity 55
5% and a photoperiod of 16:8 (light: dark). At the end of the experiment we determined
that azadirachtin presented a deterrent effect, which a higher decrease in the weight of
larvae when the concentrations increased.

Insects fed on artificial diet containing

azadirachtin presented a delay in develop, especially at the higher concentrations,

where the adult state was not reached. Differences were observed in larvae, pupae and
adults, however these were significant only at the adult stage. Mortality at the fourth
week reached nearly 50 % at the higher concentrations. Finally, azadirachtin produced
a decreased in the fertility and the fecundity when compared to control insects.
Therefore, it can be concluded, that azadirachtin adversely affects Cydia pomonella
under laboratory conditions.

1 INTRODUCCION

La polilla de la manzana (Cydia pomonella L.) es la principal plaga que afecta a la

produccin de pomceas en Chile y el mundo. El ataque de este insecto provoca una
disminucin en la calidad del fruto, reduciendo su capacidad de almacenamiento. En su
control se utilizan reiteradas aplicaciones de insecticidas qumicos, ya que, este insecto
en Chile puede llegar a tener tres generaciones por temporada, en las que se pueden
encontrar en forma simultnea distintos estados de desarrollo.
Los insecticidas qumicos ms utilizados han sido los organofosforados, piretroides,
reguladores de crecimiento e inhibidores de la sntesis de quitina. Sin embargo, debido
a las reiteradas aplicaciones de estos qumicos se ha generado resistencia a muchos
de ellos, encontrndose varios casos de tipo mltiple y cruzada.
En la bsqueda de una solucin para este problema, as como tambin en una nueva
visin del manejo de plagas en la agricultura, donde la utilizacin de qumicos sea la
menor posible, el control produzca el menor impacto ambiental y que los alimentos
sean inocuos para el ser humano, toman relevancia nuevas alternativas de control para
este insecto; entre stas se encuentran los controladores biolgicos, la confusin
sexual, los insecticidas microbiolgicos y ms recientemente el uso de bio-insecticidas.
Entre los ltimos se encuentra el insecticida de origen botnico Neem-X, cuyo
ingrediente activo es la azadiractina (0,4%). Del grupo de los limonoides, este
compuesto acta como regulador del crecimiento, interrumpiendo la metamorfosis de
larvas y pupas. Neem-X presenta accin insecticida sobre un gran nmero de
especies plagas, y se encuentra registrado para Cydia pomonella en Chile. Debido a lo
cual es relevante conocer los efectos que produce en esta importante plaga.

De acuerdo a lo mencionado anteriormente, se plante como hiptesis que la

azadiractina presente en Neem-X produce efectos en el comportamiento alimenticio,
en el ciclo de desarrollo, en la supervivencia, en la fertilidad y fecundidad de Cydia
pomonella.
El objetivo general de este ensayo fue evaluar el efecto de distintas concentraciones de
azadiractina incorporadas en dieta artificial sobre polilla de la manzana criada en
laboratorio.
Los objetivos especficos fueron:
- Evaluar el efecto de la aplicacin de cinco concentraciones de azadiractina sobre el
comportamiento alimenticio y el desarrollo del ciclo de Cydia pomonella.
- Evaluar las posibles anormalidades morfolgicas en larvas, pupas y adultos; y la
mortalidad de estados inmaduros de Cydia pomonella, luego de la aplicacin de
azadiractina.
- Evaluar el efecto de la incorporacin de las distintas concentraciones de azadiractina
en la fertilidad y fecundidad de los insectos que lograron completar su ciclo.

2 REVISION BIBLIOGRAFICA

2.1 Polilla de la manzana

Cydia pomonella (L.) conocida como polilla de la manzana o carpocapsa, pertenece al
orden Lepidoptera y a la familia Tortricidae. En Chile es considerada plaga primaria, ya
que produce dao econmico directo en pomceas y es siempre incluida en los
programas de manejo de los huertos (GONZLEZ, 1989).
Esta plaga de distribucin mundial (COTO y SAUNDERS, 2004), ataca manzano,
membrillo, nogal y peral y, como hospedantes secundarios, puede daar ciruelo,
damasco, duraznero y nectarino (GONZLEZ, 1989). En Chile, se encuentra
distribuida en la XV, I y desde la IV a XI Regiones (KLEIN y WATERHOUSE, 2000).

2.1.1 Ciclo biolgico. Este insecto inverna como larva diapausante en lugares
protegidos como corteza suelta, grietas de los rboles, restos de poda, cajas de
madera o en el suelo alrededor del tronco (UNIVERSITY OF CALIFORNIA, 2000). A
fines del invierno, cuando la temperatura ambiental es de aproximadamente 16C, por
al menos 15 das, emergen los adultos (Figura 1) (ARTIGAS, 1994). A las pocas horas
se aparean y comienza la oviposicin durante el atardecer, a una temperatura mayor a
16,7C (UNIVERSITY OF CALIFORNIA, 2000). La hembra deposita alrededor de 60
huevos en forma individual o en pequeos grupos sobre hojas o frutos (COTO y
SAUNDERS, 2004).
Los huevos son incubados por tres a quince das, dependiendo de la temperatura. Las
larvas de la primera generacin se alimentan de las hojas, hasta que se forman los
frutos y se introducen en ellos, donde permanecen entre 19 y 23 das (ARTIGAS,
1994). La larva madura en su ltimo estado (quinto) deja el fruto por una galera de
salida y busca un lugar protegido para pupar (UNIVERSITY OF CALIFORNIA, 2000).

El nmero de generaciones y la duracin del ciclo dependen del clima de cada regin
(UNIVERSITY OF CALIFORNIA, 2000). En Chile, presenta hasta tres ciclos por
temporada. Cerca del 1% de las larvas de primera generacin, 15% de las de segunda
generacin y 85% de la tercera generacin forman las larvas invernantes (ARTIGAS,
1994).

FIGURA 1. Ciclo biolgico Cydia pomonella

FUENTE: Adaptado de GONZLEZ (2001).

2.1.2 Dao. C. pomonella produce dao durante todo su estado larvario. La larva se
introduce al fruto y genera galeras hasta el centro de ste en donde se alimenta de las
semillas y el endocarpo (GONZLEZ, 1989). Debido a esto, el fruto presenta una
amplia zona consumida en la parte central, oscurecida por accin de los
microorganismos y por la abundante acumulacin de excremento. Estos frutos
generalmente caen al suelo, por lo que sufren deterioro por el golpe y luego se
descomponen (ARTIGAS, 1994).

2.1.3 Importancia econmica. La infestacin de los huertos con polilla de la manzana

produce una depreciacin de la fruta, y por lo tanto, provoca un aumento del costo de
produccin al controlarla (ARTIGAS, 1994). La fruta no puede venderse al mercado
fresco y debido a las heridas provocadas por el insecto, el fruto queda susceptible al
ataque de microorganismos, lo que limita su uso para jugos (UNIVERSITY OF
CALIFORNIA, 2000).
Las prdidas en huertos no tratados con productos qumicos ni con otros mtodos de
control, pueden llegar hasta un 80% (ARTIGAS, 1994; DURN, 2001). Segn
GONZLEZ (1989), se considera que el nivel de dao econmico no debe ser mayor a
0,5% en huertos de manzanos, perales y nogales que se encuentran con programas
fitosanitarios definidos.
Cydia pomonella es cuarentenaria para Japn, China y Corea, lo que dificulta y limita la
exportacin de pomceas a estos pases (ARTIGAS 1994). Adems, Bolivia, Brasil,
Canad, Colombia, Cuba, China, Ecuador, Filipinas, Honduras, Japn, Panam y
Taiwn exigen certificacin fitosanitaria por parte de los productores chilenos para
importar manzanas a su pas (CHILE, SERVICIO AGRCOLA Y GANADERO (SAG),
2007).

2.1.4 Manejo. Para mantener controlado el dao que causa esta plaga, es relevante
conocer los peaks de vuelo, para determinar cundo causar el mayor dao y estimar
en qu magnitud se encuentra la poblacin (UNIVERSITY OF CALIFORNIA, 2000). Si
se conoce el ciclo de la poblacin en cada huerto, es posible aplicar las medidas
adecuadas para su manejo (ARTIGAS, 1994).
Una forma para conocer el peak de vuelo de los adultos es muestrear en forma
peridica con trampas de cartn corrugado, en ramas o troncos, donde se refugian las
pupas. stas, son llevadas a laboratorio donde emergen los adultos, y as se conoce el
peak de vuelo de cada generacin. Otra forma, para estudiar los ciclos de cada
generacin es mediante trampas con feromonas para atraer a los machos adultos y
efectuar recuentos peridicos, siendo ste, el sistema de monitoreo ms utilizado
(ARTIGAS, 1994).

En conjunto con las trampas de feromona, se utiliza el clculo de los das grados, para
predecir el desarrollo del insecto. El umbral de desarrollo ms bajo es 10C y el ms
alto 31,1C (UNIVERSITY OF CALIFORNIA, 2000), demorando aproximadamente 610
grados das en completar una generacin (Cuadro 1) (AUDEMARD, 1992).

CUADRO 1 Grados das requerido para el desarrollo de Cydia pomonella.

Estado
Huevo
Larva
Pupa
Adulto
Total

Temperatura umbral (C)

10
10
11
11

Ka(/das)
90
300
150
70
610

FUENTE: AUDEMARD, 1992.

a

K: constante trmica

2.1.4.1 Medidas preventivas.

Para disminuir la infestacin de C. pomonella, se

recomienda recolectar y eliminar las manzanas daadas y desinfectar los materiales de

almacenamiento (COTO y SAUNDERS, 2004).

