UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

PRCTICA DE LABORATORIO

CURSO

MICROBIOLOGIA MDICA

DOCENTE

DR. JUAN RAMREZ

MESA

02

PRCTICA :

02, 03 y 04

ALUMNO

FLORES TRUJILLO, Julio Csar

FECHA

25 Agosto 2015

CICLO

IV

TURNO

TB

CHORRILLOS - LIMA - PER

INTRODUCCIN
En la prctica de microbiologa es fundamental conocer los tipos de coloracin o tincin que
se emplean para poder identificar los diferentes microorganismos.
Estas coloraciones consisten en una combinacin de tipo qumica con el protoplasma de la
bacteria, en general es el proceso de teir artificialmente los microorganismos con
colorantes o reactivos para facilitar su estudio microscpico de: forma, agrupacin y
estructura.
Un colorante es un compuesto orgnico que consta de anillos bencnicos y grupos
cromforos (agrupacin de tomos que da color a ciertos compuestos) y auxcromos
(sustituyentes como el grupo oxidrilo o el grupo amino que mejoran las caractersticas de
absorcin del cromforo).
En el laboratorio de microbiologa se pueden usar los colorantes de varias formas como:
Para teir bacterias y permitir la visibilidad al microscopio.
Para mostrar estructuras del organismo estudiado.
Para identificar microorganismos en base a sus caractersticas de tincin (p.e. los
cidos alcohol resistente y los que no; los gram positivos o gram negativos).
En los medios de cultivo para inhibir el desarrollo de algunas bacterias y as poder
estudiar selectivamente a los microorganismos que si crecen.
TINCIN DE BACTERIAS
La clula bacteriana intacta se tie fcilmente con colorantes bsicos como el cristal, azul
de metileno y fucsina bsica, pero relativamente mal con colorantes cidos como la eosina.
Un colorante bsico es aquel constituido por un agrupamiento de tomos orgnicos con
carga positiva que ser la parte activa del colorante ya que tendr afinidad por los cidos
nucleicos. Un colorante cido es aquel que se encuentra constituido por tomos orgnicos
con carga neta negativa por lo cual tiene afinidad por el citoplasma.
TIPOS DE TINCIN
Tincin simple. Conocida con ese nombre ya que solo nos sirve para hacer ms fcilmente
visibles a las bacterias sin resaltar ninguna caracterstica en especial. Una tincin simple se
lleva a cabo cubriendo con colorante bsico un frotis seco y fijado al calor. El frotis se deja
reaccionar con las clulas por un minuto y se lava suavemente con agua. El frotis se puede
dejar secar o usar papel secante para que quede listo para observarse.
Tincin negativa. Este mtodo de tincin utiliza colorantes neutros o cidos ya que tienen
poca afinidad por la clula bacteriana por lo tanto como no se absorben se colorea el fondo
en el que estn las bacterias pero la clula queda incolora y transparente, as pues las
bacterias aparecen como pequeas reas iluminadas en un fondo oscuro. La tincin acdica
con nigrosina, o neutral (con tinta china) son las ms usadas.
Tincin diferencial. Las bacterias se diferencian unas de otras tanto fsica como
qumicamente, por lo cual su reaccin ante algunos colorantes tambin ser diferente

dando lugar as a grupos tintoreales caractersticos. Entre estos grupos estn los que se
originan por la tincin descubierta por Hans Christian Gram, esta tincin divide a las
bacterias en Gram positivas o Gram negativas lo cual no solo sirve para diferenciarlas sino
an para elegir la terapia adecuada en algunos casos. Existen otras tinciones diferenciales
de utilidad en microbiologa clnica como la de Ziehl- Neelsen.
Tincin estructural. Existen diferentes tipos de colorantes que de acuerdo a su afinidad se
utilizan para teir y detectar ciertas estructuras de la clula bacteriana como son las
esporas, los flagelos y las cpsulas.
OBJETIVOS
Identificar los tipos de coloracin segn el nmero de colorantes que se emplean.
Familiarizarse con el manejo del microscopio ptico para la visualizacin de
microorganismos as como las tinciones ms habituales en el laboratorio de
Microbiologa.
A. COLORACIONES SIMPLES
Para ello se emple un solo colorante, su finalidad es permitir visualizar la morfologa de los
microorganismos.
Tipo de tincin: Azul de metileno.
Nombre del microorganismo: Pool de bacterias (morfologa del tipo coco).
Caracterstica observada: Los microorganismos se observan de color azul intenso.
Tipo de tincin: Tinta china, negativa, inversa
Nombre del microorganismo: Cpsula de levadura (cryptococcus neoformans)
Caracterstica observada: Identificacin de la cpsula de la levadura sin teir resaltando
sobre un fondo oscuro.
Tipo de tincin: Azul de lactofenol
Nombre del microorganismo: Hongo (Aspergillus spp.)
Caracterstica observada: Morfologa del hongo en un fondo azul-celeste.
B. COLORACIONES DIFERENCIALES
Para ello se emple ms de un colorante, donde el segundo colorante, por lo general puede
ser denominado de contraste.
Tipo de tincin: Gram
Nombre del microorganismo: Bacterias gram negativas(bacilos) y gram positivas(cocos)
Caracterstica observada: Las bacterias Gram positivas se colorean de violeta y las
bacterias Gram negativas de color rosado.

Tipo de tincin: Ziehl-Neelsen

Nombre del microorganismo: Mycobacterium tuberculosis
Caracterstica observada: Las bacterias cido alcohol resistentes (BAAR) se tien de color
rojo (+) y las no cido alcohol resistentes se tien de color azul (-)

C. COLORACIONES ESPECIALES
Tipo de tincin: Leischman
Nombre del microorganismo: Bartonella, Hongos, Rickettsias.
Caracterstica observada: Los microorganismos se tien de color rosado oscuro

Tipo de tincin: Vago

Nombre del microorganismo: Treponema phagadenis
Caracterstica observada: Espiroqueta que se encuentra formando parte de la flora normal
de la boca, en forma de espiral y de color violeta- rosado.

CONCLUSIONES
Se logr identificar los diferentes mtodos de coloracin, principalmente aquellos que se
clasifican segn el nmero de colorantes.
Los resultados de las coloraciones en los microorganismos est determinado por la
estructura celular (pared, membrana, cpsula, etc)

PROCEDIMIENTO:
Para muestras slidas.

Colocar 1 a 2 gotas de agua.

Con el asa de nicromo estril tomar una muestra de la

colonia y mezclarla con el agua.

Dejar secar al aire.

Pasar rpidamente sobre la flama del mechero.

Para muestras lquidas.

Colocar 1 a 2 asadas del medio de cultivo con el asa de

nicromo estril.

Distribuir en la zona marcada.