Tambin, resulta prctico enrollar

bandas de cartn corrugado en la base de los troncos, en donde se refugian las larvas
invernantes. Estas bandas son retiradas durante el invierno y as se disminuye la
poblacin para la temporada siguiente (UNIVERSITY OF CALIFORNIA, 2000).

2.1.4.2 Control qumico. Los insecticidas son aplicados de acuerdo al ciclo de la

polilla en cada huerto (ARTIGAS, 1994). Tradicionalmente, en Chile se han utilizado
insecticidas organofosforados (FUENTES, 2003).
Los grupos qumicos y sus respectivos ingredientes activos que se encuentran
recomendados para esta plaga por

CHILE, ASOCIACIN NACIONAL DE

FABRICANTES

DE

IMPORTADORES

PRODUCTOS

AGRCOLAS (AFIPA) (2007), se muestran en el Cuadro 2.

FITOSANITARIOS

CUADRO 2 Grupos qumicos e ingredientes activos utilizados para C. pomonella

en Chile.
Grupo qumico
Carbamatos
Neonicotinoides
(cloronicotinilos)
Organofosforados
Piretroides
Diacylhydracinas
Benzoilureas
Derivado de la benzamida

Ingrediente activo
metomil, metomilo, carbaryl
tiacloprid, acetamiprid
clorpirifos, azinfos metil, diazinon, dimetoato, fosmet,
malation, metamidofos metidation
deltametrina. fenvalerato, esfenvalerato, lambdacihalotrina,
permetrina, bifentrina
metoxifenozide, tebufenozide
novaluron
lufenuron

FUENTE: adaptado de AFIPA (2007).

Como se mencion anteriormente, se ha generado resistencia a distintos grupos de
insecticidas, entre los cuales se encuentran los organofosforados (BUSH et al., 1993;
REUVENY y COHEN, 2007; REYES et al, 2004), piretroides, reguladores de
crecimiento (SAUPHANOR et al., 1998, REYES et al, 2004), e inhibidores de la sntesis
de quitina (SAUPHANOR et al., 1998)
Hace una dcada DUNLEY y WELTER (2000) indicaron que exista disminucin de la
eficacia del azinfos-metil, no obstante, el producto se sigui utilizando, a mayor
concentracin o aumentando el nmero de aplicaciones. Tan grave ha sido esta menor
eficiencia, que para el ao 2012, en los Estados Unidos, este insecticida deber dejar
de ser usado en rboles frutales y los productores debern optar por otras alternativas
(WILLETT, 2006).
Adems, segn SAUPHANOR et al. (1998), se ha generado en algunas poblaciones
resistencia mltiple y cruzada. Por lo tanto, para tratar de dar solucin al problema, se
ha debido alternar los grupos qumicos y se han incorporado nuevos ingredientes
activos con diferentes modo de accin (FUENTES, 2007).

10

2.1.4.3 Uso de feromonas. La confusin sexual, es un mtodo de control no qumico,

basado en la interrupcin del proceso de acoplamiento sexual. En los huertos, se
liberan altas concentraciones de la feromona sexual femenina sinttica saturando el
ambiente, as los machos son incapaces de diferenciar entre la fuente natural de
emisin de la feromona y la sinttica y, no pueden encontrar a la hembra (GONZLEZ
et al. 1990). Esta prctica podra ser la principal forma de manejar las poblaciones de
polilla de la manzana en la agricultura orgnica (UNIVERSITY OF CALIFORNIA, 2000)
y constituir una adecuada alternativa para el manejo de poblaciones resistentes a
insecticidas. Tambin, existen los atracticidas, en los cuales se emplea la feromona
sexual (codlemona) y un insecticida de contacto (piretroide). La tcnica consiste en
aplicar a los rboles un formulado viscoso que contiene la mezcla y permite el control
de machos de Cydia pomonella. Los machos son atrados por la feromona y al tomar
contacto con el formulado mueren por la accin del insecticida (GONZLEZ, 1998).

2.1.4.4 Controladores biolgicos. HERNNDEZ et al. (2006), sealan que en

Argentina, se utiliza Ascogaster quadridentata (Hymenoptera: Braconidae), parasitoide
ovo-larval y Mastrus ridibundus (Hymenoptera: Ichneumonidae) que parasita larvas
desarrolladas, ambos introducidos desde Estados Unidos. Tambin, se emplean
liberaciones inundativas de Trichogramma nerudai y T. pretiosum (Hymenoptera:
Trichogrammatidae).
TORRES y GERDING (2000), indican que para el control biolgico de Cydia pomonella
en Chile se determinaron cinco especies de Trichogramma: T. nerudai cacoeciae, T.
dendrolimi, T. platneri, Trichogramma sp. "Cato" y T. cacoeciae. Los autores
observaron que las ltimas dos tienen el mayor potencial para ser usadas en biocontrol
de esta plaga
En Chile, tambin, se ha estudiado Ascogaster quadridentata y Mastrus ridibundus
para el control biolgico de esta plaga. Sin embargo, an no existe la comercializacin
de estas especies para su uso en campo (CHILE, CENTRO
CONTROL BIOLGICO, s/f).

TECNOLGICO DE

11

2.1.4.5 Insecticidas microbiolgicos. Entre estos insecticidas se encuentra Bacillus

turingensis variedad kurstaki, que afecta a lepidpteros. La bacteria esporula en el
tubo digestivo de Cydia pomonella y produce una protoxina que acta como protena
txica y que causa canales en el epitelio del esfago, permitiendo la prdida de iones,
lo que conduce a la muerte celular y posteriormente, a la destruccin del tejido. Sin
embargo, este producto especfico es relativamente dbil y tiene un corto perodo de
proteccin (GONZLEZ, 1998).
Tambin, se encuentra disponible el virus granuloso de Cydia pomonella (CpGv), un
baculovirus que ha demostrado ser lo suficientemente virulento como para alcanzar un
nivel aceptable de frutos daados (MOSCARDI y SOSA, 1995). Este virus ingresa a la
polilla con la ingestin de alimento contaminado con los cuerpos de inclusin, el que
se disuelve en el intestino, debido al pH alcalino; luego, las partculas virales liberadas
se fusionan a la membrana plasmtica de las microvellosidades del intestino medio y
las nucleocpsides desnudas penetran al citoplasma de las clulas. Despus se inicia
la replicacin del virus y comienza la infeccin. El insecto disminuye el consumo y
luego, deja de alimentarse, por lo que se debilita y muere en un perodo de 4 a 25 das
(LECUONA y LOBO, 1996).
El CpGv ha sido por largo tiempo la alternativa casi exclusiva para el manejo de C.
pomonella en huertos orgnicos, sin embargo, ya se han detectado casos de
resistencia a ste en algunas localidades de Europa (SAUPHANOR et al., 2006;
EBERLE y JEHLER 2006).

2.1.4.6 Bio-insecticidas. Desde hace algn tiempo, los insecticidas de origen vegetal
han tomado importancia debido a la manifestacin de resistencia de los insectos a los
productos sintticos, a que stos tambin se acumulan

en los alimentos y a la

contaminacin ambiental que stos causan (SILVA, 2002).

Los bio-insecticidas son extractos que estn formados por un grupo de ingredientes
activos de naturaleza qumica diversa (SILVA, 2002). El mismo autor seala que sta,
es una de las ventajas importantes de este tipo de insecticidas, ya que los insectos
demoran ms tiempo en generar resistencia a una mezcla de ingredientes activos

12

naturales que a los componentes por separado. Esto debido a que la detoxificacin de
un complejo de sustancias, es ms difcil que la de una molcula por separado.
Los derivados del rbol Neem (Azadirachta indica A. Juss.), corresponden a los bioinsecticidas

ms

ampliamente

utilizados.

Su

principal

ingrediente

activo,

la

azadiractina, ha mostrado accin antialimentaria, reguladora del crecimiento, inhibidora

de la oviposicin y esterilizante en insectos de varios rdenes (SILVA, 2002).

2.2. Azadirachta indica A. Juss.

Es un rbol conocido comnmente como margosa o neem que pertenece la familia
Meliaceae. Nativo del sur de Asia, se encuentra en las zonas semiridas de Asia y
frica (PARROTTA y CHATURVEDI, 1994).
MORDUE (2004), menciona que este rbol se utiliza para la reforestacin como
proveedor de sombra. El aceite del fruto se emplea en jabones y detergentes.
Tambin, indica que los productos del neem han sido utilizados para fabricar
antispticos, anticonceptivos, antipirticos y antiparasitarios.

Insecticida

Acaricida

Repelente

Fungicida

Antigonadal

Nematicida
NEEM

Anti-insecto
Antialimentario

Bactericida
Viricida

Molusquicida

FIGURA 2 Neem como plaguicida.

Fuente: KOUL (2004).

Regulador del
crecimiento
Inhibidor de
la oviposicin

13

PARROTTA y CHATURVEDI (1994), sealan que en las hojas, frutos y corteza del
neem se encuentra agentes medicinales e insecticidas. De acuerdo a KOUL (2004), los
derivados del neem tienen efecto sobre 500 especies de insectos de distintos rdenes.
El autor considera al neem como un plaguicida el cual no slo afecta a los insectos,
sino que tambin a algunos caros, hongos, nemtodos, bacterias, moluscos y virus
(Figura 2). Adems, aclara que este plaguicida no mata directamente a las plagas, sino
que altera su comportamiento y fisiologa, lo que a futuro contribuye con su manejo.

2.2.1 Azadiractina. Segn RAMOS (s/f), el neem contiene varios terpenoides, siendo
los pertenecientes al grupo de los limonoides (triterpenoides) los ms importantes en el
manejo de plagas por su actividad y concentracin. Dentro de este grupo, destaca la
azadiractina (Figura 3), la ms activa y efectiva para combatir a los insectos. Este
compuesto se encuentra en la corteza, hojas y frutos del rbol, aunque la mayor
concentracin se ubica en la semilla (SILVA, 2002). Las proporciones en la semilla
varan entre 0,1 a 0,9% (RAMOS, s/f).
La compleja estructura de esta molcula est constituida por, al menos, nueve
ismeros estrechamente relacionados (RAMOS, s/f). La azadiractina tipo A es el
ingrediente activo que se encuentra en mayor concentracin y el cual tiene el mayor
nivel insecticida (RUCH, 2001). Se estima que del tipo A existe un 83 %, del tipo B 16
% y el resto lo constituyen las variaciones de C a K.
Debido a su complejidad, la azadiractina no ha podido ser sintetizada en laboratorio,
por lo cual, los insecticidas en base a neem son obtenidos directamente del rbol.
Adems, cuando la molcula ha sido aislada y probada por s sola, los resultados han
sido menores a cuando se aplican extractos (SILVA, 2002).
RAMOS (s/f), indica que dosis de 30 - 60 g ha-1 de azadiractina controlaran a varios
insectos de hbitos chupador y masticador.

14

FIGURA 3 Azadiractina.
Fuente: MORGAN (2009).

2.2.2 Efectos insecticidas y modo de accin. MORGAN (2009), indica que la

azadiractina es un compuesto que posee propiedades biolgicas, teniendo efecto
disuasivo de la alimentacin en muchos insectos e interrumpiendo el crecimiento de la
mayora de stos y de muchos artrpodos.

2.2.2.1 Efecto antialimentario. Este efecto se puede dividir en dos categoras. El

primero gustativo, que acta cuando los quimiorreceptores del gusto del insecto, en las
patas y en las piezas bucales, detectan la azadiractina (MORDUE, 1997). Segn
Simmonds y Blaney 1984 citado por MORDUE (2004), la azadiractina estimula las
clulas de disuasin en los quimiorreceptores y tambin bloquea la secrecin de las
clulas receptoras de azcar, las cuales estimulan la alimentacin. Por lo tanto, se
inhibe la alimentacin, y el insecto muere por inanicin.
El segundo, anorexia, provocada por los efectos txicos de la azadiractina, despus de
la ingestin o absorcin (MORDUE, 1997). Estos efectos son debidos a la perturbacin
hormonal y/o a otros sistemas fisiolgicos (MORDUE, 2004).
MORDUE (1997) menciona que el efecto antialimentario gustativo vara segn las
especies (CUADRO 3), los lepidpteros son las ms sensibles a la azadiractina,
mientras que los rdenes Coleoptera, Hemiptera e Hymenoptera, presentan una

15

sensibilidad media. Los insectos del orden Orthoptera, presentan distintos grados de
sensibilidad.
CUADRO 3 Sensibilidad de los insectos a la azadiractina.
Orden
Lepidoptera
Coleoptera
Hemiptera
Hymenoptera
Orthoptera

DL50 a(ppm)
< 0,001 - 50
100 - 500
100 - 500
100 - 500
0,001 - > 1000

FUENTES: Adaptado de MORDUE (1997).

a

DL50: dosis letal para el 50% de la poblacin.

MORDUE (2004), seala que los hempteros, al ser de sensibilidad media, consumen
cantidades suficientes de azadiractina para que produzca efectos fisiolgicos.

2.2.2.2. Efectos fisiolgicos. RAMOS (s/f), indica que la azadiractina tiene efectos en
el crecimiento y reproduccin de los insectos. Este compuesto es semejante a la
estructura de la ecdisona, hormona que controla la metamorfosis. Segn MORDUE
(1997), estos efectos pueden ser directos o indirectos. Los directos, actan en un tejido
especfico y los indirectos, por el sistema endocrino. Este ltimo, se ve afectado por el
bloqueo de la liberacin de la ecdisona y la hormona juvenil (Morgue y Blackwell, 1993
citado por MORDUE, 1997).
El mal funcionamiento de las hormonas puede producir malformaciones en cualquier
estado, retrasar la muda, inducir incapacidad para completar la ecdisis, pudiendo
adems, disminuir la fecundidad y fertilidad (RAMOS, s/f).
MORDUE (2004), seala que la azadiractina afecta los procesos reproductivos de los
machos y hembras. En los machos, se ha visto una inhibicin del desarrollo de los
testculos, mientras que en las hembras, se inhibe el desarrollo de los ovarios.

16

En ensayos realizados por OKUMU et al. (2007),

el aceite de neem a una

concentracin de 32 ppm de azadiractina provoc el 93% de mortalidad en larvas de

Anopheles gambiae. AGUILERA et al. (2009), indican que la azadiractina demostr
afectar la oviposicin e inhibir la embriognesis en Aegorhinus superciliosus,
presentndose un 86% de efectividad en la reduccin de la embriognesis a una
concentracin de 20 ppm de azadiractina.

2.2.3 Extractos. Segn RAMOS (s/f), existen tres procesos bsicos de extraccin: la
extraccin acuosa, la extraccin alcohlica y la extraccin de aceite (Cuadro 4).
KLEEBERG (2004), menciona que el contenido de azadiractina vara segn la calidad
de las semillas de neem y del procedimiento de extraccin. Debido a las diferencias de
los productos en el mercado, indica que la FAO ha dividido estos productos en dos
grupos, los que contienen aceite de neem y los extractos ricos en azadiractina libres de
aceite de neem.
CUADRO 4 Cantidad de azadiractina obtenida utilizando distintos solventes.

Solvente usado
Etanol (95%)
Metanol / agua (85:15)
Metanol
Acetona
Etil-ter

Azadiractina encontrada
g/10L
2,8
2,6
2,19
0,74
1,28

FUENTE: adaptado de RAMOS s/f.

Los insecticidas en base a neem pueden variar en su actividad biolgica, ya que

adems de azadiractina pueden contener otros qumicos que se encuentran en la
semilla del neem que tambin tienen actividad insecticida como nimbina, melantriol, y
salanina. Este ltimo, por ejemplo inhibe la alimentacin de los insectos, sin embargo
no afecta su fisiologa (MORDUE, 1997).

17

Adems, la actividad biolgica y toxicidad de los insecticidas en base a neem pueden

variar debido a los diferentes procesos de extraccin, los solventes de la formulacin y
adyuvantes (Isman 1999, citado por LIANG et al., 2003).

2.2.4 Efecto de la azadiractina en parasitoides. Segn CNDOR (2007), el impacto

de los insecticidas a base de neem es mnimo en los parasitoides si se aplican bajas
dosis o las dosis que se utilizan comnmente en el campo. Adems, destaca que las
suspensiones acuosas de neem son menos txicas que los extractos de aceite de esta
planta para los parasitoides.
En el ensayo realizado por TANG et al. (2002), en el cual alimentaron adultos de
Lysiphlebus testaceipes (parasitoides de Toxoptera citricida) con hojas de ctricos
rociadas con neemix 4.5 (4,5% de azadiractina) no existi una disminucin de la tasa
de supervivencia de este parasitoide cuando se aplicaron 11 y 45 ppm de azadiractina.
Sin embargo, los autores sealan que al aplicar 180 ppm del compuesto existi una
reduccin de la supervivencia y emergencia de los parasitoides, pero a la vez, indican
que esta dosis no es econmicamente viable y tampoco se requiere una dosis tan alta
para controlar a Toxoptera citricida.

2.2.5. Neem-X

Neem-X es un insecticida orgnico, cuyo ingrediente activo

mayoritario es la azadiractina, la que se extrae utilizando etanol. Pertenece al grupo

qumico de los limonoides, contiene 0,4% de este ingrediente activo y se encuentra
formulado como suspensin concentrada. En cuanto a su toxicidad, se clasifica en el
grupo IV, por lo que se considera no peligroso para mamferos. Este producto est
recomendado para varios insectos, entre los cuales se encuentra Cydia pomonella
AFIPA (2007), estando permitido para el control de plagas en la produccin orgnica
en Chile (CHILE, MINISTERIO DE AGRICULTURA, 2007).

18

3 MATERIAL Y MTODO

3.1 Lugar del ensayo

El ensayo se realiz en el Laboratorio de Entomologa, perteneciente al Instituto de
Produccin y Sanidad Vegetal de la Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad
Austral de Chile.

3.2 Material biolgico

Las larvas de Cydia pomonella fueron obtenidas de huevos procedentes del Instituto de
Investigacin Agropecuaria (INIA) Quilamapu (Chilln), en donde se mantienen cras
continuas en laboratorio, sobre dieta artificial.

3.3 Dieta
Las larvas fueron alimentadas con la dieta artificial Stonefly Industries Ltd., la cual se
encuentra como slido (polvo). De acuerdo a las indicaciones del fabricante, sta fue
preparada con un 25% del slido, 75% de agua, 0,1% de formaldehdo y 0,2% de cido
actico.

3.4 Insecticida
Se utiliz el producto comercial Neem-X (Marketing Arm International Inc.), formulado
a partir de semillas de neem (0,4% azadiractina). Segn lo sealado por AFIPA (2007)
la dosis recomendada est en el rango de 2,5 -5 mL de producto comercial por litro de
agua.
En este ensayo se consider la dosis menor (2,5 mL L-1), la dosis mayor (5 mL L-1), el
promedio de stas (3,75 mL L-1) y dos dosis adicionales (1,25 mL L-1 y 6,25 mL L-1).

19

3.5 Tratamientos
Se realizaron seis tratamientos, un control sin la aplicacin del insecticida y cinco
tratamientos con concentraciones crecientes de ste.
Cada repeticin fue preparada con 10 g de la dieta artificial, 28 mL de agua destilada, 2
mL de la solucin insecticida, 30 L de formalina y 60 L de cido actico. Para el
control (T0), la solucin insecticida se reemplaz por agua destilada (Cuadro 5).

A continuacin se especfica los ingredientes de cada repeticin de los tratamientos:

CUADRO 5 Ingredientes de cada repeticin de los distintos tratamientos.

Tratamiento
0
1
2
3
4
5

Dieta
g
10
10
10
10
10
10

Agua destilada
mL
30
28
28
28
28
28

Neem-X
mL L-1
0,00
1,25
2,50
3,75
5,00
6,25

Formalina cido actico Azadiractina

L
L
ppm
30
60
0
30
60
5
30
60
10
30
60
15
30
60
20
30
60
25

3.6 Establecimiento del ensayo

Para establecer el ensayo se procedi a preparar las soluciones insecticidas, y fueron
incorporadas a la dieta de acuerdo a cada tratamiento (Figura 4a). Aproximadamente 4
g de de la dieta, fueron distribuidas en frascos de plstico de 8 mL (Figura 4b).
En cada frasco se introdujo, mediante un pincel hmedo, una larva de menos de 4
horas de edad. Los frascos se taparon hermticamente y se mantuvieron en cmara
de crianza con una temperatura de 25 2 C,

humedad relativa de 55 5% y

fotoperodo de 16 horas luz y 8 h de oscuridad (EBERLE y JEHLER, 2006).

20

FIGURA 4 a: Preparacin de las soluciones insecticidas, b: Establecimiento del

ensayo.

3.7 Evaluaciones
A continuacin, se describirn las evaluaciones que se realizaron durante el ensayo.

3.7.1 Comportamiento alimenticio. Durante los primeros cinco das del ensayo, se
evalu el comportamiento alimenticio de las larvas. Se consider que una larva se
alimentaba cuando se encontraba al interior de la dieta o se observaban los desechos
sobre la superficie de sta (Figura 5a). En cambio, una larva que se encontraba en la
superficie de la dieta o en las paredes del frasco, se consider como no alimentndose.

FIGURA 5 a: Desechos de Cydia pomonella sobre dieta artificial. b: Peso de

larvas (L5) de C. pomonella.

21

Adicionalmente, para determinar diferencias entre los diferentes concentraciones se

pesaron las larvas cuando stas alcanzaron el quinto estado (Figura 5b).

3.7.2 Anormalidades morfolgicas. Una vez por semana y durante todo el perodo
del ensayo, se observ la existencia de posibles anormalidades en las larvas, pupas o
adultos. Se consideraron como anormalidades

diferencias en la coloracin y el

tamao, respecto a un insecto normal, as como tambin la dificultad en la muda de las

larvas y pupas (formas anormales y mudas incompletas) y las deformaciones de los
adultos.

3.7.3 Mortalidad. La mortalidad de las larvas se evalu una primera vez, a los siete
das de establecido el ensayo (EBERLE y JEHLE, 2006), y posteriormente se
realizaron observaciones semanalmente, en tres ocasiones. Para esta actividad, se
escarb en la dieta hasta encontrar la larva y verificar si sta se mova luego de
estimularla con un pincel.

3.7.4 Estados de desarrollo. Al momento de observar la mortalidad, se evalu

tambin el estado en el que se encontraban las larvas.

Para ellos se realizaron

comparaciones en relacin al testigo, para determinar si las larvas tratadas tuvieron

alteraciones en el ciclo normal de desarrollo (adelanto o retraso de ste).

FIGURA 6 a y b Cpsulas ceflicas de Cydia pomonella.

22

Para determinar el estado de las larvas se contabilizaron cuidadosamente las cpsulas

ceflicas que se encontraron en el frasco (Figura 6a y 6b).

3.7.5 Porcentaje de pupas y adultos. Desde la tercera semana de establecido el

ensayo, una vez por semana y durante un periodo de cuatro semanas, se determin el
porcentaje de insectos que pasaron a los estados de pupa o adulto.

3.7.6 Fecundidad en adultos y fertilidad de huevos. Para determinar los posibles

efectos subletales de las concentraciones evaluadas en este ensayo, se determin la
fecundidad y fertilidad de los insectos que llegaron al estado adulto. Para ello, se
consideraron 4 parejas de los tratamientos T0, T1 y T2, debido a que en stos emergi
la cantidad necesaria de adultos para realizar esta evaluacin. Las parejas fueron
instaladas en forma individual en cilindros plsticos con un soporte para los huevos
(Figura 7a). Los adultos que conformaron las parejas fueron seleccionados de acuerdo
a las condiciones fsicas, es decir, que no se encontraran con defectos morfolgicos.
stas fueron mantenidas bajo las mismas condiciones ambientales utilizadas durante
la primera etapa del ensayo. Luego, de cinco das se evalu el nmero de huevos
(Figura 7b y 7c) y posteriormente, a los seis das, y durante tres das, el porcentaje de
ellos que eclos.

FIGURA 7 a. Cilindro plstico con soporte para huevos. b y c . Huevos de C.

pomonella.

23

3.8 Diseo experimental.

Para este ensayo fue utilizado un diseo experimental completamente al azar con
cinco tratamientos.

La unidad experimental

fue constituida por 10 larvas y se

realizaron 4 repeticiones (40 larvas por tratamiento).

3.9 Anlisis estadstico de los datos.

Las mortalidades observadas fueron corregidas de acuerdo a la frmula de ABBOTT
(1925):
Mortalidad corregida = (((M/T)*100) - %MC)
(100 - %MC)*100

Donde,
M= nmero de larvas muertas con el insecticida.
T= nmero total de larvas tratadas con insecticida.
%MC= porcentaje de mortalidad de larvas tratadas slo con el solvente.

Para determinar las diferencias entre la proporcin de los distintos estados se utiliz la
Prueba de G (SOKAL y ROHLF, 1995). Los dems resultados fueron sometidos a un
anlisis de varianza (ANDEVA). Para detectar diferencias entre los tratamientos, las
medias fueron comparadas a travs de la prueba de Fisher (FPLSD) con una
significacin del 5%. Los datos fueron procesados con el programa estadstico
computacional STATISTICA 7.1

24

4 RESULTADOS Y DISCUSIN

4.1 Efecto de la aplicacin de distintas concentraciones de azadiractina sobre el

comportamiento alimenticio de larvas de Cydia pomonella.
Durante los primeros cinco

das de evaluacin las larvas de C. pomonella se

introdujeron en la dieta y en la mayora de los casos, se mantuvieron dentro de ella

durante todo este perodo. De acuerdo a esto, el producto utilizado no tuvo un efecto
repelente inmediato en las larvas, presentndose en todos los tratamientos un alto
porcentaje de alimentacin. El tratamiento T4 (20 ppm) present el menor porcentaje
de larvas alimentndose (94%), no obstante no se diferenci del tratamiento control
(T0). Los dems tratamientos tuvieron un porcentaje mayor a ste (Figura 8).

bc*

abc
b

FIGURA 8 Porcentaje de larvas de C. pomonella tratadas con concentraciones

crecientes de azadiractina (T0 = 0 ppm, T1 = 5 ppm; T2 = 10 ppm; T3
= 15 ppm; T4 = 20 ppm; T5 = 25 ppm) que se alimentaron durante los
primeros cinco das de establecido el ensayo.
* Letras distintas sobre las columnas indican diferencia significativa de acuerdo a la prueba de Fisher
(F=3,03, p=0,0014).

25

Estos resultados no concuerdan con lo sealado por BURBALLA et al. (1995), quines
utilizando 30 ppm de azadiractina incorporada a dieta artificial, detectaron durante los
primeros tres das del ensayo la detencin de la alimentacin en un 49% de las larvas
de C.pomonella criadas en dicha dieta. Esta diferencia podra deberse a que la
concentracin usada por los autores fue superior a las consideradas en la presente
investigacin (25 ppm). Por otra parte, KOUL (1999) seala que Macrosiphoniella
sanbornii (Homoptera: Aphididae) y Macrosiphum rosae (Homoptera: Aphididae) no
mostraron repelencia a la azadiractina en concentraciones entre 10 a 200 ppm, lo que
indicara que existen otros factores que pueden influenciar esta respuesta.
Pese a que durante los primeros cinco das no se observaron diferencias en la
alimentacin de las larvas sobre los distintos tratamientos, s se detectaron algunas
larvas fuera de la dieta durante el transcurso del ensayo (Figura 9). Esto concuerda
con el estudio realizado por LIANG et al. (2003), quienes observaron que al introducir
larvas de Plutella xylostella (Lepidoptera: Plutellidae) de segundo, tercer y cuarto
estado en discos de hojas de repollo tratadas con distintas concentraciones de
azadiractina (4,8 y 20 ppm), stas se alimentaron por un cierto tiempo, y luego dejaron
de hacerlo.

FIGURA 9 Larvas de Cydia pomonella tratadas con concentraciones crecientes

de azadiractina que se encontraron fuera de la dieta, a (T3 = 15 ppm)
y b (T5 = 25 ppm) en la segunda semana del ensayo y c (T5 = 25 ppm)
en la tercera semana.

26

Como se observa en la Figura 10, los periodos sin alimentarse originaron diferencias
de peso de larvas de quinto estado entre los tratamientos. Las larvas control (T0)
presentaron el mayor peso, y ste fue disminuyendo en los dems tratamientos a
medida que aumentaba la concentracin de azadiractina incorporada en la
dieta.
a*
b

b
c
d

FIGURA 10 Peso (mg) de larvas de C. pomonella de quinto estado tratadas con

concentraciones crecientes de azadiractina (T0 = 0 ppm, T1 = 5 ppm;
T2 = 10 ppm; T3 = 15 ppm; T4 = 20 ppm; T5 = 25 ppm).
* Letras distintas sobre las columnas indican diferencia significativa de acuerdo a la prueba de Fisher
(F=32,837, p<0,01).

Una reduccin en el peso al aplicar azadiractina ha sido detectada tambin por LIANG
et al. (2003) en Plutella xylostella (Lepidoptera: Plutellidae) y por BURBALLA et al.
(1995) en Cydia pomonella. Estos ltimos, observaron que al utilizar concentraciones
variables de azadiractina (7,5 a 60 ppm) se produjo una reduccin del peso de las
larvas dependiente de la concentracin utilizada.

27

El efecto de la azadiractina en el comportamiento alimenticio de los insectos puede ser:

primario o gustativo, en el cual, el insecto deja de alimentarse debido a que los
quimioreceptores detectan este compuesto y se inhibe la alimentacin; o, secundario o
anorxico, que se refiere a los efectos fisiolgicos que produce la ingesta del
compuesto en el intestino medio,

donde las clulas digestivas no se producen

(MORDUE, 1997).
De acuerdo a esto, los resultados de este ensayo indican que en las larvas evaluadas
no se present el efecto gustativo, existiendo s un efecto anorxico, evidenciado por
una disminucin del peso de los insectos en quinto estado, el cual puede deberse a
que los stos no pudieron digerir el alimento consumido.

4.2 Efecto de la aplicacin de distintas concentraciones de azadiractina sobre el

desarrollo de C. pomonella
En la Figura 11, se presenta la proporcin de insectos que en la tercera semana del
ensayo, se encontraba en quinto estado larval (L5) y en pupa para cada uno de los
tratamientos. La diferencia entre los valores presentados en la figura y el 100%,
correspondan a larvas en otros estados o muertas. Como se puede observar, no se
produjeron diferencias en la proporcin de larvas L5 entre T1 (5 ppm), T2 (10 ppm) y
T0 (control), con valores de 5,1%, 28,2% y 24,1%, respectivamente. Sin embargo,
estos tratamientos s se diferenciaron de aqullos con concentraciones ms altas de
azadiractina, con valores de 51,4% en T3 (15 ppm), 50% en T4 (20 ppm) y 61% en T5
(25 ppm), siendo este ltimo el que mostr el mayor retraso, sin insectos pupando a la
tercera semana.

Estos resultados confirmaran las propiedades retardadoras del

desarrollo de la azadiractina sobre C.pomonella.

Estado de desarrollo (%)

28

100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0

ABC*

AB

AB

BCD

Pupa
L5

a
T0

a
T1

a
T2
T3
Tratamientos

b
T4

T5

FIGURA 11 Proporcin de larvas (L5) y pupas de C. pomonella luego de tres

semanas alimentndose en dieta con concentraciones crecientes
de azadiractina (T0 = 0ppm, T1 = 5 ppm; T2 = 10 ppm; T3 = 15 ppm;
T4 = 20 ppm; T5 = 25 ppm).
*Letras maysculas distintas indican diferencias significativas entre tratamientos en el estado de
pupa. Letras minsculas distintas indican diferencias significativas entre tratamientos en el estado
de larva (p < 0,05).
La diferencia entre los valores presentados en la figura y el 100%, correspondan larvas en otros
estados o muertas.

Esta alteracin en el normal desarrollo del ciclo de la polilla de la manzana fue tambin
detectada en la cuarta semana del ensayo, momento en el cual se observaron los
primeros adultos en los tratamientos T0 (control), T1 (5 ppm) y T2 (10 ppm), no
presentndose diferencias entre ellos (Figura 12). Adicionalmente, se puede observar
que en esta fecha el porcentaje de larvas L5 fue muy pequeo en todos los
tratamientos, exceptuando T5 (25 ppm), el cual fue significativamente diferente a los
tratamientos T0 (control), T1 (5 ppm) y T2 (10 ppm). De la misma forma, el porcentaje
de pupas del mismo tratamiento (8,3%) fue significativamente menor que en el resto de
los tratamientos.

Estado de desarrollo (%)

29

100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0

Adulto

A*

Pupa
L5

ab
T0

a
T1

ab
T2
T3
Tratamientos

bc

abc
T4

c
T5

FIGURA 12 Estado de desarrollo de larvas de C. pomonella

tratadas con

concentraciones crecientes de azadiractina (T0 = 0 ppm, T1 = 5

ppm; T2 = 10 ppm; T3 = 15 ppm; T4 = 20 ppm; T5 = 25 ppm) en la
cuarta semana de establecido el ensayo.
*Letras maysculas distintas indican diferencias significativas entre tratamientos en el estado de
pupa. Letras minsculas distintas indican diferencias significativas entre tratamientos en el estado
de larva. (p < 0,05)
La diferencia entre los valores presentados en la figura y el 100%, correspondan larvas en otros
estados o muertas.

Como se observa en la Figura 13, ninguna de las larvas alimentadas en dieta con las
concentraciones ms altas de azadiractina (T4 (20 ppm) y T5 (25 ppm)) alcanzaron el
estado adulto. En las concentraciones menores, por otro lado, las emergencias fueron
de 59%, 50% y 37%, para T1 (5 ppm), T2 (10 ppm) y T3 (15 ppm), respectivamente,
no existiendo diferencia entre el control (T0) (67,3%) y los tratamientos T1 (5 ppm) y T2
(10 ppm). Slo T3 (15 ppm) se diferenci de los dems tratamientos.
Estos resultados son comparables con lo obtenido por MUSABYIMANA et al. (2001)
quienes alimentaron a larvas de Cosmopolites sordidus (Coleoptera: Curculionidae)
con pseudotallos de banana sumergidos en extractos (4.000 ppm, 5.500 ppm y 5.800
ppm) o aceite (850 ppm) de neem, en el cual ningn adulto emergi. Sin embargo, las

30

concentraciones usadas en este ensayo son menores, lo que podra explicar la

emergencia de adultos en las dosis ms bajas probadas.

a*
a
a

FIGURA 13 Porcentaje de larvas de C. pomonella tratadas con concentraciones

crecientes de azadiractina (T0 = 0 ppm, T1 =5 ppm; T2 = 10 ppm; T3
= 15 ppm) que alcanzaron el estado adulto.
* Letras distintas sobre las columnas indican diferencia significativa de acuerdo a la prueba de Fisher
(F=14,05, p<0,05)

De acuerdo a lo presentado, la azadiractina a las concentraciones ms altas evaluadas

origin un importante retraso del desarrollo en Cydia pomonella. Esto era esperable
debido a que este compuesto es conocido por bloquear la liberacin de las hormonas,
lo que conlleva a una obstruccin o liberacin retardada de la -ecdisona y de la
hormona juvenil (Morgue y Blackwell, 1993 citado por MORDUE, 1997). Este retraso
del desarrollo tambin fue observado previamente en este mismo insecto al utilizar
otros productos a base de neem como Azatin y Sukrina New, para los cuales el
retraso del desarrollo tambin fue dependiente de la concentracin utilizada
(BURBALLA et al., 1995).

31

4.3 Efecto de la aplicacin de distintas concentraciones de azadiractina sobre

anormalidades morfolgicas en larvas, pupas y adultos de C.pomonella.
En la Figura 14, se puede observar una larva normal y algunas de las anormalidades
provocadas por el insecticida en larvas de la polilla de la manzana. stas
correspondieron a la presencia de manchas negras en todo el cuerpo, anillo necrtico
en el dorso, larvas transparentes y exuvios adheridos al cuerpo. Tambin se
observaron larvas de menor tamao que el control (T0) en el mismo estado.

FIGURA 14 Larvas de C. pomonella tratadas con distintas concentraciones de

azadiractina. a: control (T0 = 0 ppm), b: T3 (15 ppm), c y d: T5 (25
ppm).

Algunas de las anormalidades encontradas en este ensayo fueron tambin observadas

por BURBALLA et al. (1995), quines al incorporar extractos a base de neem en dieta
para polilla de la manzana, encontraron que las larvas muertas mostraron adems
otras sintomatologas: imposibilidad de desprenderse de la vieja cpsula ceflica o del
exuvio larvario, transparencia de la nueva cpsula ceflica e incluso del resto del
cuerpo y la presencia de un anillo negro en el primer segmento torcico.

32

FIGURA 15 Pupas de C. pomonella tratadas con concentraciones crecientes de

azadiractina, a: control (T0 = 0 ppm), b: T5 (25 ppm), c: T4 (20 ppm),
d: T3 (15 ppm).

Al igual que lo sucedido con las larvas, en las pupas se presentaron tambin algunas
malformaciones (Figura 15). En general, algunos individuos no lograron formar sus
pupas normalmente, producindose la muerte de muchas de stas sin

lograr

completar su ciclo. Estos resultados concuerdan con un ensayo realizado por NAQVI et
al. (2007) en el cual observaron anormalidades en larvas y pupas; y una parcial
emergencia de adultos de Musca domestica (Diptera: Muscidae), luego de la aplicacin
de azadiractina. En el presente ensayo, pese a que se generaron anormalidades en
larvas y pupas alimentadas en dieta con azadiractina, no hubo diferencias significativas
entre los tratamientos.
Como se aprecia en la figura 16, al considerar malformaciones al estado adulto s se
presentaron diferencias entre los tratamientos, siendo T3 (15 ppm) el con mayor
porcentaje de adultos anormales (66,7 %). Los dems tratamientos no se diferenciaron
entre s, con valores de 8,6; 17,4 y 16,6%; para T0 (control), T1 (5 ppm) y T2 (10
ppm), respectivamente. Cabe destacar, que en el grfico no aparecen los tratamientos
T4 (20 ppm) y T5 (25 ppm) debido a que en stos no hubo emergencia de adultos.

33

a*

FIGURA 16

Porcentaje de adultos anormales de C. pomonella provenientes de

larvas alimentadas en dieta con concentraciones crecientes de
azadiractina (T0 = 0 ppm, T1 =5 ppm; T2 = 10 ppm; T3 = 15 ppm)
* Letras distintas sobre las columnas indican diferencias significativas de acuerdo a la prueba de
Fisher (F=6,975; p<0,05).

La presencia de malformaciones en adultos tambin ha sido observada en Podisus

maculiventris (Say) (Hemiptera: Pentatomidae) al ser alimentado con orugas que
recibieron aplicaciones tpicas con soluciones insecticidas en base a azadiractina
(VIUELA et al., 1998). Este insecto present plegamiento incompleto de las alas,
restos de exuvios adheridos al cuerpo, gotas de hemolinfa pegadas al cuerpo,
coloraciones anmalas en las membranas alares y pronoto asimtrico.
De acuerdo a MORDUE (1997), las malformaciones en los insectos tratados con
insecticidas en base a neem son provocadas por el mal funcionamiento de las
hormonas relacionadas con la muda y la metamorfosis (ecdisona y la hormona juvenil),
lo que se provoca anomalas en sta y la incapacidad de completarla.

34

4.4 Efecto de la aplicacin de distintas concentraciones de azadiractina sobre la

mortalidad en larvas de Cydia pomonella.
En la Figura 17 se presenta la mortalidad acumulada corregida durante las cuatro
semanas de ensayo. Como se puede observar, en la primera semana la diferencia en
la mortalidad de los diferentes tratamientos fue nula. Sin embargo, a medida que
transcurri el tiempo, la diferencia se hizo ms notoria.

Al finalizar,

semana, en los tratamientos T4 (20 ppm) y T5 (25 ppm)

en la cuarta

la mortalidad alcanz

alrededor del 50%, mientras que en T1 (5 ppm) y T3 (15 ppm), fue slo de alrededor
del 20% y en T2 (10 ppm) menor al 10%. Sin embargo, este ltimo se diferenci
significativamente de T1 (5 ppm), pero no de T3 (15 ppm) (Anexo 1).

Mortalidad acumulada (%)

60
50
T1

40

T2
T3

30

T4

20

T5

10
0
1

Semanas

FIGURA 17 Mortalidad acumulada corregida* de larvas C. pomonella tratadas con

concentraciones crecientes de azadiractina (T1 =5 ppm; T2 = 10 ppm;
T3 = 15 ppm; T4 = 20 ppm; T5 = 25 ppm) durante las primeras cuatro
semanas del ensayo.
*Mortalidad acumulada corregida por la frmula de Abbott (1925)

De acuerdo a lo anterior, el efecto de la azadiractina sobre la mortalidad de larvas de

Cydia pomonella fue dependiente de la concentracin, a excepcin de lo ocurrido en
T2 (10 ppm) que present una mortalidad inferior al T1 (5 ppm).

35

Los porcentajes de mortalidad observados en la presente investigacin, fueron muy

bajos al compararlos con ensayos similares, como el realizado por BURBALLA et al.
(1995). Los autores detectaron un 49% mortalidad de Cydia pomonella en los tres
primeros das, al incorporar 30 ppm de azadiractina a la dieta, alcanzndose la muerte
del 100% de los individuos despus de siete semanas. Sin embargo, esta diferencia
puede deberse a que las concentraciones utilizadas en el mencionado ensayo fueron
mayores a las utilizadas en ste.
Por su parte OKUMU et al. (2007), aplic formulados de aceite de neem en larvas
Anopheles gambiae (Diptera: Culicidae), observando que a una concentracin 32 ppm
de azadiractina la mortalidad alcanz alrededor del 100%, a 16 ppm sta disminuy
aproximadamente a 70% y al utilizar 8 ppm a 55%.
De acuerdo a RAMOS (s/f), la mortalidad corresponde a uno de los efectos indirectos
de la azadiractina sobre los insectos, ya que sta se produce por causas como
inanicin (MORDUE, 1997), desnutricin (MORDUE, 1997) y

malformaciones o

influencia sobre el sistema endocrino del insecto, lo que a la larga le produce la muerte.
Considerando los resultados de peso de las larvas y de las anormalidades en este
ensayo, la mortalidad observada podra deberse principalmente al efecto anorxico y
por el desorden provocado en sistema endocrino. Estos resultados concuerdan con lo
descrito por KOUL (1999), en el cual, observaron que los fidos Macrosiphoniella
sanbornii y Macrosiphum rosae murieron aparentemente por la inanicin y por efectos
de la inhibicin del crecimiento, luego de ser tratados con azadiractina.
En cuanto a la mortalidad semanal, durante la primera semana, todos los tratamientos
indujeron una mortalidad menor al 5%. En la segunda semana, comienza a notarse el
efecto de las concentraciones de azadiractina donde los tratamientos T4 y T5, mataron
al 10% de los insectos. En cambio, en T1 (5 ppm) la mortalidad fue slo de 6% y en T2
y T3, fue menor al 5%. En la tercera semana la mortalidad en T1, T2 y T3 tambin fue
menor al 5%. Sin embargo, en T4 y T5 ocurre la mayor mortalidad, con un 19,4% y
25% respectivamente. En la cuarta semana, se puede observar que aumenta la
mortalidad en las tratamientos de menores concentraciones del producto, T1 con un
20,5%, T2 con un 7,9% y T3 con un 16,2% (Figura 18), lo que confirmara que sta

36

ocurre fundamentalmente por los efectos fisiolgicos que produce la azadiractina en los
insectos

Mortalidad (%)

25,0
20,0
T1

15,0

T2

10,0

T3
T4

5,0

T5

0,0
1

Semanas

FIGURA 18 Mortalidad semanal corregida* de larvas C. pomonella tratadas con

concentraciones crecientes de azadiractina (T1 =5 ppm; T2 = 10 ppm;
T3 = 15 ppm; T4 = 20 ppm; T5 = 25 ppm) durante las primeras cuatro
semanas del ensayo.

4.5 Efecto de distintas concentraciones de azadiractina en la fecundidad

fertilidad de Cydia pomonella.

A pesar de que el producto no afect el nmero de adultos emergidos entre los
tratamientos T0 (control), T1 (5 ppm) y T2 (10 ppm), si produjo un efecto en la fertilidad
de stos. Para el control (T0), sta alcanz un 86,8% siendo significativamente
diferente de los tratamientos T1 (5 ppm) y T2 (10 ppm). La menor fertilidad la obtuvo
T1 (5 ppm), con un 13,3%, T2 (10 ppm), en cambio, un 38,8% (Figura 19). Resultados
similares fueron observados por WEATHERSBEE y MCKENZIE (2005) en el cual ms
huevos fueron depositados por Diaphorina citri (Homoptera: Psyllidae) a medida que
aumentaba la concentracin de azadiractina. Esto podra deberse al instinto de
sobrevivencia de los insectos, los que al verse amenazados, tratan de asegurar su
descendencia.

37

Una reduccin de la fertilidad ha sido observada tambin, por AGUILERA et al. (2009),
en el cual alimentaron con el mismo producto a adultos de Aegorhinus superciliosus
(Gurin) (Coleoptera: Curculionidae).
a*

FIGURA 19 Fertilidad (%) de polillas de C. pomonella

tratadas con

concentraciones crecientes de azadiractina (T0 = 0 ppm; T1 = 5

ppm; T2 = 10 ppm).
* Letras distintas sobre las columnas indican diferencia significativa de acuerdo a la prueba de
Fisher (p<0,05).

Este mismo efecto de la disminucin de la fertilidad fue encontrado en un estudio

realizado por MAHMOUND y SHOEIB (2008), al incorporar Nimbecidene (0,03% de
azadiractina) en dieta sobre la cual alimentaron larvas de Bactrocera zonata
(Saunders) (Diptera: Tephritidae). El mayor porcentaje de disminucin de la fertilidad
fue de un 46,4% al incorporar 600 ppm de azadiractina, diferencindose
significativamente del control. Sin embargo, al incorporar 37,5 y 18,7 ppm, no existi
una diferencia significativa respecto al testigo.
Adems, de la disminucin en la fertilidad producida por la azadiractina, tambin se
apreci un efecto en la fecundidad (Figura 20). El control obtuvo un promedio de 33,5

38

larvas por pareja, siendo significativamente mayor que T1 (5 ppm) y T2 (10 pmm). Sin
embargo, la reduccin de la fecundidad fue ms alta en T1 (95,5%) que en T2 (65,2%).

Esta reduccin es similar a la encontrada en el estudio realizado por TANG et al.

(2002), en el cual, la descendencia disminuyo en un 65-85% respecto al control, luego
de alimentar adultos de Toxoptera citricida (Kirklady) (Hemiptera: Aphididae), con hojas
tratadas con Neemix 4.5 (0,45% de azadiractina)

a*

FIGURA 20 Porcentaje de

larvas eclosadas

de C. pomonella

tratadas con

concentraciones crecientes de azadiractina (T0 = 0 ppm; T1 = 5

ppm; T2 = 10 ppm).
* Letras distintas sobre las columnas indican diferencia significativa de acuerdo a la prueba de
Fisher (p<0,05).

Una disminucin en la fertilidad y fecundidad ha sido tambin documentada por KOUL

(1999) en Macrosiphoniella sanbornii (Homoptera: Aphididae) y Macrosiphum rosae.
(Homoptera: Aphididae).
Segn MORDUE (1997), los efectos causados por la azadiractina en la fertilidad y
fecundidad de los insectos se deben al mal funcionamiento de las hormonas ecdisona

39

y juvenil, ya que stas tambin se encuentran en el adulto y estn relacionadas con el

desarrollo de los huevos. Por lo tanto, se podra provocar una inhibicin del desarrollo
de los ovarios y la reabsorcin de los huevos. Adems, la azadiractina afecta a los
tejidos de rpida divisin celular, afectando la funcin de los testculos al inhibir la
formacin de espermatozoides (MORDUE, 2004).

4.6 Consideraciones finales.

La dosis de Neem-X recomendada por AFIPA (2007) para el manejo de Cydia
pomonella va en el rango de 2,5 a 5 mL de producto comercial por litro de agua. Sin
embargo, los resultados de este ensayo indican que a la dosis menor, correspondiente
a T2 en este ensayo, no se generan efectos importantes en la mortalidad de los
insectos. En la cuarta semana del ensayo la mortalidad a la misma dosis es menor al
10%, por lo que no se estara controlando la poblacin en el corto plazo.
A pesar de lo mencionado, s existe una importante disminucin de la fertilidad y
fecundidad a esta dosis. Por lo que, el control estara dado por la disminucin de la
poblacin futura, contribuyendo al manejo en el largo plazo, lo que constituye una
posibilidad para el manejo orgnico de C. pomonella.
Adicionalmente, es importante considerar que estas dosis son recomendadas para su
aplicacin en campo, lugar donde las condiciones de alimentacin son diferentes: el
insecticida se encuentra en la superficie del fruto, y el insecto lo ingiere slo antes de
ingresar al interior del fruto.

Debido a esto, sera importante realizar ensayos de

campo para determinar si las dosis recomendadas realmente manejan la poblacin de

la polilla de la manzana.

40

5 CONCLUSIONES

De acuerdo a los resultados de este trabajo la azadiractina produce efectos en el

comportamiento alimenticio, en el

ciclo de desarrollo, en la supervivencia, en la

fertilidad y fecundidad de Cydia pomonella, por lo que se acepta la hiptesis planteada.

Las distintas concentraciones de azadiractina en la dieta, produjeron un efecto en el

comportamiento alimenticio de las larvas, generando un efecto secundario de la
alimentacin. Esto se vio reflejado en la considerable disminucin del peso de las
larvas a medida que se aument la concentracin incorporada en la dieta.
Paralelamente, se observ un retraso en el desarrollo del insecto, especialmente en las
dos concentraciones mayores, en las cuales no se alcanz el estado adulto.

Todos los estados de desarrollo evaluados (larva, pupa y adulto) presentaron

anormalidades morfolgicas, sin embargo, stas fueron significativas slo en el caso
de los adultos.

La mortalidad de las larvas no fue la esperada, a pesar que en las concentraciones

mayores sta alcanz alrededor del 50% a la cuarta semana del ensayo.

Algunas de las concentraciones de azadiractina evaluadas, produjeron reducciones

significativas en los parmetros de fertilidad y fecundidad de C. pomonella. Esta ltima,
present una reduccin del 95,5% respecto al control en el tratamiento T1 (5 ppm).

41

6 BIBLIOGRAFIA

ABBOTT, W. 1925. A method of computing the effectiveness of an insecticide. Journal

of Economic Entomology (USA).18: 265-267.
AGUILERA, A.; ZAMPEZZI, M.; ARANEDA, D.; KLEIN, C.;y REBOLLEDO, R. 2009.
Efectividad de la azadiractina en la inhibicin de la embriognesis de Aegorhinus
superciliosus (Gurin) (Coleoptera: Curculionidae). IDESIA (Chile) v 27 (1): 4755.

(On

line)

<http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0718-

34292009000100007&lng=pt&nrm=i> (19 nov. 2009).

ARTIGAS, J.

1994. Entomologa econmica: insectos de inters agrcola, forestal,

mdico y veterinario. Universidad de Concepcin, Chile. Vol. 2. 943 p.

AUDEMARD, H. 1992. Population dynamics in codling moth. In: L.P.S. van der Geest &
H.H. Evenhuis (Eds), Tortricid Pests: their Biology, Natural Enemies and Control,
Amsterdam, Elsevier Science, pp. 329338.
BURBALLA, A.; SARASA, M. y

AVILLA, J. 1995. Alimentacin, mortalidad y

desarrollo de Cydia pomonella (L.) y de Cacoecimorpha pronubana (Hbner)

sobre dieta con extracto de neem incorporado. Boletn de Sanidad Vegetal.
Plagas (Espaa) 21(3): 425-437 .
BUSH, M.; ABDEL-AAl, Y.; ROCK, G. 1993. Parathion resistance and esterase activity
in codling moth (Lepidoptera: Tortricidae) from North Carolina. Journal of
Economic Entomology (USA.) 86: 660-666 .
CHILE, CENTRO TECNOLGICO DE CONTROL BIOLGICO. s/f. Agentes de Control
biolgico. Chile. (On line) <http://www.controlbiologicochile.cl/content/view/60/>
(19 Nov 2009).
CHILE, ASOCIACIN NACIONAL DE FABRICANTES E IMPORTADORES DE
PRODUCTOS

FITOSANITARIOS

AGRCOLAS

fitosanitario. Santiago, Chile, AFIPA,. 1214 p.

(AFIPA).

2007.

Manual

42

CHILE, MINISTERIO DE AGRICULTURA. 2007. Oficializa normas tcnicas de la ley

20.089 que cre el sistema nacional de certificacin de productos orgnicos
agrcolas. (On line) <http://www.sag.gob.cl/OpenDocs/asp/pagVerRegistro.asp?
argInstanciaId=54&argRegistroId=676> (11 dic 2009).
CHILE, SERVICIO AGRCOLA Y GANADERO (SAG). 2007. Aspectos cuarentenarios
de polillas de la fruta en Chile para diferentes mercados de exportacin. (On
line).<http://www.fdf.cl/download/polillas/Presentaci%C3%B3n%20polillas%20de
%20la%20fruta%20Soledad%20Castro.pdf> (13 oct. 2009).
COTO, D; SAUNDERS, J. 2004. Insectos plagas de cultivos perennes con nfasis en
frutales en Amrica Central. Costa Rica. Centro Agronmico Tropical de
Investigacin y Enseanza. 351 p.
CNDOR, F. 2007. Effect of neem (Azadirachta indica A. Juss) insecticides on
parasitoids. Revista Peruana de Biologa. 14 (1): 69-74.
DUNLEY, J. y WELTER, S. 2000. Correlated insecticide cross-resistance in azinphosmethyl resistant codling moth (Lepidoptera: Tortricidae). Journal of Economic
Entomology (USA) 93: 955-962.
DURN, J. 2001. El gusano de las manzanas y peras. Terralia (Espaa) v 21. (On line)
<http://www.terralia.com/index.php?revista=21&articulo=125> (14 oct 2009).
EBERLE, K. y JEHLER, J.

2006. Field resistance of codling moth against Cydia

pomonella: granulovirus (CpGV) is autosomal and incompletely dominant

inherited. Journal of Invertebrate Pathology (USA) 93: 201206.
FUENTES, E. 2003. Polilla de la manzana. Boletn tcnico, Pomceas. Universidad de
Talca. v 3 (7). 4 p. (On line). <http://pomaceas.utalca.cl/publicaciones/boletin
/BoletinNov03.pdf> (12 oct. 2009).
FUENTES, E. 2007. Polilla de la manzana y resistencia a azinfosmetil. Boletn tcnico,
Pomceas.

Universidad

de

Talca

(Chile).

(6):4

(On

line).

http://pomaceas.utalca.cl/publicaciones/boletin/BoletinNoviembre2007.pdf>

<
(04

jul. 2009).
GONZLEZ, R. 1989. Insectos y caros de importancia agrcola y cuarentenaria en
Chile. Santiago. Ograma. 310 p.

43

GONZLEZ, R. 1998. Proteccin integrada de frutales pomceos en Chile. Revista

Frutcola (Chile) 19(1): 5-13.
GONZLEZ, R.; BARRA, G. y CURKOVIC, T. 1990. Confusin sexual: un nuevo
mtodo de control especfico de la grafolita del durazno, Cydia molesta (Busk).
Revista Frutcola (Chile) 11(2): 41-49.
GONZLEZ, R. 2001. Antecedentes biolgicos de la polilla de la manzana, Cydia
pomonella (L.), en huertos de pomceas. Revista Frutcola (Chile) 21(1): 11-26.
HERNNDEZ, C.; BOTTO, E.; TORRE, V.; LAFALCE, C.; GARRIDO, S.; CHICHN, L.
y FERNNDEZ, D. 2006. Empleo de entomfagos parasitoides para el control
biolgico de Cydia pomonella (L.) en frutales de pepita (manzanos). Primera
reunin Argentina de Parasitoides Bariloche. (On line) <http://www.inta.gov.ar/
bariloche/info/documentos/forestal/insectos/rap/doc/compaginados/control%20bio
logico/hernandez_etal_cbiol.pdf> (22 oct 2009).
KLEEBERG, H. 2004. Neem based products: registration requirements, regulatory
processes and global implications. . In: Koul, O. y Wahab, S. (eds). Neem: today
and in the new millennium. USA. Kluwer Academic Publishers. pp: 109 123.
KLEIN, C.; WATERHOUSE, D. 2000. Distribution and importance of arthropods
associated with agriculture and forestry in Chile. Australia. ACIAR Monograph
231pp.
KOUL, O. 1999. Insect growth regulating and antifeedant effects of neem extracs and
azadirachtin on two aphid species of ornamental plants. Journal of Biosciences.
24 (1): 85-90.
KOUL, O. 2004. Neem: a global perspective. In: Koul, O. y Wahab, S. (eds). Neem:
today and in the new millennium. USA. Kluwer Academic Publishers. pp: 1 19.
LECUONA, R. y LOBO, M. 1996. Virus entomopatgenos. In: Lecuona, R. (ed).
Microorganismos patgenos empleados en el control microbiano de insectos
plaga. Argentina. Mariano Mas pp: 73- 86.
LIANG, G.; CHEN, W.; LIU T.

2003. Effects of three neem-based insecticides on

diamondback moth (Lepidoptera: Plutellidae). Crop Protection (Gran Bretaa). 22

(2): 333-340.

44

MAHMOUD, M. y SHOEIB, M. 2008. Sterilant and oviposition deterrent activity of neem

formulation on peach fruit fly Bactrocera zonata (Saunders) (Diptera: Tephritidae).
Journal of Biopesticides (India). 1 (2):177-181.
MOSCARDI, F. y SOSA, D. 1995. Utilizacin de virus a campo. In: Lecuona, R. (ed).
Microorganismos patgenos empleados en el control microbiano de insectos
plaga. Argentina. Mariano Mas. pp: 261-276.
MORDUE, J.

1997. Azadirachtin - A Review of its Mode of Action in Insects. In:

Kleeberg, F (ed). Practice Oriented Results on Use and Production of NeemIngredients and Pheromones Neem-Ingredients: Toxicological Results and
Possible Medical Uses. Germany.Druck y Graphic 73 p.
MORDUE, J. 2004. Present concepts of the mode of action of azadirachtin from neem.
In: Koul, O. y Wahab, S. (eds). Neem: today and in the new millennium. USA.
Kluwer Academic Publishers. pp: 229 242.
MORGAN, D. 2009. Azadirachtin, a scientific gold mine. Bioorganic y Medicinal
Chemistry (Gran Bretaa). 17: 40964105
MUSABYIMANA, T.; SAXENA, R.; KAIRU, E.; OGOL, C. y KHAN,Z. 2001. Effects of
neem seed derivates on behavioral and physiological responses of the
Cosmopolites sordidus (Coleoptera: Curculionidae). Journal of Economic
Entomology. (USA) 94 (2): 449 -454.
NAQVI, R.; TABASSUM, M.; KHAN, N.; YASMIN, S.; NURULAIN, A. y BURNEY, A.
2007. Toxic, Residual, and Teratomorphic Effect of a Neem Extract (N-9) in
Comparison to Coopex 25 WP (Permethrin + Bioallethrin) againstsca domestica
L. (Holland Strain). Turkish Journal of Zoology.31:127-130.
OKUMU, F.; KNOLS, B. y FILLINGER, U.

2007. Larvicidal effects of a neem

(Azadirachta indica) oil formulation on the malaria vector Anopheles gambiae.

Malaria journal. 8 p. (On line) < http://www.malariajournal.com/content/6/1/63>.
(16 oct. 2009).
PARROTTA, J. y CHATURVEDI, A. 1994. Azadirachta indica A. Juss. Neem margosa.
Publication SO-ITF-SM-70. Rio Piedras. Department of Agriculture, Forest

45

Service, Southern Forest Experiment Station, Institute of Tropical Forestry. 8 p.

(On line). < http://www.fs.fed.us/global/iitf/Azadirachtaindica.pdf>. (09 sep. 2009).
RAMOS, R. s/f .Aceite de Neem un insecticida ecolgico para la agricultura. (On line)
<http://www.zoetecnocampo.com/Documentos/Neem/neem01.htm>.

(16

oct.

2009).
REUVENY, H. y COHEN, E. 2007. Toxicity of azinphos-methyl to various development
stages of the codling moth Cydia pomonella (Lepidoptera: Tortricidae). Pest
Management Science (Inglaterra). 63:129133.
REYES, M.; BOUVIER, J.; BOIVIN, T.; FUENTES, E.y SAUPHANOR, B. 2004.
Susceptibilidad a insecticidas y actividad enzimtica de Cydia pomonella L.
(Lepidoptera: Tortricidae) proveniente de tres huertos de la Regin del Maule,
Chile. Agricultura Tcnica (Chile). 64 (3): 229-237.
RUCH, B. 2001. Quality control of neem material. Practice Oriented Results on Use and
Production of Plant Extracts and Pheromones in Integrated and Biological Pest
Control. Abstracts of the 1. Workshop Neem and Pheromones University of
Uberaba, Brasil. Trifolio-M GMBH 46 p
SAUPHANOR, B.; BOURVIER, J.; BROSSE, V. 1998. Spectrum of insecticide
resistance in Cydia pomonella (Lepidoptera: Tortricidae) in Southeastern France.
Journal Economic Entomology (USA). 91:1225- 1231.
SAUPHANOR, B.; BERLING, M.; TOUBON, J.; REYES, M.y DELNATTE, J. 2006.
Carpocapse des pommes cas de resistance aux virus de la granulose dans le
Sud-Est. Phytoma La Dfense des Vgtaux (Francia). 590: 24-27.
SILVA, G. 2002. Insecticidas Vegetales. El texto mundial del MIP. University of
Minesota.

(On

line)

<http://ipmworld.umn.edu/cancelado/Spchapters/

GSilvaSp.htm> (19 oct 2009).

SOKAL, R. y ROHLF, R. 1995. Biometry. 3 th ed. W.H. Freeman and Company, New
York, USA. 887 p.
TANG, Y.; WEATHERSBEE, A. y MAYER, R. 2002. Effect of Neem seed extract on
the brown citrus aphid (Homoptera: Aphididae) and its parasitoid Lysiphlebus

46

testaceipes (Hymenoptera: Aphidiidae). Environmental Entomology (USA). 31(1):

172-176.
TORRES, C. y GERDING, M. 2000. Evaluacin de cinco especies de Trichogramma
como posibles agentes de control biolgico de Cydia pomonella (L.)
(Lepidoptera:Tortricidae). Agricultura Tcnica (Chile) 60(3):282-288.
UNIVERSITY OF CALIFORNIA. 2000. Organic Apple production manual. Agriculture
and Natural Resources. Publication 3403 (USA). 67 p.
VIUELA, E.; ADN, A.; GONZLEZ, M.; BUDIA, F.; SMAGGHE, G. y DEL ESTAL, P.
1998. Spinosad y azadiractina: efectos de dos plaguicidas de origen natural en el
chinche depredador Podisus maculiventris (Say) (Hemiptera: Pentatomidae).
Boletn Sanidad Vegetal. Plagas (Espaa). 24: 57 66.
WEATHERSBEE, A. y MCKENZIE, C. 2005. Effect of a neem biopesticide on
repellency, morality, oviposition and development of Diaphorina citri (Homoptera:
Psyllidae). Florida Entomologist (USA) 88 (4): 401-407.
WILLETT, M. 2006. The 1996 Food Quality Protection Act after a decade. Proc WA
Hort Assoc 554 (103):162-165.

47

7 ANEXO

Anexo 1. Mortalidad acumulada corregida de larvas C. pomonella tratadas con

azadiractina (T1 =5 ppm; T2 = 10 ppm; T3 = 15 ppm; T4 = 20 ppm; T5 =
25 ppm) durante las primeras cuatro semanas del ensayo.

Tratamiento
T1
T2
T3
T4
T5

Semana 1ab
0,0 a
0,0 a
0,0 a
0,0 a
0,0 a

Semana 2 ab
5,1 ab
0,0 a
3,6 abc
8,8 abc
10,3 abc

Semana 3 ab
8,0 abc
0,0 a
8,9 abc
31,3 de
34,5 de

a Mortalidad acumulada corregida por la frmula de Abbott (1925)

b Letras distintas en las columnas indican diferencia significativa entre los tratamientos

Semana 4 ab
25,9 cd
4,6 ab
21,9 bcd
49,1 e
48,3 e